组织破碎提取法及闪式提取器的研究进展及应用

随着中药现代化技术的不断发展,运用现代科学技术和方法探讨中药材的提取、分离取得了一定的成果,为中药新药研制提供了有力的手段[1]。在中草药研究的过程中,提取技术是作为整个中药材研究中的的重要环节,提取能否成功直接影响着后期实验的进行和药物的最终疗效,而提取的时间、温度、溶剂对中药材的有效成分的提取及有效率等有着重大的影响。

植物组织破碎提取法及闪式提取器的创制与实践

本文在对中药提取的原理与实现过程进行深刻剖析的基础上,首次对组织破碎提取法的基本原理、实现过程、闪式提取器的构造及八大优势和应用实践进行了系统论述。用十余年的实践过程证明,闪式提取器集粉碎、浸泡、搅拌、振动等技术优势于一体,使完成一次提取只需数秒至数十秒间,仅为常规回流提取的数十至数百分之一,不但避免了不耐热成分的破坏,且收率高,操作简便,有利环保等。

中草药组织破碎提取法的实践与中药化学实验教学改革

本文在对传统提取方法回顾的基础上，以中草药组织破碎提取法成功用于曼地亚红豆杉、五味子、三七和细柱五加4种不同类型化学成分的提取为例，充分展现了该提取方法与传统的回流提取法和超声波提取法等相比的突出优越性。作者对槐米中芦丁进行了组织破碎提取实验，以50%--70%乙醇或丙酮为溶剂，破碎提取2 min，芦丁收率可达12%以上，HPLC显示几乎无芦丁以外的杂质峰。作为中药化学实验教学的改革内容，组织破碎提取法具有较大的应用与发展空间。

菟丝子中总黄酮的闪式提取工艺及近红外透射光谱含量分析方法

利用闪式提取器对菟丝子中的总黄酮进行组织破碎提取,确定菟丝子中总黄酮闪式提取的最佳提取工艺为:料液比1∶8(mg∶mL),以50%的乙醇为溶剂提取8min。采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法(PLS)回归分析法建立了菟丝子提取液中总黄酮含量近红外透射光谱定量分析模型,该模型校正集的相关系数为0.99985,校正集标准偏差(RMSEC)为0.0685,预测集标准偏差(RMSEP)为0.160,交叉验证结果的相关系数为0.99966,交叉验证标准差(RMSECV)为0.102。利用该模型预测和紫外分光光度法测量的总黄酮含量相差很小,且模型具有良好的稳定性。

改良联合酶消化法提取成年小鼠原代心脏成纤维细胞

目的探讨改良联合酶消化法是否能稳定提取成年小鼠原代心脏成纤维细胞。方法 6只C57成年小鼠拉颈处死后取心脏,然后采用改良联合酶消化法即用胰酶、Ⅱ型胶原酶于37℃恒温箱内消化心脏组织6 min,加血清终止消化,然后将含有细胞的消化液冰上储存,离心提取成年小鼠原代心脏成纤维细胞,传代后采用苏木素-伊红染色及免疫荧光法检测波形蛋白、盘状结构域受体2进行形态学和免疫学鉴定。结果采用改良联合酶消化法可以稳定地提取贴壁细胞。苏木素-伊红染色可见细胞呈梭形,贴壁生长;经免疫荧光鉴定,所提取的细胞波形蛋白、盘状结构域受体2表达阳性。结论改良联合酶消化法可以稳定地提取成年小鼠原代心脏成纤维细胞。

野菊花中绿原酸的不同提取工艺比较

目的:以绿原酸含量和浸膏率为考察指标,探讨从野菊花中提取该成分的新工艺。方法:采用加热回流提取法、组织破碎提取法及超声波提取法3种提取工艺,利用反相高效液相色谱法,以甲醇:冰醋酸:水(体积比为18:1:81)为流动相(流速为1.0mL/min),测定3种提取方法的绿原酸含量及浸膏率。结果:绿原酸在0.01518～0.15180g/L范围内线性关系良好(r=0.9999)。加热回流提取法绿原酸含量为(0.4211±0.0137)%,超声波提取法为(0.3361±0.0107)%,组织破碎提取法为(0.4066±0.0065)%,3者相比差异有统计学意义(F=28.061,P=0.001)。加热回流提取法的浸膏率为(32.48±0.68)%,超声波提取法为(22.53±1.16)%,组织破碎提取法为(26.79±0.55)%,3者相比差异有统计学意义(F=52.413,P<0.001)。结论:组织破碎提取法具有简便迅速和节能高效的优点,是一种值得推广的提取新工艺。

不同野菊花提取物中蒙花苷和木犀草素的含量测定比较

目的:通过比较不同的提取方法对野菊花提取物中蒙花苷和木犀草素含量测定的影响,研究中药提取新工艺。方法:采用加热回流提取法、超声波提取法和组织破碎提取法3种提收工艺,同时提取野菊花中蒙花苷和木犀草素;利用RP-HPLC法,以水-乙腈-4%醋酸溶液为流动相(流速1.0 mL·min^(-1))司时测定蒙花苷和木犀草素含量。结果:蒙花苷和木犀草素分别在0.048～0.240 mg·mL^(-1)(r>0.9995)、0.0059～0.0294 mg·mL^(-1)(r>0.9999)浓度范围内线性关系良好,加热回流法、组织破碎法提取的蒙花苷和木犀草素含量均高于超声法,组织破碎法较回流法操作简便、节能节时,且可避免高温对热敏性物质的破坏性,表现出较高优越性。结论:组织破碎提取法有着高效经济的优势,是一种值得推广的高新提取工艺。

组织破碎提取法在中药研究中的应用进展

在对组织破碎提取法的原理和其实现途径闪式提取器进行简要介绍的基础上,对近10年来组织破碎提取法和闪式提取器在中药研究中的应用进展进行了综述。组织破碎提取法具有高效、快速、节能、环保及成分安全的特点,在中药提取和天然化学成分研究等方面具有广泛的应用前景,将为中药研究开辟一个新的途径。组织破碎提取法必将对中药现代化和国际化的发展起到积极的推动作用。

透明质酸的性能及生产

叙述了生化药物透明质酸的化学结构。

不同提取方法对丹参中丹参酮Ⅱ_A和丹酚酸B含量测定的影响

目的:比较不同的提取方法对丹参中丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量测定的影响。方法:分别采用加热回流提取、超声波提取和组织破碎提取3种提取工艺,对丹参中丹参酮ⅡA(脂溶性成分)和丹酚酸B(水溶性成分)进行提取,并利用RP-HPLC法对二者进行测定。色谱条件:采用YMCC18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.5%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,检测波长为270nm(丹参酮ⅡA)和286nm(丹酚酸B)。结果:丹参酮ⅡA和丹酚酸B浓度分别在0.002～0.032mg·mL-1(r=0.9992)和0.015～0.24mg·mL-1(r=0.9997)范围内线性关系良好,组织破碎提取法比加热回流提取法、超声波提取法提取得到的丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量高,而且节时节能。结论:本法准确、方便、灵敏,稳定性好,可作为丹参质量研究手段;同时表明组织破碎提取法明显优于加热回流提取法、超声波提取法,高效经济,是一种值得推广的高新提取工艺。

An Improved Method of Extracting Artemisia abrotanum Genomic DNA

[ Objective ] The objective of this study is to explore a rapid and efficient method of extracting genomic DNA from Artemisia abrotanum. [ Method] Three methods of Cutting Method, Liquid Nitrogen Method and Quartz Sand Method based on SDS method were employed to extract Artemisia abrotanum genomlc DNA from tender leaf at seedling stage, tender spike and old leaf at heading stage. The obtained DNAs were detected by absorbance detection, agarose gel and PCR amplification. [ Result ] Cutting Method performed better than the other two methods compared in purity, extracting cycle and cost, accordingly more suitable for PCR amplification. The results also show that young spike is the best material for extracting genomic DNA from Artemisia Annua.

中药制剂工艺中新技术应用进展

中药是中华民族的瑰宝,是先辈们在与疾病作斗争的漫长过程中,经过无数次实践,不断更新认知,一步一步建立起来的医学理论体系。中药在过去几千年里对中华儿女的生命健康起了至关重要的作用。在现代,随着中华民族的复兴,中药这一伟大的国粹在国家的大力扶持下产业结构调整愈发合理,中药行业的竞争力越来越强大。我们应以传统中医药理论为基础,坚持不断地去创新,不断提高中药的标准,使之可控可靠,让中药成为人们保护健康的第一选择。

野菊花总黄酮提取方法比较及其抗氧化活性研究

目的研究不同提取工艺的野菊花中总黄酮的量及其抗氧化活性。方法采用经典回流提取法、超声提取法、组织破碎提取法提取野菊花中黄酮类成分,以芦丁为对照品,通过紫外-可见分光光度法测定黄酮类成分的量,并用流动注射化学发光法测定野菊花中黄酮类成分的抗氧化活性。结果经典回流提取法、超声提取法、组织破碎提取法所提取的总黄酮的量分别为12.60、11.02、10.95 mg/g,采用流动注射化学发光法测得3种不同提取方法的总黄酮提取物的IC50分别是2.67、3.43、5.13μg/m L。结论经典回流提取法提取得到的野菊花总黄酮的量最高,且抗氧化活性最强,说明野菊花中总黄酮的量和抗氧化活性具有一致性。

一种简单高效稳定的高质量第X期鸡胚盘DNA提取方法的建立

为了建立快速高效稳定的高质量鸡胚盘DNA提取方法,试验通过收集第X期鸡胚胎,应用酚氯仿抽提法、微量组织DNA提取试剂盒法和优化的硅胶膜吸附法分别提取鸡胚DNA,所提DNA经0.8%的琼脂糖凝胶电泳初步检测,并经PCR进一步分析检验,对不同方法提取DNA的稳定性和质量进行评价。结果表明:微量组织DNA提取试剂盒法提取的基因组DNA比用酚氯仿抽提法提取DNA的方法具有更高的稳定性和更好的质量,而微量组织DNA提取试剂盒法与本试验建立的优化的硅胶膜吸附法提取的基因组DNA稳定性和质量相近,但本试验建立优化的硅胶膜吸附法,无需蛋白酶K消化胚盘组织,因而优化了步骤降低了成本。试验建立了一个简单高效稳定的高质量低成本的第X期鸡胚盘DNA提取方法,为后续的相关研究建立了一个有效的鸡受精蛋胚盘DNA提取方法。

肉制品中牛源性成分的快速定性检测研究

文章通过选用磁珠法组织核酸提取试剂盒对畜肉制品中的DNA进行提取,使之适用于PCR检测技术,依据标准《畜肉制品中牛成分定性检测方法实时荧光PCR法》(SN/T 2557—2010)检测其中是否含有牛特异性基因序列,同时在提取时加入猪源作为干扰,并进行灵敏度试验,为验证提取、扩增过程及方法准确性,加做核酸提取空白、扩增空白对照、扩增阴性对照和扩增阳性对照。该方法选用的磁珠法组织核酸提取试剂盒提取效率高,抗干扰能力强,且该方法在检测结果分析中增加了质量控制,可排除假阴性结果,检测时间可缩短为4 h以内,可用于市售新鲜、冷冻畜肉和肉干、肉酱等畜肉制品中的牛成分快速定性检测。从而为打击不法商家和企业用低价猪肉代替或非肉冒充牛肉提供了有力的技术保障,维护了消费者权益。