流式细胞光度术分析胃癌石蜡标本DNA含量及P53蛋白含量的测定

用免疫组织化学的方法检测了４９例胃癌组织和１０例胃良性病变组织Ｐ５３蛋白的含量，用流式细胞光度术检测了ＤＮＡ倍体和１０例免疫组化Ｐ５３蛋白表达阳性标本的Ｐ５３蛋白含量。结果提示，ＤＮＡ倍体和Ｐ５３蛋白表达与胃癌生物学行为有重要关系，ＦＣＭ定量基因表达产物及ＤＮＡ含量双参数分析预后，对临床有重要指导意义。

胎儿食管粘膜上皮细胞DNA含量的细胞光度术及细胞增殖分析

本文采用Feulgen-DNA含量细胞分光光度术动态地测量了林县不同胎龄人的食管上皮细胞DNA含量及其染色体倍性的精确变化,DNA含量及相关细胞频数关系用直方图显示吸收光度量。结论是:胎龄愈高,DNA含量愈集中分布,最大峰值的G_1的造型愈高,DNA值的标准差(s)和标准误(s_?)愈小。DNA含量在2～4C范围,符合一个增殖细胞群体的特征。食管上皮的增殖和分化情况由细胞分光光度计所测量的DNA含量的分级依据和细胞形态学特征所反映,同时探讨了在增殖与分化“失常”的微细形态学改变之前可能显示出精微的DNA含量的改变。

流式细胞光度术的初步建立——在MPVⅡ显微光度计基础上改装的流式细胞光度计

流式细胞光度术(Flow Cytometry)是六十年代末发展起来的一项新技术。它可以在细胞群体中对单个细胞逐个进行高速的定量分析和分类,从一个细胞中可同时测得蛋白质、DNA、细胞体积及核与细胞直径比例等多种参数,具有高速度多信息分析的特点,是研究细胞生物学、免疫生物学、体细胞遗传学、生物化学、肿瘤学的有力手段。目前使用的流式光度计基本上有两种类型:一种是以汞灯作光源,在落射光照明条件下,激发通过流动室的细胞悬液,测量细胞发出的荧光强度。

流式细胞光度术DNA分析在非何杰金氏淋巴瘤预后中的意义

用流式细胞光度术对一组非何杰金氏淋巴瘤(NHL)存档石蜡标本进行DNA分析。DNA异倍体肿瘤占总例数的47.4％,高、中度恶性组异倍体肿瘤的比例(76.8％和51.9％)分别高于低度恶性组(17.6％)(P<0.05)。S期细胞比例(synthetic phase fraction,SPF)随组织学恶性程度升高而增大,低、中和高度恶性淋巴瘤平均SPF值分别是6.5(0.6—18.8)％,13.5(3.2—37.3)％和23.4(4.4—41.4)％。二倍体和异倍体肿瘤患者的生存率无差别。全部病例中高SPF值肿瘤患者具有生存短的趋向(P=0.1)。低度恶性组内也存在此种趋向(P=0.08)。上述结果表明流式细胞光度术DNA分析对估价非何杰金氏淋巴瘤生物学行为是一种不依赖形态学的有用方法。

人食管鳞癌细胞及癌旁细胞流式细胞光度术分析

本研究应用流式细胞光度术对１４例人食管鳞癌手术切除标本的癌、癌旁组织和正常食管上皮细胞进行细胞动力学和细胞ＤＮＡ含量分析。结果表明；处于Ｓ期癌细胞的数量明显高于癌旁细胞和正常食管上皮细胞；癌细胞ＤＩ值明显高于癌旁细胞。因此，应用流式细胞光度术作癌和癌旁细胞核的ＤＮＡ分析，对于食管鳞癌的临床诊断有一定的帮助。

流式细胞光度术用于草莓倍性鉴定的研究

利用流式细胞光度术对草莓３个二倍体、１个五倍体、２个八倍体试管苗的细胞核ＤＮＡ的相对含量进行测定。结果表明，随着倍性水平的增加，细胞核ＤＮＡ相对含量随之成倍增加，说明可利用流式细胞光度术测定细胞核ＤＮＡ含量来进行倍性鉴定；利用这一技术对草莓几个杂交后代及诱变植株的倍性水平进行了鉴定，发现一诱变植株存在两群核ＤＮＡ相对含量相差近一倍的细胞，初步认为这一诱变植株为倍性嵌合体，该结果进一步证明这种方法的可靠性。

利用流式细胞光度术鉴定苹果倍性的研究

利用流式细胞光度术测定了苹果１２个二倍体，５个三倍体细胞核ＤＮＡ含量。结果表明：二倍体细胞核ＤＮＡ含量平均为２．２７ｐｇ，三倍体细胞核ＤＮＡ含量平均为３．１３ｐｇ。不同倍性品种间细胞核ＤＮＡ含量差异显著；对６个苹果实生苗诱变植株细胞核ＤＮＡ含量测定的结果表明，这些诱变植株均存在两群细胞核ＤＮＡ含量相差１倍的细胞，这说明这些诱变植株均为倍性嵌合体。研究表明，利用流式细胞光度术可以进行倍性鉴定。利用流式细胞光度术测定细胞核ＤＮＡ含量，试样制备简单，测量快速，精度高，因此是进行倍性鉴定的理想方法之一。

胃癌及其癌前期病变的流式细胞光度分析

目前,对癌及其癌前期病变的诊断和分级主要以病理学家借助光学显微镜观察组织结构和细胞形态的异型性,凭经验作出的诊断为依据,故带有一定的主观性。因此,探索客观的定量诊断方法甚为必要。本实验应用快速、准确、客观的流式细胞光度术(FlowCytometry,FCM)定量分析胃癌及其癌前期病变细胞核DNA含量及其细胞周期各时相分布,探讨胃癌与其癌前期病变的关系,试图应用FCM作为预示癌前期病变发展趋势、胃癌普查中筛选病例及发现早期癌变的辅助工具。材料和方法 1、样品来源:采用我院胃癌研究室1985～1987年胃癌普查中胃镜咬检标本68例,胃癌术后标本59例,共计127例。

显微分光光度计测量细胞DNA对肿瘤诊断和预后价值的研究

目的 :研究显微分光光度计测量细胞DNA对肿瘤诊断和预后的价值。方法 :应用OPTON 0 3型扫描分光光度计和改良的DNA Feulgen染色方法对 15例涎腺发生的肿瘤、17例恶性淋巴瘤、2 3例早期胃癌和 2 0例食管及贲门早期浅表癌的癌细胞DNA含量进行了测量。测量结果与病理组织学诊断及随访结果进行了对比分析。结果 :癌细胞DNA含量增高 ,胞核DNA含量分布广泛 ,出现非整倍体细胞核。非整倍体型早期食管癌的复发率较二倍体型早期食管癌高 (P <0 0 5 )。结论 :细胞光度术测量细胞DNA含量对鉴别良、恶性肿瘤可以提供客观依据。DNA倍体数对食管癌预后判断有一定价值。本研究建立的DNA Feulgen染色方法效果极佳。

中日第一届组织化学与细胞化学学术讨论会在广州召开

中日第一届组织化学与细胞化学学术讨论会(简称讨论会)于1989年12月3—6日在广州市南湖宾馆召开。这是组织化学与细胞化学学组首次举办的较大型国际学术交流活动。会议共收到论文140篇,内容包括组织细胞化学、免疫组织细胞化学、原位杂交、放射自显影、流式细胞光度术等,其中DNA的定量分析与细胞的癌变,糖蛋白组织细胞化学的现状,脂质的电镜细胞化学的图像分析,原位杂交技术的应用,细胞化学与冷冻技术,流式细胞光度术在临床方面的应用,图象分析和放射自显影技术概况,神经肽免疫细胞化学新进展,受体与溶酶体的细胞化学和氧化还原酶最新发展,第二信使细胞化学等,显示了组织化学与细胞化学研究新进展,也体现了基础理论与临床实践的密切结合,已大大超出了传统组织细胞化学、免疫组织化学的范畴。我国组织细胞化学研究工作,虽然起步较晚,但近几年来发展十分迅速,能与先进国家同步进行。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对人外周血单个核细胞HLA-I分子表达的影响

研究探讨了脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对人外周血单个核细胞HLA-I(human leuco-cyte antigen I)分子表达影响。采用流式细胞术(FCM)和免疫印迹方法研究了不同剂量DON对体外培养人外周血单个核细胞表面HLA-I分子表达的影响及其量效关系。FCM定量检测结果表明,不同浓度DON处理均可一定程度降低人外周血单个核细胞表面HLA-I分子的表达,DON 50ng/mL、100 ng/mL、1000 ng/mL和2000 ng/mL组HLA-I类分子的平均表达量分别为6.92±0.68、6.64±0.69、5.95±0.48和5.48±0.77,在50～2000ng/mL范围内随着DON浓度增加,外周血单个核细胞HLA-I分子表达降低,两者是显著负相关(r=0.737,P<0.01)。Western印迹结果显示,大剂量DON(1000ng/mL和2000 ng/mL)组人外周血单个核细胞HLA-I分子表达明显减弱。研究结果表明脱氧雪腐镰刀菌烯醇可剂量依赖地抑制体外培养的人外周血单个核细胞HLA-I分子的表达。

脂蟾毒配基诱导人肝癌细胞凋亡作用的研究

目的探讨脂蟾毒配基对体外培养人肝癌细胞(Bel7402)的诱导凋亡作用,为研究其对肿瘤细胞生长抑制作用的机制提供依据。方法应用流式细胞光度术检测细胞凋亡;采用细胞免疫细胞化学显色检测和Westernblotting分析凋亡相关基因蛋白的表达来研究脂蟾毒配基对人肝癌细胞(Bel7402)凋亡的诱导作用。结果表明脂蟾毒配基能够诱导Bel7402细胞发生凋亡,凋亡率大于50%;脂蟾毒配基提取液(浓度1.0μm)作用于Bel7402细胞24h后,bc1-2蛋白的表达下调,到48h、72h后下调更明显;而Bax蛋白的表达从24h后开始上调,到48h、72h后表达上调明显。使用方差分析法与对照组相比较,P<0.05,统计学有显著意义。结论提示诱导肿瘤细胞凋亡可能是脂蟾毒配基抑制、杀伤人肝癌细胞的机制之一。

抗癌药莪棱舌草Ⅰ号诱导人肝癌细胞凋亡的研究

用流式细胞光度术检测细胞凋亡 ,运用细胞化学方法检测凋亡相关基因蛋白的表达 ,以及用Westernblot ting分析研究抗癌药莪棱舌草Ⅰ号对人肝癌细胞 (772 1细胞 )凋亡的诱导作用。结果表明药物能够诱导 772 1细胞发生凋亡 ,凋亡率可达 4 0 % ;药物作用可以使细胞中凋亡抑制基因bc1 2表达减少 ,凋亡促进基因Bax表达增加。

大蒜油不同给药途径对癌细胞周期移行过程的影响

本研究采用流式细胞光度术(FCM)分析癌灶局部及肌注大蒜油(GO)后,S180腹水癌细胞周期移行过程的变化。实验结果表明癌灶局部注射 GO 后,组方图上高倍体 DNA 峰值减少,癌细胞由 G_1期向 S 期运行受阻,S 期细胞显著减少,G_1期与 Go 期细胞积累。肌注 Go 对癌细胞周期影响远不如癌灶局部给药明显。Go 与 G_1期癌细胞积累的原因可能与 GO 对癌细胞周期活动选择性的抑制,或特异性杀伤 S 期或 G_2+M 期癌细胞有关。

仙九冲剂诱导肿瘤细胞凋亡及抑瘤效应的实验研究

用光镜、透射电镜和流式细胞光度术 ,观察中药仙九冲剂诱导荷S180肉瘤小鼠肿瘤细胞凋亡及抑瘤效应 ,结果显示 :仙九冲剂能有效地诱导肿瘤细胞凋亡 ,凋亡指数为 2 7 3± 2 6 2 ,凋亡峰为 32 5 ;超微结构变化表现为肿瘤细胞染色质发生边移 ,沿核膜分布 ,染色体浓缩破裂 ,并出现凋亡小体。抑瘤率为 5 8 8%,接近化疗药环磷酰胺组 ,P <0 0 5。

去甲斑蝥素杀伤HeLa细胞机制研究

目的研究去甲斑蝥素(NCID)杀伤肿瘤细胞的机制。方法用流式细胞光度术测量 NCTD 对细胞 DNA 复制的作用;用同步化 HeLa 细胞检测 NCTD 作用的时相性;间接免疫荧光显示胞质微管结构的改变及与 M 期阻滞、细胞死亡的相关性。结果 NCTD 不抑制细胞 DNA 复制,不杀伤 G_1期、S 期细胞;5、10μg/ml时,使胞质微管改变、M 期阻滞、畸形率升高,强烈杀伤 HeLa 细胞。2μg/ml 时,不杀伤细胞,仅促进增殖。结论 NCTD 具有刺激细胞增殖和杀伤肿瘤细胞的双向作用,并呈剂量依赖性。临床应用须达到足够剂量方有抗癌效果。

白血病细胞动力学观察及临床意义

流式细胞光度术（Flow Cyto Metry简称FCM）是近年来发展起来的新技术.使用荧光激发细胞分类器（FACS）定量检测单个细胞的不同成份,并进行细胞周期分析,测定迅速,数据主观性好,还可做细胞分类.FCM在病理学、免疫学、细胞遗传学、血液病学等方面有广阔的应用前景.本文仅就其在血液病学上的应用加以探讨.FCM技术可检测细胞相对DNA含量,细胞大小,细胞周期中G0+G2期、S期、G2+M期细胞所占比例,分辨DNA非倍性细胞出现与否与后期所占比分等.

肿瘤细胞DNA图像分析系统的研制

介绍一种采用数字图像处理技术而设计的肿瘤细胞DNA图像分析系统。该系统功能包括细胞DNA含量定量测量,DNA倍体分析和细胞核形态参数分析。该系统可为癌细胞的病理诊断提供可靠的数据。文中给出了系统硬件、软件的设计。

全国首届定量细胞化学讨论会在汕头举行

由中国细胞生物学学会和汕头大学医学院联合组织的第一次全国定量细胞化学讨论会,于5月8日至12日在广东省汕头市举行。来自17个省市50多个单位的92名代表参加了会议。还特邀联邦德国和香港专家到会讲学。定量细胞化学是对单个细胞或细胞器内化学物质进行定性定量分析,以探索某些物质在生理甚至病理状态下的意义的科学。这次讨论会的目的是交流细胞光度术、流式细胞光度术及图象分析技术,以期促进我国定量细胞化学研究的普及与提高,充分挖掘、发挥现有仪器设备的潜力,为发展医学生物学及农牧科学,提供先进的技术手段和指标。