病理组织脱钙液传统组方的比较分析

病理组织脱钙液传统组方种类繁多，组分剂量差异较大。本文就相关溶质、溶剂、溶液的性质及对病理组织成分的作用，对各种传统组方质量进行比较分析（传统组方组分剂量的统一换算以100ml溶液量计，组织钙盐以碳酸钙计）。

保存液pH值和钙离子浓度对古尸骨组织脱钙的影响

为了检测保存液pH值和Ca2+浓度对古尸骨组织脱钙的影响,本实验于2002年检测了古尸保存液的pH值和微量元素含量,然后分两步调整了马王堆古尸保存液的pH值和Ca2+浓度,并分别于2004年、2006年进行了相同检测。结果发现适当上调保存液的pH值和Ca2+浓度能明显延缓古尸保存液中Ca2+浓度的增加:而保持适当的pH值、适当降低Ca2+浓度明显加速了古尸保存液中Ca2+浓度的增加。这些表明保存液pH值和Ca2+浓度的适当提高有利于防止古尸骨组织的脱钙。

改良快速骨组织脱钙法在骨肿瘤临床病理诊断中的价值

目的:本文主要探究改良快速骨组织脱钙法应用在骨肿瘤临床病理诊断中所取得的效果,对改良快速骨组织脱钙法应用在临床中的价值展开相应的分析。方法:本次选取2017年1月-2019年1月于我院进行收治的骨肿瘤患者80份骨组织标本纳入研究之内,按照不同的病理诊断方式进行分组,第一组改良快速骨组织脱钙法进行标本处理,第二组为传统脱钙法进行标本处理,对两组切片状况展开分析。结果:第一组骨组织切片十分完整,且厚薄比较均匀,厚度为3-4um,,形态、结构比较清晰,免疫组化染色比较均匀,切片染色不容易脱落,细胞核染色边界分明、染色清晰。第二组细胞核着色不佳,显微镜之下才可观察到组织结构完整、清晰,骨基质平整性差,出现广泛卷曲和折叠,骨细胞明显受损,核皱缩,胞浆界限模糊,染色对比度差,第一组在本次研究之中病理切片质量明显优于第二组,组间结果对比存有明显差异(P<0.05)。第一组在本次研究之中病理切片处理时间明显短于第二组,组间结果对比存有明显差异(P<0.05)。结论:骨肿瘤患者标本处理应用改良快速骨组织脱钙法,可有效的缩短了标本的处理时间,保障切片质量的提升,值得推广。

改良快速骨组织脱钙法在骨肿瘤临床病理诊断中的价值

目的:探讨改良快速骨组织脱钙法在骨肿瘤临床病理诊断中的价值.方法:选取本院于2017年4月-2018年4月收治的36例骨肿瘤患者,收集其骨组织标本,依据随机数字表法分为2组,每组18份,观察组采用改良AF硝酸脱钙液脱钙进行处理,对照组采用传统脱钙方法进行处理,比较2组切片情况.结果:观察组病理切片质量相比对照组,明显好于后者,而在处理时间方面,观察组明显短于对照组(P<0.05).观察组骨髓活检组织切片比较完整,且薄厚均匀,有着较为清晰的形态与结构,以及均匀的免疫组化染色.结论:在针对骨肿瘤开展病理诊断时,采用经过改良的快速骨组织脱钙法,除了可以提高切片质量外,还能较大程度缩短脱钙处理的具体时间,因而有着较好的综合利用价值.

一种对基于甲基丙烯酸甲酯(MMA)包埋的非脱钙组织切片进行免疫组化染色的方法

本文旨在探讨对于甲基丙烯酸甲酯树脂包埋的未脱钙组织切片进行免疫组化染色的可行性。方法 在本实验中,传统的环氧树脂包埋剂被替换为甲基丙烯酸树脂包埋剂。在切片制备完成并进行正式染色前,对切片进行脱钙处理以增加碱性染料的着色。采用血管平滑肌标志物α-SMA为目的蛋白。抗体孵育过程中,多种封闭剂被采用以降低背景着色——非特异性蛋白采用血清白蛋白封闭;内源性生物素采用未标记链霉素封闭;内源性碱性磷酸酯酶采用左旋咪唑封闭。Fast-red TR显色剂的采用使得阳性区与较暗的背景能够更好的区分。最后采用甲基绿染料对细胞核进行复染。结果 在聚甲基丙烯酸甲酯包埋的骨组织切片中,α-SMA成功标记了血管的形态。结论 本实验提供的方法使树脂包埋的未脱钙组织切片能够成功地进行免疫组化染色,使得对于这类样本进行蛋白表达的检测成为可能。

四种脱钙液对骨组织HE和免疫组化染色的影响

骨是由黏多糖和蛋白纤维构成的有机质及沉积于其中的无机盐组成，无机盐主要是羟基磷灰石结晶，其中大部分为磷酸钙和碳酸钙；由于骨的特殊构成，使骨组织质地较硬，较难制成切片影响诊断工作，因此制片过程中必须对其脱钙。

改良混合脱钙液在骨髓活检组织中的应用

目的探讨改良混合脱钙液在临床骨髓组织活检中的应用。方法选取临床骨髓穿刺活检病例188例,分别采用改良混合脱钙液(改良混合脱钙液组,146例)与传统硝酸类脱钙液(硝酸类脱钙液组,42例)在常温下进行脱钙处理,比较两组脱钙的时间、制成切片的质量、HE染色效果及免疫组化表型表达情况。结果改良混合脱钙液的脱钙时间短于硝酸类脱钙液,改良混合脱钙液的切片质量良好为97.9%(143/146),HE染色效果良好为98.6%(144/146);硝酸类脱钙液切片质量良好为61.9%(26/42),HE染色效果良好为54.8%(23/42)。改良混合脱钙液组标本免疫组化表达效果优于硝酸类脱钙液组。结论改良混合脱钙液效果良好、脱钙时间短、染色效果佳、组织抗原不丢失、实用性强,能很好地满足临床骨髓组织活检的脱钙需要。

改良快速骨组织脱钙法在骨肿瘤病理诊断中的应用

目的研究改良快速骨组织脱钙法应用于骨肿瘤临床病理诊断的价值。方法 40例骨肿瘤患者的骨组织标本随机分为A组和B组,各20份。A组应用改良AF硝酸脱钙液脱钙处理,B组应用传统脱钙方法处理,对比两组的切片情况。结果 A组的病理切片质量明显优于B组,处理时间较B组显著缩短(P<0.05);A组骨髓活检组织切片的厚薄均匀完整、结构与形态清晰、免疫组化染色均匀。结论在骨肿瘤的病理诊断中应用改良快速骨组织脱钙法能够缩短脱钙处理时间,提高切片质量,具有重要应用价值。

抗原修复脱钙组织石蜡切片抗原性后免疫组织化学染色效果的比较

目的 探讨抗原修复方法对脱钙组织石蜡切片抗原性的恢复作用。方法 将“低温微波-硝酸快速脱钙方法”处理的骨及其软组织分为5组:Ⅰ对照组、Ⅱ盐酸组、Ⅲ胰蛋白酶组、Ⅳ微波-枸橼酸组和V微波-Triton X-100组。应用LSAB技术检测ANP,5-HT,S-100,NF,GFAP等7种抗体在Ⅰ～V组的表达,图像分析各组阳性细胞的平均光密度值(OD)。结果进行统计学处理。结果 Ⅱ一Ⅴ的OD值(分别为.097±0.35、1.03±0.38、1.96±0.49和1.89±0.43)明显高于Ⅰ组(0.26±0.34),Ⅳ、Ⅴ组明显高于Ⅱ、Ⅲ组,有非常显著差异P<0.01;Ⅱ与Ⅲ、Ⅳ与Ⅴ组间无显著差异P>0.05。结论 微波缓冲液和表面活性剂恢复脱钙组织石蜡切片抗原明显好于胰蛋白酶和盐酸,能显著提高免疫组化染色的敏感性。

石蜡包埋脱钙骨组织中结核杆菌DNA不同提取方法比较

目的探讨石蜡包埋的10%硝酸脱钙骨组织中简易有效的结核杆菌DNA提取方法并进行验证。方法以20例石蜡包埋、10%硝酸脱钙的坏死性肉芽肿炎疑为骨结核的组织标本为研究对象,常规法直接采用德国QIAGEN公司的QIAampDNA FFPE Tissue Kit方法提取DNA,而改良法中加入QIAampDNA Micro Kit试剂盒中的carrier RNA,以两种方法分别提取20例标本中结核杆菌DNA,通过荧光定量PCR,比较常规试剂盒提取法和改良提取法对结核杆菌检测结果的影响。结果改良法提取的DNA[(35.32±3.48)ng/μl]比常规法[(6.68±3.72)ng/μl]提取的DNA显著增多(P<0.05),改良法提取的DNA经荧光定量PCR检测结核杆菌的阳性率(55%)明显高于常规法(15%,P<0.01)。结论改良法提取石蜡包埋脱钙骨组织中结核杆菌DNA具有高效简便的特点,是较为理想的方法,值得在puncture和极微小石蜡样本中推广。

抗原修复技术在脱钙组织冰冻切片免疫组化染色中的应用

目的 探讨抗原修复技术在脱钙组织冰冻切片免疫组织化学染色中的作用 ,并寻找最佳的抗原修复方法。方法 将“低温微波 硝酸快速脱钙方法”处理的骨及其软组织冰冻切片分为 4组 :Ⅰ对照组 (不处理 )、Ⅱ组(胰蛋白酶 )、Ⅲ组 (微波 枸椽酸 )、Ⅳ组 (微波 TritonX 1 0 0 )。应用LSAB技术检测ANP、5 HT、S 1 0 0、NF、GFAP、Vimen tin、CD31、CD34、FⅧ和VEGF和 1 0种抗体在I～Ⅳ组中的表达 ,图像分析各组阳性细胞的平均吸光度 (A)值 ,结果进行统计处理。结果 Ⅱ～Ⅳ组的吸光度值 (分别为 0 87± 0 4 1、2 .4 3± 0 35、和 2 .4 9± 0 4 3)明显高于I组 (0 4 1±0 37) ;Ⅲ～Ⅳ组明显高于Ⅱ组 ,差异有非常显著性 (P <0 0 1 ) ;Ⅲ、Ⅳ组间差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 用微波 TritonX 1 0 0或微波 枸椽酸缓冲液对脱钙组织冰冻切片进行微波抗原修复是必要的 ,能明显提高免疫组化染色的敏感性。

改良的硝酸脱钙液HE制片方法探讨

脱钙是制作骨组织切片的重要环节,脱钙液的选择与脱钙速度和骨组织切片染色质量密切相关.脱钙时酸性脱钙液时间长,对骨组织形态结构侵蚀较大,即使脱透,制片模糊,但脱钙时间短,组织脱钙不彻底,组织坚硬,难以制片,常常延误诊断.我院采用改良的硝酸脱钙液用于骨组织脱钙,该液既不损害骨组织结构,也不影响染色效果,简化步骤,缩短时间.

即时脱钙液在切片中的应用

在日常病理制片过程中。我们常遇到一些需要即时处理的蜡块，比如骨组织脱钙不全，含少量骨组织没做脱钙处理的，病变软组织中带点状或小灶或灶状钙化组织，或在组织中间杂砂粒样组织等等,

槲皮素对生长期小鼠峰值骨量和脏器病理学的影响

目的探究槲皮素对生长期小鼠峰值骨量和脏器病理学的影响。方法将40只SPF级C57雌性小鼠随机分为对照组(Control)、槲皮素低剂量组(Q-20)、槲皮素中剂量组(Q-40)和槲皮素高剂量组(Q-80)4组,每组各4只。Q-20组、Q-40组和Q-80组分别每天灌胃20、40和80 mg/kg槲皮素,Control组给予等体积蒸馏水。给药6周后取材,分别观察脏器系数、主要脏器病理学切片、骨组织病理学切片、分析Micro CT和蛋白质免疫印迹实验。结果槲皮素组主要的脏器系数与Control组相比,差异均无统计学意义(P>0.05);脏器病理学切片未发现明显的病变和毒副作用;骨组织脱钙切片Q-20组与Control组相比,脂肪细胞较少,骨小梁比较连贯和整齐;Q-20组、Q-40组和Q-80组的小鼠与Control组小鼠比较,数值在Tb.BMD、Tb.N、Tb.Th、Ct.BMD和Tb.BV/TV均有增加,但是Tb.Sp数值均有减少,差异均有统计学意义(P<0.05);Q-20组的OSX、COL-1、Runx-2与BMP-2的表达最为明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论槲皮素可能是通过增加骨密度、改善骨微结构、促进骨形成、从而提高峰值骨量,并且对脏器没有明显的副作用。

炔雌醇对绝经后骨质疏松症模型小鼠骨质量的影响

目的探究炔雌醇对绝经后骨质疏松症模型小鼠骨质量的影响。方法将30只SPF级C57雌性小鼠随机分为3组,每组10只,分别为假手术组、模型组和炔雌醇组,炔雌醇组每天ig炔雌醇100μg/kg,假手术组和模型组均ig给予等体积蒸馏水,给药12周后取材,分别观察脏器系数、主要脏器和骨组织病理学切片,分析Micro CT、生物力学和血清生化指标。结果与模型组相比,炔雌醇组小鼠体质量显著下降(P<0.05、0.01)。炔雌醇组的脏器系数除了子宫与模型组和假手术组有显著性差异,其余均没有显著性差异,主要脏器未发现明显的病变。骨组织脱钙切片显示,与模型组相比,炔雌醇组骨小梁结构致密,脂肪细胞较少。与模型组相比,炔雌醇组生物力学的最大载荷和弹性模量得到了明显的提高(P<0.05、0.01)。与模型组比较,炔雌醇组小鼠的骨小梁骨密度(Tb.BMD)、骨小梁数(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)和骨体积分数(Tb.BV/TV)水平均显著增加,骨小梁分离度(Tb.Sp)数值显著减少(P<0.01)。与模型组比较,炔雌醇组血清骨钙素(OCN)和I型前胶原N端前肽(PINP)的平均水平显著升高;抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)和I型胶原交联C端肽(CTXI)水平显著降低(P<0.01)。结论炔雌醇能提高绝经后骨质疏松症模型小鼠骨质量同时对小鼠主要脏器没有损害。