组织蛋白酶D生物合成及其功能的研究进展

蛋白酶D是溶酶体的重要组成部分,与癌细胞的生长和转移密切相关。本篇综述了蛋白酶D在细胞中的生物合成路线及其在细胞内的生物功能。旨在探讨组织蛋白酶与癌细胞的关系,为临床治疗癌症提供依据。

胃癌组织中c-erb B-2和组织蛋白酶D的表达及其与胃癌生物学行为间的关系

目的 观察癌基因c erbB 2及组织蛋白酶D(Cath D)在胃癌中的表达 ,探讨二者的关系及其与胃癌生物学行为之间的关系。方法 采用免疫组化S P法检测了 10 2例胃癌手术切除标本的c erbB 2及Cath D的表达 ,同时观察了网状纤维分布与c erbB 2和Cath D之间的关系 ,并将检测结果与跟踪随访资料进行了综合分析。结果 10 2例胃癌组织中c erbB 2表达阳性率为 3 8.2 4% (3 9/ 10 2 ) ,与胃癌浸润深度 (P<0 .0 5 )及淋巴结转移 (P<0 .0 5 )密切相关 ;Cath D表达阳性率为 81.3 7% (83 / 10 2 ) ,与胃癌浸润深度 (P<0 .0 5 )、生长方式 (P<0 .0 5 )、淋巴结转移 (P<0 .0 5 )及脉管内有无癌栓 (P<0 .0 5 )有关。生存期分析显示 :Cath D和c erbB 2表达阳性患者预后差 ,5年生存率低于表达阴性患者。结论 c erbB 2及Cath D与胃癌的生长、浸润、转移及预后有密切关系 ,可作为判断胃癌生物学行为和预后的重要指标 ,为临床诊断。

基质金属蛋白酶-2和组织蛋白酶D与胃癌生物学行为及腹膜转移的关系

目的:探讨基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)和组织蛋白酶D(cathepsinD,CD)在胃癌组织中的表达与胃癌生物学行为、腹膜转移的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测55例胃癌MMP-2和CD表达情况。其中45例行腹腔脱落细胞学检查。结果:MMP-2和CD与浸润深度、胃浆膜分型、腹腔脱落癌细胞和临床分期密切相关(P<0.01);CD与淋巴结转移显著相关(P<0.01),MMP-2与淋巴结转移无明显关系,但淋巴结转移阳性者MMP-2表达率高于淋巴结转移阴性者。结论:MMP-2和CD高表达胃癌具有更强的侵袭、淋巴结转移能力及腹膜转移倾向。MMP-2和CD能较好的反映胃癌的恶性生物学行为,有助于判断预后。结转移显著相关(P<0.01),MMP-2与淋巴结转移无明显关系,但淋巴结转移阳性者MMP-2表达率高于淋巴结转移阴性者。结论:MMP-2和CD高表达胃癌具有更强的侵袭、淋巴结转移能力及腹膜转移倾向。MMP-2和CD能较好的反映胃癌的恶性生物学行为,有助于判断预后。

华支睾吸虫组织蛋白酶D样天冬氨酸蛋白酶全长基因的生物信息学分析

目的从华支睾吸虫成虫全长cDNA质粒文库中识别组织蛋白酶D样天冬氨酸蛋白酶基因,利用生物信息学方法预测其结构和功能特征,为进一步的实验研究提供理论指导。方法利用生物信息学网站的在线分析工具和Vector NTI suite软件包,识别华支睾吸虫组织蛋白酶D样天冬氨酸蛋白酶基因,并预测其编码蛋白质的各种结构特征与功能特征,并根据该基因构建种系分子进化树。结果BLASTx分析该基因为全长基因,该基因全长1 459 bp,编码425个氨基酸,具有两个天冬氨酸蛋白酶的催化位点。SignalP分析该基因编码的蛋白质含有信号肽序列,切割位点在第17和第18个氨基酸之间,分子进化树提示其与日本血吸虫组织蛋白酶D样天冬氨酸蛋白酶亲缘关系最近。结论组织蛋白酶D属于天冬氨酸蛋白酶家族,为分泌性蛋白,与日本血吸虫同源基因一致性最高,为后续实验筛选华支睾吸虫病的诊断抗原及药物靶标提供了必要的理论依据。

组织蛋白酶D在乳腺癌浸润转移中作用的研究

目的 通过研究组织蛋白酶D与乳腺癌传统临床指标及部分生物学因子的关系 ,探讨组织蛋白酶D在乳腺癌浸润转移过程中的作用。方法 采用免疫组化SP法对组织切片进行染色处理。结果 16 0例乳腺癌组织Cath D的总表达率为 6 8.8% (110 / 16 0 ) ;Cath D表达与临床分期、肿块大小、组织学分级、c erbB 2、VEGF呈正相关 (P <0 .0 5 ) ,与ER、PR表达呈负相关 (均P <0 .0 2 5 ) ;与淋巴结转移、月经状况、年龄无相关性 (均P >0 .0 5 )。结论 Cath D过度表达与乳腺癌的浸润及转移有密切关系 ;Cath D促进肿瘤细胞转移的主要途径是血行播散而非淋巴道 ;ER、PR阴性患者中Cath D的高表达 ,提示应加强这部分病人的化疗及综合治疗。

组织蛋白酶D及碱性成纤维细胞生长因子在33例膀胱移行细胞癌中的表达及相关性研究

目的 研究组织蛋白酶 D(CD)的表达与膀胱移行细胞癌 (BTCC)生物学行为间的关系 ,并探讨 BTCC发生浸润转移的机制。方法 应用免疫组化 ABC法检测 33例 BTCC及 12例正常膀胱组织中 CD与碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)的表达。结果 CD在正常膀胱移行细胞均呈弱阳性表达 ,BTCC组肿瘤细胞的过表达率显著高于正常对照组 (P<0 .0 5 ) ,且在不同病理分级、临床分期、单发与多发、初发与复发组间均有显著性差异 (P<0 .0 5 )。 BTCC组 CD过表达与 b FGF阳性表达间有显著相关性 (P<0 .0 5 )。结论 CD与 BTCC生物学特性密切相关 ,与 b

胃癌组织蛋白酶D表达的免疫组织化学研究

目的 研究胃癌组织中组织蛋白酶D(CD)的表达并探讨CD与胃癌生物学行为的相关性。方法 运用S -P免疫组化方法检测 5 0例胃癌组织CD的表达 ,并分析与胃癌临床因素、临床病理分期间的关系。结果 CD阳性表达率 72 % (36 / 5 0 ) ,CD阳性表达率在低分化组 (2 3/ 2 6 )明显高于分化组 (13/ 2 4) ;浆膜侵犯组 (2 0 / 2 2 )明显高于未侵犯组 (16 / 2 8) ;淋巴结转移阳性组 (2 1/ 2 4)明显高于淋巴结转移阴性组 (15 / 2 6 ) ,且随着病理分期的提高 ,CD阳性率有逐渐升高趋势。结论 CD的表达与胃癌的分化程度、浆膜侵犯、淋巴结转移相关 。

组织蛋白酶D在乳腺导管内癌及伴早期浸润中的表达及其与复发转移的关系

背景与目的:组织蛋白酶D(Cath-D)具有促进浸润性乳腺癌增殖转移的作用,但其表达对导管原位癌肿瘤生物学的影响尚不清楚。本研究旨在明确Cath-D在乳腺导管内癌及伴早期浸润中的表达及其与传统临床病理指标的关系,并探讨Cath-D在乳腺导管内癌及乳腺导管内癌伴早期浸润中的表达与复发转移的关系。方法:回顾性分析了复旦大学附属肿瘤医院乳腺医疗中心乳腺癌数据库中的1995年1月—2006年12月期间由该院乳腺外科手术且经病理确诊、资料完整的336例乳腺导管内癌及乳腺导管内癌伴早期浸润的病例。结果:在全部336例患者中Cath-D的表达阳性者241例(71.70%),阴性者95例(28.3%),其中导管内癌143例,Cath-D表达阳性者99例(69.2%),阴性者44例(30.8%),导管内癌伴早期浸润193例,Cath-D阳性表达者142例(73.6%),阴性者51例(26.4%)。Cath-D阳性的患者中有淋巴结转移的有10例(4.15%),Cath-D阴性的患者中有淋巴结转移的有4例(1.66%)。Cath-D的表达与PR、Her-2的表达没有相关性,与ER存在一定相关性(P=0.075),且与突变型p53显著相关(P=0.001)。未复发转移的患者Cath-D阳性表达率约71.5%,而复发转移的病例中阳性率高达80%。结论:Cath-D的阳性表达虽然与浸润性乳腺癌的浸润及转移有关,但其在乳腺导管内癌及乳腺导管内癌伴浸润中的阳性表达与传统临床病理指标的关系无统计学意义。Cath-D的表达在一定程度上能反映乳腺导管内癌及乳腺导管内癌伴早期浸润的预后情况,但其价值似乎并不大。

血清组织蛋白酶D检测在非酒精性脂肪性肝病中的临床意义

目的探讨血清组织蛋白酶D(CTSD)在非酒精性脂肪肝性病(NAFLD)中的临床意义。方法选取NAFLD患者356例,按疾病严重程度将NAFLD患者分为轻度组(146例)、中度组(113例)和重度组(97例),另选取体检健康者300名作为正常对照组。检测所有对象的血清CTSD、丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。采用Pearson相关分析和Spearman等级相关分析评估各项目之间及其与NAFLD严重程度的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各项指标诊断NAFLD的价值。结果NAFLD组血清ALT、TC、TG、LDL-C、CTSD水平高于正常对照组(P<0.01),且NAFLD各组之间差异亦有统计学意义(P<0.01)。NAFLD组血清AST、GGT水平高于正常对照组(P<0.01),且NAFLD重度组高于中度组(P<0.01),NAFLD轻度组与正常对照组之间血清AST、GGT水平差异无统计学意义(P>0.05)。血清CTSD与NAFLD的严重程度呈正相关(rs=0.8005,P<0.0001),与ALT、TC、LDL-C亦呈正相关(r值分别为0.541、0.662、0.571,P<0.01)。ROC曲线分析显示,CTSD、ALT、GGT诊断NAFLD的曲线下面积(AUC)分别为0.940、0.822、0.627,最佳临界值分别为12.67 pg/mL、38.00 U/L、53.00 U/L,敏感性分别为76.97%、51.69%、34.55%、特异性分别为91.33%、93.00%、92.33%。CTSD与ALT联合检测诊断NAFLD的AUC为0.960,敏感性和特异性分别为88.48%和90.00%。结论CTSD与NAFLD的进展密切相关,或可作为NAFLD早期诊断及分级的标志物。

cathpsin D在多囊卵巢综合征卵巢组织中的表达

目的:检测cathepsin D蛋白在多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)患者卵巢组织中的表达。方法:采用Western blot免疫印迹法检测卵巢组织中cathepsin D蛋白的表达,并进行半定量分析;免疫组织化学法观察cathepsin D蛋白的分布定位。结果:PCOS组患者卵巢中cathepsin D蛋白表达显著低于对照组(2.06±0.39 vs 4.76±1.43,P<0.05);cathepsin D在卵泡和卵巢间质细胞上均有表达,其中在卵泡颗粒细胞上染色最深,主要定位在胞浆和胞膜。结论:cathepsin D蛋白在PCOS患者卵巢组织中表达水平显著下调,这可能是PCOS卵泡发育异常的机制之一。

构建骨组织工程支架中应用的3D打印技术

背景:3D打印技术自20世纪末出现以来逐渐应用在医学领域已成为一种趋势。近年来3D打印技术被广泛用于骨组织工程支架材料的成型,并取得了一些令人惊喜的成果。目的:文章从骨组织工程支架基本概念、3D打印的基本原理和流程、3D打印应用于构造支架的要求以及不同的粉末材料等方面进行阐述,分析其优势与目前存在的局限性,并对未来3D打印在骨组织工程支架中的应用进行展望。方法:第一作者应用计算机检索1990年1月至2015年2月MEDLINE数据库、Science Direct全文数据库、中国期刊全文数据库、维普中文期刊网等有关3D打印技术在构建骨组织工程支架中应用的文章,检索词"3D打印,组织工程学,快速成型技术,支架,材料",排除重复性研究。文章共检索到52篇相关文献,其中33篇文献符合纳入标准。结果与结论:3D打印技术具有高精度、构建速度快、可按需制造实现个性化定制等优势。3D打印应用于骨组织工程支架构建时,所用的粉末或黏合剂需具备一定的条件,如流动性、稳定性与可湿性等。用于打印的粉末材料可分为人工合成多聚体、天然高分子聚合物、生物陶瓷及它们的混合物。不同粉末材料的粉末各自优缺点不同,且最终成型效果也不尽相同。3D打印技术也存在一些包括费用昂贵、不易大规模生产等方面的局限性。但尽管如此,3D打印的临床应用前景一片光明。

检测基质金属蛋白酶及其抑制物对判断膀胱癌侵袭和转移的意义

目的 :研究基质金属蛋白酶 (MMPs)中MMP 2、MMP 9及MMP 9抑制物TIMP 1在膀胱移行细胞癌中的表达情况及其在判断膀胱癌侵袭转移中的作用。方法 :应用免疫组化LSAB法检测 90例膀胱移行细胞癌 (transitionalcellcarcinomaofbladder,TCCB)组织中MMP 2、MMP 9和TIMP 1蛋白表达水平。结果 :膀胱癌组织中MMP 2、MMP 9和TIMP 1蛋白表达显著高于正常膀胱黏膜。浸润性膀胱癌组织中阳性表达显著高于表浅性膀胱癌组织。阳性表达细胞在肿瘤 -间质界面较多。与病理组织学分级、分期均呈正相关 ;与肿瘤的复发和转移呈正相关。结论 :MMP 2、MMP 9和TIMP 1参与膀胱癌侵袭转移 ,在膀胱移行细胞癌中的表达具有预后价值。

人类肝癌发生过程中cyclinD1和CDK4及p16蛋白的表达

目的研究肝细胞癌(HCC)发生过程中细胞周期调控因子cyclinD1、CDK4和p16蛋白表达及其意义。方法应用免疫组织化学SP染色法检测正常肝组织、慢性肝炎、肝硬化、癌周肝硬化和肝癌组织中cyclinD1、CDK4和p16蛋白表达。对免疫组化结果进行计算机图象定量分析。结果cyclinD1、CDK4和p16蛋白的阳性单位(positive unit,PU)和面数密度(area number density,NA)从慢性肝炎(PU分别为39.4、41.0和33.3;NA分别为236.7、272.7和237.4)、肝硬化(PU分别为40.8、45.2和43.6;NA分别为313.8、354.6和322.9)、癌周肝硬化(PU分别为55.5、59.4和54.4;NA分别为481.9、488.9和432.6)到肝癌(PU分别为59.6、63.7和58.1;NA分别为549.2、587.7和451.3)表达逐渐增强。癌周肝硬化和肝癌组织中cyclinD1、CDK4、p16的表达明显高于慢性肝炎和肝硬化(P值分别为0.034、0.020、0.030、0.007、0.003和0.005),但癌周肝硬化和肝癌组织之间差异无统计学意义,P值分别为0.433、0.535和0.447。慢性肝炎和肝硬化中cy-clinD1、CDK4、p16阳性信号主要定位于胞核,而癌周肝硬化和HCC中主要定位于胞质。p16与HCC的分化程度有关,但未发现cyclinD1、CDK4与肿瘤分化程度之间有相关性。结论cyclin-细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)-细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(CKIs)调控网络中,相关调控因子的异常可能参与了HCC的发生、发展。cyclinD1、CDK4的过度表达可能是肝癌发生过程中的早期事件。在HCC的发生过程中p16高表达可能是细胞周期正反馈调控的结果,在HCC的发生中可能属于早期事件,而p16表达下降或缺失可能是肝癌发生过程中的晚期事件。

结直肠癌中cyclin D1和CD_(44)V_6及E-cadherin蛋白的表达及其意义

目的 :探讨结直肠癌中cyclinD1、CD44V6、E cadherin(E cad)蛋白的表达。方法 :采用免疫组化SP法测定 48例结直肠癌中cyclinD1、CD44V6、E cad蛋白的表达。结果 :48例结直肠癌中cyclinD1、CD44V6、E cad表达的阳性率分别为5 8 3 % ( 2 8/4 8)、75 0 % ( 3 6/4 8)和 45 8%( 2 2 /4 8)。cyclinD1蛋白表达的阳性率 60岁以上年龄组高于 60岁以下年龄组 ,P<0 0 5 ,cyclinD1蛋白的表达与肿瘤组织分化程度呈负相关 ,P <0 0 1。CD44V6高表达及E cad低表达与结直肠癌Duke’s分期、浆膜浸润、淋巴结转移呈正相关 ,P<0 0 5。结论 :cyclinD1蛋白的表达与分化程度相关 ;CD44V6、E Cad蛋白的表达与结直肠癌浸润转移密切相关 ,检测cyclinD1、CD44V6、E cad蛋白是判断结直肠癌预后的客观指标。

胃癌组织中HSP70与Cyclin D1的表达及意义

目的:探讨热休克蛋白70 (heatshock protein 70,HSP70)与细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在胃癌组织中的表达。方法:应用免疫组化SABC 与SP 法检测胃癌、不典型增生、萎缩性胃炎及浅表性胃炎组织中HSP70 与Cyclin D1 的表达。结果:HSP70与Cyclin D1 在浅表性胃炎、萎缩性胃炎、不典型增生和胃癌中的表达阳性率,随病变的进展而升高。HSP70 的表达阳性率分别为42. 9% (12/28)、57. 1%(24/42)、64. 3%(9/19)和77 .1%(37/48),其中萎缩性胃炎、不典型增生及胃癌与浅表性胃炎相比,差异有统计学意义,P<0 .05。Cyclin D1 的表达阳性率分别为7 .1% ( 2/28 )、19 .0% ( 8/48 )、35 .7%(5/14)和52. 1% (25/48),其中不典型增生、胃癌与萎缩性胃炎相比,差异有统计学意义,P<0. 05。大多数受检胃癌组织中,HSP70与Cyclin D1的表达有相关性。结论:HSP70与Cyclin D1 过度表达,在胃癌的产生过程中可能起重要作用。

MMP-9与NF-кB p65在乳腺癌组织中表达的相关性及临床意义

目的探讨乳腺癌基质金属蛋白酶-9(MM P-9)与NF-κB p65在乳腺癌组织中表达的相关性及临床病理意义。方法用实时荧光定量PCR方法检测了46例乳腺癌及其癌旁组织中的MM P-9 mRNA(单位:2-ΔΔC t)的表达,用免疫组化法检测NF-κB p65的表达状态。结果以2-ΔΔC t≥2为阳性标准,78.3%(36/46)的乳腺癌组织中MM P-9基因表达阳性;T/A 2-ΔΔC t值在不同NF-κB表达组,差异有显著性(P<0.05)。经相关分析显示,r=0.46,P值<0.01。其表达与ER状态、肿瘤最大径相关(r=-0.298,0.369,P<0.05),但与患者年龄、肿瘤的组织学类型、淋巴结阳性数及有无远处转移无关。结论乳腺癌组织中NF-κB受到激活,MM P-9 mRNA含量明显增高,提示MM P-9表达可能受NF-κB调控;MM P-9表达增高与ER状态及肿瘤大小相关。

大肠癌组织中MMP-3的表达及其临床意义

目的:探讨基质金属蛋白酶3(matrixmetalloproteinases3,MMP3)在大肠腺瘤及大肠癌组织中的表达及其与临床各病理参数之间的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测MMP3在20例大肠腺瘤和60例大肠癌组织中的表达。结果:MMP3在20例大肠腺瘤及60例大肠癌组织中,阳性表达率分别为10.0%(2/20)和41.7%(25/60),组间差异有统计学意义,P=0.031;在大肠腺癌组织中,MMP3的阳性表达与淋巴结转移呈正相关,P=0.008,与患者5年生存率呈负相关,P=0.003。结论:MMP3的上调表达可能参与了大肠癌的发生与发展,对临床上判断预后具有较大的意义。

Cyclin D_1和p16在青年妇女早期子宫颈鳞癌诊断中的表达及意义

目的探讨Cyclin D1、p16在青年妇女子宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia CIN）及子宫颈早期鳞状上皮癌中的表达意义。方法观察Cyclin D1、p16在CINⅠ级40例、CINⅡ及CINⅢ级各20例、早期浸润癌30例的免疫组织化学表达,设立30例正常子宫颈及慢性炎性反应子宫颈上皮作对照组。结果Cyclin D1、p16在正常子宫颈组织中低表达,在CINⅡ~Ⅲ级组和早期浸润癌组中表达升高,且有递增的趋势（P〈0.01）。Cyclin D1在正常子宫颈组与CINⅠ组,CINⅡ组与子宫颈癌组之间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。p16在正常子宫颈组和CINⅡ组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。CINⅠ级组中p16表达亦较低,与子宫颈癌组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。在早期浸润癌中Cyclin D1与p16的表达无明显相关性（P〉0.05）。结论Cyclin D1和p16与CIN及癌变有密切关系,可作为恶性转化的指标之一。

细胞周期素D1和p27^(kip1)在肾癌中的表达及其意义

目的:探讨cyclin D1、p27kip1在普通型肾细胞癌(conventional renal cell carcinoma,CRCC)发生、发展中的作用。方法:用定量RT-PCR和Western-blot方法检测25例CRCC组织和10例肿瘤远端的正常肾皮质中cyclin D1和p27kip1的mRNA和蛋白的含量;用免疫组化方法检测76例CRCC中cyclin D1、p27kip1的表达;分析cyclin D1、p27kip1的表达与肿瘤分期、分级及术后生存率的相关性。结果:CRCC中cyclin D1的mRNA和蛋白含量分别为0.488±0.399和1.069±0.371,高于正常对照组0.089±0.066和0.281±0.253(P均<0.01);cyclin D1的表达与肿瘤体积大小有关,体积大者cyclin D1高表达(P<0.05);CRCC中p27kip1mRNA和蛋白含量分别为0.191±0.111和0.146±0.051,低于正常对照组0.374±0.216和1.004±0.318(P均<0.01),随着p27kip1表达的降低,肿瘤的细胞核Fuhrman分级、TNM分期增高;p27kip1阳性组患者的5年生存率为84.26%,高于p27kip1阴性组25.25%(P<0.01)。结论:cyclin D1高表达和p27kip1的低表达与CRCC的发生有关;p27kip1的低表达可能促进肿瘤的演进,检测p27kip1可作为评价CRCC预后的参考指标。