细胞信号负调控因子3调控Wnt/β-Catenin信号通路对肿瘤干细胞的影响及其在脑胶质母细胞瘤中的应用

背景:有研究表明,细胞信号负调控因子3、Wnt/β-Catenin信号通路与脑胶质母细胞瘤的发生密切相关。目的:探讨细胞信号负调控因子3与Wnt/β-Catenin信号通路对肿瘤干细胞的影响及在治疗脑胶质母细胞瘤中的作用机制。方法:从手术切除的脑胶质母细胞瘤标本中,分离、培养及鉴定脑肿瘤干细胞。反转录PCR扩增细胞信号负调控因子3基因,转染至脑胶质母细胞瘤干细胞。反转录PCR、Western blot检测细胞信号负调控因子3转染前后,脑胶质母细胞瘤干细胞中细胞信号负调控因子3、信号转导与转录活化因子3、β-Catenin及抑癌因子人第10号染色体缺失磷酸酶及张力蛋白同源基因mRNA及蛋白的表达。结果与结论:高表达细胞信号负调控因子3可能通过抑制信号转导与转录活化因子3的表达,从而抑制Wnt/β-Catenin通路的传导,以增强人第10号染色体缺失磷酸酶及张力蛋白同源基因活性,降低胶质瘤细胞增殖及侵袭能力同时诱导细胞凋亡,为脑胶质母细胞瘤的靶向治疗提供新的途径。

干扰素调控因子3:细胞抗病毒反应的核心转录因子

固有免疫系统是宿主抵御病毒入侵的第一道防线.Ⅰ型干扰素是关键的抗病毒细胞因子,它在细胞建立抗病毒状态的过程中发挥了核心的作用.Ⅰ型干扰素的诱导表达是固有免疫的重要调节与效应机制.已有的研究表明:多种转录因子(NF-kappa B、ATF-2/c-Jun、IRF3、IRF7)通过在Ⅰ型干扰素的转录调控区形成稳定的转录增强复合物(enhanceosome),迅速并大量地诱导Ⅰ型干扰素表达.体内与体外的生物学分析已确立,干扰素调控因子3(IRF3)是介导细胞表达Ⅰ型干扰素最关键的转录因子,其转录活力与生物学功能直接影响细胞的抗病毒的能力.近年来,IRF3相关的细胞信号转导与调控机制等研究取得重大进展.围绕IRF3的结构、功能以及分子调控机制等方面,概述相关的研究进展,并做前沿展望。

沉默SOCS3对TNF-α诱导3T3-L1前体脂肪细胞凋亡的抑制作用

【目的】运用si RNA沉默小鼠前体脂肪细胞3T3-L1的细胞信号负调控因子3基因(SOCS3),探讨SOCS3在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导3T3-L1细胞凋亡中的作用。【方法】体外培养3T3-L1细胞,用0,20,40,60,80,100,150,200 ng/mL TNF-α处理细胞24 h后,观察细胞凋亡情况。利用脂质体LipofectamineTM2000,用化学合成的SOCS3小干扰RNA(si RNA)转染3T3-L1细胞,用100 ng/mL TNF-α刺激24 h,荧光显微镜下观察细胞凋亡的变化,RT-PCR检测SOCS3、c-myc和survivinmRNA的表达情况。【结果】SOCS3 si RNA抑制了3T3-L1细胞中SOCS3 mRNA的表达(P<0.05)。与空白对照组相比,SOCS3 si RNA组的SOCS3 mRNA表达量极显著减少,c-myc和survivinmRNA的表达水平极显著或显著升高,而脂质体组和阴性对照组无显著差异。【结论】体外试验结果证明,靶向抑制SOCS3基因表达可以有效抑制TNF-α诱导的3T3-L1细胞凋亡。

组织TIPE2、Cath-D、GPX3与PTC发病关系及预测术后复发的相关性

目的探讨组织免疫负调控分子肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)、组织蛋白酶D(Cath-D)、谷胱甘肽过氧化物酶3(GPX3)与甲状腺乳头状癌(PTC)发病及预测术后复发的相关性。方法选取2020年6月至2021年12月于新乡市中心医院接受手术治疗的176例(均完成1年随访)PTC患者为PTC组,同期176例甲状腺良性结节患者为对照组,根据PTC患者术后1年复发情况将其分为复发(64例)和未复发(112例)两个亚组。比较两组TIPE2、Cath-D、GPX3表达情况,比较复发和未复发患者癌组织中TIPE2、Cath-D、GPX3表达情况,比较不同病理学参数PTC患者癌组织中TIPE2、Cath-D、GPX3表达情况,分析组织中TIPE2、Cath-D、GPX3表达情况与PTC发病、PTC病理学参数及术后复发的相关性,偏回归分析PTC患者术后复发的影响因素。结果PTC组癌组织中TIPE2、GPX3阳性表达率低于对照组,Cath-D阳性表达率高于对照组(P<0.05);复发患者癌组织中TIPE2、GPX3阳性表达率低于未复发患者,Cath-D阳性表达率高于未复发患者(P<0.05);不同病理学参数PTC患者癌组织中TIPE2、GPX3阳性表达率比较:Ⅰ~Ⅱ期高于Ⅲ~Ⅳ期,高中分化高于低分化,无淋巴结转移高于有淋巴结转移(P<0.05);不同病理学参数PTC患者癌组织中Cath-D阳性表达率比较:Ⅰ~Ⅱ期低于Ⅲ~Ⅳ期,高中分化低于低分化,无淋巴结转移低于有淋巴结转移(P<0.05);PTC发病、复发、临床分期、分化程度、淋巴结转移与组织中TIPE2、GPX3阳性表达率呈负相关,与Cath-D阳性表达率呈正相关(P<0.05);Logistic回归分析发现,PTC患者癌组织TIPE2、GPX3阳性表达是PTC患者术后复发的保护因素,Cath-D阳性表达为危险因素(P<0.05)。结论组织中TIPE2、Cath-D、GPX3阳性表达率与PTC发生发展相关,且是PTC患者术后复发的影响因素。

低氧诱导因子-3α的研究进展

低氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)是细胞应对氧气水平降低时的主要调节因子,具有调控与细胞缺氧应激相关基因表达的作用。HIF是由1个不稳定的氧气浓度依赖的α亚基(HIF-α)和1个稳定的不受氧气调节持续表达的β亚基(HIF-β)组成的异源二聚体。人的序列同源性的α亚基有3种,包括HIF-1α、HIF-2α和HIF-3α。相对于HIF-1α和HIF-2α亚基,对HIF-3α亚基的研究还是相对匮乏的。HIF-3α被认为是HIF-1α和HIF-2α的负调控因子,由于其具有多种剪接变异体,因此HIF-3α参与多种生理功能。该综述对HIF-3α的结构,剪接变异体,表达调控及其各种生理功能进行了系统的阐述,并对今后的研究方向进行了展望。

食管鳞癌与细胞因子信号转导负调控因子3及其DNA甲基化的关系

目的检测食管鳞癌（ESCC）组织中细胞因子信号转导负调控因子3（SOCS3）的DNA甲基化、mRNA及蛋白表达水平，探讨其在食管鳞癌发生、发展、浸润和转移中的作用。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）、Real—Time聚合酶链反应（PCR）和Westernblot法分别检测43例食管鳞癌组织中SOCS3的DNA甲基化、mRNA和蛋白表达水平，并与相应的癌旁正常食管组织进行对照研究，分析其与临床病理参数的关系。结果（1）食管鳞癌组织SOCS3DNA甲基化的阳性率（79．1％）明显高于癌旁组织（14．0％，P〈0．01）；（2）食管鳞癌组织SOCS3mRNA相对表达强度比值（0．53±0．30）明显低于癌旁组织（1．15±0．44，P〈0．01），食管鳞癌组织中甲基化组的SOCS3mRNA表达（0．45±0．24）显著低于非甲基化组（0．86±0．29，P〈0．05）；（3）食管鳞癌组织SOCS3蛋白表达（1．66±0．22）显著低于癌旁组织（1．83±0．15，P〈0．01），食管鳞癌组织中甲基化组SOCS3蛋白表达（1．61±0．21）显著低于非甲基化组（1．87±0．15，P〈0．01）；（4）在TNM分期中Ⅲ期组表达均低于I～Ⅱ期组（P〈0．05），伴有淋巴结转移组表达也都低于无淋巴结转移组（P〈0．05），未发现其在性别、年龄、家族史、吸烟史中有明显差异（P〉0．05）；（5）食管鳞癌组织中SOCS3mRNA表达及其蛋白表达水平与肿瘤分化级别呈正相关（0．301〈r〈1，P〈0．05），与TNM分期、淋巴结转移呈负相关（-1〈r〈-0．301，P〈0．05）。结论食管鳞癌组织中SOCS3 DNA甲基化阳性率高，导致SOCS3基因表达下调，与食管鳞癌的分化、浸润和转移密切相关。

口腔鳞状细胞癌中SOCS3及其DNA甲基化的表达及生物学意义

目的:研究口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)的DNA甲基化及蛋白表达水平,探讨其在OSCC发生、发展、浸润和转移中的作用。方法:采用甲基化特异性焦磷酸测序技术(Pyrosequencing)和Western blot法分别检测100例口腔鳞状细胞癌组织中SOCS3的DNA甲基化及蛋白表达水平,并与20例正常口腔黏膜组织进行对照研究,分析其与OSCC临床病理参数的关系。结果:1)OSCC组织SOCS3 DNA甲基化的阳性率为85%,显著高于正常口腔黏膜组织的20%(P<0.05);2)OSCC组织中SOCS3蛋白表达(1.76±0.12)明显低于正常口腔黏膜组(1.93±0.25),差异有统计学意义(P<0.01)。口腔鳞状细胞癌组织中甲基化组SOCS3蛋白表达(1.72±0.21)显著低于非甲基化组(1.92±0.23),差异有统计学意义(P<0.01);3)在TNM分期中Ⅲ期组表达均低于Ⅰ～Ⅱ期组(P<0.05),伴有淋巴结转移组表达也低于无淋巴结转移组(P<0.05);4)口腔鳞状细胞癌组织中SOCS3蛋白表达水平与肿瘤分化级别呈正相关(r=0.416,P<0.05),与TNM分期、淋巴结转移呈负相关(r=-0.357,P<0.05)。结论:口腔鳞状细胞癌组织中SOCS3 DNA甲基化阳性率高,导致SOCS3基因表达下调,与口腔鳞状细胞癌的分化、浸润和转移密切相关。

人类免疫缺陷病毒-1负调控因子通过调控糖原合成酶激酶-3β/β连环蛋白信号通路促进人类疱疹病毒8型病毒白细胞介素6诱导血管生成

目的 探讨糖原合成酶激酶（GSK）3β/β连环蛋白信号通路在HIV 1负调控因子（Nef）蛋白促进人类疱疹病毒8型（HHV-8）病毒白细胞介素6（vIL-6）诱导血管生成中的作用.方法 将GSK-3β突变质粒GSK-3β-S9A、显性负相质粒GSK 3β-DN及其对照质粒pcDNA3.1＋分别转染稳定表达HHV-8 vIL-6、HIV-1-Nef以及共表达vIL-6和Nef蛋白的内皮细胞,观察EA.hy 926细胞微管形成;将上述转染质粒的细胞接种鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）检测血管生成情况;Western印迹法检测转染上述质粒的细胞及CAM组织中GSK-3β/β连环蛋白通路中信号分子的表达水平.计量资料两两比较采用t检验.结果 转染GSK-3β-DN降低GSK-3β活性,能增强HIV-1 Nef蛋白促进vIL-6诱导微管形成（3.42比2.51,t=3.67,P＜0.01）和血管生成（6.25比3.97,t=4.06,P＜0.01）的能力.转染GSK-3β-S9A活化GSK-3β,则能显著抑制Nef蛋白的上述功能（0.62比2.51,t=8.48,P＜0.01;0.39比3.97,t=8.59,P＜0.01）.转染GSK-3β-DN后,细胞或组织中信号通路下游β连环蛋白（细胞中：3.53比2.07,t=6.60,P＜0.05;组织中：2.76比1.74,t=17.40,P＜0.01）、血管内皮生长因子（VEGF,细胞中：2.68比1.87,t=4.28,P＜0.01;组织中：2.20比1.39,t=7.08,P＜0.01）的表达升高;转染GSK-3β-S9A后,GSK-3β的磷酸化水平降低（细胞中：0.50比1.47,t=7.33,P＜0.01;组织中：0.35比1.97,t=10.72,P＜0.01）,β连环蛋白（细胞中：1.05比2.62,t=29.50,P＜0.01;组织中：0.79比1.77,t=5.72,P＜0.01）、VEGF（细胞中：0.74比2.16,t=20.95,P＜0.01;组织中：0.43比1.65,t=11.89,P＜0.01）的表达也随之减少.结论 GSK-3β/β连环蛋白信号通路参与调控HIV-1 Nef蛋白促进HHV-8 vIL-6诱导血管生成,极可能成为临床治疗艾滋病患者卡波齐肉瘤的一个潜在分子靶点.

MTT法测定细胞因子信号负调控因子3稳转乳腺癌细胞株对他莫昔芬的耐药性

目的 MTT法检测细胞因子信号负调控因子3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)稳转乳腺癌细胞株对他莫昔芬(tamoxifen,TAM)的耐药性。方法用慢病毒LV-SOCS3(5775-1)感染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,经氨苄西林筛选及扩增后,建立SOCS3稳转乳腺癌细胞株。常规培养正常及SOCS3稳转人乳腺癌MDA-MB-231细胞,并分别加入不同浓度的TAM(0、10、20、30、40μmol/L),采用MTT法检测各组细胞的相对增殖率。结果相同TAM浓度下,SOCS3稳转人乳腺癌MDA-MB-231细胞的相对增殖率明显低于人乳腺癌MDA-MB-231细胞(P<0.05)。结论 SOCS3稳转细胞株对TAM耐药性显著降低,为内分泌治疗耐药的乳腺癌患者提供了一种新的治疗方法。

SOCS3过表达对乳腺癌细胞侵袭能力的影响及作用机制

目的探讨细胞因子信号负调控因子3(SOCS3)过表达对乳腺癌细胞侵袭能力的影响及可能的作用机制。方法采用慢病毒转染法构建SOCS3过表达乳腺癌细胞MDA-MB-23。取对数生长期SOCS3过表达乳腺癌细胞MDA-MB-231作为观察组、乳腺癌细胞MDA-MB-231作为对照组,采用Transwell小室法检测两组细胞侵袭能力,采用RT-PCR法、Western blotting法检测丝-苏氨酸蛋白激酶(AKT)mRNA和蛋白相对表达量。结果观察组穿膜细胞数为(310±9)个,对照组为(396±12)个,两组比较P<0.05。观察组AKT mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.877±0.015、111±8,对照组分别为1.065±0.021、127±10,两组比较P均<0.05。结论 SOCS3过表达可抑制乳腺癌细胞侵袭能力,其机制可能与抑制磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/AKT通路有关。

SOCS3过表达细胞模型的建立

目的建立体外高表达细胞因子信号转导负调控蛋白3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)的细胞模型,为进一步研究SOCS3在炎症因子信号通路中的作用机制提供研究手段。方法通过RT-PCR克隆SOCS3的编码片段,连接至pIRES2-EGFP真核表达质粒,经测序鉴定后,转染至293T细胞。通过荧光显微镜观测转染效率,RT-PCR和Western印迹法检测SOCS3表达情况,同时检测SOCS3高表达对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的信号转导和转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)磷酸化的影响。结果经测序证实,pIRES2-EGFP-SOCS3重建质粒中的SOCS3序列完全正确,转染后细胞中可见明显绿色荧光,且SOCS3在mRNA和蛋白水平表达均显著增加,过表达SOCS3可显著抑制由LPS诱导的STAT3的磷酸化。结论成功构建SOCS3基因重组质粒,转染293T细胞,获得高表达具有功能性SOCS3分子。该细胞模型建立为进一步研究SOCS3的调节机制提供了有利工具。

LncRNA MALAT1调节miR-383-5p/SOCS3轴对人牙周膜干细胞的影响

目的探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)调控微小RNA-383-5p(microRNA-383-5p,miR-383-5p)/细胞因子信号转导负调控因子3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)轴对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)增殖、凋亡及成骨分化的影响。方法LPS处理hPDLSCs后用靶向MALAT1的小干扰RNA(small interfering RNA-MALAT1,si-MALAT1)或miR-383-5p抑制物(miR-383-5p inhibitor,in-miR-383-5p)或SOCS3过表达质粒(SOCS3)转染,ELISA检测炎症因子水平;RT-qPCR和Western blot检测转染效率;CCK-8和TUNEL检测细胞增殖、凋亡;使用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红S(alizarin red S,ARS)染色分析成骨分化;Western blot对增殖、凋亡以及成骨分化相关蛋白进行检测。生物信息学与双荧光素酶实验分析miR-383-5p与MALAT1/SOCS3之间的关系。结果LPS可诱导hPDLSCs细胞炎症和凋亡,降低了细胞增殖能力和成骨分化程度;同时上调MALAT1和SOCS3表达,下调miR-383-5p表达(P<0.05)。敲低MALAT1可明显降低LPS诱导的hPDLSCs细胞炎症反应、凋亡能力,细胞增殖能力和成骨分化程度增加;同时还可上调miR-383-5p表达,下调SOCS3表达(P<0.05)。此外,回复实验表明,抑制miR-383-5p表达或上调SOCS3表达可部分逆转MALAT1敲低后对LPS诱导的hPDLSCs细胞的影响(P<0.05)。进一步分析验证,MALAT1海绵化miR-383-5p靶向调控SOCS3表达(P<0.05)。结论敲低MALAT1可通过调节miR-383-5p/SOCS3轴改善炎症状态下hPDLSCs的增殖、凋亡和成骨分化。

SOCS3及促炎因子在大鼠重症急性胰腺炎早期炎症反应中的变化

目的观察细胞因子信号负调控因子3(SOCS3)与促炎因子在大鼠重症急性胰腺炎(SAP)早期炎症反应过程中的变化,为SAP的早期治疗提供实验依据。方法 32只SD雄性大鼠随机分成对照组和SAP6h、12h、24h组;采用逆行胰胆管注射4%牛磺胆酸钠制备大鼠SAP模型;检测血清淀粉酶(AMY)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平;HE染色观察胰腺和肾脏病理形态学改变,ELISA、RT-qPCR检测血清TNF-α、IL-1β、IL-18表达情况,免疫组化、RT-qPCR检测肾脏SCOS3活化情况。结果与对照组比较,SAP各组血生化指标、炎症因子表达随造模时间延长明显升高,胰腺及肾脏损伤程度逐步加重(P<0.05);SAP各组SOCS3表达水平明显高于对照组,且与促炎因子表达趋势一致,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SAP早期炎症因子的大量释放伴随着胰腺及胰外脏器的损伤,SOCS3参与SAP早期的脏器损伤过程,可能在炎症反应过程中起调节作用。

血清热休克蛋白70、细胞因子信号转导负调控因子3与妊娠期高血压患者免疫因子的关系及其预测价值分析

目的探讨血清热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)、细胞因子信号转导负调控因子3(suppressor of cytokine signaling-3,SOCS-3)与妊娠期高血压患者免疫因子的关系,并分析两项指标对妊娠期高血压的预测价值。方法选择2016年1月至2018年2月宜昌市第二人民医院收治的妊娠期高血压患者86例,根据疾病严重程度分为子痫前期和重度子痫前期组51例和子痫组35例,另选择同期正常妊娠妇女40名作为对照组。检测各组血清HSP70、SOCS-3浓度和血浆免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)、补体C3、补体C4浓度,分析血清HSP70、SOCS-3浓度与免疫因子的相关性,并应用ROC曲线分析血清HSP70、SOCS-3对妊娠期高血压的预测价值。结果子痫前期和重度子痫前期组血清HSP70的浓度为(3.92±0.35) μg/L ,子痫组为(6.45±0.78) μg/L ,显著高于对照组[(0.36±0.07) μg/L],差异有统计学意义(t值分别为63.272、49.202,P均<0.05)。子痫前期和重度子痫前期组SOCS-3浓度为(0.22±0.08) ng/L,子痫组为(0.10±0.03) ng/L,显著低于对照组[(0.62±0.11)ng/L],差异有统计学意义(t值分别为-20.078、-27.079,P均<0.05),子痫组血清HSP70的浓度显著高于子痫前期和重度子痫前期组,差异有统计学意义(t=-20.402,P<0.05),子痫组血清SOCS-3的浓度显著低于子痫前期和重度子痫前期组,差异有统计学意义(t=8.462,P<0.05)。子痫前期和重度子痫前期组血浆IgM的浓度为(1.83±0.56) g/L、IgG的浓度为(7.94±1.34) g/L、补体C3的浓度为(0.95±0.08) g/L、补体C4的浓度为(0.24±0.08) g/L,子痫组IgM的浓度为(1.42±0.58) g/L、IgG的浓度为(5.23±1.13) g/L、补体C3的浓度为(0.73±0.12) g/L、补体C4的浓度为(0.13±0.05) g/L以及对照组IgM的浓度为(2.55±0.53) g/L、IgG的浓度为(11.04±2.15) g/L、补体C3的浓度为(1.28±0.15) g/L、补体C4的浓度为(0.35±0.08) g/L,子痫前期和重度子痫前期组、子痫组血浆IgM、IgG、补体C3、补体C4显著低于对照组(IgM:t值分别为-6.232、-8.815,P均<0.05;IgG:t值分别为-8.426、-14.340,P均<0.05;补体C3:t值分别为-13.470、-17.364,P均<0.05;补体C4:t值分别为-6.510、-14.040,P均<0.05),子痫组血浆IgM、IgG、补体C3、补体C4的浓度显著低于子痫前期和重度子痫前期组(t值分别为3.288、-9.805、10.209、7.217,P均<0.05)。经Pearson相关分析显示,妊娠期高血压患者血清HSP70的浓度与血浆IgM、IgG、补体C3、补体C4的浓度呈负相关(r值分别为-0.446、-0.537、-0.426、-0.428,P均<0.05),血清SOCS-3的浓度与血浆IgM、IgG、补体C3、补体C4的浓度呈正相关(r值分别为0.423、0.507、0.416、0.407,P均<0.05),妊娠期高血压患者血清HSP70、SOCS-3的浓度与血浆IgA的浓度无相关性(r值分别为-0.082、0.093,均P>0.05)。HSP70的ROC曲线下面积为0.821,以≥0.89 μg/L作为预测的临界值,HSP70对妊娠期高血压预测的灵敏度为86.3%,特异度为76.4%;SOCS-3的ROC曲线下面积为0.759,以≤0.035 ng/L作为预测的临界值,SOCS-3对妊娠期高血压预测的灵敏度为79.4%,特异度为71.6%。结论妊娠期高血压患者血清HSP70异常升高,SOCS-3异常降低,孕妇血清HSP70、SOCS-3的浓度与免疫因子密切相关,血清HSP70、SOCS-3有可能作为妊娠期高血压的早期预测指标。

细胞因子信号传导负调控因子3与癌胚抗原125在先兆流产合并宫腔积血患者中的表达及临床意义

目的 探讨细胞因子信号传导负调控因子3 (SOCS3)与癌胚抗原125 (CA125)在先兆流产合并宫腔积血患者中的表达及临床意义,为临床诊治提供参考依据。方法 选择2015年2月-2016年2月余姚市第二人民医院收治的40例先兆流产合并宫腔积血孕妇设为观察组1,选取单纯先兆流产孕妇40例作为观察组2。另选取同期在医院行预期保健的正常妊娠孕妇40例作为对照组。所有入组孕妇均动态监测血清SOCS3、CA125水平。比较观察组1和观察组2孕妇难免流产率。比较观察组1和观察组2孕妇及对照组孕妇入组时血清SOCS3、CA125水平。分析先兆流产孕妇血清SOCS3与CA125的相关性。根据先兆流产及先兆流产合并宫腔积血孕妇的妊娠结局,以难免流产结局为金标准,分别做血清SOCS3、CA125的ROC曲线,以最左侧拐点为难免流产阳性范围。计算SOCS3、CA125及二者联合预测先兆流产合并宫腔积血孕妇及单纯先兆流产孕妇妊娠结局的灵敏度、特异度和准确度。结果 先兆流产孕妇血清SOCS3与CA125呈显著负相关。观察组1孕妇难免流产率22. 50%明显高于观察组2的12. 50%,差异有统计学意义(P<0. 05)。3组孕妇入组时观察组1孕妇血清CA125均明显高于观察组2和对照组孕妇,观察组2孕妇明显高于对照组孕妇,观察组1血清SOCS3均明显低于观察组2和对照组孕妇,观察组2明显低于对照组孕妇,差异有统计学意义(均P<0. 05)。孕14周时,观察组1、观察组2血清SOCS3、CA125均较入组时有所改善,但两者比较差异无统计学意义(均P>0. 05)。SOCS3联合CA125预测先兆流产合并宫腔积血孕妇和单纯先兆流产孕妇难免流产结局具有较高的灵敏度和准确度。结论 SOCS3联合CA125监测可反映孕妇胎盘蜕膜细胞和滋养细胞状况,是反映孕妇胎盘功能的重要标志物,对预测先兆流产合并宫腔积血孕妇发生难免流产具有较高的临床价值,可为此类孕妇诊治方案的制定提供科学数据。

过表达SOCS3抑制IL-6诱导的食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的探讨细胞因子信号转导负调控因子3(SOCS3)对白细胞介素6(IL-6)诱导的食管癌细胞TE11增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法食管癌细胞TE11分为对照组(NC组)、IL-6组、SOCS3过表达载体组(pcDNA-SOCS3组)、空载体组(pcDNA组)、IL-6+pcDNA-SOCS3组、IL-6+pcDNA组,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,免疫印迹法(Western Blot)检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、SOCS3和磷酸化细胞信号转导与转录活化因子3(p-STAT3)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR检测SOCS3 mRNA表达水平。结果与NC组比较,IL-6组TE11细胞活性、迁移和侵袭细胞数及MMP-2、MMP-9和p-STAT3蛋白表达显著升高(P<0.05),SOCS3 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-SOCS3组TE11细胞活性、迁移和侵袭细胞数及MMP-2和MMP-9蛋白表达显著降低(P<0.05),SOCS3蛋白表达显著升高(P<0.05)。与IL-6+pcDNA组比较,IL-6+pcDNA-SOCS3组TE11细胞活性、迁移和侵袭细胞数及MMP-2、MMP-9和p-STAT3蛋白表达显著降低(P<0.05),SOCS3蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论过表达SOCS3可抑制IL-6诱导的食管癌细胞增殖、迁移和侵袭,其作用机制与抑制STAT3蛋白的活化有关。

ICP胎盘中SOCS3表达量与母体Th细胞失衡、胎盘滋养细胞损伤的相关性

目的:研究妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)胎盘中细胞因子信号传导负调控因子3(SOCS3)表达量与母体Th细胞失衡、胎盘滋养细胞损伤的相关性。方法:选择巴中市中医院2014年6月~2017年8月诊断为ICP的初产妇作为研究的ICP组,另取同期分娩的健康初产妇作为对照组。分娩后取胎盘并测定SOCS3、Th细胞因子、凋亡基因的表达量。结果:ICP组胎盘中SOCS3的mRNA表达量、蛋白表达量以及白介素(IL)-4、IL-13的蛋白表达量均显著低于对照组,γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-2、p53、Caspase-3、Fas、Caspase-8、Cyt-C、Caspase-9的蛋白表达量显著高于对照组;SOCS3低表达的ICP胎盘中IFN-γ、TNF-α、IL-2、p53、Caspase-3、Fas、Caspase-8、Cyt-C、Caspase-9的蛋白表达量显著高于SOCS3高表达的ICP胎盘,IL-4、IL-13的蛋白表达量显著低于SOCS3高表达的ICP胎盘。差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:ICP胎盘中SOCS3的低表达能够加重Th细胞失衡及凋亡所致胎盘滋养细胞损伤。

龙牙楤木皂苷Ⅳ调控SOCS3/STAT3通路对骨质疏松大鼠骨重建的影响

目的:探讨龙牙楤木皂苷Ⅳ对骨质疏松大鼠骨重建的影响及相关机制。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、龙牙楤木皂苷Ⅳ低、中、高剂量组(25,50,100 mg·kg^(-1))及龙牙楤木皂苷Ⅳ+信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路抑制组(100 mg·kg^(-1)+3.75 mg·kg^(-1)),每组8只。除假手术组外,其余各组大鼠构建骨质疏松大鼠模型。造模后第30天开始,龙牙楤木皂苷Ⅳ各剂量组灌胃给药,假手术组和模型组大鼠给与等体积生理盐水,1次/d,持续8周;STAT3通路抑制组大鼠在灌胃给与龙牙楤木皂苷Ⅳ的同时腹腔注射Stattic(其余组大鼠腹腔注射等量生理盐水),每2 d注射1次,持续8周。测定大鼠血清及骨组织中Runt相关转录子-2(Runx2)、骨形态发生蛋白2(BMP2)、碱性磷酸酶(AKP)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)水平,检测股骨骨密度(BMD),观察股骨组织病理变化,检测骨组织中细胞因子信号负调控因子3(SOCS3)、p-STAT3/STAT3蛋白水平。结果:与模型组相比,龙牙楤木皂苷Ⅳ低、中、高剂量组大鼠血清Runx2、BMP2、AKP水平,骨组织中Runx2、BMP2、AKP、p-STAT3/STAT3蛋白水平及股骨BMD值显著升高(P<0.05),血清RANKL水平及骨组织中RANKL、SOCS3蛋白水平显著降低(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05),股骨组织病理变化得到改善。与龙牙楤木皂苷Ⅳ中、高剂量组相比,龙牙楤木皂苷Ⅳ+STAT3通路抑制组大鼠以上各指标差异有统计学意义(P<0.05),股骨组织病理变化加重。结论:龙牙楤木皂苷Ⅳ可抑制SOCS3表达,激活STAT3通路,抑制骨吸收并促进骨形成,改善骨质疏松大鼠骨重建情况。

多疣壁虎SOCS3A对神经元和星形胶质细胞的生物学行为影响

目的:研究细胞因子信号转导负调控蛋白3A(suppressor of cytokine signaling 3A,SOCS3A)在多疣壁虎脊髓中的细胞定位及过表达SOCS3A对神经元和星形胶质细胞生物学行为的影响。方法:采用组织免疫荧光方法检测壁虎断尾脊髓中SOCS3A的细胞定位;构建SOCS3A腺病毒,分别在SH-SY5Y神经元细胞株和GSN1壁虎星形胶质细胞株中转染SOCS3A过表达腺病毒,观察对神经元轴突生长及JAK-STAT3的信号通路的影响,对星形胶质细胞增殖及迁移的影响。结果:免疫荧光染色结果表明,SOCS3A与多疣壁虎脊髓中的神经元和星形胶质细胞有共定位。过表达SOCS3A对神经元轴突生长无明显抑制作用,对JAK-STAT3的信号通路无显著影响;过表达SOCS3A可抑制星型胶质细胞的迁移,但对细胞增殖没有明显影响。结论:在多疣壁虎断尾脊髓再生过程中,SOCS3A与神经元和星形胶质细胞的功能相关,不参与JAK-STAT3信号通路发挥调节作用。