基于HepG2细胞评价不同来源虾青素抗氧化能力差异

为探究雨生红球藻源虾青素(Haematococcus pluvialis ester astaxanthin,E-AST)和人工合成虾青素(synthetic astaxanthin,S-AST)抗氧化能力的差异,该研究分析了不同浓度(0、2.5、5、10μmol/L)2种来源虾青素处理24 h后,对HepG2细胞存活率、细胞内不同活性氧分子含量和细胞内抗氧化活性(cellular antioxidant activity,CAA)的影响。结果显示,与对照组相比,E-AST和S-AST对HepG2细胞存活率无明显影响,仅10μmol/L E-AST能够显著提高细胞存活率。荧光探针DCFH-DA检测显示,与对照组比较,除5μmol/L E-AST和2.5μmol/L S-AST外,添加其他浓度的2种虾青素均能够显著降低细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量(P<0.05),但是同一浓度2种虾青素处理组之间不存在显著性差异(P>0.05)。DHR123荧光探针的检测结果则显示,在虾青素处理浓度为5μmol/L时,E-AST对H 2O_(2)的清除能力显著高于S-AST(P<0.05)。而使用DHE探针检测发现,仅2.5μmol/L S-AST处理后细胞内·O_(2)-的含量显著降低(P<0.05),其他处理组与对照组比略有减少但不存在显著性差异(P>0.05)。2种虾青素的CAA值随虾青素处理浓度的升高而升高,但同一浓度不同来源虾青素之间CAA值无显著性差异(P>0.05)。综上所述,2种不同来源虾青素抗氧化能力存在差异,并可能与2种虾青素对HepG2细胞内活性氧分子的清除能力不同有关。

以细胞模型评价乳酸菌无细胞提取物的抗氧化活性

目的:利用细胞内抗氧化活性测定方法(CAA)检测乳酸菌无细胞提取物的抗氧化能力及其对肝癌细胞的毒害作用,在细胞水平对乳酸菌无细胞提取物的功能进行评价分析。方法:利用Hep G2细胞构建测定乳酸菌无细胞提取物抗氧化能力的细胞模型,对来自4个种的13株乳酸菌的无细胞提取物进行细胞内抗氧化活性以及细胞毒性测定。结果:乳酸菌无细胞提取物抗氧化活性显著高于MRS(P<0.05),其抗氧化活性存在显著的种间与种内差异(P<0.05),嗜酸乳杆菌CCFM8的细胞内抗氧化活性最强,显著高于阳性对照菌株鼠李糖乳杆菌(LGG,P<0.05)。在试验浓度范围,未检测到乳酸菌无细胞提取物对Hep G2细胞具有毒性。结论 :CAA方法能够反映抗氧化物在细胞水平的抗氧化活性,能够对乳酸菌无细胞提取物在细胞水平的抗氧化活性进行定量。该方法在测定乳酸菌相关抗氧化活性方面具有良好的应用前景。