局灶性脑缺血再灌注损伤细胞凋亡相关基因表达的研究

目的探讨在局灶性脑缺血再灌注损伤中神经细胞凋亡及相关基因表达的影响及脑缺血后神经细胞凋亡的调控机制。方法利用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,采用免疫组化和逆转录聚合酶链(RT-PCR)反应方法分别检测脑缺血再灌注不同时间细胞凋亡及相关基因bcl-2和bax、Caspase-3表达的动态变化。结果轻度脑缺血和再灌注早期,bcl-2表达升高,具有神经保护作用,但重度脑缺血和再灌注后期,其保护作用不足以抑制神经细胞凋亡。Bax表达于神经细胞凋亡时空分布一致,可反映缺血后脑损伤的程度。Caspase-3在脑缺血再灌注损伤中起重要作用,其表达的升高早于细胞凋亡,直接参与神经细胞凋亡的执行。结论脑缺血再灌注能够引起Bcl-2基因和Caspase-3基因表达的改变,导致神经细胞凋亡的发生。

缺氧预处理对L02肝细胞Bcl-2、Bax、Fas及FasL表达的影响

目的研究缺氧预处理对正常肝细胞株L02缺血再灌注损伤的抗凋亡机制。方法:将体外培养的L02细胞分为3 组:正常对照组(A组)、缺氧复氧损伤组(B组)、缺氧预处理组(C组)。各组细胞缺氧复氧处理1、6、12、18、24h后,使用流式 细胞术检测细胞凋亡率,各组细胞分别缺氧复氧、缺氧预处理后12h检测细胞Bcl-2、Bax、Fas及FasL蛋白表达,同时对细胞 结构进行电镜观察。结果:C组和B组比较,细胞凋亡率明显降低(P<0.05),细胞Bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.05),Bax、 Fas及FasL蛋白表达量显著降低(P<0.05),透射电镜观察到缺氧预处理组细胞结构基本正常。结论:缺氧预处理明显减轻 了缺氧复氧所导致的L02肝细胞损伤,降低了细胞凋亡率,缺氧预处理保护机制和Bcl-2、Bax、Fas及FasL蛋白表达有关。

左西孟旦拮抗庆大霉素致豚鼠耳蜗毛细胞损伤的研究

目的探讨钙增敏剂左西孟旦(levosimendan)和川芎嗪对庆大霉素致耳聋豚鼠内耳毛细胞损伤的保护作用及作用机制。方法将60只preyer反射正常的DHP白化雌性豚鼠平均随机分为6组,分别为庆大霉素损伤组、川芎嗪阳性对照组、羟丙基-β-环糊精辅料对照组、低剂量左西孟旦组、高剂量左西孟旦组和正常组,造模共12 d,造模前后分别行听性脑干反应(ABR)测试确定客观听力阈值差异水平,并以HE(hematoxylin-eosinstaining)染色法和免疫组化法观察比较不同组别下豚鼠毛细胞形态学特征以及凋亡蛋白Capase-3和钙离子通道蛋白CaVl.3表达。结果庆大霉素组豚鼠ABR阈值明显高于左西孟旦药物保护组和川芎嗪阳性对照组,且具有显著性差异(P=0.000<0.01;P=0.002<0.01);庆大霉素组豚鼠耳蜗Capase-3蛋白和CaV1.3钙离子通道蛋白表达量高于低剂量左西孟旦组,均具有统计学意义(P=0.004<0.01;P=0.002<0.01),但与高剂量左西孟旦组相比均无统计学差异(P>0.05)。庆大霉素组与川芎嗪阳性对照组相比Capase-3凋亡蛋白显著增高且具有统计学差异(P<0.05),而CaV1.3钙离子通道蛋白表达略低于川芎嗪组且无统计学差异(P>0.05)。结论应用左西孟旦注射液静脉注射可有效保护耳毒性药物聋豚鼠听力。

黄芪抑制心肺复苏后大鼠肝细胞凋亡的实验研究

目的研究黄芪注射液对心肺复苏后的大鼠肝细胞凋亡的抑制作用。方法SD雄性大鼠30只,随机分为5组:对照组、实验组(复苏后6h、24h)、黄芪组(复苏后6h、24h),每组6只。采用细胞凋亡原位末端标记法并结合透射电镜观察,分别检测各组大鼠肝细胞凋亡及Bcl2、Bax、NFκB的阳性表达。结果在各组大鼠肝组织内均可见肝实质细胞凋亡现象,实验组肝细胞TUNEL阳性表达率6h组为(56.63±3.41)%,24h组为(47.53±2.15)%,黄芪组的TUNEL阳性表达率6h组为(38.26±3.0)%,24h组为(28.59±2.31)%,对照组的TUNEL阳性表达率为(3.12±0.56)%;黄芪组Bel2、NFκB的表达高于实验组,而Bax的表达低于实验组。结论黄芪注射液对心肺复苏后大鼠肝细胞凋亡有保护作用。