颗粒蛋白前体对脓毒症急性肺损伤小鼠肺组织核转录因子-κB的表达的影响

目的:探讨颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)对脓毒症急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响及可能机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为对照组(Control组)、急性肺损伤组(CLP组)、颗粒蛋白前体治疗组(CLP+PGRN组)。采用盲肠结扎穿刺术(cecal ligation and puncture,CLP)构建小鼠脓毒症ALI模型,CLP+PGRN组在CLP处理半小时后使用PGRN腹腔注射。24 h后麻醉并处死小鼠,取小鼠肺HE染色观察肺组织病理损伤;TUNEL法检测肺部细胞凋亡情况;免疫荧光染色检测肺组织中核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)水平;Western blot法检测NF-κB、总p65和磷酸化p65表达水平;RT-qPCR检测NF-κB和炎症细胞因子水平。结果:和Control组相比,CLP组和CLP+PGRN组肺损伤加重,促炎细胞因子升高,肺组织中细胞凋亡增加,NF-κB、p65和p-p65的表达水平明显增加;与CLP组相比,CLP+PGRN组肺组织损伤和凋亡减轻,促炎细胞因子降低,抑炎细胞因子升高,NF-κB、p65和p-p65的表达明显减少。结论:PGRN可以减轻脓毒症小鼠急性肺损伤,其机制可能与抑制NF-κB、p65表达和p65磷酸化有关。

清热燥湿方对急性肺损伤大鼠肺组织核转录因子-κB蛋白及mRNA表达的影响

目的 探讨清热燥湿方对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织核转录因子-κB(NF-κB)蛋白及mRNA表达的影响.方法 40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法均分为对照组、模型组、地塞米松组、清热燥湿方组4组.地塞米松和清热燥湿方在LPS诱导ALI模型前预处理3 d.分别于制模后4 h和8 h采用免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测NF-κB的蛋白及mRNA表达,并进行肺组织病理观察.结果 与模型组相比,地塞米松组和清热燥湿方组4 h、8 h NF-κB蛋白染色阳性面积率[4 h:(3.40±0.39)%、(2.59±0.62)%比(4.28±0.55)%;8 h:(3.04±0.74)%、(2.60±0.11)%比(4.20±0.62)%]及mRNA表达[4 h:(12.88±2.28)×10-4、(3.07±2.63)×10-4比(44.82±9.27)×10-4;8 h:(3.30±2.64)×10-4、(1.53±1.51)×10-4比(26.07±3.81)×10-4]均明显降低(P＜0.05或P＜0.01).光镜下观察,模型组大鼠肺组织出现大片出血及坏死;清热燥湿方组大鼠肺组织病理损伤程度较模型组减轻.结论 清热燥湿方能减轻内毒素致ALI大鼠肺组织损伤,对肺损伤有保护作用,其机制可能与其能降低损伤肺组织NF-κB蛋白及mRNA表达有关.

培哚普利和缬沙坦对兔动脉粥样硬化脑组织核转录因子-κB,诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的建立兔高胆固醇-动脉粥样硬化模型,观察脑组织核转录因子κB(NF-κB)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的阳性表达,探讨培哚普利、缬沙坦的干预效果及临床意义.方法30只雄性新西兰大白兔,随机分为4组:正常对照组(A组);高脂饮食组(B组);高脂饮食加培哚普利组(C组);高脂饮食加缬沙坦组(D组);喂饲8周后,取脑组织标本用免疫组化方法(SABC法)测定NF-κB的表达;分光光度法测定脑组织iNOS的活力.结果与对照组相比,高脂饮食组脑组织中NF-κB,iNOS水平明显升高(P<0.05);高脂饮食加培哚普利组及高脂饮食加缬沙坦组NF-κB,iNOS水平明显降低(P<0.05),但仍显著高于对照组(P<0.05).结论动脉粥样硬化致脑组织中NF-κB,iNOS表达发生的变化,与肾素-血管紧张素系统(RAS)的激活有关,培哚普利和缬沙坦从不同水平阻断RAS后,可减轻NF-κB,iNOS的表达,达到保护脑组织的作用.

辛芷鼻敏胶囊对大鼠变应性鼻炎脾脏组织核转录因子-κB和白介素-5表达的影响及相关性

目的探讨辛芷鼻敏胶囊对实验性大鼠变应性鼻炎(A llergic rh in itis,AR)脾脏组织核转录因子-κB(Nuc lear factorkappa B,NFκ-B)和白介素-5(Interleuk in-5,IL-5)表达及相互关系的作用,明确药效机理。方法通过造模的大鼠灌服辛芷鼻敏胶囊及与同类药物对照,用免疫组化Evision方法半定量检测脾脏组织NFκ-B(亚单位P65)的活性细胞表达及双抗体夹心酶联免疫吸附技术(Enzym e labeled immunosorbent assay,ELISA)定量测定IL-5的表达。结果实验药物组的NF-κBP65的阳性细胞比例和IL-5含量明显低于模型组及阳性对照组(P<0.05);且NFκ-BP65的活性细胞比例与IL-5的表达呈正相关(r=0.935 5、P<0.05)。结论辛芷鼻敏胶囊可能通过降低核转录因子-κB活性,抑制大鼠AR发病过程中IL-5的表达,进而减少嗜酸粒细胞(Eosinoph il,EOS)的浸润而控制症状。

温肾活血化湿方对肾间质纤维化大鼠肾组织NF-κB表达的影响

目的:探讨温肾活血化湿方对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)法致肾间质纤维化大鼠肾组织核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响,初步揭示该方防治肾间质纤维化的作用机制。方法:采用UUO建立大鼠肾间质纤维化模型,将雄性SD大鼠80只随机分为假手术组、UUO组、氯沙坦组和温肾活血化湿方组,每组20只;于造模后第2天开始灌胃,假手术组、UUO组给予等量生理盐水,氯沙坦组灌胃氯沙坦[10 mg/(kg·d)],温肾活血化湿方组灌温肾活血化湿方汤剂[9.8 mg/(kg·d)]。于造模后第7、14、21天留取梗阻侧肾组织行HE、Masson染色,观察肾组织病理变化,免疫组化法检测肾组织NF-κB的表达。结果:第7、14、21天UUO组中NF-κB表达较假手术组高(P<0.05),治疗组在第7天较UUO组低(P<0.05)。结论:温肾活血化湿方可能通过抑制NF-κB的过度表达从而延缓肾间质纤维化的进程。

健脾方对糖尿病大鼠肾组织NF-κB表达及血清中PDGF-β及ICAM-1的影响

目的探讨健脾方对糖尿病大鼠肾组织NF-κB表达及血清中PDGF-β及ICAM-1的影响。方法取大鼠55只,随机选择10只为正常对照组,予普通饲料喂养,余为实验组给予高脂饲料喂养。并采用链尿佐菌素(STZ)单次腹腔注射35mg/kg,建立糖尿病动物模型,120h后测血糖。造模成功后,再将实验组大鼠随机分为模型组、吡格列酮组和健脾方组,每组各10只。除模型组和正常对照组外,健脾方组按3.0g/(kg·d)、吡格列酮组按10mg/(kg·d)灌胃,模型组和正常对照组按5mL/(kg·d)给予生理盐水灌胃,连续8周。测定血糖、肾组织中核转录因子-κB的表达及血清中血小板衍生因子(PDGF-β)及细胞间黏附分子(ICAM-1)。结果模型组大鼠肾组织中NF-κB表达较正常组明显升高(P<0.01);予健脾方后,肾组织中NF-κB表达较模型组明显降低(P<0.01),疗效与吡格列酮组近似。与正常组比较,模型组中PDGF-β、ICAM-1升高(P<0.01);予药物后,健脾组与吡格列酮组中上述指标下降(P<0.01)。造模后,模型组血糖明显升高,与正常组比较差异显著(P<0.01);健脾方组与吡格列酮组血糖明显降低(P<0.01)。结论健脾方可抑制糖尿病大鼠肾脏NF-κB的高表达,下调血清中PDGF-β及ICAM-1的水平,降低血糖,延缓糖尿病肾病的进展。

肝豆灵片对铜负荷大鼠肝细胞凋亡的影响

目的通过观察肝豆灵片对铜负荷大鼠肝细胞凋亡及肝组织核转录因子kappa B(NF-κB)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响,分析肝豆灵片对铜负荷大鼠肝损伤治疗的作用机制。方法18只Wistar大鼠被随机分为对照组、模型组和肝豆灵组,每组6只。对照组自由饮食,模型组和肝豆灵组连续12周以铜负荷法复制大鼠模型,自第7周开始,肝豆灵组大鼠以肝豆灵片混悬液灌胃,直至造模结束。采用HE染色法观察大鼠肝组织病理变化,TUNEL法检测大鼠肝细胞凋亡,免疫组化技术检测大鼠肝组织NF-κB和Caspase-3的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠肝组织病理损伤严重,肝细胞凋亡指数显著升高(P<0.05),NF-κB和Caspase-3表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,肝豆灵组大鼠肝组织病理损伤减轻,肝细胞凋亡指数及NF-κB,Caspase-3表达显著降低(P<0.05)。结论肝豆灵片可减轻铜负荷大鼠肝损伤,其机制可能与其下调肝组织NF-κB和Caspase-3的表达、抑制肝细胞凋亡相关。