组织细胞周期调节缺陷基因A型单核苷酸多态性与精神分裂症的关系

目的:探讨组织细胞周期调节缺陷基因A型(HIRA)单核苷酸多态性(SNP)与精神分裂症的关系。方法:在216个汉族精神分裂症核心家系中,以PCR和限制性片段长度多态(RFLP)方法对HIRA基因rs1473109(A/G碱基改变)SNP进行检测,应用基于家系的连锁不平衡方法分析基因型数据。结果:HIRA基因的rs1473109等位基因和基因型频数分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。传递不平衡检验(TDT)显示HIRA基因rs1473109与精神分裂症无连锁及关联。HIRA基因的rs1473109位点基因型频数分布与精神分裂症的阳性症状中关系妄想、读心症和思维连贯性障碍有关联(χ2=9.310,υ=2,P=0.010;χ2=14.373,υ=2,P=0.001;χ2=11.067,υ=2,P=0.004)。结论:中国汉族精神分裂症患者HIRA基因本身或其附近的基因可能与精神分裂症阳性症状的发生有关。

2型糖尿病患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因及其剪接异构体的表达水平和临床意义

目的:探讨2型糖尿病(T2DM)患者外周血淋巴细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶5调节亚基相关蛋白1类似物1(CDKAL1)基因及其剪接异构体的表达水平,并探讨其临床意义。方法:收集65例糖尿病患者,其中T2DM患者20例(T2DM组)、糖尿病肾病(DN)患者23例(DN组)和糖尿病视网膜病变(DR)患者22例(DR组),并选择同期健康体检者28名(健康对照组)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组研究对象外周血淋巴细胞中CDKAL1基因及其2种剪接异构体CDKAL1-X1和CDKAL1-X2表达水平,分析其表达与T2DM及其糖尿病微血管并发症的关系。结果:与健康对照组比较,T2DM组患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因表达水平升高(Z=4.705,P<0.01),CDKAL1-X1表达水平升高(Z=2.698,P=0.007)。与健康对照组比较,DR组和DN组患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因和CDKAL1-X1表达水平升高(P<0.05);DR组患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因表达水平高于DN组(P<0.05)。结论:T2DM患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因和CDKAL1-X1表达水平升高可能参与糖尿病及其并发症的发生发展。

蛋白C基因C5498T致Ⅰ型遗传性蛋白C缺陷症

目的:对一个遗传性Ⅰ型蛋白C(PC)缺陷症家系进行基因突变的检测。方法:先证者的蛋白C活性(PC:A)和抗原(PC:Ag)分别为26%和1.43mg/dl。用PCR法对先证者PC基因的9个外显子及其侧翼、内含子序列进行扩增,PCR产物纯化后直接测序,检测其基因突变。突变位点经限制性内切酶分析证实。结果:先证者表现为PC基因外显子3区杂合错义突变C5498T,引起Argl5→Trp。结论:该突变导致遗传性Ⅰ型PC缺陷症,为国内首次报道。

罕见病研究:GPAA1基因突变导致糖基磷脂酰肌醇生物合成缺陷15型

6岁男性患儿,因发育迟缓6年,反复发热、抽搐5年就诊。患儿3月龄时发现精神运动发育落后,1岁起出现反复发热、抽搐,伴间断口腔溃疡及扁桃体化脓,发热期间查血白细胞计数、C反应蛋白、红细胞沉降率升高,热退后正常,脑电图提示癫痫,基因检测提示GPAA1基因存在复合杂合突变。最终该患儿诊断为糖基磷脂酰肌醇生物合成缺陷15型(glycosylphosphatidylinositol biosynthesis deficiency 15,GPIBD15)、周期性发热。该患儿抗癫痫效果不佳,糖皮质激素治疗对发热有效。该文报道了中国首例GPAA1基因突变导致GPIBD15患儿,对该病基因、临床特点、诊疗等进行归纳总结,为该病的早期诊断、治疗提供参考依据。

一种有效且安全的1型单纯疱疹病毒扩增子载体用于肝细胞癌转录水平的靶向治疗

以往的研究已显示当细胞周期调节因子被整合进入单纯疱疹病毒-1（HSV—1）扩增子结构载体时转基因表达可针对增殖性细胞。 在本项研究中作者采用小鼠部分肝切除模型进一步证实了转基因表达的转录活性与启动细胞增殖的相关性。而且，这种转录调节在HCC的特异性杂合启动子调节下可通过插入相嵌基因Gal4／NF—YA而具有对HCC的特异性。

Ⅰ型免疫缺陷病毒蛋白R基因致U251细胞基因的差异表达

Ⅰ型免疫缺陷病毒基因R（Vpr）,有多种生物学功能,可诱导细胞周期停滞和细胞凋亡,但详细机制不明确.我们用基因芯片技术检测腺病毒介导Vpr基因转移诱导的U251细胞基因的差异表达,探讨Vpr诱导胶质瘤细胞停滞及凋亡的机制.

抗HIV-1免疫基因的研究进展

人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)是艾滋病(Acquired Immune Deficiency Syndrome,AIDS)的病原体。HIV感染使人体免疫系统中最重要的CD4+T淋巴细胞减少,从而破坏人的免疫系统,最终使免疫系统崩溃,丧失对各种疾病的抵抗能力而并发多种感染和肿瘤最终导致死亡。宿主的一些抗艾滋病免疫基因如载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G、正常T细胞表达分泌的调节活化蛋白等在抑制HIV感染和延缓感染者疾病进展中都起着非常重要的作用。文章主要综述人体内抗HIV病毒的部分免疫基因及其作用机制。

一例遗传性Ⅰ型蛋白C缺陷症遗传表型和基因突变的研究

蛋白C（PC）是由肝脏合成的一种维生素K依赖性糖蛋白。PC被凝血酶调节蛋白（TM）与凝血酶的复合物水解为活化蛋白C（APC），通过灭活FⅤa、FⅧa下调促凝活性，同时通过凝血酶激活的纤溶抑制物（TAFI）抑制纤溶酶原激活物抑制物（PAI）-1活性而增强纤溶活性，参与机体的抗凝，维持抗凝与凝血过程的动态平衡。

免疫缺陷41型自身免疫性淋巴细胞增生伴胰岛素依赖型糖尿病10型一例并文献复习

目的报道1例白细胞介素2受体α亚基（interleukin 2 receptor-α，IL2RA）基因突变引起的免疫缺陷41型自身免疫性淋巴细胞增生（immunodeficiency 41 with lymphoproliferation and autoimmunity, IMD41）及胰岛素依赖型糖尿病10型（diabetes mellitus, insulin-dependent 10, IDDM10）。 方法临床诊断结合基因测序。 结果本例报道1例7.5岁女童，因＂全身淋巴结肿大5年，乏力2个月，血糖波动20余天＂入院，伴真菌性肺炎、ANCA相关性血管炎。全外显子测序结果显示IL2RA基因复合杂合突变：c.340C〉T（p.Q114X，父系来源，新发突变）、c.64G〉A（p.E22K，母系来源）。经泼尼松、伏立康唑治疗结合糖尿病饮食后自身抗体转阴、血糖恢复正常、肺部病变减轻。文献复习提示国外报道IL2RA基因突变共5例患儿，均表现不同程度的感染（感染部位为肺部、皮肤、胃肠道等）及免疫异常（自身免疫疾病、淋巴结病、肝脾肿大、糖尿病等）。 结论对于临床症状不典型的病例，全外显子测序有助于早期诊断。

泛素特异性蛋白酶18的研究进展

泛素特异性蛋白酶18（USP18）是泛素特异性蛋白酶家族成员之一。它是一种Ⅰ型干扰素诱导基因（Ⅰ-IFN）,也称为UBP43,参与将连接在蛋白质上的类泛素干扰素刺激基因（ISG）15移除的过程,是ISG15共价酶修饰系统中特异性的蛋白水解酶。但是机体在Ⅰ-IFN作用后的数小时内即产生对Ⅰ-IFN的抵抗,其机制可能是因为USP18表达的上调。USP18抑制天然免疫反应有两种作用机制。

Vpr对人结肠癌细胞的抑制作用及其机制

目的 探讨人类免疫缺陷病毒1型（ HIV-1）病毒蛋白r（Vpr）对人结肠癌细胞HCT-8的抑制作用及其机制.方法 将细胞分为空白对照组、空载体转染组和Vpr转染组.空白对照组：细胞不予干预；空载体转染组：对数生长期的细胞加入不同感染复数（MOI）的空载体腺病毒；Vpr转染组：加入不同MOI的含有HIV1-Vpr基因的重组腺病毒（Adv-Vpr）.应用MTT比色法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡及线粒体膜电位,Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白的表达.多组间均数比较采用单因素方差分析,两两比较采用q检验；或采用双因素方差分析,组内比较采用t检验.结果 Vpr显著抑制人结肠癌细胞HCT-8增殖,Adv-Vpr转染72 h后（MOI=200）,Vpr转染组细胞MTT值为1.03±0.04,与空载体转染组（2.46 ＋0.15）及空白对照组（2.51±0.14）比较,差异有统计学意义（F=144.6,P＜0.05）；Adv-Vpr转染48 h后（MOI=200）,Vpr转染组处于G2/M期的细胞比例及线粒体膜电位下降的细胞比例增加,分别为37.31％±5.90％和32.07％±5.64％,与空载体转染组（18.30％±6.04％、3.32％±0.79％）及空白对照组916.66％±3.51％、2.76％±1.43％）比较,差异有统计学意义（F=10.08,64.45,P＜0.05）.Adv-Vpr转染72 h后（MOI=200）,Vpr转染组细胞凋亡率为37.62％±6.48％,与空载体转染组（3.44％±1.11％）及空白对照组（2.93％±1.07％）比较,差异有统计学意义（F=122.4,P＜0.05）.Adv-Vpr处理48 h后（MOI=200）,Westem blot检测发现Vpr导致了Caspase-9、Caspase-3剪切为活性片段,p-Chk1-S345磷酸化增加,而Fas、Fas-L、ERK1及ERK2表达未见上调.结论 Vpr在体外能够有效抑制结肠癌细胞株HCT-8增殖,并诱导其细胞周期G2期阻滞及凋亡,其机制分别与DNA损伤信号通路激活及线粒体凋亡通路启动有关.Vpr在结肠癌的治疗中具有潜在的应用前景.