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Connexin31相互作用蛋白筛选、证实与功能研究
被引量:
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作者
刘宇
谭志平
+7 位作者
潘乾
贺立强
蔡芳
邬玲仟
梁德生
夏昆
夏家辉
张灼华
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2005年第1期18-24,共7页
筛选间隙连接蛋白31 (connexin31,Cx31) 相互作用蛋白并研究其在Cx31运输中的功能. 运用制备的抗Cx31多克隆抗体免疫沉淀,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,蛋白质条带回收,蛋白质胶块酶解,电喷雾-四极杆-飞行时间质谱分析,数据库扫描筛选可...
筛选间隙连接蛋白31 (connexin31,Cx31) 相互作用蛋白并研究其在Cx31运输中的功能. 运用制备的抗Cx31多克隆抗体免疫沉淀,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,蛋白质条带回收,蛋白质胶块酶解,电喷雾-四极杆-飞行时间质谱分析,数据库扫描筛选可能相互作用蛋白,可能互作蛋白经免疫共沉淀、细胞免疫共定位等证实,确定actin为Cx31相互作用蛋白. 用药物处理细胞,抑制actin的功能,观察Cx31定位与间隙连接通道的通透性,确定actin在Cx31运输中的功能. 当药物抑制actin的功能时,Cx31很少能到达细胞膜上形成间隙连接通道,Cx31主要分布在胞质中;当药物抑制tublin的功能时,Cx31能到达细胞膜上形成间隙连接通道,细胞免疫荧光实验显示间隙连接斑有增多的现象,但染料转移实验表明细胞膜上间隙连接通道并没有增加. Actin在Cx31运输至细胞膜上形成间隙连接通道的过程中具有重要作用.
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关键词
Cx31
间隙连接蛋白相互作用蛋白
细胞免疫共定位
免疫
共
沉淀
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职称材料
题名
Connexin31相互作用蛋白筛选、证实与功能研究
被引量:
1
1
作者
刘宇
谭志平
潘乾
贺立强
蔡芳
邬玲仟
梁德生
夏昆
夏家辉
张灼华
机构
中南大学医学遗传学国家重点实验室
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2005年第1期18-24,共7页
基金
国家重点基础研究发展规划项目(973)(2001CB510302)
国家高技术863计划资助项目(2002BA711A07)
+1 种基金
国家自然科学基金资助项目(30370737
30123006)~~
文摘
筛选间隙连接蛋白31 (connexin31,Cx31) 相互作用蛋白并研究其在Cx31运输中的功能. 运用制备的抗Cx31多克隆抗体免疫沉淀,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,蛋白质条带回收,蛋白质胶块酶解,电喷雾-四极杆-飞行时间质谱分析,数据库扫描筛选可能相互作用蛋白,可能互作蛋白经免疫共沉淀、细胞免疫共定位等证实,确定actin为Cx31相互作用蛋白. 用药物处理细胞,抑制actin的功能,观察Cx31定位与间隙连接通道的通透性,确定actin在Cx31运输中的功能. 当药物抑制actin的功能时,Cx31很少能到达细胞膜上形成间隙连接通道,Cx31主要分布在胞质中;当药物抑制tublin的功能时,Cx31能到达细胞膜上形成间隙连接通道,细胞免疫荧光实验显示间隙连接斑有增多的现象,但染料转移实验表明细胞膜上间隙连接通道并没有增加. Actin在Cx31运输至细胞膜上形成间隙连接通道的过程中具有重要作用.
关键词
Cx31
间隙连接蛋白相互作用蛋白
细胞免疫共定位
免疫
共
沉淀
Keywords
connexin31
protein-protein interaction
colocalization
coimmunoprecipitation
分类号
Q25 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Connexin31相互作用蛋白筛选、证实与功能研究
刘宇
谭志平
潘乾
贺立强
蔡芳
邬玲仟
梁德生
夏昆
夏家辉
张灼华
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2005
1
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