通痹外敷散对大鼠弗氏完全佐剂性膝关节炎的实验研究

目的:观察中药通痹外敷散对弗氏完全佐剂性大鼠急性关节炎的影响,探讨其作用机制。方法:大鼠随机分为模型组及治疗组,分别于右膝关节腔内注弗氏完全佐剂0.1 m L,术前及术后1周、2周、3周分别测定白细胞介素-1β亚型(IL-1β)、透明质酸(HA)含量;测量右足趾关节以下部位的容积,计算各组治疗效果。结果:治疗2周后,治疗组IL-1β明显降低、HA含量明显升高,与治疗前及模型组比较有统计学意义(P<0.05)。治疗组足肿胀度及消肿时间明显优于模型组(P<0.05)。结论:通痹外敷散能有效治疗弗氏完全佐剂性大鼠急性关节炎,其作用可能是通过抑制IL-1β合成、增加HA含量而起到治疗作用。

糖皮质激素受体α基因RNA干扰的生物学效应研究

目的 采用RNA干扰 (RNAinterference ,RNAi)技术 ,通过构建人糖皮质激素受体α(glucocorticoidreceptorα ,GRα)基因的特异性siRNA(smallinterfereRNA)真核表达载体 ,体外观察对GRα基因的沉默作用及生物学效应。方法 采用基因克隆技术 ,将合成的发卡样特异性GRα干扰寡核苷酸序列插入真核表达载体 (pPUR/U6) ,构建GRαsiRNA的表达载体 ,转染体外ECV 3 0 4细胞 ,48h后观测胞内GRα蛋白水平 (Westernblot)及对LPS刺激后细胞因子产生的影响作用。结果 ①成功构建发卡样GRαsiRNA真核表达载体 (pPUR/U6 GRαsiRNA) ;②pPUR/U6 GRαsiRNA转染 (脂质体法 )ECV 3 0 4细胞 ,48h后明显下调胞内GRα蛋白水平 ;③转染pPUR/U6 GRαsiRNA的细胞 ,在LPS刺激后 ,其TNF α、IL 1β的表达释放显著高于空载体对照组。结论 该RNA干扰真核表达载体能明显干扰GRα蛋白的表达、释放 ,结果促进了LPS刺激后炎性细胞因子的表达释放。进一步说明严重创伤所引起的糖皮质激素受体下调是机体应激紊乱的重要原因。