Rho激酶抑制剂Y-27632对人U87胶质瘤细胞侵袭能力的影响

目的观察Rho激酶(ROCKS)特异性抑制剂Y-27632对体外培养的U87胶质瘤细胞侵润能力的影响。方法体外培养U87胶质瘤细胞,采用Transwell体外细胞侵润实验,用浓度分别为0、10、25、50μmol/L的Y-27632处理U87细胞,检测下室中洗脱液的吸光度值(OD值)比较不同浓度的Rho激酶抑制剂Y-27632对人U87胶质瘤细胞侵袭能力的影响。实验结果用SPSS 17.0进行方差分析。结果 Transwell小室培养的U87胶质瘤细胞洗脱液的OD值分别为(0.28±0.052)、(0.22±0.046)、(0.17±0.023)、(0.12±0.034)。其中当Y-27632浓度为25μmol/L时其OD值与对照组统计学处理差异有统计学意义(P<0.05);50μmol/L时其OD值与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);25μmol/L组与50μmol/L组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论适当浓度下Rho激酶抑制剂Y-27632能明显抑制U87胶质瘤细胞的体外侵润能力。

去整合素基质金属蛋白酶19抑制人正常胎盘来源滋养层细胞的侵润能力

去整合素基质金属蛋白酶19(ADAM-19)是新近发现的ADAMs家族成员,在胎盘组织中有较高水平的表达,但其在胎盘发生过程和滋养层细胞侵润中的功能还是未知的.我们以人正常胎盘来源的细胞滋养层细胞(NPC)为体外模型,利用基因转染、RT-PCR、蛋白质印迹、免疫组织化学及细胞侵润分析等手段,证实ADAM-19在人胎盘组织中有特异表达,存在于多种滋养层细胞中;转化生长因子β1(TGF-β1)可以显著上调NPC细胞中ADAM-19的表达,呈现剂量依赖性;过表达hADAM-19可使NPC细胞中MMP-9的mRNA和蛋白质表达下调,并降低细胞的侵润能力.研究结果表明,人滋养层细胞中存在ADAM-19表达的旁分泌调节机制,而ADAM-19在调节滋养层细胞侵润中发挥一定作用.这一结果为阐明ADAM-19在胎盘发生中的功能提供了新的科学资料.

ADAM19在人胎盘组织中的表达及其对滋养层细胞侵润、黏附的影响

去整合素基质金属蛋白酶19(a disintegrin and metalloproteinase 19,ADAM19)是新近发现的ADAMs(a disintegrin and metalloproteinase)家族新成员,在人胎盘组织中有较高水平的表达,但其在胎盘发生过程中母胎界面的时空表达及功能还鲜有报道.本研究首次就ADAM19在正常胎盘中的时空表达进行了研究,并以人绒毛膜癌细胞系JEG-3细胞为体外研究模型分析了ADAM19对滋养层细胞侵润和黏附的影响及其机理.研究结果显示,从空间上看,ADAM19在多种滋养层细胞中有广泛的分布,包括细胞滋养层细胞(vctb)、合体滋养层细胞(stb)和滋养层细胞柱(ct),绒毛内毛细血管的内皮细胞等.RT-PCR和Western印迹分析显示在孕早期8,9周龄绒毛中ADAM19的表达量较高,但在26周和足月胎盘中其mRNA和蛋白水平均明显下调.在JEG-3细胞中瞬时转染ADAM19可以降低其侵润能力同时增强细胞间的黏附.研究结果提示,ADAM19可能是胎盘发生过程中非常重要的滋养层细胞功能的调节分子.

病毒/细胞同步侵染体系筛选抗植物病毒剂的研究

本文采用病毒 /细胞同步侵染体系筛选 3种植物抽提物抗 TMV增殖及对叶绿体的保护作用 ,其中射干抽提物处理转染烟草细胞 96h后对病毒增殖抑制率为 76.0 % ,吴茱萸抽提物抑制病毒对叶绿体的破坏作用达到 89.58% ,筛选出了作用方式不同的抗病毒物质。用植物整株法和大田试验比较病毒 /细胞同步侵染体系测定的结果相近 ,因此病毒

侵染细胞中一种内含物的组化研究

在大豆根瘤中有一种非常特殊的细胞质内含物,只存在于侵染细胞中,一个细胞通常只有一个,一般位于细胞的外周部分,常常靠近胞间隙。这种内含物通常为圆形,其直径在1—2μm之间,主要由颗粒状物质、管状和泡状成分组成。它经甲苯胺蓝O染色后呈深蓝色,苏丹黑B染色后呈深黑色,考马斯蓝染色后呈蓝色,因此它不是类聚核糖核蛋白体,也不是一般的蛋白体和脂滴或脂质体,而可能是一种蛋白质和脂的复合物。其作用可能与共生固氮中的能量转换和供应有关。

红豆草根瘤侵染细胞中液泡内含物的超微结构特征

用透射电镜研究了红豆草(Onobrychisviciifolia)根瘤侵染细胞中液泡内含物的超微结构特征.结果表明,早期发育侵染细胞的液泡中只含有少量的纤维状物质.随着细胞的发育,液泡不断变大,液泡中的纤维状物质和膜状物质越来越多.在中央液泡形成后,液泡中的纤维状物质逐渐减少,类细胞质、泡状和膜状物质明显增多,它们常由一层来自液泡膜的膜包围,其形状一般近似圆形或椭圆形.液泡内含物的大量出现可能与红豆草及其根瘤具有高度的抗旱性有关.

豌豆根瘤发育中侵染细胞核的超微结构变化

用透射电镜研究了豌豆根瘤发育中侵染细胞核的超微结构变化。早期发育的侵染细胞核较大 ,近似圆形或椭圆形 ,核膜开始内陷。随着细胞的发育 ,细胞核变小 ,形状趋向扁平 ,核膜内陷增加 ,逐渐出现浓的染色质。在细胞衰老后 ,细胞核再度减小 ,核膜内陷加剧 ,浓的染色质增多。在早期的解体细胞中 ,虽然细胞质、细胞器和类菌体已经消失 ,但细胞核仍然清晰可见 ,只是浓的染色质进一步增多 ,常常位于核膜附近和核膜上。还讨论了侵染细胞核超微结构的特征和对细胞衰老的稳定性。

促性腺激素释放激素(GnRH)对人绒毛膜上皮癌细胞系JEG-3侵润性的调节

促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是生殖过程中起重要调节作用的激素.近年来的研究发现,Ⅰ型GnRH(GnRHⅠ)和Ⅱ型GnRH(GnRHⅡ)在胎盘和胎盘来源的滋养层细胞中发挥生理功能.利用人滋养层细胞模型人绒毛膜上皮癌细胞系(JEG-3)细胞,探讨GnRHⅠ和GnRHⅡ对人滋养层细胞侵润的调节作用.荧光实时定量PCR证实,GnRHⅠ和GnRHⅡ可调节JEG-3细胞中经典GnRH受体(GnRHRⅠ)的表达.RNA干扰实验显示,特异性针对GnRHRⅠ的siRNA可显著阻断GnRHⅠ对JEG-3细胞的促侵润作用,但不能影响GnRHⅡ的促细胞侵润功能,提示GnRHⅡ可能通过经典GnRH受体以外的其他受体介导,以发挥促进滋养层细胞侵润的功能.对信号通路的进一步研究表明,GnRHⅠ和GnRHⅡ通过ERK和JNK激酶级联促进基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达,以调节细胞的侵润.

豌豆根瘤侵染细胞发育中造粉体的研究

透射电镜研究表明 ,在豌豆根瘤侵染细胞发育过程中 ,造粉体的形态结构处在变化之中。在发育早期 ,造粉体较多 ,分布在细胞壁附近。它的基质很少 ,多含有呈长梭形的、电子密度非常低的淀粉粒 ,并有一些电子密度较高的条带结构。随着细胞的发育 ,造粉体逐渐移至胞间隙周围 ,不断变小 ,切面近似椭圆形或圆形。进一步发育时 ,造粉体中的淀粉粒越来越小 ,几乎都近似椭圆形或圆形。与此相反 ,造粉体基质明显增多 ,常含一些嗜锇颗粒 ,有时还有一种特殊的泡状结构。在衰老细胞中 ,造粉体很少 ,但不含淀粉粒的质体经常可见 ,在造粉体附近常有较多的线粒体和内质网。还讨论了豌豆根瘤侵染细胞中造粉体的变化规律及其与细胞发育和固氮的关系。

红豆草根瘤侵染细胞的超微结构变化

红豆草(Onobrychis viciaefolia Scop.)是一种抗旱、耐寒、耐热和耐瘠薄的优良豆科牧草,不仅是很好的饲料和绿肥,而且还能大量结瘤固氮,提高土地肥力。因此,它在我国甘肃和其他北方干旱和半干旱贫瘠地区广为种植。虽然不少学者曾对它的引种条件、生产性能、营养成分和形态解剖作过许多研究,但对其共生固氮,特别是与共生固氮息息相关的根瘤在发育中的变化却至今尚无系统报道。因此,为了更好开发利用这一资源,

大豆根瘤侵染细胞发育中高尔基体的变化

为了探讨高尔基体与细菌增殖和周膜扩展的关系,用电子显微镜研究了大豆根瘤侵染细胞发育中高尔基体的变化。结果表明:幼龄侵染细胞中有高尔基体,但在成熟和衰老的侵染细胞中却几乎没有这种结构。高尔基体随幼龄侵染细胞中细菌的增多而增多,它们主要位于细菌附近。这些高尔基体的生理活性较高,不断向周围的细胞质分泌含有纤维状物质的小泡,有的小泡还在向细菌运动。一些小泡位于细菌的周膜上,其附近细菌的周膜常向外形成隆起,并有纤维状物质出现在其中。由此说明,大豆根瘤侵染细胞中的高尔基体参与了细菌的增殖和周膜的扩展。

豆科根瘤非侵染细胞的形态结构研究

非侵染细胞是豆科根瘤中一种非常重要的细胞,它不仅参与了根瘤共生固氮,而且还在其中起了极为重要的作用,这些作用的发挥与其具有与此相适应的形态结构和分布有关。非侵染细胞体积小、数量少,分散于侵染细胞之间。在大豆根瘤中,它们彼此相连接,形成一条条的线和一个个的面,由根瘤中心向四周辐射,直至与皮层细胞相接,其作用可能与根瘤中心组织和皮层细胞之间的物质运输,特别是固氮产物的输出密切有关。非侵染细胞与侵染细胞之间的主要差异在于它不含细菌,中央有一个大液泡,细胞质中含有大量的过氧化物酶体和许多膨大的管状内质网,而且细胞壁上还有丰富的胞间连丝和纹孔,但主要存在于非侵染细胞与非侵染细胞之间的连接壁上。

红豆草根瘤侵染细胞核在细胞凋亡中的超微结构变化

用透射电镜观察红豆草根瘤侵染细胞核在细胞凋亡过程中的超微结构,以探讨红豆草根瘤侵染细胞核在发育过程中的超微结构变化及其与细胞凋亡的关系.结果表明,红豆草根瘤侵染细胞核的超微结构随细胞发育程度不同而不同.在幼龄侵染细胞中,细胞核体积较大,近似圆形.在即将成熟和成熟的侵染细胞中,细胞核膜有内陷现象,其核仁常具有核仁泡和核仁联合体.在早期凋亡的侵染细胞中,细胞核体积减小,形状变得不规则,核膜出现大量内陷,在其表面形成许多大的突起和深的沟槽,有时还有内质网、线粒体、小液泡和细菌等位于核膜的内陷处,而且核仁也开始裂解.在后期凋亡的侵染细胞中,除细菌解体外,还出现核仁消失,核膜破裂,核质外流,并在细胞质中形成一些电子密度很高,无一定形状的团块状物质.

豌豆根瘤侵染细胞中核仁联合体的超微结构研究

用透射电镜研究了豌豆根瘤细胞中核仁联合体的超微结构 ,核仁联合体普遍存在于豌豆根瘤即将成熟或已成熟的侵染细胞中 ,其他发育阶段的侵染细胞以及非侵染细胞一般没有这种结构 .核仁联合体体积很小 ,近似圆形 ,电子密度较高 ,质地较均匀 ,表面无包围膜 ,它通常位于大核仁附近 ,但与大核仁之间总有一定的界限 .大核仁电子密度较高 ,质地不均匀 ,有时有一个体积很大的核仁泡位于其中 .还讨论了核仁联合体的出现与细胞生理活动的关系 .

羊奶果根瘤侵入线和被侵染细胞的亚显微结构

羊奶果根瘤的侵入线，总是在几个相邻细胞的细胞间隙中出现。在根瘤发生部位未出现根毛的变形。侵入线似一囊状物，其内含物有丝状物和基质，侵入线的壁部分或全部加厚，并与周围的寄主细胞壁相连。侵入线呈多种形态，在被侵染细胞中，细胞核膨大，并分叉变成指状核。随着细胞的衰老，被侵染细胞中的内生菌、细胞器也逐渐消失。

侵染细胞质膜附近小泡的来源及其作用

箭舌豌豆根瘤幼龄侵染细胞的壁和质膜比较光滑，成熟侵染细胞与此不同，不仅细胞壁厚薄不均，有较多的胞间连丝，而且质膜常常内陷形成各种突起，然后脱离质膜形成小泡。这些位于质膜附近的小泡体积较小，多呈圆形，既可单独存在，也可多个聚在一起。在向细胞中央移动中，有的小泡靠近细胞质膜，甚至与细菌周膜融合。有的小泡还可与附近的小液泡融合变为较大液泡，并常有降解程度不同的细菌位于其中。在衰老侵染细胞中，细胞壁附近有小泡。

猪流行性腹泻病毒SHpd/2012株侵染Vero细胞特性分析

为了探究PEDV(猪流行性腹泻病毒)流行毒株SHpd/2012侵染细胞的特性,研究采用IFA(间接免疫荧光)及绘制病毒一步生长曲线等方法,对感染PEDVSHpd/2012株后的Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)病变过程进行研究。结果发现,CPE(细胞病变)主要表现为细胞肿胀、变圆、皱缩、聚集成合胞体甚至从培养瓶壁大量脱落。IFA结果显示,接毒后12h病毒开始增殖,在接毒后36h时感染细胞数量最多,其后病毒增殖速度逐步下降,60h时趋于平稳。病毒一步生长曲线结果显示,SHpd/2012株感染细胞后24~60h的毒价一直处于较高水平,60h后开始下降。此外,本研究成功克隆并真核表达了PEDV S蛋白,为研究PEDV与受体蛋白的互作及病毒的致病机制奠定基础。

豌豆根瘤侵染细胞衰老过程的电镜观察

用透射电镜观察了豌豆根瘤侵染细胞在衰老过程中的超微结构变化,结果表明,侵染细胞和拟菌体的衰老有一定的规律和特征,首先是一些包裹拟菌体的包囊变得疏松,包囊和拟菌体之间出现较大间隙,间隙中常有一些纤维状和泡状物质。然后,细胞质失去正常结构,逐渐凝聚为染色很深的团块,进而完全泡状化。伴随着拟菌体的衰老,寄主细胞质染色由深变浅,细胞器逐渐减少。最后,液泡和质膜相继破裂,细胞完全瓦解。有时在衰老细胞的胞间隙,或在衰老的细胞质中有一些年轻的细菌,甚至在一片崩溃的拟菌体中还有侵染丝,有的还正在向寄主细胞质释放细菌。

肿瘤组织内肿瘤侵润淋巴细胞和前列腺癌术后复发的关系

目的探讨前列腺癌肿瘤侵润淋巴细胞(TIL)与前列腺癌患者术后复发的关系,为临床上研究和预防前列腺癌术后复发提供理论及实验依据.方法采用流式细胞仪对81例前列腺癌根治术术后肿瘤组织内CD3^+、CD8^+、CD3^+CD4^+和CD3^+CD8^+TIL细胞进行测定分析,回顾性比较前列腺癌术后<3 a(A组)、3~5 a内(B组)及>5 a无复发(C组)的患者肿瘤组织内CD3^+CD8^+TIL细胞比例,对比分析各组前列腺癌术后复发与肿瘤组织内CD3^+CD8^+TIL细胞比例的关系.结果行前列腺癌根治术患者3 a内复发患者(A组)较3~5 a复发患者(B组)和5 a内无肿瘤复发患者(C组)CD3^+CD8^+TIL细胞比例明显较低(P<0.05),而C组患者CD3^+CD8^+TIL细胞比例较A、B 2组明显升高(P<0.05),3组患者中CD3^+、CD8^+、CD3^+CD4^+细胞比例则无明显统计学差异(P>0.05).结论对于可手术切除前列腺癌患者,其肿瘤内CD3^+CD8^+TIL细胞比例与前列腺癌术后复发有相关性,其可能作为监测前列腺术后复发的一个生物学指标,为临床预防或控制前列腺癌的术后复发转移提供新的思路.