中药对肺纤维化动物模型细胞因子表达的影响

目的:探讨中药国圣一号对纤维化肺组织TNF -α和IL- 8 表达的影响。方法:48 只Wistar 大鼠随机分为正常对照组、模型组、氢化可的松组和中药组,分别于14d和28d观察肺组织病理改变,TNF -α及IL -8表达情况和中药对肺纤维化的治疗作用。结果:①中药和氢化可的松治疗后肺泡炎及肺纤维化较模型组显著减轻(p<0.05),纤维化程度与正常对照组无显著差异(p>0.05)。②模型组肺组织TNF- α、IL- 8表达显著高于其它三组(p<0.01),28 d时IL- 8 的表达较14 d时显著升高(p<0.05),中药组和氢化可的松组肺组织TNF -α、IL- 8 显著高于对照组(p<0.05)。结论:中药通过下调肺纤维化时肺组织TNF- α及IL-8表达起到治疗作用。

人源异种皮下注射移植法建立子宫内膜异位症纤维化裸鼠模型的评价

目的评估人源子宫内膜异位症纤维化裸鼠模型建立的可行性,确定子宫内膜间充质干细胞是否参与诱导子宫内膜异位症纤维化。方法收集人源子宫内膜标本4例,采用皮下注射的方式1∶3移植到12只BABL/c裸鼠体内。记录病灶皮表形态及体积变化,移植后第15天处死裸鼠,观察病灶形态及其与腹壁周围粘连情况,HE染色评判造模结果,Masson染色评定纤维化程度,免疫荧光追踪子宫内膜间充质干细胞在子宫内膜异位症纤维化进程中的作用。结果裸鼠异位病灶体积随时间增长,呈局限性、囊泡样改变,与腹壁粘连紧密,镜下可见子宫内膜样腺体、胶原纤维沉积,造模成功率为83.4%,造模后病灶胶原纤维容积分数显著升高(P<0.01),共聚焦成像提示子宫内膜间充质干细胞(SUSD2^(+))可在体内向肌成纤维细胞(α-SMA^(+))分化。结论人源异种皮下注射移植的方法建立的裸鼠模型符合子宫内膜异位症纤维化的病变特点,操作简单,可行性高,此外体内观察到子宫内膜间充质干细胞参与诱导子宫内膜异位症纤维化形成,为进一步探究其发病机制提供较好的模型参考。

扶正化瘀方对DMN肝纤维化模型鼠肝细胞凋亡的影响

探讨扶正化瘀方(主药:丹参、桃仁、蝙蝠蛾青霉菌、绞股蓝、松花粉、五味子)对DMN肝纤维化大鼠肝脏细胞凋亡的影响。Wistar雄性大鼠 60只,随机分造模组及正常对照组。其中 52只隔日腹腔注射 0 .5% DMN造模, 4周后随机分为模型对照组、扶正化瘀方组、秋水仙碱组,各组分别以自来水、3. 69g·100ml-1扶正化瘀方、0 .1%的秋水仙碱按 10ml·kg-1灌胃,每周 6次,共 4周;正常对照组 8只,前 4周腹腔注射生理盐水,后 4周用自来水灌胃。8周时处死动物取材,检测相关指标。结果:扶正化瘀方组大鼠死亡率、腹水发生率较模型组明显降低,肝功能好转;肝组织Hyp含量以及肝组织胶原分期下降,纤维化程度减轻;肝组织α- SMA表达明显降低,HSC凋亡增多,肝细胞凋亡减少,与模型组相比均有显著性差异。结论:促进活化HSC凋亡、抑制肝细胞凋亡是扶正化瘀治疗肝纤维化的机理之一。

肝纤维化动物实验模型的研究进展

肝纤维化的致病因素在于创伤愈合反应的渐进过程,肝纤维化可进展为肝硬化,并进一步发展为肝癌。目前科研人员在肝纤维化研究方面付出了相当大的努力,希望通过阐明这种疾病的发病机制,建立有效的诊断和治疗方案。本文目的是从动物实验模型建立的理论基础、实验动物的选择、操作方法、试剂的用量、注意事项和模型的优缺点及适用方向进行详细分析,希望可以借此帮助科研人员根据不同的实验需求,在研究肝纤维化时做出更好的选择。肝纤维化的动物实验模型需要注意在建模时的随行观察,以免给药过度形成更为严重的疾病模型如肝硬化模型等。肝纤维化的动物实验方法较多,有化学方法、饮食法、手术法、感染法和遗传修饰小鼠模型,通过对文献内容的比较和分析,发现四氯化碳法是比较普遍适用的方法,具有方法简单、可靠性强、价格低廉等优点。

肝纤溶颗粒与复方鳖甲软肝片对大鼠肝纤维化模型细胞凋亡及内质网应激相关因子表达影响研究

目的探究肝纤溶颗粒与复方鳖甲软肝片对大鼠肝纤维化模型细胞凋亡及内质网应激相关因子表达影响。方法 48只雄性清洁级SD大鼠随机分为:正常对照组、模型对照组、复方鳖甲软肝片组及肝纤溶颗粒组,每组各12只。除正常对照组外各组复制肝纤维化模型。于复制模型后的3周各组大鼠同时给药,正常对照组与模型对照组大鼠给予生理盐水1.5 ml/kg灌胃,1次/d;复方鳖甲软肝片组给予33.3%复方鳖甲软肝片溶液1.5 ml/kg重灌胃,1次/d;肝纤溶颗粒组给予33.3%肝纤溶颗粒溶液1.5 ml/kg灌胃,1次/d。各组连续用药6周。实验开始后第3、6和9周对各组大鼠肝脏病理学、细胞凋亡数量、肝纤维化指标水平以及内质网应激相关指标进行检测。结果与其他各组相比,肝纤溶颗粒组纤维增生程度评分下降(P<0.05),肝凋亡数下降(P<0.05);透明质酸、层黏连蛋白、血清Ⅲ型前胶原、血清Ⅳ型胶原水平下降(P<0.05);CHOP、ATF6蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论肝纤溶颗粒组肝纤维化大鼠细胞凋亡数量和肝纤维化水平较复方鳖甲软肝片组下降,差异有统计学意义(P<0.05),肝纤溶颗粒能够改善肝脏病理变化,调节内质网应激相关指标,对临床有指导意义。

肝纤维化的形成机制、动物模型及治疗进展

肝纤维化(hepatic fibrosis)是许多慢性肝病的共同病理过程。随着对肝纤维化尤其是免疫性肝纤维化(immune hepaticfibrosis)形成机制研究的不断深入,肝的巨噬细胞在肝纤维化中的重要作用再次被提出,本文主要对免疫性肝纤维化形成机制,尤其是巨噬细胞在肝纤维化形成中的作用、各种肝纤维化模型及抗肝纤维化药物的研究进展进行了综述。

肺纤维化动物模型

肺纤维化一般指在毒物、自发免疫反应、药物副反应、感染、严重外伤等不同因素刺激下引起肺部炎症反应,以肺泡表面上皮细胞损伤,炎性细胞累积,成纤维细胞增生,细胞外基质沉积和疤痕形成为主要特征,最终导致正常肺组织结构改变、功能丧失的一类疾病,是间质性肺疾病的终末结局。全球超过5百万人患有不同程度的肺纤维化[1]。

红细胞生成素诱导小鼠骨髓纤维化模型的实验研究

本研究旨在利用大剂量人重组红细胞生长素(rhEPO)诱导骨髓纤维化(M F)小鼠模型。60只昆明小鼠分为正常对照和EPO诱导组,分别用生理盐水和rhEPO进行腹腔注射,在实验第6、30、60、90、120和150天每组分别处死5只鼠。用细胞分析仪测定外周血白细胞数、血红蛋白(Hb)水平、红细胞平均体积(MCV)、红细胞分布宽度(RDW)和血小板量;用流式细胞术检测骨髓CD34阳性细胞率,称重肝、脾,计算肝、脾系数,利用HE和网状纤维染色分析肝、脾、股骨病理变化;应用高清CT测定股骨皮质厚度、髓腔直径和腰椎密度。结果表明,与正常对照组相比,EPO组各阶段白细胞轻度增高,但无统计学差异(p>0.05);Hb和RDW在第6和30天增高显著(p<0.05);MCV在第6天增高显著(p<0.05);各阶段血小板数降低,在第120和150天差异显著(p<0.05)。EPO组第60天肝肿大明显,肝系数差异显著(p<0.05);各阶段脾肿大,脾系数差异显著(p<0.05)。EPO组各阶段骨髓CD43阳性细胞率显著增高(p<0.05),第150天CT显示股骨皮质增厚,髓腔变窄,密度不均,腰椎密度增高。病理检查显示,EPO组小鼠肝脂肪化和空泡化,脾脏巨核细胞增多,股骨硬化和骨髓纤维组织增多。结论:大剂量rhEPO可诱导小鼠出现M F特有临床和病理特点。本研究对建立新的M F模型和病理研究有重要意义。

T淋巴细胞介导的小鼠免疫性肝纤维化模型的建立及形态学观察

目的 建立刀豆蛋白A诱导的T淋巴细胞介导的小鼠免疫性肝纤维化模型并进行形态学观察。方法 BALB/C小鼠随机分组。模型组、CD4抗体处理组、CD8抗体处理组、地塞米松处理组和裸鼠组静脉注射刀豆蛋白A ;CD4、CD8抗体处理组、地塞米松注射组和裸鼠组共注射 5周 ,模型组共注射 2 0周 ,分别于相应的时间点取血、取肝脏组织统一保存。检测ALT水平 ,进行肝脏组织苏木精 伊红染色、免疫组织化学染色和VanGieson胶原纤维染色。结果 模型组接受刀豆蛋白A刺激后ALT水平明显高于正常对照组 ,而CD4抗体处理组、地塞米松处理组和裸鼠组ALT水平明显低于模型组 ,CD8抗体处理组ALT水平则与阳性组无明显差异。肝组织冰冻切片免疫组织化学染色提示肝组织内淋巴细胞浸润以CD4+ T淋巴细胞为主。模型组病理检查提示肝纤维化发生。

药物所致肝纤维化动物模型的研究进展

肝纤维化是细胞外基质在肝内过度沉积的病变，是发展为肝硬化的重要中间环节。目前认为，肝纤维化是可逆的，但若没有得到及时有效的治疗，则最终发展为不可逆转的肝硬化、甚至肝癌。因此，如何有效地防治肝纤维化，阻断其进展，已经成为国内外研究的热点。为了研究肝纤维化的发生机制并筛选出有效的治疗药物，需要建立良好的肝纤维化动物模型。

四氯化碳制备不同实验动物肝纤维化模型的研究

由于各种理化因素或炎症长期反复作用于肝脏,引起肝细胞变性、坏死、增生和肝纤维结缔组织的增生和沉积[1],称为肝纤维化。如未及时对其进行控制和治疗,严重者可发展为肝硬化、肝癌,严重威胁人类的健康与生活质量[2]。建立标准和理想的肝纤维化动物模型,模拟人类肝纤维化状态,

中药对肺纤维化动物模型细胞因子表达的影响效果

目的:探讨中药对肺纤维化动物模型细胞因子TNF-ɑ和IL-8表达的影响效果。方法:将120只Wistar大鼠称重后随机分为空白对照组、模型组、中药组和西药对照组,每组30例。采用气管内滴注博来霉素制作肺纤维化模型,各组均灌胃给药,各组大鼠在d28分别处死,观察各组大鼠肺组织匀浆中TNF-ɑ和IL-8的表达,各组进行统计比较。结果:1病理学评分模型组纤维化程度最重,中药组、西药对照组纤维化程度与模型组比较较轻(P<0.01),中药组与西药对照组比较疗效更加明显,差异显著(P<0.05);2与空白对照组比较,模型组、中药组以及西药对照组肺组织中TNF-ɑ和IL-8含量均显著升高,与空白对照组比较均有显著差异(P<0.01);中药组与西药对照组与模型组比较,IL-8含量显著降低(P<0.01),中药组与西药对照组比较,IL-8含量降低程度更加明显(P<0.01)。结论:中药与西药对肺组织中TNF-ɑ和IL-8均具有下调的效果,抑制并延缓肺纤维化的发展,中药的疗效优于西药。

皮肤鳞状细胞癌整体可视化动物模型实验研究

目的:建立整体可视化皮肤癌的模型,以期实时动态观察药物与肿瘤体积、血清指数等指标的量效关系,为研究皮肤癌临床治疗提供一种更好的动物模型。方法:利用pEGFP-N1表达质粒转染皮肤鳞状细胞癌(以下简称鳞癌)SCL-1细胞,经筛选后建立稳定表达绿色荧光蛋白(EGFP)的皮肤鳞癌细胞株pEGFP-SCL-1。细胞悬液接种于裸鼠皮下,借助整体荧光成像系统实时监测细胞在接种部位生长情况。结果:皮肤鳞癌细胞pEGFP-SCL-1稳定、高效表达EGFP,裸鼠皮下注射部位种植成瘤,1周左右肿瘤向周围组织浸润;常规组织病理学检查验证了可视化模型的可靠性。结论:利用稳定转染的皮肤鳞癌pEGFP-SCL-1细胞,在注射部位种植建立整体可视化皮肤鳞癌,为研究皮肤癌治疗提供有效的阶段性监测的实验模型。

大鼠酒精性肝纤维化星状细胞模型的建立

目的探讨建立离体的大鼠酒精性肝纤维化星状细胞模型。方法检测采用不同浓度乙醛干预大鼠第二代肝星状细胞24小时的光密度值。结果乙醛浓度以1.25倍递增,25μmol/L为起始浓度,取对数浓度对增殖效应呈现规则的生长曲线,其刺激浓度(EC50)为71μmol/L。结论选用乙醛浓度为71μmol/L作用于 HSC 24h作为以后的实验大鼠酒精性肝纤维化的细胞模型的浓度。

大鼠睾丸纤维化模型睾丸内细胞增殖的实验研究

目的:探讨大鼠睾丸纤维化模型睾丸内各种细胞的增殖情况。方法采用免疫组化ElivisionTM Plus二步法,观察增殖细胞核抗原在纤维化睾丸中的表达。结果纤维化睾丸内Leydig细胞、成纤维细胞和血管内皮细胞均显著增多。结论各种细胞的增殖是睾丸纤维化和生精障碍的主要原因。