壮骨镇痛胶囊含药血浆培养乳腺癌细胞rac-1,PI3-K转录和细胞伪足的变化

背景:前期实验已证实壮骨镇痛胶囊能显著抑制体外培养乳腺癌细胞的迁移和增殖。目的:进一步观察壮骨镇痛胶囊对高转移人乳腺癌MDA-MB-231细胞rac-1,PI3-K转录和细胞伪足生长的影响。方法:SD大鼠以3倍剂量灌服壮骨镇痛胶囊连续7d,以大鼠含药血浆培养MDA-MB-231细胞24h后,采用扫描电镜法观察不同浓度壮骨镇痛胶囊含药血浆对MDA-MB-231细胞伪足生长的影响,采用RT-PCR法检测含药血浆对MDA-MB-231细胞中rac-1,PI3-K转录的影响。结果与结论:5.0%和1.25%壮骨镇痛胶囊含药血浆能显著抑制MDA-MB-231细胞伪足的形成和生长以及rac-1和PI3-K基因的转录(P<0.05);0.63%壮骨镇痛胶囊含药血浆对伪足生长和rac-1基因转录无显著影响,但可显著抑制了PI3-K基因的转录(P<0.05)。由此推测壮骨镇痛胶囊含药血浆抑制MDA-MB-231细胞迁移可能与其抑制rac-1和PI3-K基因转录进而影响细胞伪足形成和生长密切有关,并且该作用可能与浓度相关。

益气解毒法不同组方对鼻咽癌细胞迁徙运动潜能及细胞伪足的影响

目的研究益气解毒法不同组方对鼻咽癌细胞迁徙运动潜能及其细胞伪足的影响。方法以正常大鼠血浆为对照,分别应用益气解毒方原方及其改方大鼠药物血浆对CNE2Z细胞进行干预,采用划痕实验法评价不同组方药物对靶细胞迁徙运动潜能的影响,以扫描电镜观察细胞伪足形态特征,分析靶细胞的反应特性。结果益气解毒原方对CNE2Z细胞的迁徒运动潜能显示抑制效应,细胞迁徙能力较差,伪足伸展不明显;益气解毒改方则对靶细胞迁徙运动潜能显示为促进效应,细胞伪足伸展长度较长。结论同为益气解毒法的组方,由于剂量构成比不同,各方对鼻咽癌细胞迁徙运动潜能的药效学差异巨大。这样的药理效应特点,对中药复方的合理组方提出了严格要求。

小檗碱通过Ezrin蛋白抑制鼻咽癌细胞迁移和伪足形成

目的观察小檗碱（Berberine，BBR）对鼻咽癌细胞埃兹蛋白（Ezrin）和磷酸化埃兹蛋白（phos-Ezrin）表达的影响以及其对细胞伪足形成和迁移的抑制作用，探讨BBR抗鼻咽癌转移可能的分子机制。方法以体外培养的鼻咽癌细胞株（CNE1）为研究对象，用MTr法分析BBR对CNE1细胞生长的影响，选用BBR细胞无毒性浓度（non-cytotoxic concentration，NCC）进行实验。免疫印迹（Western-blotting）分析CNE1Ezrin和phos-Ezrin的表达。用光镜CNE1观察细胞迁移能力，电子显微镜观察细胞伪足形成。Ezrin小干扰RNA（Ezrin-siRNA）转染阻断Ezrin蛋白表达，进一步确证BBR通过Ezrin抑制细胞伪足形成。结果MTT结果显示，BBR在5μM以上明显抑制CNE1增殖（P〈0．05），浓度（0—5）州对CNE1细胞生长增殖抑制作用不明显，为BBR对CNE1的细胞无毒性浓度（NCC）。BBR在NCC能明显抑制CNE1细胞phos-Ezfin表达，且呈浓度依赖性。光镜观察显示BBR对CNE1细胞迁移有明显的抑制作用。电镜观察结果显示，BBR抑制CNE1细胞伪足形成。结论BBR可能通过抑制Ezfin磷酸化而抑制鼻咽癌CNE1迁移。

伪足、有氧糖酵解与肿瘤细胞迁移的研究进展

肿瘤转移是其预后差的一个首要原因。就像脚作为人类运动必不可少的支撑载体一样,伪足也是肿瘤细胞运动的主要执行者,它决定了肿瘤细胞迁移能力的强弱。细胞伪足的延伸是一个动态循环的过程,由ATP-肌动蛋白复合物牢固结合到伪足的前端,随后ATP水解肌动蛋白脱落,如此周而复始。在此过程中需要大量的ATP参与,而在多种转移性肿瘤中也发现糖代谢过度活跃等异于正常细胞的能量代谢重排现象。因此,代谢产能对肿瘤细胞运动迁移过程起着不可或缺的作用。本文通过文献综述将从能量代谢重排角度探讨代谢产能对伪足形成及肿瘤细胞运动的影响。

白藜芦醇对宫颈癌HeLa细胞表皮生长因子表达的影响

目的:通过体外实验,研究白藜芦醇对宫颈癌细胞表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)表达的影响,探讨白藜芦醇对宫颈癌侵袭影响的作用机制。方法:采用Transwell侵袭系统,检测白藜芦醇对宫颈癌HeLa细胞侵袭能力的影响;扫描电子显微镜,观察白藜芦醇对肿瘤细胞伪足形态的影响;RT-PCR、Western blot法了解白藜芦醇对HeLa细胞EGF mRNA及蛋白表达的影响。结果:Transwell侵袭实验结果表明,白藜芦醇1mM、0.5mM两组平均穿过的细胞数分别为9.20±1.924,10.20±2.049与空白对照组及溶剂对照组(平均穿过的细胞数分别为39.80±2.387,39.00±3.808)相比,明显减少(P<0.05)。RT-PCR及Western blot结果表明,白藜芦醇能够明显降低宫颈癌细胞EGF mRNA及蛋白表达水平。同时,扫描电子显微镜观察到,经白藜芦醇作用后,HeLa细胞逐渐由多角形向圆形转变,周围生长出的片层状、不规则的伪足结构(包括板状伪足和丝状伪足)逐渐减少,伪足变短变细,且断裂增多。结论:白藜芦醇能够有效降低宫颈癌细胞EGF mRNA及蛋白的表达水平,进而对肿瘤细胞侵袭转移所必需的细胞装配—伪足结构的形成数量和质量产生影响。白藜芦醇通过此作用机制达到对宫颈癌细胞侵袭的抑制作用。

岩白菜素对LPS诱导RAW264.7细胞炎性因子产生及细胞形态变化的影响

目的:探讨岩白菜素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导下RAW264.7细胞产生炎性因子及细胞形态变化的影响。方法:以不同浓度岩白菜素作用RAW264.7细胞24、48 h,记录巨噬细胞形态,将RAW264.7细胞随机分为正常对照组、模型组及岩白菜素300、50μg/mL组,各组设置24、48 h处理,处理完毕后,用RT-PCR法检测LPS诱导的RAW264.7细胞内炎性相关因子TNF-α、IL-6、IL-1β及参与细胞骨架调节因子RhoA、Rac1、Cdc42的表达。结果:岩白菜素作用RAW264.7细胞24 h后能显著降低细胞炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达,作用48 h后能显著升高TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达。岩白菜素处理细胞48 h后,巨噬细胞骨架调节因子Rac1、Cdc42 mRNA表达显著上调,RhoA mRNA表达显著下调。结论:一定浓度的岩白菜素处理LPS诱导的RAW264.7细胞24 h,巨噬细胞形态变化不明显,能显著发挥抗炎作用,而当岩白菜素作用时间为48 h时,巨噬细胞伪足增多,炎症反应加强。