纤维蛋白组织粘着剂携载反义基因片段的实验研究

为了探讨纤维蛋白组织粘着剂携载反义基因片段血管外膜给药的可能性及可行性 ,作者首先对粘着剂的物理性状进行了观察 ,继而将亚甲蓝溶于粘着剂中观察其上清液的颜色变化 ,再以人工合成的反义寡核苷酸溶于粘着剂中 ,分别于 12、2 4、36、48、6 0、72h取其上清液以紫外分光光度计测其OD值 ,绘出其体外控释曲线。结果发现 ,粘着剂混合后即刻凝结 ,表面呈膜状 ,内部呈丝状蛋白结构 ,其间充满颗粒状液体 ;粘着剂具有弹性 ,有类似海绵样特性 ,且随着时间延长其上清液颜色渐变深 ;体外控释曲线显示其携载的反义寡核苷酸可以缓慢释放 ,近 72h已大部分释放。提示纤维蛋白组织粘着剂可以携载反义基因片段直接血管外膜给药 ,使反义药物缓慢释放 。

纤维蛋白胶塑形、异体微粒软骨脱细胞基质支架的人工软骨研究

目的:利用软骨微粒脱细胞基质这种新型支架材料及纤维蛋白胶,体外构建可塑形及具有良好生物相容性的组织工程化软骨。方法:制备绵羊关节软骨微粒脱细胞基质并与体外扩增的异体关节软骨细胞及纤维蛋白胶混合,塑成圆柱形,体外培养。结果:软骨微粒脱细胞基质及纤维蛋白胶与异体软骨细胞有良好的生物相容性,软骨细胞生长和分泌功能良好,塑成的复合物具有一定的硬度和弹性。结论:塑成的圆柱形软骨细胞-异体软骨微粒脱细胞基质-纤维蛋白胶复合物可于体外形成软骨样组织,可进一步应用于体内修复关节软骨缺损。

纤维蛋白胶促进肠外瘘愈合

目的 探索应用纤维蛋白胶促进肠外瘘愈合的方法。方法 前瞻性观察 2 7例肠外瘘患者应用纤维蛋白胶充填瘘管、封堵瘘口后的愈合情况。结果 2 7例肠外瘘患者中 2 5例在 2周内通过纤维蛋白胶堵瘘方法获得愈合 ,经平均 5 6个月 (1～ 15个月 )的随访未见复发。结论 纤维蛋白胶可以有效促进肠外瘘愈合。

磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料填充桡骨缺损的生物相容性

背景:磷酸钙骨水泥与人体自身骨矿物的化学组成和结构相似,能够填充因骨折造成的骨质塌陷,具有诱导成骨作用,但其降解速度较慢。目的:评估磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料的生物相容性及修复桡骨缺损的可行性。方法:(1)体外细胞毒性实验:分别以磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶材料浸提液、苯酚溶液,含体积分数为10%胎牛血清RPMI1640培养液培养小鼠成纤维细胞,检测细胞毒性分级;(2)血液相容性实验:在兔抗凝血中分别加入磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶材料浸提液、生理盐水及双蒸水,检测溶血率;(3)取45只新西兰大白兔,制备双侧桡骨缺损模型,随机分3组,空白对照组不进行任何干预,实验组与骨缺损处植入磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料,对照组植入自体桡骨。术后4,8,16周,进行X射线、组织学、骨密度及生物力学检测。结果与结论:(1)细胞毒性:磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶材料浸提液的毒性为0至1级;(2)血液相容性:磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶材料的溶血率为3.15%;(3)体内修复实验:术后16周,X射线显示,实验组和对照组骨折线完全消失,髓腔复通,塑性完全;组织学显示,对照组骨小梁重建较明显,板层骨较成熟,髓腔再通,实验组有大量新生编织骨成网格状长入材料中,材料降解明显,降解与骨长入同步;实验组与对照组骨密度、最大负荷、最大应力和破坏能量均明显高于空白对照组(P<0.05),实验组与对照组各指标比较差异无显著性意义;(4)结果表明:磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料具有良好的生物相容性,修复骨缺损可促进骨组织再生,获得与自体骨移植基本相当的治疗效果。

注射型磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶作为BMP注射性载体的可行性研究

目的:了解以注射型磷酸钙骨水泥(ICPC)/纤维蛋白胶(FS)共同作为骨形态发生蛋白(BMP)复合载体的注射型骨修复材料在小鼠体内异位成骨的能力,探讨其作为注射性骨替代物的可行性.方法:在小鼠肌袋随机注射或植入ICPC/FS/bBMP复合物、ICPC/FS复合物和单纯bBMP材料,术后2wk,4wk取材,通过碱性磷酸酶测定和组织学检查,观察其异位诱导成骨能力.并对术后4wk时新生骨进行定量测定和统计学比较.结果:ALP和组织学检查结果表明ICPCFS/bBMP复合物有较多新骨形成,单纯bBMP诱导出少量骨ICPC/FS复合物未见新生骨,诱导骨量有统计学意义(P<0.05).结论:可注射性ICPC/FS/BMP复合物具有良好的骨诱导活性,ICPC/FS是BMP的良好注射性载体之一.

复合bBMP的纤维蛋白胶对去势绵羊体内椎弓根螺钉固定的强化作用

目的:探讨复合牛骨形态发生蛋白(bBMP)的纤维蛋白胶(FS)强化去势绵羊椎弓根螺钉固定作用的生物力学效果.方法:选取4只去势绵羊腰椎2～6双侧共36个椎弓根随机分为3组:FS/bBMP组,磷酸钙骨水泥(CPC)组,空白对照组,每组12个椎弓根.FS/bBMP组钉道内注入复合bBMP的FS,CPC组注入CPC,空白对照组钉道内不作任何处理.拧入螺钉饲养3mo后取材.在材料试验机上进行轴向拔出试验和周期抗屈试验.结果:FS/bBMP组的最大拔出力为(909.98±155.65)N,CPC组为(994.20±122.78)N,两组差异无统计学意义(P>0.05).两组均明显高于空白对照组的(524.65±118.35)N,差异具有统计学意义(P<0.05).周期抗屈试验800个周期内,FS/bBMP组螺钉位移为(1.478±0.466)mm,CPC组为(1.274±0.393)mm,空白对照组为(1.978±0.531)mm,其中FS/bBMP组与CPC组两组差异无统计学意义(P>0.05),两组均小于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:在骨质疏松椎体内植入椎弓根螺钉时,添加复合bBMP的FS可显著提高螺钉稳定性.

化学去细胞同种异体神经复合神经生长因子移植后运动功能神经生理学观察

目的:观察化学去细胞同种异体神经复合神经生长因子(NGF)修复大鼠坐骨神经缺损的神经生理恢复情况。方法:采用药物微球技术制备的NGF微球,与生物纤维蛋白胶混合后,形成NGF复合缓释制剂,作为补充外源性NGF载体。选取30只Wister大鼠制备坐骨神经10 mrn缺损进行神经修复,随机分为A、B、C3组,A组予自体神经反转吻合,B组予化学去细胞异体神经桥接,C组在化学去细胞神经移植段周围注射1 mL的NGF复合缓释制剂。术后16周观察大鼠在运动功能神经生理学恢复的情况。结果:方波刺激移植段近侧神经,均在小腿三头肌上记录到运动诱发电位曲线。A、B、C组的神经移植段运动传导速度分别为(52.6±3.9)、(35.4±3.2)、(47.2±3.8)m/s,A组与C组比较无统计学差异,B组与C组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:化学去细胞神经同种异体复合NGF缓释制剂移植修复大鼠坐骨神经长段缺损,术后4个月运动传导功能恢复与自体神经移植相似。

甲状腺功能亢进手术中纤维蛋白胶的应用与观察

目的总结甲状腺功能亢进(甲亢)手术使用纤维蛋白胶不放置引流的临床经验。方法对392例甲状腺Ⅲ度及以下肿大的甲亢手术创面喷洒纤维蛋白胶不放置引流(下称蛋白胶组)与386例甲亢手术切口放置胶管引流(下称引流组)进行比较。结果蛋白胶组切口术后无出血,无切口积液,无切口感染,切口甲级愈合,无不良反应,术后平均住院(4.6±0.5)d;引流组切口放置引流管24～48h,切口引流量平均125ml,切口出血3例(0.77%),切口积液7例(1.81%),切口感染1例(0.26%),术后平均住院(5.8±0.7)d。结论在甲状腺Ⅲ度及以下肿大的甲亢手术中创面喷洒蛋白胶不放置引流是可行的。

纤维蛋白胶黏合修复周围神经抗牵拉强度的动态变化(英文)

背景:目前周围神经损伤断裂后依然用缝线缝合的方法进行修复,而用纤维蛋白胶的黏合作用修复周围神经损伤将成为临床又一新的研究课题。目的:了解利用纤维蛋白胶黏合作用修复周围神经损伤后抗牵拉强度及其动态变化。设计:随机对照实验研究。地点和对象:在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科生物力学实验室完成。健康成年雄性Wistar大鼠,体质量250～300g。干预:采用完全随机的方法将96只Wistar大白鼠分成缝合组和黏合组。切断大鼠坐骨神经,对合整齐,黏合组用纤维蛋白胶黏合进行修复,缝合组用11-0缝线缝合进行修复。分别于术后当天(术毕),3,7,14,21,28d从缝合组与黏合组各取8只大鼠,游离出坐骨神经立即进行生物力学检测。主要观察指标:测量神经断裂时的最大负荷、功耗,并描绘出神经应力—应变曲线。结果:正常神经抗牵拉强度曲线表现出黏弹性特性。缝合组与黏合组的最大抗牵拉强度及功耗在术后当天,第14,21和28天差异无显著性意义(P>0.05);但在术后第3天时最大抗牵拉强度分别为(1.35±0.27),(1.97±0.23)N/mm2,功耗分别为(0.028±0.007),(0.040±0.003)J/mm2,第7天最大抗牵拉强度(1.93±0.26),(2.74±0.30)N/mm2,功耗分别为(0.047±0.009),(0.063±0.007)J/mm2,差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:纤维?

注射型骨修复材料诱导成骨活性的研究

目的:了解以纤维蛋白胶(Fibrinsealant,FS)为载体的注射型骨修复材料犤骨形态发生蛋白(BMP)犦异位诱导成骨的作用。方法:实验分组为:实验组b(FS+bBMP)、对照组b(bBMP)、实验组r(FS+rhBMP-2)、对照组r(rhBMP)、对照组FS(FS)及空白对照组。将各组材料注射或植入小鼠肌袋内,采用用放射学、形态学、碱性磷酸酶(ALP)检测等方法对其成骨效应进行研究。结果:在以bBMP为成骨因子的实验区中,实验组b具有高效的骨诱导活性,其成骨量显著高于对照组b、对照组FS及空白对照组(P<0.01);在以rhBMP-2为成骨因子的实验区中,实验组r同样具有高效的骨诱导活性,其成骨量也显著高于对照组r、对照组FS及空白对照组(P<0.01)。结论:以FS为载体复合BMP的注射型骨修复材料具有高效的骨诱导活性。

纤维蛋白黏合剂的止血作用对烧伤修复植皮的影响

目的:观察纤维蛋白胶应用于烧伤深二度植皮手术中的削痂创面和供皮区创面渗血的止血效果。方法:随机选择2003-01/05第三军医大学西南医院烧伤研究所烧伤后需行植皮手术患者24例,术中选取相邻部位或对称部位的供皮区及削痂创面,进行自身同体对照,实验组创面使用纤维蛋白胶;对照组使用生理盐水,观察并记录创面出血量及止血时间。结果:实验组24例平均出血量为1.04g,出血时间为5.71s,对照组24例平均出血量3.46g,出血时间为86.58s。试验组的止血效果显著优于对照组(P<0.01)。结论:纤维蛋白胶运用于烧伤植皮手术削痂创面及供皮区时,有确切的止血效果。

生物蛋白胶在脊柱外科中的应用

目的:探讨生物蛋白胶对脊柱外科手术后引流量的影响。方法:对同期脊柱外科手术同一手术组实验组58例和对照组50例进行术后24h引流量和总引流量进行观察比较。结果:实验组术后24h及引流总量明显少于对照组(P<0.05)。结论:医用生物蛋白胶可以有效减少脊柱外科手术术后24h及引流总量,促进术后康复。

以纤维蛋白胶为载体的注射型骨修复材料对兔骨髓基质细胞增殖和分化的影响

目的观察以纤维蛋白胶(FS)为载体的注射型骨修复材料对体外培养的兔骨髓基质细胞(MSCs)增殖和分化的影响。方法取3天龄新西兰兔MSCs进行培养,实验分为5组,A组(实验组)培养液中加入含1μg/ml重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)和1μg/ml重组人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的纤维蛋白胶,B组(对照1组)培养液中加入单纯的纤维蛋白胶,C组(对照2组)培养液中加入含1μg/mlbFGF的纤维蛋白胶,D组(对照3组)培养液中加入含1μg/mlrhBMP-2的纤维蛋白胶,E组为单纯对照组(培养液中不加入任何材料)。采用细胞培养、组织化学及电镜观察等方法对各组细胞增殖情况、贴壁率、碱性磷酸酶(ALP)活性、I型胶原表达、超微结构变化等进行研究。结果各组材料的促增殖作用和对细胞贴壁率的影响由强到弱均依次为C组、A组、B组、D组、E组,差异有显著性(P<0.05)。各组细胞ALP活性及I型胶原表达水平由强到弱均依次为A组、D组、B组、C组、E组,差异有显著性(P<0.05)。扫描电镜观察发现,以纤维蛋白胶为载体的注射型骨修复材料表面粗糙,有微孔存在,各组细胞与其融合生长。透射电镜观察发现:A组的绝大部分细胞呈成骨细胞表型,细胞增殖旺盛,分化好,胞质内有丰富的粗面内质网和线粒体,并明显扩张,内有蛋白样物质,细胞外基质丰富,细胞周围可见大量的胶原纤维;而各对照组或是细胞增殖活性高,但向成骨细胞表型分化差,或是向成骨细胞表型分化好,但细胞增殖活性较差,细胞外基质及胶原纤维少。结论以纤维蛋白胶为载体的注射型骨修复材料(FS+bFGF+rhBMP-2)可显著促进MSCs的增殖及其向成骨细胞的分化。

脊髓内移植纤维蛋白胶包裹嗅粘膜固有层促进损伤轴突再生

目的 将富含嗅神经鞘细胞的大鼠嗅粘膜固有层(OL P)碎片裹以纤维蛋白胶 (FG) ,移植到脊髓全横断断端间隙内 ,观察对脊髓两断端连接及轴突再生的影响 .方法 成年雄性 SD大鼠 2 4只 ,全横断胸 10节段脊髓 .分别于脊髓断端间隙内移植 OL P(OL P组 )、FG包裹的 OL P(FG- OL P组 )或等量的 FG(FG组 ) ,每组 6只 ;另 6只仅行脊髓横切 (单纯全切组 ) . 10 wk后处死动物 ,取材观察四组大鼠脊髓断端的连接情况 .再取损伤区 2 cm范围脊髓节段 ,行冰冻水平切片 ,免疫组化 ABC法染色 ,观察神经丝 (NF)和生长相关蛋白- 43(GAP- 43)免疫组化染色阳性神经纤维的分布与形态 ,同时行 NF和 GAP- 43的免疫荧光双标染色 ,激光共聚焦显微镜下观察两者的相互关系及形态异同 .结果 单纯全切组和OL P组脊髓两断端连接较差 ;FG组和 FG- OL P组断端连接较好 ,少有空洞 .单纯全切组和 FG组损伤区可见少量 NF及GAP- 43免疫组化染色阳性纤维 ,分布弥散 ,纤维细小 ,排列方向凌乱 .OL P组可见较多 NF及 GAP- 43免疫组化染色阳性纤维 ,但未见跨越脊髓横切部位 ;而 FG- OL P组损伤区内有大量 NF及 GAP- 43免疫组化染色阳性纤维 ,并跨越脊髓横切部位 . NF和 GAP- 43免疫荧光双标结果显示 ,二者在损伤区的分布相同 .

用于椎体造影的纤维蛋白胶基造影剂的相关研究

目的:制备适用于椎体造影的纤维蛋白胶基造影剂,并对其性状进行初步研究。方法:将纤维蛋白原按体积比1∶1溶解于纤维蛋白溶解酶抑制剂,凝血酶按体积比1∶1溶解于氯化钙溶液后与不同比例的造影剂结合,分别测定不同实验组的造影剂的显影性和粘度值,以期获得最佳配比。结果:试验Ⅷ组的配比在保证较高的粘滞度的前提下保持了良好的显影性,更加有助于对骨水泥渗漏的判断。结论:纤维蛋白胶与水溶性碘造影剂以最佳配比组合所获得的纤维蛋白胶基造影剂在保持其显影性的同时,极大的提高了粘滞度,为椎体造影提供了更加有利的手段。

可注射神经生长因子缓释制剂的体外释药性能

目的:观察可注射神经生长因子(NGF)缓释制剂的一般性质和体外释药特征。方法:采用药物微球技术制备的NGF微球,与生物纤维蛋白胶混合形成NGF复合缓释制剂,并通过体外释放率和PC12细胞活性考察其体外释药性质。结果:体外实验证明,NGF复合缓释制剂可持续释放NGF达7周以上,累积释放率为63.85%,释出的NGF可促进PC12细胞分化,具有较强的生物学活性,出现神经突触样生长。结论:制备可注射NGF缓释制剂,可长期释放NGF,并具有生物活性,可作为补充外源性NGF的良好制剂。

纤维蛋白胶减少乳腺癌改良根治术创面渗漏的效果观察

目的探讨乳腺癌改良根治术中应用医用纤维蛋白胶(FG)对减少创面渗血的效果。方法将行乳腺癌改良根治术的72例乳腺癌患者分为两组,实验组36例术中创面使用FG,对照组36例不使用FG,观察术后第1天引流量及引流总量、拔管时间、皮下积液情况。结果实验组术后第1天引流量及引流总量、拔管时间明显少于对照组(P均<0． 01),皮下积液发生率亦少于对照组(P<0．01)。结论乳腺癌改良根治术中应用FG能有效减少创面引流量,降低皮下积液发生率,有利于切口愈合。