组蛋白乙酰化修饰调控RAR-β2表达与宫颈病变的相关性

目的：探讨组蛋白乙酰化修饰与RAR-β2表达及宫颈病变发生发展的关系。方法：收集正常宫颈、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）Ⅱ-Ⅲ和宫颈鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）组织，分别采用免疫组织化学和WesternBlot方法检测AcH3、RAR—B：和Involucrin的表达；分析组蛋白乙酰化水平与RAR-β2表达及宫颈病变程度的关系。结果：随着宫颈病变的进展，AcH3、RAR-β2和Involucrin的表达逐渐降低，甚至缺失，组间差异有统计学意义（P〈0．05）；组蛋白乙酰化水平与RAR-β2表达呈正相关（r=0．797，P〈0．05），AcH3和RAR-β2的表达均与宫颈病变程度呈负相关[r=-0．5479（Ach3）,r=-0．585（RAR-β2），P〈0．05]。结论：组蛋白乙酰化修饰与RAR-β2表达调控有关，并可能参与宫颈癌的发生。

组蛋白乙酰化修饰在哮喘小鼠气道内黏蛋白5AC表达中的作用研究

目的探讨哮喘小鼠体内组蛋白乙酰基转移酶(HAT)活性对气道内黏蛋白5AC(MUC5AC)表达的重要性。方法复制哮喘小鼠模型,行外周血常规分析,肺泡灌洗液常规瑞氏染色并计数,肺组织HE染色,免疫组织化学法检测肺组织内MUC5AC蛋白表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定HAT、组蛋白去乙酰基酶(HDAC)活性、MUC5AC水平,进行统计学分析。结果哮喘组小鼠外周血嗜酸性粒细胞计数(EOS)较曲古抑菌素A(TSA)治疗组、对照组均升高(P<0.05);哮喘组肺泡灌洗液总细胞计数及EOS均较TSA治疗组、对照组升高(P<0.05);TSA治疗组与哮喘组比较,可同时降低小鼠体内HAT、HDAC活性,差异有统计学意义(P<0.05),但以HAT为主;TSA治疗组MUC5AC水平较哮喘组降低(P<0.05);肺组织HE染色可见哮喘组小鼠气道炎症细胞增多,而TSA治疗后明显改善;免疫组织化学结果示,TSA治疗组较哮喘组能明显减少MUC5AC蛋白含量(P<0.05)。结论组蛋白乙酰化修饰在哮喘小鼠气道黏液分泌中起重要的调控作用。

精神活性物质对组蛋白乙酰化修饰的影响

当前,精神活性物质的滥用和成瘾呈上升趋势,其既是一个严重的社会问题,又是一个非常重要的医学问题。表观遗传学的研究发现,基因表观事件的发生与精神活性物质的滥用和成瘾有着密切的关系,其中组蛋白乙酰化修饰起了关键作用。本文着重阐述了可卡因、苯丙胺、甲基苯丙胺、吗啡和酒精等多种精神活性物质对组蛋白乙酰化的影响。

慢性哮喘小鼠肺组织中组蛋白乙酰化修饰位点H2BK16ac表达增强

目的探讨组蛋白乙酰化修饰位点H2BK16a在慢性哮喘模型小鼠肺组织中的表达变化。方法BALB/C小鼠分为正常组和慢性哮喘组,应用卵蛋白致敏和激发方法构建慢性哮喘模型,HE染色观察气道炎症浸润,AB-PAS染色观察气道杯状细胞增生,Masson染色观察上皮下胶原沉积,免疫组织化学染色观察H2BK16ac在肺组织中的表达分布,Western blot检测肺组织中H2BK16ac水平。结果慢性哮喘小鼠气道血管周围可见大量炎症细胞浸润、气道纤毛柱状上皮细胞中的杯状细胞增生、黏液腺化生、上皮下胶原沉积,表明构建慢性哮喘模型成功。免疫组织化学染色和Western blot检测显示,正常小鼠肺组织中H2BK16ac的表达极少;慢性哮喘小鼠肺组织中H2BK16ac的表达水平显著升高,在气道纤毛柱状上皮细胞、气道血管周围炎症细胞、血管平滑肌细胞、肺泡腔炎症细胞中H2BK16ac均呈明显阳性表达。结论肺组织中乙酰化修饰位点H2BK16ac的高表达可能与慢性哮喘的发生密切相关。

组蛋白乙酰化修饰及其对缺血-再灌注损伤的影响研究进展

缺血-再灌注损伤是常见的一种血管性疾病,可导致远端组织的坏死和器官的梗死等。组蛋白的乙酰化修饰与缺血-再灌注损伤的发生发展密切相关,而组蛋白去乙酰化酶抑制剂可有效减轻缺血-再灌注损伤,是治疗缺血-再灌注损伤的新方法。本文在器官水平上就近年有关组蛋白乙酰化修饰对缺血-再灌注损伤影响的研究进行综述。

结肠癌中相关组蛋白乙酰化修饰位点的机制探讨

目的观察结肠癌细胞株SW480及结肠癌组织中组蛋白乙酰化修饰的相关位点的变化情况。方法实时无标记细胞分析仪(RTCA xCELLigence)动态观察人正常结肠上皮细胞株NCM460及人结肠癌细胞株SW480的增殖情况;Western blot检测正常结肠细胞株及结肠癌细胞株的组蛋白acH3K9、acH3K14、acH3K18、acH3K27修饰的情况及同一肠癌患者手术后切除的肠段肿瘤部位(结肠癌组织)和非肿瘤部位(正常结肠上皮组织)组蛋白acH3K9、acH3K14、acH3K18、acH3K27修饰的情况。结果结肠癌细胞株SW480增殖速度明显大于正常结肠上皮细胞株的增殖;相同培养状态下,在72h后人结肠癌上皮细胞株增殖速度明显大于正常结肠上皮细胞株的增殖;与NCM460相比,SW480细胞组蛋白acH3K9、acH3K14、acH3K18、acH3K27修饰下调(P<0.01)。结论结肠癌的发生过程中,在表观遗传学方面,可能也有一定的关联,而组蛋白乙酰化修饰下调可能是引起结肠癌发生发展机制的又一条通路。

组蛋白乙酰化抑制哮喘易感基因ADRB2的表达

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACi)及组蛋白乙酰化转移酶(histone acetyltransferase,HAT)调控的组蛋白乙酰化修饰对β2肾上腺素受体(β2-drenergic receptor,ADRB2)基因的影响。方法将ADRB2启动子质粒(pADRB2-1918)转染到人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B)细胞后,分别加入丁酸钠(sodium butyrate,SoB)和曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA),将pADRB2-1918质粒和腺病毒E1A相关的300kDa蛋白(p300)质粒共转染到BEAS-2B细胞,使BEAS-2B细胞中组蛋白乙酰化,利用双荧光素酶报告基因检测经SoB、TSA及p300处理后BEAS-2B细胞中ADRB2启动子活性。向BEAS-2B细胞中分别加入SoB和TSA,或向BEAS-2B细胞中转染p300质粒,使BEAS-2B细胞中组蛋白乙酰化,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测BEAS-2B细胞中ADRB2mRNA的相对表达,利用Western blot法检测BEAS-2B细胞中ADRB2蛋白的表达。结果在BEAS-2B细胞中分别加入SoB、TSA和转染p300质粒,参与BEAS-2B细胞中组蛋白乙酰化,发现BEAS-2B细胞中ADRB2启动子活性、mRNA和蛋白的表达均较对照组下降(P<0.05),差异均有统计学意义。结论组蛋白乙酰化可下调哮喘易感基因ADRB2的表达。

辅激活因子及组蛋白协同乙酰化修饰对NF-κB亚基转录调控的影响

核因子κB(NF-κB)信号转导通路在细胞的增殖、分化、凋亡、免疫应答及炎症反应中具有重要的调节作用。炎症调节机制极其复杂,NF-κB在不同的环境下,通过不同的翻译后修饰、协同组蛋白共价修饰以及招募辅激活因子参与调控下游靶基因的表达。辅激活因子具有乙酰基转移酶活性,对转录激活的调控至关重要,而组蛋白的乙酰化修饰一直是表观遗传学研究的热点,其可使NF-κB对靶基因的特异性调控更加精确。两者协同作用在NF-κB亚基转录调控中发挥关键作用。

补肾方药龟鹿二仙胶对ELS大鼠成年后海马组蛋白乙酰化修饰的影响

目的探讨早期负性经历(ELS)对成年后大鼠创伤后应激障碍(PTSD)易感性和海马组蛋白乙酰化修饰的影响以及补肾方药龟鹿二仙胶(GLEXJ)的干预作用。方法以单一延长应激(SPS)作为应激源,建立ELS大鼠模型;采用旷场实验、高架十字迷宫实验、条件性恐惧实验进行行为学检测;采用ELISA法检测海马中的组蛋白乙酰化转移酶(HATs)与组蛋白去乙酰化转移酶(HDACs)的比值;采用Western Blot法检测海马中的组蛋白H3、组蛋白乙酰化H3K9(AC-H3K9)、组蛋白H4、组蛋白乙酰化H4K12(AC-H4K12)的蛋白表达;采用免疫荧光法检测海马中的AC-H3K9和AC-H4K12的阳性细胞数;采用Western Blot法和免疫荧光法检测海马中的组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)的表达。结果行为学结果中,ELS组大鼠总路程明显降低(P<0.05)、开臂的路程百分比和开臂进入次数百分比均明显降低(P<0.05)、场景性条件恐惧记忆测试和线索性条件恐惧记忆测试中僵直行为时间百分比均明显升高(P<0.05);与对照组相比,ELS组大鼠海马HATs/HDACs比值显著升高(P<0.05);Western Blot和免疫荧光结果显示,ELS组大鼠海马H3、H4、AC-H4K12、HDAC2表达无差异(P>0.05),AC-H3K9表达明显上升(P<0.05)。GLEXJ可改善ELS组大鼠行为学异常,下调海马中HATs/HDACs比值以及AC-H3K9蛋白表达(P<0.05)。结论ELS可增加个体成年后罹患PTSD的风险,GLEXJ可通过调节海马HATs和HDACs平衡,降低ELS个体成年后对PTSD的易感性。

糖尿病诱发神经管畸形的组蛋白乙酰化修饰谱

目的探讨母亲DM诱发胎儿神经管畸形(NTDs)的组蛋白乙酰化修饰机制。方法构建高糖处理小鼠神经干细胞(NE-4C)模型、T1DM雌鼠诱发NTDs胎鼠模型及人类母亲高血糖相关NTDs胚胎脑组织,建立葡萄糖浓度5、25 mmol/L的NE-4C细胞模型组;雌鼠分为正常对照(NC)组(n=40)和STZ构建的TIDM组(n=80);人类样本分为对照(Con)组和NTDs组。Western blot联合Orbitrap QE-HF质谱仪定性分析组蛋白乙酰化修饰谱,定量检测组蛋白特定位点乙酰化修饰水平。结果25 mmol/L组相比5 mmol/L组,TIDM组相比NC组,NTDs相比Con组,组蛋白赖氨酸位点整体乙酰化修饰位点均增加,其中组蛋白H4K5/K8/K12/K16ac修饰在体外体内模型均保守性修饰,且25 mmol/L组H4K5/K8/K12/K16ac修饰水平是5 mmol/L组的2.2倍(P<0.01)。结论组蛋白乙酰化修饰异常增加可能参与调控母亲DM诱发NTDs。

组蛋白乙酰化修饰调控腹膜纤维化的研究进展

乙酰化是一种重要的组蛋白翻译后修饰过程。研究证明组蛋白乙酰化可调控脏器的纤维化进程。腹膜纤维化是腹膜透析的常见并发症,目前缺乏有效的防治手段。近年来,关于组蛋白乙酰化调控腹膜纤维化的作用和机制方面,本课题组和其他课题组均发现组蛋白乙酰化修饰可调控TGF⁃β信号通路传导、炎性因子和血管增生等作用,本文将针对组蛋白乙酰化在腹膜纤维化发生与发展中的最新研究进展作一综述。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂在造血干细胞体外扩增中的作用

造血干细胞的自我更新和分化受到高度协调的表观遗传调控,其中组蛋白乙酰化修饰可以激活或沉默基因的转录。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACIs)可以抑制造血干细胞中组蛋白去乙酰化酶的活性,增加组蛋白乙酰化水平。多种HDACIs,如曲古他汀A、丙戊酸钠等,被用于在体外无血清培养中与细胞因子组合联合处理造血干细胞,尤其是脐血造血干细胞,促进与干细胞自我更新相关的多能基因的转录表达,抑制分化相关基因的表达,从而促进造血干细胞扩增,抑制分化,获得数量更多的长期重建细胞。小分子HDACIs体外扩增脐血造血干细胞有望改变脐血干细胞数量不足、造血及免疫重建延迟的缺陷。大规模高通量筛选出扩增作用强的HDACIs、选择不同通路表观修饰剂协同作用、筛选高选择性HDACIs是进一步研究方向。

组蛋白去乙酰化酶的结构及应用

组蛋白赖氨酸乙酰化是目前研究最为广泛和深入的组蛋白翻译后修饰之一,在染色质重塑和基因表达调控等方面发挥重要作用,这种修饰在体内受到组蛋白乙酰化酶和去乙酰化酶的高度动态调控.除了以组蛋白为底物外,组蛋白去乙酰化酶还可以催化多种非组蛋白的去乙酰化,参与多种生命过程的调节.本文围绕四类人源组蛋白去乙酰化酶,综述了其分类依据、结构与功能特点、催化反应的分子机制,以及针对这些组蛋白去乙酰化酶的抑制剂和激动剂的开发和应用等方面的研究进展.

去乙酰化酶抑制剂HDACIs抗胶质瘤研究进展

DNA甲基化和组蛋白乙酰化是表观遗传学经典的调节途径。其中,组蛋白乙酰化途径在脑胶质瘤发生过程中起到重要作用,并受组蛋白乙酰基转移酶(histone acetyltransferase,HAT)和组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)两类酶调节。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDAC inhibitors,HDACIs)可以通过改变细胞内组蛋白乙酰化程度改变染色质空间结构,从而抑制目的基因转录,对肿瘤发生起到关键作用。本文就组蛋白乙酰化修饰与脑胶质瘤的关系及HDACIs在脑胶质瘤治疗中的应用进行综述。

前列腺癌中巴豆酰化修饰的测定及与肿瘤分期和分级的相关性

目的·初步探讨巴豆酰化修饰是否可以作为前列腺癌诊断的肿瘤标志物及其与前列腺癌分期和分级的相关性。方法·含有不同临床分期、分级的前列腺癌组织芯片73例,正常前列腺组织7例,利用免疫组织化学技术分别检测各样本中巴豆酰化修饰和组蛋白H4乙酰化修饰水平(H-Score评分),并进行组间比较和相关性分析。结果·巴豆酰化修饰水平在前列腺癌组织中较低,与正常前列腺组织比较,差异有统计学意义(P=0.001);而组蛋白H4乙酰化修饰水平组间比较差异无统计学意义(P=0.704)。不同临床分期、分级的前列腺癌组间比较,巴豆酰化修饰和组蛋白H4乙酰化修饰水平差异均无统计学意义(P>0.05)。H4乙酰化修饰与前列腺癌的分期、分级无相关性(P>0.05);巴豆酰化修饰与前列腺癌的分期无相关性(P=0.887),与前列腺癌分级呈正相关(r=0.493,P=0.000)。结论·相比较组蛋白H4乙酰化修饰,巴豆酰化修饰可以作为一种更好的诊断前列腺癌的肿瘤标志物。

抑制组蛋白乙酰化酶活性对心肌微环境中间充质干细胞向心肌细胞分化的影响

目的通过检测移植经干扰乙酰化作用基因Gcn5表达重组质粒ZJ3转染间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）的Wistar大鼠心肌组织内乙酰化酶活性及乙酰化作用基因Gcn5、心肌发育基因GATA4的表达量，探讨体内心肌微环境下乙酰化修饰在干细胞特化心肌样细胞转录调控中的作用。方法提取干扰组蛋白乙酰化酶Gcn5表达重组质粒ZJ3，经脂质体包载转染MSCs24h后移植至Wistar大鼠心肌组织内，2w后检测移植区域心肌组织内乙酰化酶活性及乙酰化作用基因Gcn5、心肌发育基因GATA4的表达量。结果实验组心肌组织乙酰化酶活性较正常对照组、阴性对照组及试剂对照组均有显著性降低；实验组心肌组织内Gcn5及GATA4表达量较正常对照组、阴性对照组及试剂对照组均有明显减弱。结论相关特异性基因的检测结果显示封阻干细胞染色质组蛋白乙酰化修饰后，在体内心肌微环境诱导下亦可以抑制干细胞特化心肌细胞转录过程，这为进一步研究组蛋白末端乙酰化修饰与干细胞分化调节机制奠定了实验室基础。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂在疼痛治疗中的研究进展

1979年世界卫生组织将疼痛定义为由实际造成或有可能造成组织损伤的各种刺激引起的一种不愉快的感觉,常伴有痛苦的心理、情绪感受[1].疼痛是一种复杂的生理心理活动,是临床的最常见的症状之一. 表观遗传学(e pigenetics)是指基因表达发生可遗传的改变而脱氧核糖核酸(dna)序列没有改变,即表型改变而基因型未变.组蛋白修饰是表观遗传修饰的重要的方式.包括组蛋白甲基化、乙酰化、磷酸化等.其中研究得最透彻的是组蛋白乙酰化修饰[2,3].近年来,随着表观遗传学的发展,疼痛的表观遗传学研究也逐步深入.本文主要就组蛋白去乙酰化酶( histone deacetylase,hdac)抑制剂在疼痛治疗中的研究进展予以总结.

多囊卵巢综合征胰岛素抵抗的中西医研究进展

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是绝经前妇女最常见的内分泌和代谢紊乱之一,患病率高达6%~20%[1].越来越多的证据表明PCOS可能是一种复杂的多基因疾病,具有强烈的表观遗传和环境影响[2].PCOS不仅影响女性生殖功能,还与肥胖、高胰岛素血症、胰岛素抵抗(insulinresistance,IR)以及罹患2型糖尿病(T2DM)和心血管疾病的风险增加密切相关[3].IR是PCOS的核心发病机制,IR早诊断、早干预对阻止PCOS的病情进展及远期代谢并发症发生至关重要.近年来,PCOS胰岛素抵抗逐渐成为国际内分泌疾病研究的前沿热点,但目前PCOS胰岛素抵抗的产生及胰岛素信号转导调控机制仍未阐明.本文将从中西医两方面对PCOS胰岛素抵抗的研究进展作一综述.

溴结构域蛋白4 BD1和BD2选择性抑制剂的研究进展

溴结构域蛋白4(BRD4)在组蛋白乙酰化修饰过程中发挥着重要的作用,与多种包括恶性肿瘤在内的疾病发生发展密切相关。目前,已有多个BRD4抑制剂进入临床研究阶段。因泛BRD4小分子抑制剂因其选择性差而导致的不良反应等问题,最终多数临床研究被终止。BRD4高选择性抑制剂靶向肿瘤等疾病已成为BRD4抑制剂开发的新趋势。对BRD4蛋白的结构和生物学功能进行研究,并对目前已经报道的选择性BRD4 BD1和BRD4 BD2抑制剂以及BRD4选择性抑制剂产生选择性的结构基础和独特的适应证进行综述,旨在加深对BRD4蛋白功能了解的同时,为后续BRD4高选择性抑制剂的设计和拓展研究奠定基础。

《ANP32A regulates histone H3 acetylation and promotes leukemogenesis》解读

本文最初发表于2018年《Leukemia》杂志上,文章题录为:Yang X,Lu B,Sun X,et al.ANP32Aregulates histone H3acetylation and promotes leukemogenesis[J].Leukemia,2018,32:1587-1597。在本研究中,我们发现ANP32A能够促进AML发生;ANP32A通过调控组蛋白H3乙酰化修饰影响脂质代谢等下游关键通路;靶向ANP32A及其下游通路有望成为白血病治疗的新策略。