氧化苦参碱抑制肝癌细胞诱导血管内皮细胞增殖作用的研究

目的 :探讨氧化苦参碱 (OM )对肝癌细胞诱导血管内皮细胞 (VEC)增殖的抑制作用。方法 :用MTT法检测不同浓度OM对VEC、人肝癌SMMC 772 1细胞增殖及SMMC 772 1细胞诱导VEC增殖的影响。结果 :OM浓度为 2 .5～ 1 0mg mL时 ,对VEC增殖的抑制率为 4 .6 %～ 36 .4 % ;OM浓度为0 31 3～ 1 0mg mL时 ,对肝癌细胞增殖的抑制率为 2 5 3%～ 88 6 1 % ;经浓度为 1 2 5～ 1 0mg mLOM作用后的肝癌细胞培养液对VEC增殖的抑制率为 7 6 9%～ 38 4 6 % ;OM浓度为 0 6 2 5～ 1 0mg mL时 ,对肝癌细胞培养液诱导的VEC增殖的抑制率为 3 5 7%～ 5 7 5 4%。结论

白术挥发油对人肺癌细胞株PG细胞增殖和细胞周期的影响

目的:观察白术挥发油对人肺癌细胞株PG细胞增殖的抑制作用和对其细胞周期的影响。方法:倒置相差显微镜下观察白术挥发油对PG细胞形态和生长状态的影响,MTT法测定白术挥发油对PG细胞的生长抑制率,流式细胞术检测白术挥发油对PG细胞细胞周期的作用。结果:镜下观察,250μg/ml和125μg/ml白术挥发油处理PG细胞48小时及72小时后,PG细胞形态变差,分裂相减少;250μg/ml和125μg/ml白术挥发油处理48小时对PG细胞的生长抑制率分别为58.58%、16.84%,与对照组比较有显著性著异;250μg/ml、125μg/ml白术挥发油组G0/G1期细胞数与阴性对照组比较有显著性差异,S期细胞数亦显著低于阴性对照组。结论:白术挥发油可以抑制PG细胞增殖,其作用可能是通过阻止PG细胞通过G1/S期转换点来实现,的并呈剂量依赖性。

丹参酮ⅡA对人肺癌细胞株A549/CDDP细胞增殖和凋亡的影响

目的研究丹参酮ⅡA（TanⅡA）对人耐药非小细胞肺癌细胞株（A549/CDDP）增殖与凋亡的影响。方法体外培养A549/CDDP,以不同剂量组TanⅡA干预A549/CDDP,在48、72、96小时后用四氮唑盐（MTT）法检测活细胞OD值;采用Heochst33258荧光染色观察TanⅡA干预后细胞凋亡的形态学变化;半定量RT-PCR检测用药后A549/CDDP survivin和Bax基因表达;流式细胞术检测TanⅡA干预后细胞周期分布。结果在0.6-5.0 mg/L浓度范围内,TanⅡA对A549/CDDP均有增殖抑制作用,并呈剂量依赖趋势,在96小时各组增殖抑制率达高峰;5.0mg/L 72小时组,形态学观察细胞凋亡明显;2.5、5.0 mg/L 72小时组,survivin DNA条带强度较对照组减弱,BaxDNA条带强度较对照组明显增强;流式细胞术检测显示TanⅡA明显抑制A549/CDDP进入增殖周期,与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 TanⅡA可诱导凋亡抑制A549/CDDP增殖并影响细胞周期,其分子机制可能与survivin下调,Bax上调有关。

重组人酸性成纤维细胞生长因子对糖尿病大鼠难愈性皮肤溃疡的促愈合作用

目的:研究外用大肠杆菌表达的重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对糖尿病大鼠难愈性创面的促愈合作用。方法:雄性Wistar大鼠10只,制备糖尿病大鼠难愈性皮肤溃疡模型;创面局部分别用rhaFGF(90U.cm^(-2))及生理盐水喷洒;记录创面面积、伤腔容积及愈合时间,观察创面肉芽组织生长及再上皮化,评价创伤修复情况。结果:与生理盐水对照组比较,rhaFGF组伤后各时间点的创面面积、伤腔容积均明显缩小(P<0.05),愈合率显著提高(P<0.05),创面愈合时间明显缩短(P<0.05)。rhaFGF组的肉芽组织生长及再上皮化明显加速。结论:局部应用大肠杆菌表达的rhaFGF对糖尿病大鼠难愈性创面有明显的促愈合作用。

细胞色素C诱导HL-60细胞凋亡及其与细胞周期关系分析

目的 分析细胞色素 C诱导 HL- 6 0细胞凋亡的时间效应及其与细胞周期的关系。方法 (1)利用透射电镜观察细胞色素 C诱导 HL- 6 0细胞凋亡时凋亡小体的形成。 (2 )应用流式细胞仪技术检测细胞色素 C诱导 HL-6 0细胞的凋亡率并分析其凋亡的时 -效关系以及凋亡与细胞周期的关系。结果 (1)细胞色素 C作用 HL- 6 0细胞2 4小时出现凋亡 ,形成凋亡小体。 (2 )细胞色素 C诱导 HL- 6 0细胞凋亡的作用体现一定的时间效应 ,8～ 2 4小时作用时间范围内 ,凋亡率随时间延长而明显增高。 (3)细胞色素 C诱导 HL- 6 0凋亡与细胞周期密切相关 ,随凋亡率升高 ,S期和 G2 期细胞比例随之下降 ,且 S期细胞比例与凋亡率二者呈显著负相关 (r=- 0 .718,P<0 .0 1)。结论 细胞色素 C诱导 HL- 6 0细胞凋亡与细胞周期密切相关 ,其周期特异性具有一定的实际意义。

碱性成纤维细胞生长因子和α-黑素细胞刺激素对体外培养黑素细胞黏附和迁移的影响

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和α-黑素细胞刺激素(-αM SH)对黑素细胞黏附、迁移的影响。方法:从正常人包皮分离、纯培养黑素细胞,分别用bFGF和-αM SH处理培养黑素细胞;采用纤维连接素包裹的培养板观测黑素细胞黏附,用T ransw ell微孔膜法研究黑素细胞迁移。结果:bFGF和-αM SH均可促进黑素细胞黏附于培养板,bFGF可诱导黑素细胞迁移并呈剂量依赖性(P<0.05),-αM SH对黑素细胞迁移无明显影响(P>0.05)。结论:bFGF和-αM SH可以诱导黑素细胞的黏附和/或迁移,参与白癜风的恢复。

外源性白介素24促进C6细胞凋亡的体外研究

目的探讨外源性白细胞介素24(interleukin 24,IL-24)体外抑制胶质瘤细胞增殖及促凋亡的相关机制。方法应用MTT体外观察转染IL-24对胶质瘤C6细胞增殖的抑制作用。应用Hoechst 33258荧光染色体外观察IL-24对C6细胞的促凋亡作用。Western blot法检测c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和caspase-3蛋白的表达变化情况。结果 IL-24能使C6细胞的体外增殖能力降低,转入IL-24的C6细胞(C6/IL-24)增殖能力下降。经Hochest 33258染色,转入IL-24的C6细胞凋亡后出现核固缩、染色质凝集呈块或碎裂状改变。与转入空载体的C6细胞(C6/p LXSN)及C6细胞比较,C6/IL-24细胞的JNK和caspase-3蛋白表达均增高(均P<0.05)。C6/p LXSN与C6细胞比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论外源性IL-24基因可抑制C6胶质瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,该诱导凋亡的作用可能与其上调并激活JNK及caspase-3表达有关。

促红细胞生成素对血管性痴呆大鼠认知功能的影响

【目的】探讨促红细胞生成素(EPO)对血管性痴呆(VaD)大鼠认知功能的影响。【方法】采用永久性结扎双侧颈总动脉的方法建立VaD模型。将行为学筛选合格的Wistar大鼠分为假手术组(Sham)、VaD组、EPO侧脑室注射+VaD组(E1组)和EPO腹部皮下注射+VaD组(E2组)。应用Y-迷宫观察术后4周、8周、12周大鼠的空间学习和记忆能力。【结果】VaD组和治疗组(E1组和E2组)术后4周出现学习记忆能力降低,并呈逐渐下降趋势,VaD组为甚;而两治疗组之间无明显统计学差异。【结论】EPO能通过血脑屏障改善VaD大鼠的认知功能。

罗红霉素对IL-22诱导的HaCaT角质形成细胞增殖的影响

【目的】探讨罗红霉素对白介素-22（IL-22）诱导的HaCaT角质形成细胞增殖的影响。【方法】①0、12．5、25、50、100、200μg／mL的11．-22处理HaCaT细胞48h后。MTT法检测细胞活力。②0、10、20、40、80、160、320ug／mL的罗红霉素处理HaCaT细胞48h后，MTT法检测细胞活力。③细胞分为5组：正常对照纽，模型对照组（100ug／mL IL-22），罗红霉素低、中、高剂量组（40、80、160ug／mL＋100μg／mL IL-22）。MTT法检测各组细胞活力。Western blot检测各组细胞中角蛋白16（K16）、K17表达量。[结果]12．5、25、50、100μg／mL的IL-22提高HaCaT细胞活力（P〈0．05）；10、20μg／mL的罗红霉素显著的提高HaCaT细胞活力（P〈0．01），40、80、160、320μg／mL的罗红霉素降低HaCaT细胞活力（P〈0．01）；与正常对照组比较，模型对照组中K16、K17、Bcl-2表达上调（P〈0．01）；与模型对照组比较，罗红霉素低、中、高剂量组中K17表达依次下调（P〈0．01）；与正常对照组比较，模型对照组中Bax表达下调；与模型对照组比较，罗红霉素低、中、高剂量组中Bax表达依次上调（P〈0．01）。【结论】罗红霉素能通过下调角蛋白表达及调控细胞凋亡相关蛋白表达进而抑制IL-22诱导的HaCaT细胞增殖。

黄芩素对IL-1β诱导的软骨细胞炎症反应的影响

【目的】探讨黄芩素对白介素-1β（IL-1β）诱导的软骨细胞炎症反应的影响。【方法】软骨细胞分为正常组（加入不含任何刺激物的培养基），IL-1β组（10ng／mL的IL-1G），黄芩素低、中、高剂量组（12．5，25，50μmol／I。黄苓素十10ng／mL的IL-1B）。MTT法检测细胞活力，硝酸还原酶法测一氧化氮（NO）含量，酶联免疫吸附法（ELISA）检测肿瘤坏死因子-α（TNF-u），白介素-γ（IFN-7）及IL-6含量，westernblot检测核因子KB（NF—KBp65）及p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）磷酸化水平。【结果】低、中、高剂量组黄芩素能显著提高软骨细胞活力（P〈0．05）。与正常组比较，IL-1B组中细胞活力降低（P〈0．01），TNF—α，IFN-7，IL-6及N0含量提高（P〈0．01），P—NF—KBp65及P—p38MAPK表达量上调（P〈0．01）；与IL-18组比较，黄芩素低、中、高剂量组中细胞活力提高（P〈0．01），TNF-α，IFN-7，IL-6及NO含量降低（P〈0．01），p-NF—κB p65／NF-κBp65及Pp38MAPK／p38MAPK值下调（P〈0．01）；与低剂量组比较，中、高剂量组中细胞活力提高（P〈0．01），TNF—α，IFN-γ，11。6及N）含量降低（P〈0．01），p-NF—CBp65／NF-KBp65及P—p38MAPK／p38MAPK值下调（P〈0．01）；与中剂量组比较，高剂量组中细胞活力提高（P〈0．01），TNF-d，IFN-7，IL-6及NO含量降低（P〈0．01），p-NF—KHp65及p—p38MAPK表达量下调（P〈0．01）。【结论】黄芩素能通过阻断NF—KB及p38MAPK信号通路进而抑制1I。一1口诱导的软骨细胞炎症反应，为临床OA的治疗提供理论依据。

细胞色素C对阿糖胞苷诱导白血病细胞凋亡的影响

【目的】探讨细胞色素C(Cyt C)对小剂量阿糖胞苷(LD-Ara-c)诱导白血病细胞凋亡的影响。【方法】用HL-60白血病细胞株进行传代培养,MTT试验检测Ara-c和Cyt C不同药物浓度对白血病细胞增殖的影响,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡。【结果】12μg/ml浓度以下的Cyt C具有促进HL-60细胞增殖的作用,不同浓度的Cyt C干预后HL-60细胞凋亡率均低于干预前(P<0.01)。联合应用Cyt C和LD-Ara-c,HL-60细胞凋亡率明显高于单用LD-Ara-c组(P<0.01)。【结论】外源性Cyt C在12μg/ml浓度以下时仅能促进白血病细胞增殖,联合应用Cyt C和LD-Ara-c可增强LD-Ara-c诱导白血病细胞凋亡的作用。

促红细胞生成素对慢性肾衰竭患者免疫功能的影响

【目的】探讨促红细胞生成素(EPO)对慢性肾衰竭(CRF)患者免疫功能等方面的影响。【方法】将48例CRF随机分成3组,每组各16例。A组:采用透析和EPO治疗;B组:单纯采用EPO治疗;C组:为对照组,不采用透析及EPO治疗。同时观察3组患者治疗期间T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)的变化及感染发生率。【结果】A、B两组患者治疗8周后,CD3、CD4及CD4+/CD8+比率显著升高,与对照组相比差异有非常显著性。【结论】EPO可以提高CRF患者的免疫功能,降低患者的感染率。

普罗布考对氧化修饰低密度脂蛋白诱导的人内皮细胞TOLL样受体4表达及单核内皮细胞黏附功能的影响

目的:探讨普罗布考对氧化修饰低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoprotein,ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞TLR4表达及其黏附功能的影响,为进一步研究普罗布考抗动脉粥样硬化的机制,发现抗动脉粥样硬化形成的新靶点提供理论依据。方法:应用RT-PCR,WesternBlot技术检测了普罗布考对ox-LDL诱导的细胞TOLL样受体4(toll-likereceptor4,TLR4)表达的影响,同时用孟加拉玫瑰红活细胞染色法观察不同浓度普罗布考对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs)对单核细胞黏附的影响,并利用相关性检验分析两者间的相关性。结果:ox-LDL能明显上调HUVECsTLR4的表达,并呈一定的剂量依赖性(t=3.04～12.52,P<0.01)。普罗布考呈浓度依赖方式抑制ox-LDL诱导HUVECsTLR4表达,同时也能明显抑制ox-LDL诱导的HUVECs对单核细胞黏附(t=5.30,19.23,P<0.01)。相关性分析显示两者间有明显的正相关性(r=0.996,P<0.01)。结论:普罗布考除具有调脂作用外,尚可通过抑制ox-LDL诱导的内皮细胞TLR4受体的表达和抑制单核细胞与内皮细胞黏附聚集,发挥抗炎作用;TLR4可能成为防治动脉粥样硬化的新靶点。

人白细胞介素29对Hela细胞抗病毒保护作用

目的研究重组人白介素29(rhIL-29)对Hela细胞的抗病毒保护作用及其作用机制。方法传代培养的Hela细胞按一定密度接种于24孔培养板,分别加入不同浓度的rhIL-29,培养24h后换液一次,继续以含rhIL-29的培养基培养16h,用水疱性口炎病毒(VSV)感染后,以不加rhIL-29为空白对照。RT-PCR分析MxA蛋白、2′,5′-寡腺苷酸合成酶(2′,5′-OAS)mRNA及VSV的RNA水平;MTT及细胞形态学检测分析rhIL-29对Hela细胞的抗病毒保护作用。结果经rhIL-29处理的Hela细胞的MxA蛋白、2′,5′-OAS的mRNA表达明显上调,VSVRNA含量显著下降。MTT分析结果rhIL-29对Hela细胞有保护作用且具有剂量依赖关系(P<0.01)。结论rhIL-29通过上调MxA蛋白、2′,5′-寡腺苷酸合成酶,抑制VSV增殖具有一定的保护Hela细胞免受病毒损伤的作用。

异环磷酰胺联合自体PHA-LAK细胞治疗晚期复发卵巢上皮癌的疗效观察

目的研究异环磷酰胺(ifosfamide,IFO)联合自体PHA-LAK细胞过继性免疫治疗晚期复发卵巢上皮癌的疗效。方法25例复发的晚期卵巢上皮癌患者经IFO1200mg/(m2·d)连用4d,同时于用IFO后0、4、8h分别静脉推注美司钠400mg;化疗间歇期以PHA-LAK细胞治疗4次。联合治疗2个周期以上。结果25例患者中,完全缓解(CR)3例,部分缓解(PR)8例,稳定(NC)7例,进展(PD)7例,有效率(CR+PR)44%(11/25),中位无进展生存期(TTP)21周,中位生存期(OS)47周。毒副反应主要是消化道反应和骨髓抑制。结论IFO联合自体PHA-LAK细胞治疗复发的晚期卵巢上皮癌有效,毒副反应低,可作为晚期复发卵巢上皮癌的选择方案。

PEG-G-CSF在多发性骨髓瘤外周血造血干细胞动员及预处理后造血重建中的应用进展

诱导化疗序贯自体外周血造血干细胞移植是适合移植多发性骨髓瘤患者的一线治疗方案,能延长患者无进展生存期和总生存期,而聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子由于其有效、稳定和安全的优点,在多发性骨髓瘤自体外周血造血干细胞动员及预处理后造血重建方面的应用越来越广泛。本文对聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子在多发性骨髓瘤外周血造血干细胞动员及预处理后造血重建的作用机制及具体影响作一综述。

碱性成纤维细胞生长因子对脊髓损伤的保护作用及其机制

碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是近年来引起人们关注的一类新的神经营养因子,对神经细胞的生长、发育、分化及再生起重要调节作用的蛋白质,对细胞有强烈的促进增殖和有丝分裂作用,对脊髓损伤的再生和修复具有重要作用,并且在脊髓损伤早期所起作用尤为显著[1].本文就bFGF对脊髓损伤的保护作用及其可能机制等方面的研究近况作一综述.

分泌性白细胞蛋白酶抑制剂在胃溃疡愈合中的作用机制探讨

【目的】探讨分泌性白细胞蛋白酶抑制剂（secretory leucocyte protease inhibitor，SLPI）在胃溃疡愈合中的作用机制。【方法】采用免疫组织化学染色法、反转录聚合酶链反应（Reverse TranscriptionPolymerase Chain Reaction ，RTPCR）等方法，对30例胃溃疡患者愈合前后胃黏膜组织中SLPI的表达进行检测。【结果】免疫组化染色法显示，SLPI主要表达于胃黏膜上皮及胃腺上皮细胞胞质中，溃疡愈合前胃黏膜组织中SLPI的表达水平为A=0.7083±0.0593，与愈合后A=0.2641±0.0236相比明显增强（P〈0.05）（A为平均吸光度）。RTPCR检测结果显示SLPI mRNA的表达与其蛋白质的改变相一致（P〈0.05）。【结论】SLPI可能通过促进成纤维细胞和血管内皮细胞的增殖活化，促进结缔组织增生和微血管形成，从而促进溃疡愈合。

自体DC-CIK细胞回输在MWA联合化疗治疗局部晚期腺细胞肺癌中的作用

目的观察自体树突状细胞-细胞因子诱导杀伤细胞(dendritic cells-cytokine induced killer cells,DCCIK)回输在微波消融(microwave ablation,MWA)联合化疗治疗局部晚期腺细胞肺癌中的作用及预后分析。方法收集76例局部晚期腺细胞肺癌,随机分为2组:研究组38例,MWA联合化疗后给予>5次的DC-CIK细胞输注;对照组38例,MWA联合化疗。观察治疗前、后肿瘤标志物及外周血淋巴细胞表型变化、总生存期及不良反应。结果全组随访率100.0%。两组均未出现因治疗死亡病例及严重并发症,治疗后两组肿瘤标志物均降低,研究组降低的幅度高于对照组(均P<0.05)。研究组外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞数及CD4+/CD8+比值治疗前、后无明显变化,但对照组治疗后均明显下降(均P<0.05)。研究组1、2、3年生存率分别为73.7%、36.8%、7.9%,中位生存期17月;对照组1、2、3年生存率分别为71.1%、26.3%、2.6%,中位生存期14月,两组总生存时间差异有统计学意义(P=0.043)。结论自体DC-CIK细胞回输在微波消融联合化疗的基础上治疗局部晚期腺细胞肺癌更有生存优势,而且安全性及耐受性良好。