组蛋白去乙酰酶阻滞剂的放射增敏作用

放射治疗是肿瘤的重要治疗手段之一，辐射可以导致细胞DNA双链断裂。细胞主要通过同源重组修复和非同源末端连接修复方式修复DNA双链断裂。随着对双链DNA损伤修复机制认识的深化，组蛋白去乙酰酶（HDAC）阻滞剂成为提高放射敏感性的一种新策略。HDAC可分为4类。HDAC阻滞剂可非特异性地或特异性地阻滞这4类HDAC，使组蛋白乙酰化水平提高，染色体解螺旋，核小体结构改变。一方面使DNA更易受到辐射的影响；另一方面通过降低E2F1转录因子活性抑制损伤修复蛋白Ku80、Rad51等的表达，使其不能募集DNA损伤修复蛋白，且不能形成相应的蛋白复合物，使同源重组修复和非同源末端连接修复作用延缓，在伴有或不伴有肿瘤细胞凋亡增加的情况下，提高放射敏感性。现已有一些临床试验在进行中，并取得了初步的结果。

组蛋白乙酰转移酶Tip60降表达的肺腺癌细胞侵袭迁移能力变化及其机制

目的观察组蛋白乙酰转移酶Tip60降表达的肺腺癌细胞侵袭迁移能力变化并探讨其机制。方法肺腺癌细胞系A549分为Tip60降表达组、降表达阴性对照组及对照组,Tip60降表达组、降表达阴性对照组分别转染Tip60干扰siRNA及阴性对照siRNA,对照组不进行转染。采用Western blotting法检测细胞SETDB1蛋白,实时荧光定量PCR法检测细胞SETDB1 mRNA。采用CCK-8法观察细胞增殖能力,Transwell小室实验观察细胞侵袭能力,划痕修复实验观察细胞迁移能力。使用Cistrome DB数据库的UCSC Browser功能搜索发现肺腺癌细胞A549中SETDB1启动子区H3组蛋白第9位赖氨酸(H3K9)和第27位赖氨酸(H3K27)残基存在明显富集峰,采用染色质免疫沉淀检测细胞SETDB1基因启动子区H3组蛋白H3K9、H3K27的乙酰化水平。结果Tip60降表达组SETDB1蛋白及mRNA表达均小于对照组、降表达阴性对照组(P均<0.05)。培养24、48、72 h时,Tip60降表达组细胞增殖能力均小于对照组、降表达阴性对照组;Tip60降表达组侵袭细胞数少于对照组、降表达阴性对照组;培养24、48 h时Tip60降表达组划痕愈合率均小于对照组、降表达阴性对照组(P均<0.05)。Tip60降表达组SETDB1启动子区组蛋白H3K9及H3K27乙酰化水平均小于对照组、降表达阴性对照组(P均<0.05)。结论Tip60降表达可抑制肺腺癌细胞的侵袭迁移能力,其机制可能与调控SETDB1启动子区H3组蛋白乙酰化水平有关。

环肽类组蛋白去乙酰化酶抑制剂

组蛋白乙酰转移酶(HAT)和组蛋白去乙酰化酶(HDAC)调节组蛋白乙酰化程度,HDAC在基因表达和染色体形成等方面起着重要的调节作用。HDAC抑制剂能够引起肿瘤细胞生长停滞、诱导肿瘤细胞分化和凋亡。通过对各种HDAC抑制剂结构及作用机制的研究有助于该类药物在临床上的应用和拓宽癌症治疗的适用范围。本文概述了近年来天然及合成的环肽类组蛋白去乙酰化酶抑制剂的研究进展。

组蛋白去乙酰酶抑制剂的研究进展

组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferase,HAT)和组蛋白去乙酰酶(histone deacetylase,HDAC)通过对组蛋白氮端氨基酸残基进行乙酰化或去乙酰化,调节组蛋白的乙酰化水平,调控基因表达,该过程与癌症的发生具有密切的关系。组蛋白去乙酰酶抑制剂通过增加细胞内组蛋白的乙酰化程度,提高p21等基因的表达水平等途径,抑制肿瘤细胞的增殖,诱导细胞分化和(或)凋亡。该文对HDAC抑制剂的研究进展进行系统的综述。

组蛋白去乙酰酶抑制剂MS-275抑制膀胱癌的实验研究

背景与目的:染色质核心组蛋白的乙酰化水平受组蛋白乙酰转移酶和组蛋白去乙酰酶(HDAC)的控制,它与基因表达调控密切相关、HDACs功能异常与肿瘤的发生发展有关,组蛋白去乙酰酶抑制剂(HDAC Is)通过抑制HDACs而抗肿瘤。本文研究HDAC I类药物之一MS-275对人膀胱癌T24细胞的抑制作用,为临床应用提供有价值的实验依据。方法:将不同浓度的MS-275作用于T24细胞,用MTT法检测生长抑制作用,用平板克隆形成试验测定细胞增殖能力的影响,分别采用光学显微镜、透射电子显微镜及AnnexinV、PI双标流式细胞术观察和检测细胞的凋亡情况。结果:MS-275对人膀胱癌T24细胞的生长抑制作用存在明显的剂量、时间依赖关系,0.5μmol/L作用72 h的抑制率为9.34%±3.57%,而8μmol/L作用120 h达94.84%±1.33%。克隆形成率从阴性对照组的55.67%±6.51%降至4μmol/L组的2.33%±0.58%。显微镜下可观察到大量的凋亡形态特征的细胞。流式细胞术检测示,作用48 h后的凋亡率在1μmol/L组、2μmol/L组和4μmol/L组分别为24.19%、30.77%和38.51%,明显高于阴性对照组(2.49%)。结论:组蛋白去乙酰酶抑制剂类药物具有体外抗膀胱癌作用,其重要作用机制之一是诱导膀胱癌细胞凋亡,并有望成为新的抗膀胱肿瘤药物。

组蛋白脱乙酰酶抑制剂apicidin及其类似物的抗原虫与抗肿瘤作用研究进展

Apicidin是镰刀菌代谢产物,属环四肽类分子,能结合组蛋白脱乙酰酶(HDAC)使组蛋白过度乙酰化,具有广谱抗顶复亚门原虫和广谱抗肿瘤作用,可抑制肿瘤细胞转移、增殖和促使肿瘤细胞凋亡、分化。对apicidin类似物的生物学活性研究表明,apicidin的癸酸侧链、大环结构和色氨酸侧链是药效基团元件,使其能竞争性结合HDAC,发挥其生物学效应。

组蛋白去乙酰酶抑制剂对结肠癌细胞增殖和ID4基因表达的影响

目的:研究组蛋白去乙酰酶抑制剂曲古菌素A (TSA)对结肠癌细胞Caco2增殖的影响和机制.方法:5-500μg/L TSA处理结肠癌Caco2细胞0-5d,在药物处理前及36h后用MTT法检测细胞增殖状况.流式细胞仪检测细胞周期的改变.RT-PCR检测ID4 mRNA的表达.结果:TSA在100μg/L浓度以上可以明显抑制结肠癌Caco2细胞的增殖(P<0.05),但在5和20μg/L浓度时抑制作用不明显.100μg/L TSA可导致细胞G_1期阻滞,但没有诱导明显的细胞凋亡.RT-PCR显示20μg/L TSA作用36 h后ID4 mRNA表达增强(P<0.05),在100μg/L其表达显著增强(P<0.01).结论:TSA可以通过阻滞Caco2细胞的G_1期和重新表达ID4来发挥抑癌作用.

组蛋白去乙酰酶抑制剂的药理学研究进展

组蛋白的乙酰化调节,参与了基因表达的调控;组蛋白乙酰转移酶和组蛋白去乙酰酶活性共同决定了组蛋白的乙酰化水平。组蛋白去乙酰酶抑制剂可提高组蛋白的乙酰化水平,并对一些非组蛋白成分产生影响,从而调节某些特定基因的表达。综述了组蛋白去乙酰酶抑制剂的药理作用及其临床应用前景。

组蛋白脱乙酰化酶抑制剂对炎性细胞因子表达的影响

组蛋白脱乙酰化酶（HDACs）抑制剂因其可诱导细胞周期阻滞、诱导肿瘤细胞的分化和凋亡，而且重要的是对机体的不良反应小，因此被广泛地用于各种恶性肿瘤的治疗。近年来，出现了诸多关于HDACs抑制剂被用作抗炎药物的研究，不过也有一些关于HDACs抑制剂促进某些炎性细胞因子表达的报道。本文就HDACs抑制剂对炎性细胞因子表达的影响作一综述。

蛋白酶体抑制剂协同组蛋白去乙酰化酶抑制剂诱导T细胞淋巴瘤凋亡及其与蛋白聚集体关系的研究

本研究探讨蛋白酶体抑制剂硼替唑米(bortezomib)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对T淋巴瘤细胞株Jurkat和Hut78的协同诱导凋亡作用,以及两药联合对蛋白聚集体形成的影响。硼替唑米(10nmol/L)单药或硼替唑米(10nmol/L)联合SAHA(2μmol/L)处理Jurkat和Hut78细胞,应用台盼蓝拒染法计数细胞生长抑制率;细胞涂片观察细胞形态学改变;流式细胞术检测细胞凋亡变化;透射电子显微镜观察细胞凋亡和聚集体形成的超微结构特征。研究结果表明,与对照组和单用硼替唑米组比较,两药合用能够显著抑制Jurkat和Hut78细胞生长,促进细胞凋亡。流式结果显示,两药合用组的Jurkat和Hub78细胞凋亡细胞比例分别为(41.8±4.7)%和(72.7±11.7)%,显著高于对照组[(3.6±1.3)%和(7.0±1.9)%]和单用硼替唑米组[(6.3±2.3)%和(18.7±9.2)%](p均<0.01)。超微结构显示,单用硼替唑米组细胞内多为典型的聚集体结构,两药合用组细胞内聚集体密度降低,数量减少甚至消失,且凋亡细胞明显增多。结论:蛋白酶体抑制剂联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂能有效诱导T淋巴瘤细胞凋亡,两药具有协同作用。硼替唑米促进聚集体形成,SAHA能破坏聚集体结构,是增强硼替唑米促凋亡效应的可能机制之一。

新型抗肿瘤组蛋白去乙酰化酶抑制剂西达本胺的合成

目的:合成西达本胺{N-(2-氨基-5-氟苯基)-4-[N-(吡啶-3-丙烯酰)氨甲基]苯甲酰胺}。方法:以吡啶甲醛为起始原料,通过Knoevenagel反应,制得吡啶丙烯酸,然后以N,N’-碳酰二咪唑(CDI)为催化剂,通过2步酰化反应,合成目标产物。结果:目标产物的产率为29%。结论:本法条件温和,操作简便,适合工业化生产。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰-双羟肟酸对乳腺癌细胞增殖的影响

背景与目的:目前乳腺癌发病率仍居首位,是严重威胁女性健康的主要肿瘤之一。组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰双羟肟酸(suberic bishydroxamate,suberoyl bishydroxamic acid,SBHA)能够抑制组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)中的HDAC1和HDAC3的活性,选择性抑制某些肿瘤的生长而对正常细胞无不良反应。本实验旨在研究SBHA对人乳腺癌细胞增殖及周期的影响。方法:将不同浓度的SBHA以不同时间作用于乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞,用WST-8法检测其对细胞增殖能力的影响;用相差显微镜观察药物对细胞形态学变化;用流式细胞仪分析细胞周期。结果:SBHA呈时间和剂量依赖性抑制乳腺癌细胞增殖,使细胞形态发生明显变化,明显使G0～G1期细胞比例增高,S期细胞比例降低,与对照组比较差异有统计学意义(P>0.05)。结论:SBHA具有抑制人乳腺癌细胞增殖作用,使细胞阻滞在G0～G1期。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂的研究进展

核小体是真核生物染色质的基本单位，核小体的中部由4种组蛋白（H2A，H2B，H3，H4）各两分子形成八聚体，周围围绕DNA，尾部为组蛋白H1。核小体表面修饰与基因表达调控联系密切。组蛋白乙酰化是其中一种重要的共价修饰，通过招募染色体构型重建复合体引起染色体构型发生改变。染色体构型改变使高度螺旋的染色质变得相对松弛，便于转录因子与DNA结合。使组蛋白乙酰化的主要是组蛋白乙酰转移酶（histone acetyltransferase，HAT）和组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histone deacetylase inhibitors，HDACI）。

蟾毒灵联合组蛋白脱乙酰酶抑制剂SAHA抗多发性骨髓瘤细胞的效应

目的:探讨蟾毒灵联合组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂SAHA抗多发性骨髓瘤(MM)细胞的效应。方法:采用CCK-8试剂盒和RH-123、PI染色流式检测仪检测蟾毒灵对MM细胞株的生长抑制效应。同时用CCK-8试剂盒检测SAHA单药、联合蟾毒灵对MM细胞株的生长抑制效应。结果:蟾毒灵以较低的药物浓度即可较强抑制H929、U266、CZ-1细胞株的生长,48 h的IC50浓度在10～20 nmol/L;并且蟾毒灵主要引起H929、U266、RPMI8226细胞株MM细胞发生S期及G_2-M期的细胞周期阻滞,可通过引起细胞内线粒体的损伤而导致后续的细胞凋亡的发生。SAHA也可使H929及CZ-1细胞发生明显的生长抑制。两药共同作用于H929细胞48 h,较单药有显著的联合作用,10 nmol/L的蟾毒灵可以使SAHA相应浓度作用下的细胞生长活性下降30%左右(P<0.01)。结论:蟾毒灵、SAHA均有诱导MM细胞生长抑制,甚至凋亡的作用,但两药联合可以以更低的药物浓度发挥强有效的抗MM细胞作用。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂与疾病治疗的研究进展

综述了几种组蛋白去乙酰化酶抑制剂(Histone deacetyltransferase inhibitor,HDACI)及其疗效,以及治疗机理和治疗策略。

新结构组蛋白去乙酰化酶抑制剂筛选及抗肿瘤活性初步观察

组蛋白的乙酰化调节是基因表达调控的一种重要机制，它参与了机体病理、生理水平的多方面调节。组蛋白乙酰转移酶和组蛋白去乙酰化酶活性共同决定了组蛋白的乙酰化水平。组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以提高组蛋白的乙酰化水平，从而调节某些特定基因的表达。我们建立了非同位素法高通量筛选组蛋白去乙酰化酶抑制剂的模型，筛选了约二百种化合物，发现三种能够抑制组蛋白去乙酰化酶的化合物。实验证明，它们能在细胞水平促进组蛋白的乙酰化，并对体外培养的多种肿瘤细胞具有明显的杀伤作用。初步体内实验表明，化合物H9能抑制小鼠体内肿瘤的发生、发展。新结构的组蛋白去乙酰化酶抑制剂可能具有新型抗肿瘤药物的应用前景。

组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸钠对胃癌细胞浸润转移的影响

目的 探讨组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸钠对胃癌细胞侵袭、迁移能力的影响及其作用机制.方法 采用肿瘤细胞体外迁移实验和Tanswell小室侵袭模型评价丙戊酸钠对BGC-823细胞浸润转移能力的影响.同时检测BGC-823细胞中MMP-2、MMP-9的表达来探讨其作用机制.结果 对照组细胞培养24小时后迁移细胞数目较多,而丙戊酸钠试验组细胞迁移数目随药物浓度升高而逐渐减少（p〈0.001）;对照组穿过聚碳酯膜细胞数目明显高于药物实验组,差异具有显著意义（p〈0.001）;与对照组比较,试验组MMP-2、MMP-9蛋白表达被明显下调.结论 组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸钠可显著抑制胃癌细胞侵袭转移,通过调节染色体组蛋白乙酰化水平下调金属基质蛋白酶（MMP-2、MMP-9）表达可能是其发挥作用的主要机制之一.

组蛋白去乙酰化酶抑制剂抗炎机制的研究进展

组蛋白乙酰转移酶（HATs）和组蛋白去乙酰化酶（HDACs）通过对组蛋白氮端氨基酸残基进行乙酰化或去乙酰化,调节组蛋白的乙酰化水平,进而调控基因表达,对维持细胞正常功能有重要作用。组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACIs）是一类在转录水平调控基因表达的化合物,通过诱导组蛋白过乙酰化,引起染色体重建、细胞周期停滞、诱导细胞分化和凋亡以及调节转录因子活化和抑制等一系列生物学效应,具有神经保护、抗氧化、脏器保护、抗炎等作用。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂联合用药研究进展

组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)是一类新型发展起来的抗肿瘤药物,通过调节核小体结构控制抑癌基因表达而发挥抗肿瘤的作用。近年来对具有去乙酰化酶(HDACs)抑制活性化合物的报道越来越少,对HDACi与作用于其他靶点的抗肿瘤药物的联合应用研究逐年增多,并且取得了一定的成就。本文重点介绍了HDACi与细胞毒药物、细胞分化诱导剂全反式维甲酸、DNA去甲基抑制剂(DNMT-i)、蛋白酶体抑制剂、细胞周期DNA修复抑制剂、蛋白酶体抑制剂等的抗肿瘤机制以及联合应用所取得的成绩,并对抗肿瘤药物的研究和发展作出了展望。

一种简便可靠的组蛋白乙酰转移酶(HAT)抑制剂荧光检测方法

组蛋白乙酰转移酶(HAT)参与真核细胞基因转录的调节,其抑制剂由于具有调节转录并产生抗病毒、抗炎、抗氧化等作用,有希望成为一类新药.非放射性分光光度HAT测定方法虽然可替代广泛使用的放射性检测方法,但缺乏灵敏度和准确性.建立了一种简单的非放射性荧光检测方法,即测量辅酶A(CoASH)与邻苯二甲醛(OPA)和巯基乙醇反应的荧光产物.此法与分光光度法相比具有更高的准确性,可进行多种化合物HAT抑制活性的筛选.这种新方法有望成为研究转录调节和新药开发方面的一种有效工具.