激光诱导细胞内递送原理及方法概述

细胞内递送是细胞工程和细胞治疗中的关键步骤。激光诱导细胞内递送比传统的显微注射、细胞融合、电穿孔具有高精度、高通量、非入侵式等优点,近年来受到越来越多的关注。激光诱导细胞膜产生瞬时微孔,增加细胞膜的通透性,使货物透过细胞膜进入细胞内。主要介绍了激光利用热效应、化学效应和流体剪切力破坏细胞膜的原理,其实施方法分为激光直接作用,激光作用于纳米粒子、基底材料或光热刀去破坏细胞膜。评价了每种方法的优缺点并对激光诱导细胞内递送的前景进行了展望。

5-氟尿嘧啶醇脂体抑制瘢痕成纤维细胞的实验研究

目的构建纳米级载5-氟尿嘧啶醇脂体(5-FU ES),观察其对瘢痕成纤维细胞的抑制作用。方法采用Touitou法制备5-FU ES悬液并进行质量评价。体外培养增生性瘢痕成纤维细胞,荧光素RhoB标记醇脂体,进行体外透细胞实验,以水醇溶液为对照。激光共聚焦显微镜(CLSM)观察不同作用时间后细胞内荧光分布和强度。CCK-8检测不同浓度5-FU ES对成纤维细胞活性的影响,计算载5-FU ES对成纤维细胞活性的半数抑制浓度(IC50)。CCK-8检测醇脂体对瘢痕成纤维细胞生长的影响。结果制备所得5-FU ES粒径为(87.5±5.4)nm,分散系数为0.151±0.27,包封率为(10.03±2.12)%。CLSM图像显示,醇脂体促进RhoB进入细胞内,可见荧光分布和强度均较水醇溶液组增多增强;经Image-Pro Plus 6.0图像分析软件计算单位面积光密度值,RhoB标记醇脂体组(Rho ES)细胞内荧光光密度显著高于水醇溶液组(Rho HA)(P<0.01)。随着5-FU浓度增加,5-FU HA和5-FU ES对成纤维细胞的生长抑制率逐渐增强;5-FU ES和5-FU HA对成纤维细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(9.2582±1.2329)μg/mL和(18.0352±2.3145)μg/mL,差异具有统计学意义(P<0.05);同时,醇脂体本身对细胞活性无明显抑制作用。结论醇脂体可有效携带5-FU向瘢痕成纤维细胞内递送,促进5-FU对成纤维细胞的活性抑制作用。醇脂体作为经皮给药载体,是一种安全有效的透细胞药物载体。