组蛋白脱乙酰化酶抑制剂对炎性细胞因子表达的影响

组蛋白脱乙酰化酶（HDACs）抑制剂因其可诱导细胞周期阻滞、诱导肿瘤细胞的分化和凋亡，而且重要的是对机体的不良反应小，因此被广泛地用于各种恶性肿瘤的治疗。近年来，出现了诸多关于HDACs抑制剂被用作抗炎药物的研究，不过也有一些关于HDACs抑制剂促进某些炎性细胞因子表达的报道。本文就HDACs抑制剂对炎性细胞因子表达的影响作一综述。

组蛋白脱乙酰化酶4N-末端和C-末端片段的原核表达及纯化

目的在大肠杆菌中分别表达组蛋白脱乙酰化酶4(HDAC4)N-末端(1-1950bp)和C-末端(1708-3255bp)片段与谷胱甘肽-S转移酶(GST)的融合蛋白,并进行纯化。方法应用PCR方法扩增HDAC4N-末端和C-末端片段,将目的基因插入GST融合载体pGEX-6P-1中,重组载体在酶切鉴定和序列测定后,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达GST-HDAC4-N'和GST-HDAC4-C'蛋白。经SDS-PAGE及Western blotting鉴定表达产物后,用谷胱苷肽琼脂糖珠纯化目的蛋白。结果经测序、酶切鉴定证明成功构建了融合蛋白表达质粒,表达出的融合蛋白经SDS-PAGE分析其相对分子量约为110500和93080。Western blotting分析证实融合蛋白可以被HDAC4特异性抗体所识别。结论成功构建了融合表达载体(pGEX-6P-1/HDAC4-N'和pGEX-6P-1/HDAC4-C'),并进行了融合蛋白的诱导表达和鉴定,可以进一步用于HDAC4与其他蛋白质相互作用的研究。

水稻组蛋白脱乙酰化酶SIR2的功能注释分析

依赖于NAD+的组蛋白脱乙酰化酶SIR2对酵母和哺乳动物细胞的存活、衰老、凋亡等生理活动的调节起着重要的作用。利用生物信息学方法对SIR2在水稻中的生物学功能进行研究。结果表明,SRT701和SRT702分别位于第4条和第12条染色体上;它们编码的蛋白均含有N-糖基化、蛋白激酶C磷酸化、酪蛋白激酶II磷酸化和豆蔻酰化4个相同的位点;SRT701主要位于细胞核,而SRT702主要位于内质网,它们均有跨膜区,且为疏水性蛋白质,都无信号肽;多序列比对发现植物SIR2家族的SIR2结构域高度保守;电子表达谱分析发现SRT701主要表达于叶片和花序,SRT702表达于整个植物中。利用RT-PCR方法进行检测的结果表明,SRT701在水稻根、茎、叶中均有表达,而SRT702只在叶、茎中有表达,根中没有表达,说明利用生物信息学方法所得的结果只能作为初步预测。水稻SRT701和SRT702器官特异性的表达模式表明它们可能在组织或器官形成中起着重要作用。

组蛋白脱乙酰化酶在α-突触核蛋白抑制酪氨酸羟化酶表达中的作用

目的探讨组蛋白脱乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)参与α-突触核蛋白(-αsynuclein,-αSyn)的过表达抑制酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的可能机制。方法利用HDAC活性检测试剂盒检测MES 23.5多巴胺能神经细胞系和稳定转染-αSyn的细胞中HDAC的活性差异,应用Western-blot及RT-PCR检测转染-αSyn细胞系中HDAC抑制剂———曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对TH表达的影响。结果在转染-αSyn的细胞系中HDAC的活性显著高于未转染组;TSA增加了转染细胞内TH蛋白和mRNA的表达(P<0.05)。结论HDAC参与了多巴胺能神经元中-αSyn抑制TH表达的机制。

水稻组蛋白脱乙酰化酶HD2 HDACs蛋白质的生物信息学分析

HD2 HDACs家族成员是植物特异性的组蛋白脱乙酰化酶并参与基因的转录调控.本研究利用生物信息学方法对水稻组蛋白脱乙酰化酶HD2 HDACs家族成员(HDT701、HDT702、HDT2201和HDT2202)的生物学功能进行研究.结果表明,HD2 HDACs家族成员位于不同的染色体上,分布于细胞的不同部位;它们编码的蛋白均含有依赖于cAMP-和cGMP的蛋白激酶、蛋白激酶C、酪蛋白激酶II与酰胺化4个相同的位点;它们均无跨膜区,都为不稳定的亲水性蛋白质,都无信号肽.多序列比对发现粳稻与籼稻HD2 HDACs的同源性非常高;水稻HD2 HDACs蛋白质的结构域比较特殊;这些蛋白可能参与植物的基因复制、信号传导、转录过程和免疫应答等过程.

稻瘟病菌组蛋白脱乙酰化酶SIR2 HDACs的功能初探

利用生物信息学方法对稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)组蛋白脱乙酰化酶SIR2家族成员(SRT3001、SRT3002、SRT3003、SRT3004、SRT3005、SRT3006和SRT3007)的生物学功能进行研究。结果表明,SIR2 HDACs家族成员位于不同的染色体上,分布于细胞的不同部位;它们编码的蛋白均含有蛋白激酶C磷酸化、酪蛋白激酶II磷酸化、N-糖基化、N-豆蔻酰化4个相同的位点;它们均无跨膜区,且为亲水蛋白质,都无信号肽。多序列比对发现稻瘟病菌SIR2 HDACs家族结构域高度保守,均含有SIR2结构域;这些蛋白可能参与病原菌的转录调节、能量代谢和染色质沉默等过程。

选择性组蛋白脱乙酰化酶抑制剂MS1568对创伤性颅脑损伤大鼠的神经保护潜能研究

目的通过建立临床相关的颅脑创伤动物模型并于伤后注射选择性Ⅱa类HDAC抑制剂MC1568,研究其对于脑损伤后神经炎性反应及急性神经细胞变性死亡的保护作用。方法建立中度颅脑损伤模型,比较不同组别脑组织损伤同侧海马CA2-3区乙酰化组蛋白H4、小胶质细胞及急性变性神经元数量。结果与安慰剂治疗组比较,2组剂量MC1568均可明显减少脑外伤后巨噬细胞样小胶质细胞的数量(P<0.05)。结论 MC1568可通过参与改善脑外伤后小胶质细胞介导炎性反应及急性神经元凋亡变性等一系列病理改变发挥其潜在神经保护作用,为临床治疗创伤性颅脑损伤提供实验室依据及有效的治疗手段。

组蛋白脱乙酰化酶及其与基因转录的关系

含有组蛋白脱乙酰化酶活性的分子有两类 :一类是与酵母RPD3同源的分子 ,另一类是与RPD3不同源的分子 .它们各有其不同的来源 ,存在于各自的复合物中 ,催化不完全相同的组蛋白或其他蛋白质脱乙酰化 ;这些脱乙酰化酶与基因转录的调控存在着密切的关系 。

纳米脂质体槲皮素联合8-Br-cAMP对人Rb44细胞组蛋白脱乙酰化酶抑制效应的探讨

目的探讨纳米脂质体槲皮素(nanoliposomal quercetin,nLQ)联合8-Br-cAMP对培养的人Rb44细胞组蛋白脱乙酰化酶的抑制效应。方法将培养的Rb44细胞分为4组:nLQ组,以40μmol·L-1nLQ培养;8-Br-cAMP组:以20μmol·L-18-Br-cAMP培养;nLQ+8-Br-cAMP组;以40μmol·L-1nLQ和20μmol·L-18-Br-cAMP共培养;对照组:不加nLQ或8-Br-cAMP。应用MTT实验检测细胞生长抑制率(GSR)。应用免疫斑点印迹检氉测脱乙酰化酶抑制物、NF-κBp65、磷酸化IκBα及c-myc的表达。对表达的靶信号以图像分析仪扫描灰度值。结果与对照组相比,nLQ组和8-Br-cAMP组GSR达44%±1%和40%±1%,均为P<0.05;nLQ+8-Br-cAMP组GSR达60%±1%,P<0.01。nLQ组、8-Br-cAMP组、nLQ+8-Br-cAMP组与对照组相比,脱乙酰化酶抑制物、NF-κBp65及c-myc的表达均减低,均为P<0.05;而磷酸化IκBα的表达均增强,均为P<0.05。结论 nLQ联合8-Br-cAMP可下调脱乙酰化酶抑制物表达,上调磷酸化IκBα的表达同时可抑制NF-κBp65的表达。

组蛋白脱乙酰化酶-1保守氨基酸中组氨酸定点突变的建立

为了研究组蛋白脱乙酰化酶 1(HDAC1)保守氨基酸中组氨酸的定点突变对其功能的影响 ,需要建立HDAC1保守组氨酸定点突变的突变子。在克隆野生型HDAC1cDNA的基础上 ,利用Al teredSiteⅡ体外突变系统对HDAC1保守氨基酸中的 3个组氨酸位点进行突变 ,并用全自动测序鉴定。结果分别获得了HDAC1的H14 0F、H178F、H179F的定点突变子 ,为进一步研究HDAC1保守氨基酸中组氨酸定点突变对其功能的影响打下了基础。

水稻组蛋白脱乙酰化酶基因HDA705启动子的克隆与表达特性分析

为探讨水稻(Oryza sativa)组蛋白脱乙酰化酶基因HDA705的功能和表达特性,根据NCBI上登录的水稻HDA705基因(GenBank登录号:AK111861)的序列,克隆了5′端2 kb的启动子片段proHDA705,并构建了proHDA705:GUS表达载体。通过农杆菌介导法转化水稻,并获得了转基因株系。GUS检测结果表明,proHDA705仅在水稻的根、茎、叶及部分颖壳的表皮毛等器官中表达,而在花器官中不表达,这表明HDA705具有组织表达特异性。

组蛋白脱乙酰化酶抑制剂在血液系统肿瘤的研究进展

组蛋白的乙酰化和脱乙酰化在调节基因表达方面起着重要作用，并且组蛋白脱乙酰化酶（histone deacety—lases。HDACs）和组蛋白乙酰转移酶（histone acetylases，HATs）的活性与肿瘤发生有关，组蛋白脱乙酰化酶抑制剂（histone deacetylase inhibitors，HDACi）可以抑制HDACs，促进组蛋白乙酰化，调节染色质结构和基因转录，被用于实体瘤和血液肿瘤的靶向治疗，成为研究的热点之一。

刘伟教授团队发现激活组蛋白脱乙酰化酶Sirt1启动细胞自噬的信号新途径

11月25日，浙江大学医学院基础医学系刘伟教授团队发现一条激活组蛋白脱乙酰化酶Sirt1启动细胞自噬的信号新途径。

组蛋白脱乙酰化酶抑制剂在心血管疾病中的研究进展

组蛋白脱乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)是一类主要通过与底物蛋白相互作用而参与和调控多种生物学进程的蛋白酶。大量研究发现,在神经退行性疾病、肿瘤及心血管疾病等诸多疾病中HDAC与其均有关联。近年来的研究表明HDAC抑制剂(histone deacetylase inhibition,HDACi)不仅对肿瘤性疾病起着很好的抑制作用,在心血管疾病的诊治过程中也发挥着独特的作用,更重要的是对正常细胞几乎没有细胞毒性,因此已逐渐成为科研和临床实践中的“香饽饽”。文章综述了HDACi在心血管疾病中的研究进展,为其以后相关的科研研究提供一些证据,使其能更好地应用于临床心血管疾病。

组蛋白脱乙酰化酶抑制剂对Kasumi-1细胞血管新生相关因子表达的影响

目的 研究组蛋白脱乙酰化酶（HDAC）抑制剂丙戊酸钠（VPA）及曲古菌素（TSA）对白血病细胞系Kasumi-1细胞血管内皮生长因子（VEGF）、VEGF受体（KDR或FLK-1）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）表达的影响,探讨其抗白血病血管新生的可能机制.方法 采用RT-PCR及Western blot方法 分析不同浓度VPA、TSA处理Kasumi-1细胞3 d后VEGF及其受体KDR mRNA及蛋白水平的变化,RT-PCR检测bFGF mRNA水平的变化.结果 VPA能够下调VEGF mRNA（3 mmol/L时处理组VEGF121 0.034±0.004、VEGF165 0.015±0.001,对照组分别为0.632±0.014、0.526±0.021）、KDRmRNA（3 mmol/L组0.038±0.000对0.258±0.034）及蛋白的表达,下调bFGF mRNA（3 mmol/L组0.086±0.015对0.228±0.017）的表达 TSA对VEGF、KDR mRNA及蛋白表达的影响与VPA相似,较高浓度的TSA能够下调bFGF mRNA的表达.结论 HDAC抑制剂可能通过调节血管新生相关因子及受体的表达,阻碍白血病患者的血管新生,从而抑制白血病的进展.

组蛋白脱乙酰化酶抑制剂抗心脏纤维化作用及免疫机制

可逆性组蛋白乙酰化在调节心肌纤维化过程中具有核心作用，而组蛋白乙酰基转移酶（HATs）和组蛋白脱乙酰化酶（HDACs）是决定组蛋白乙酰化程度的两种主要酶。组蛋白脱乙酰酶抑制剂（HDACIs）具有抗纤维化作用，可减少心脏细胞凋亡、肥大以及心室纤维化，其抗心脏纤维化作用与其对心脏成纤维细胞、肾素一血管紧张素一醛固酮系统及其免疫机制密切相关。不久的未来，HDAC抑制剂可能作为一种新型的治疗心衰的药物。

白藜芦醇对胃癌细胞及其表达DNA甲基转移酶和组蛋白脱乙酰化酶的影响及意义

胃癌DNA高甲基化及组蛋白低乙酰化几乎同时存在。白藜芦醇（Res）具有抗癌作用，本研究旨在观察Res对胃癌细胞及其表达抑制DNA甲基转移酶（DNMTs）和组蛋白脱乙酰化酶（HDACs）的影响。一、材料与方法胃癌细胞分别用空白、25、50、100μmol／L的Res干预24h后，流式细胞仪测凋亡及G1期比例；免疫细胞化学检测DNMTs和HDACs灰度值。数据用SPSS20．0分析，采用单因素方差分析（ANOVA），组间比较采用Tukey检验，以P〈0．05为差异有统计学意义。

组蛋白脱乙酰化酶抑制剂在治疗白血病中的研究进展

组蛋白的乙酰化和脱乙酰化在调节基因表达方面起着重要作用,与肿瘤的发生密切相关。具有组蛋乙酰基转移酶(HATs)活性的蛋白均为转录因子活性相关蛋白;组蛋白脱乙酰化酶(HDACs)是转录因子辅助抑制复合物的关键成分。目前发现的HDAC抑制剂结合HDAC催化袋状结构的锌离子,其他部位阻断活性位点的通道而发挥作用;体外培养多种白血病细胞系细胞导致不同程度的分化、凋亡和细胞周期阻滞。体内能抑制荷瘤动物肿瘤生长。

组蛋白脱乙酰化酶抑制剂对失血性和感染性休克早期救治作用的研究进展

背景休克早期的药物救治，一直普遍受到关注，近来组蛋白脱乙酰化酶抑制剂（histone deacetylabe inhibitors，HDACI）因其突出的抗休克作用成为国际研究热点。目的回顾目前HDACI的临床应用方向和分类，讨论其作为抗失血性休克和感染性休克药物的突出优势以及作用机制。内容HDACI可通过抗细胞凋亡等多种途径，提高细胞对休克所致缺血，缺氧环境的耐受能力，改善失血性休克和感染性休克动物模型的预后。趋向HDACI已成为抗失血性休克和感染性休克研究的新方向，是提高休克早期生存率的新策略，也为休克的治疗提供了药物配合液体复苏的新途径。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对人宫颈癌SiHa细胞增殖及凋亡的影响

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对人宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法:以MS-275(0、5、10、20μmol/L)作用于人宫颈癌SiHa细胞,MTT法检测细胞的增殖,流式细胞术检测细胞的凋亡,Western blotting法检测细胞内乙酰化组蛋白H4(acetylhistone4,Ac-H4)水平,RT-PCR检测p21和p53 mRNA的表达。结果:MS-275作用后,人宫颈癌SiHa细胞增殖受到抑制、细胞凋亡增加,20μmol/L MS-275作用下,细胞增殖率仅为(13.95±8.91)%,凋亡率高达(38.38±1.78)%,显著高于其他各组(P<0.01)。MS-275作用后,细胞内Ac-H4水平增加(P<0.01),p21和p53 mRNA表达增加(均P<0.01)。结论:MS-275可抑制人宫颈癌SiHa细胞的增殖,诱导SiHa细胞凋亡;上调p21和p53表达、提高组蛋白乙酰化水平可能是其作用机制之一。