钙离子、血管紧张素Ⅱ受体在血管紧张素Ⅱ促心肌细胞蛋白质合成中的作用

通过3H-Leu掺入量的测定与RNA狭线杂交技术，初步探讨血管紧张素正受体、Ca2+在血管紧张素Ⅱ刺激乳鼠心肌细胞蛋白质合成中的作用，并观察血管紧张素Ⅱ对原癌基因c-fos表达的影响。结果发现培养液中加入钙通道阻断剂（vera-pamil）、细胞外钙螯合剂（EGTA）、肌浆网钙释放抑制剂（dantrolene）和细胞内钙螯合剂（Fura-2／AM），可使血管紧张素对Ⅱ导的3H-Leu掺入量较单独加血管紧张素Ⅱ组分别降低17％、19％、22％和27％。另外，AugⅡ还可诱导c-fos基因的表达。以上结果提示:血管紧张素Ⅱ促进心肌细胞蛋白质合成作用是通过其受体介导的，有赖于[Ca2+]i升高的信息传递途径并可能与c-fos基因表达增强有关。

细胞膜电压门控钙离子通道蛋白质结构、系统发育分析及应用

细胞膜上的钙离子通道(VGCCs)由α1/α2-δ/β/γ亚基组成,在昆虫方面分L、非L型和T型。介绍了各亚基的组成及其功能,采用软件Mega 4绘制进化树研究GenBank已克隆的各种亚基的遗传性,了解物种VGCCs的分子进化关系,并根据进化树推断出一些α1亚基序列原作者未标记的钙离子通道蛋白类型。从理论上提出研究家蚕和越北腹露蝗VGCCs的重要性,简要论述了钙离子通道蛋白及其阻滞剂在医药和农业上的应用前景。

构建线粒体钙离子摄入蛋白1慢病毒表达载体及在H9C2细胞中的应用

背景:线粒体钙离子摄入蛋白1(mitochondrial calcium uptake 1,MICU1)是维持细胞线粒体钙稳态的重要分子,MICU1对线粒体钙稳态的调节可能在糖尿病心肌病的发生及发展中起着重要作用,但目前机制尚不明确。目的:构建MICU1基因的慢病毒表达载体,产毒感染H9C2细胞,评价MICU1基因在H9C2细胞中的表达效果,为后续在细胞水平研究糖尿病心肌病的发生及发展建立平台。方法:PCR提取H9C2细胞MICU1基因,SpeⅠ、EcoRⅠ双酶切后,将MICU1基因片段插入慢病毒载体pR RLsin.CMV.e FP中,构建慢病毒表达质粒pR RLsin.CMV.MICU1-e FP。使用pC MVDR8.91、pC MV-VSVG共转染于293T细胞中包装产毒,用于感染H9C2细胞。通过RT-PCR及Western blot检测感染后H9C2细胞中MICU1 m RNA及蛋白的表达。共聚焦显微镜检测Rhod-2染色H9C2细胞后线粒体钙水平。结果与结论:(1)MICU1基因成功插入pR RLsin.CMV.e FP慢病毒表达质粒;(2)转染pR RLsin.CMV.MICU1-e FP慢病毒表达质粒后,可见293T细胞表达绿色荧光蛋白,并且MICU1的蛋白表达明显升高;(3)病毒液感染H9C2细胞后,MICU1的蛋白及m RNA水平较未感染组及空质粒包装组明显升高;(4)Rhod-2染色后观察发现,MICU1能够明显增强线粒体钙水平;(5)结果表明,pR RLsin.CMV.MICU1-e FP慢病毒能够高效感染H9C2细胞,为构建永生化细胞系奠定基础。

微囊蛋白1及细胞内钙离子在TGF-β1诱导哮喘大鼠气道平滑肌增殖中的作用

目的探讨微囊蛋白1、细胞内钙离子在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖中的作用。方法离体培养大鼠ASMCs,并分为正常组、哮喘组、TGF-β1干预组、TGF-β1+β-环糊精(β-CD)干预组,CCK-8法检测各组细胞的增殖水平;Western blot法检测各组微囊蛋白1含量;流式细胞仪检测各组ASMCs胞内钙离子荧光强度。结果哮喘组OD值较正常组明显增加(P<0.05),TGF-β1组OD值较正常组、哮喘组明显增加(P<0.05),TGF-β1+β-CD组OD值较TGF-β1组明显增加(P<0.05)。TGF-β1组较正常组和哮喘组微囊蛋白1含量减少(P<0.05),TGF-β1+β-CD组较TGF-β1组微囊蛋白1含量减少(P<0.05)。TGF-β1组较正常组和哮喘组胞内钙离子荧光强度增加(P<0.05),TGF-β1+β-CD组较TGF-β1组胞内钙离子荧光强度增加(P<0.05)。相关关系分析示细胞增殖水平与微囊蛋白1含量呈负相关(r=-0.51,P<0.05),细胞增殖水平与钙离子荧光强度呈正相关(r=0.60,P<0.05),微囊蛋白1含量与钙离子荧光强度呈负相关(r=-0.87,P<0.05)。结论微囊蛋白1可以抑制TGF-β1诱导的ASMCs增殖,这种抑制作用可能部分是通过减少胞内游离钙离子来实现的。

单核细胞趋化蛋白1和血管内皮细胞钙黏蛋白水平与脑梗死进展及颈动脉粥样硬化的关系

目的探讨血清单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、血管内皮细胞钙黏蛋白(VE-cadherin)水平与脑梗死进展及颈动脉粥样硬化的关系。方法选取112例急性脑梗死患者作为脑梗死组,其中进展性脑梗死37例,非进展性脑梗死75例;颈动脉内膜中层厚度(IMT)正常19例、IMT增厚17例及斑块76例,同时选择健康体检者49例作为对照组。比较各组血清MCP-1、VE-cadherin水平。结果脑梗死组血清MCP-1[(305.21±32.17)ng/L vs(217.70±23.33)ng/L]和VE-cadherin[(6.12±1.11)mg/L vs(3.95±0.40)mg/L]均高于对照组(P<0.05)。与非进展性脑梗死比较,进展性脑梗死患者血清MCP-1[(317.23±29.64)ng/L vs(299.28±31.89)mg/L]、VE-cadherin[(6.53±1.06)mg/L vs(5.92±1.09)mg/L]水平升高,颈动脉斑块检出率升高(86.5%vs 58.7%),斑块以混合回声与低回声斑块为主;斑块患者血清MCP-1、VE-cadherin水平高于IMT正常与IMT增厚患者。结论进展性脑梗死患者血清MCP-1、VE-cadherin水平高,提示其与动脉粥样硬化程度及斑块稳定性有一定关系。

抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路对MPP+处理的SH-SY5Y细胞自噬、凋亡及PD特征蛋白表达的影响

目的探讨抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)处理的SH-SY5Y细胞自噬、凋亡及帕金森病(PD)特征蛋白α-突触核蛋白(α-syn)、酪氨酸羟化酶(TH)表达的影响。方法以MPP+、PI3K/Akt激活剂胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、PI3K/Akt抑制剂LY294002作用于人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,CCK-8检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;吖啶橙(AO)染色检测自噬空泡;Western blot检测α-syn、TH、p62、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、p-mTOR、mTOR、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白水平。结果MPP+干预显著降低SH-SY5Y细胞存活率,且呈现剂量依赖性(P<0.05)。MPP+和IGF-1处理后SH-SY5Y细胞存活率降低,凋亡率增高(P<0.05);细胞中自噬空泡减少,LC3BⅡ/Ⅰ降低,p62蛋白水平增高(P<0.05);TH蛋白水平降低,α-syn蛋白水平增高(P<0.05);p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt与p-mTOR/mTOR增高(P<0.05)。LY294002对SH-SY5Y细胞的影响与MPP+和IGF-1相反,且LY294002可在一定程度上逆转MPP+对SH-SY5Y细胞的影响(P<0.05)。结论抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路可能对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞毒性具有保护作用。

钙蛋白酶活性对颅脑创伤大鼠海马神经细胞凋亡和学习记忆的影响

目的:探讨钙蛋白酶活性对重型闭合性颅脑创伤大鼠海马神经细胞凋亡和学习记忆功能的影响。方法:采用重型闭合性颅脑创伤模型。将120只SD大鼠随机分为创伤组、治疗组、假手术组及对照组,前3组各36只分为伤后6、12、24、48、72h5个时相组,每亚组6只,进行钙蛋白酶活性测定及凋亡检测,余6只进行Morris水迷宫测试;对照组12只,其中6只进行钙蛋白酶活性测定及凋亡检测,另6只进行Morris水迷宫测试。治疗组各亚组在致伤前1d经侧脑室注射MDL28170(10μL),创伤组、假手术组及对照组给予生理盐水(10μL)。结果:创伤组大鼠海马在伤后6h钙蛋白酶活性升高,于24h达到高峰,治疗组各时相点海马区钙蛋白酶活性均较创伤组明显下调(P<0.01);创伤组大鼠伤后6h海马CA2区即出现少量凋亡阳性细胞,伤后24h明显增多,于伤后72h达高峰;治疗组凋亡细胞密度高峰较创伤组明显下调(P<0.01);定位航行能力测试结果表明治疗组搜索安全岛潜伏期较治疗组明显缩短(P<0.01);空间探索能力测试结果表明治疗组于第四象限的航行时间较创伤组明显延长(P<0.05)。结论:脑创伤后钙蛋白酶活性增加可能参与了神经细胞凋亡与学习记忆功能障碍的过程。

CD47和钙网织蛋白在紫杉醇诱导的乳腺癌细胞凋亡中的表达

目的探讨CD47、钙网织蛋白(CRT)在乳腺癌细胞凋亡过程中表达的变化和意义。方法用不同浓度的紫杉醇(0.1、1.0、10.0、100.0μmol/L)作用于MDA-MB-231细胞。在不同的处理时间点(24、48、72、96 h),噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞抑制率变化,流式细胞术测定CD47、CRT的表达。结果 MDA-MB-231细胞的生长抑制率和紫杉醇浓度呈一定的剂量、时间相关性。各处理组在培养24 h时CD47的表达均显著高于对照组,其中10.0μmol/L组表达高于1.0μmol/L组(F=34.71,P<0.05);各处理组在培养48 h时CD47的表达均显著高于对照组,其中10.0μmol/L组表达高于1.0μmol/L组和0.1μmol/L组(F=24.272,P<0.05);1.0μmol/L组在培养72 h时CD47的表达高于对照组和10.0μmol/L组(F=3.713,P1=0.023,P2=0.02,P<0.05);0.1μmol/L组在培养96 h时CD47的表达高于对照组、1.0μmol/L组和10.0μmol/L组(F=5449,P1=0.022,P2=0.009,P3=0.008)。各处理组在培养24 h时CRT的表达均显著高于对照组,其中0.1μmol/L组和1.0μmol/L组的表达又高于10.0μmol/L组(F=48.007,P<0.05);各处理组在培养48 h时CRT的表达均显著高于对照组,其中0.1μmol/L组和1.0μmol/L组的表达又高于10.0μmol/L组(F=98.683,P<0.05)。结论CD47和CRT随着乳腺癌细胞发生凋亡其表达相应增加,和细胞抑制率存在一定的相关性。

8-甲氧沙林对黑素细胞内游离钙浓度及细胞骨架蛋白形成的影响

目的:观察8-甲氧沙林对体外培养黑素细胞内游离钙浓度、细胞骨架蛋白形成的影响。方法:正常人黑素细胞取自包皮环切术切取的包皮,用激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内游离钙浓度,用罗丹明结合毒伞素对细胞骨架蛋白进行特异性染色。结果:8-甲氧沙林可使细胞内游离钙离子浓度升高,促进黑素细胞骨架蛋白合成。结论:8-甲氧沙林可能通过诱导黑素细胞内钙离子浓度升高和细胞骨架actin蛋白生成,从而影响黑素细胞的迁移。

类缺血后神经元内钙离子浓度变化及不同钙阻滞剂对其影响

目的观察类缺血后神经元内钙离子浓度及细胞活性的变化,探讨缺血性神经元的损伤与细胞内钙离子的关系及不同钙阻滞剂的作用。方法采用孕小鼠皮层神经元培养技术,应用相差显微镜观察培养的神经元形态结构,激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内钙离子浓度。结果给予神经元类缺血处理10min后,神经元内钙离子浓度明显高于尼卡地平组(P<0.01)。类缺血处理10min后再灌注2h细胞损伤程度较尼卡地平干预组有显著性差异。结论尼卡地平可抑制神经元细胞内钙离子浓度的升高,降低缺血性神经元的损伤的程度。

电针足阳明经穴后家兔胃窦平滑肌细胞内钙离子浓度、三磷酸肌醇及环磷酸腺苷含量的变化

目的:通过测定胃窦平滑肌细胞内信使物质钙离子浓度及三磷酸肌醇、环磷酸腺苷含量的变化,探讨针刺足阳明经穴对胃窦平滑肌细胞内信息转导通路的影响。方法:实验于2003-06/2004-05在湖南中医学院针灸基础实验室完成。选用清洁级健康成年新西兰大耳白兔55只,随机分为5组,每组11只。①生理盐水组耳缘静脉滴注9g/L氯化钠溶液。②阿托品组耳缘静脉滴注0.25mg/L阿托品。③电针足阳明经穴组、电针足少阳经穴组和电针足太阳经穴组均在滴注阿托品总量的一半时,分别电针双侧足阳明经穴、足少阳经穴、足太阳经穴30min。各组分别处理后,分离胃窦平滑肌细胞,制成活的单个平滑肌细胞悬液;测定胞内钙离子浓度采用荧光法;测定胞内三磷酸肌醇含量应用蛋白质竞争结合分析法;测定胞内环磷酸腺苷含量采用放射免疫计数法。结果:纳入家兔55只,每组11只。最终进入结果分析动物数为:钙离子浓度分析55只,每组11只,无脱失;三磷酸肌醇及环磷酸腺苷含量分析数均为45只,均脱失10只。①各组家兔胃窦平滑肌细胞内钙离子浓度的比较:阿托品组、足少阳经穴组与足太阳经穴组钙离子浓度明显低于足阳明经穴组[(172.97±60.38),(203.57±72.20),(183.52±76.81),(321.22±55.36)nmol/L(F=9.37,P<0.01)]。②各组家兔胃窦平滑肌细胞内三磷酸肌醇含量的比较:阿托品组、足少阳经穴组、足太阳经穴组三磷酸肌醇含量均明显低于足阳明经穴组[(21.87±10.16),(21.08±10.97),(23.81±12.06),(39.00±12.97)pmol/106(F=3.61,P<0.01)]。③各组家兔胃窦平滑肌细胞内环磷酸腺苷含量的比较:各组差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:针刺足阳明经穴可使家兔胃窦平滑肌细胞内钙离子、三磷酸肌醇含量明显增高。脑肠肽是足阳明经与胃相关的重要物质基础,参与调节胃平滑肌运动的脑肠肽受体后信号转导通路可能与胞内钙离子、三磷酸肌醇等信使物质有关。

组合性细胞因子与钙离子载体诱导急性髓系白血病细胞向树突状细胞分化中的作用

目的:探讨钙离子载体能否诱导急性髓系白血病细胞分化为树突状细胞及其抗肿瘤免疫。方法:选择2004-01/09解放军广州军区广州总医院血液科住院的初诊或复发的急性髓系白血病患者7例。分离急性髓系白血病患者的急性髓系白血病细胞,在体外给予钙离子载体100μg/L培养3～5d(钙离子载体组),或1000U/mL重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、1000U/mL白细胞介素4和500U/mL肿瘤坏死因子α培养7～10d(组合细胞因子组)。通过细胞形态的观察及细胞免疫表型的检测鉴定树突状细胞,用同种异体混合淋巴细胞实验及细胞毒实验检测树突状细胞的功能。结果:①形态学观察和免疫表型变化:钙离子载体组及组合细胞因子组诱导急性髓系白血病细胞均可获得具有典型树突状细胞形态及免疫表型的成熟树突状细胞,但钙离子载体组诱导的树突状细胞表面CD80,CD86,CD83,CD40,CD54等分子的表达较组合细胞因子组明显增高。②混合淋巴细胞反应和胞毒性T淋巴细胞活性:钙离子载体组所诱导的急性髓系白血病细胞刺激同种异体混合淋巴细胞反应的能力及激发细胞毒性T淋巴细胞的活力比组合细胞因子组强。结论:钙离子载体能高效诱导急性髓系白血病细胞分化成树突状细胞,比组合细胞因子诱导分化的树突状细胞功能更强。

磷酸三钙陶瓷和钙离子对成骨细胞生长的影响

目的：观察鼠成骨细胞在体外与磷酸三钙（ＴＣＰ）陶瓷和钙离子混合培养时的生长情况，研究ＴＣＰ和钙离子对成骨细胞的影响。方法：用酶消化法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞，通过扫描电镜对生长于 ＴＣＰ陶瓷材料上的成骨细胞进行观察，利用［３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测ＴＣＰ对成骨细胞的影响。用不同浓度的钙离子（２．５～１０ｍｍｏｌ／Ｌ）作用于成骨细胞，通过增殖细胞核抗原免疫组化分析测定钙离子对成骨细胞增殖的影响。结果：成骨细胞不仅很好地贴附于陶瓷表面及培养孔底，而且细胞的增殖活性未受到抑制。钙离子则对体外培养的成骨细胞增殖无负效影响。结论：ＴＣＰ陶瓷人工骨与成骨细胞有良好的生物相容性，并对成骨细胞的生长有一定的促进作用。

釉基质蛋白对人牙周膜细胞群骨钙素的影响

目的研究人牙周膜细胞群(human periodontal ligament cell populations,hPDLPs)在釉基质蛋白(em-dogain,EMD)诱导下骨钙素(osteocalcin,OCN)表达的改变。方法组织块法分离培养人牙周膜细胞,实验组用含100 mg/L EMD的培养液诱导6 d,对照组不经EMD诱导培养。免疫细胞化学和实时定量聚合酶链反应(polymer-ase chain reaction,PCR)检测成牙骨质细胞矿化相关蛋白OCN的表达。结果免疫细胞化学结果显示,实验组和对照组hPDLPs细胞胞浆均可见黄色或棕黄色颗粒,OCN表达呈阳性;实验组hPDLPs的OCN检测平均光密度值为0.172 43±0.014 85,对照组为0.167 01±0.017 03,组间差异无统计学意义(t=0.757,P=0.459);实时定量PCR检测结果显示,实验组骨钙素相对表达量是对照组的1.13倍。结论 EMD对hPDLPs的OCN表达无明显影响。

初发未治的Graves病患者血清IgG对鼠甲状腺细胞内钙离子的作用

为研究初发未治的Graves病患者血清IgG对大鼠甲状腺细胞 (FRTL 5 )内Ca2 + 的作用 ,将Graves病患者血清IgG分为甲状腺刺激抗体 (TSAb)阴性和阳性两组 ,比较正常人、TSAb阴性和阳性IgG对FRTL 5细胞内Ca2 + 的作用。结果发现 :(1) 80 .6 % (2 9/36 )初发未治的Graves病患者TSAb阳性 ,19.4% (7/36 )TSAb阴性 ;(2 )不同浓度 (0 .1～ 1mg/ml)的TSAb阳性IgG对FRTL 5细胞内Ca2 + 均有明显刺激作用 ,并呈现浓度依赖性 ;(3)高浓度 (1mg/ml)的TSAb阴性IgG对细胞内Ca2 + 也有刺激作用 ,且Ca2 + 的变化时相与TSAb阳性IgG作用于FRTL 5细胞时相类似 ;(4 )高浓度 (1mg/ml)的正常人IgG对FRTL 5细胞内Ca2 + 有一定程度的刺激作用 ,但Ca2 + 变化时相不同于Graves病IgG。提示部分Graves病患者血清IgG可同时激活AC/cAMP和PLC/Ca2 + 两种信号途径 ,推测这些血清IgG对细胞内Ca2 + 的刺激作用可能与其对AC的刺激作用有一定程度的相关性 ,因而Ca2 +

肾癌中促红细胞生成素产生肝细胞受体A2的表达及其与E-钙黏蛋白、微血管密度的关系

目的探讨促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(Eph A2)在肾癌组织中的表达及其与肿瘤血管生成、E-钙黏蛋白的关系。方法利用免疫组织化学法检测肾癌组织68例、正常肾组织24例中EphA2、E-钙黏蛋白的表达,并采用CD34抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。分析EphA2、MVD、E-钙黏蛋白与肾癌临床病理特征的关系及其的相关性。结果肾癌组织中EphA2阳性表达及MVD明显高于正常肾组织,E-钙黏蛋白阳性表达明显低于正常肾组织(均P<0.01)。EphA2在肾癌组织的高分级组、高分期组、淋巴结转移组显著高于低分级组、低分期组和无淋巴结转移组(P<0.01或<0.05);MVD在肾癌组织的高分级组、高分期组、淋巴结转移组的表达亦显著高于低分级组、低分期组和无淋巴结转移组(均P<0.01);MVD值还与肿瘤直径有关(均P<0.01);E-钙黏蛋白在肾癌组织的高分级组、高分期组、淋巴结转移组显著低于低分级组、低分期组和无淋巴结转移组(P<0.01或<0.05);Spearman等级相关分析表明,EphA2蛋白表达与MVD呈显著正相关(r=0.555,P<0.01),与E-钙黏蛋白蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.483,P<0.01)。结论 EphA2蛋白的高表达预示肿瘤恶性程度的增加,其机制可能通过影响或协同E-钙黏蛋白和微血管生成来实现的。

可溶性耐药相关钙结合蛋白在MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞帕金森病模型中的表达及意义

目的:观察1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的SH-SY5Y细胞帕金森病(PD)模型中可溶性抗药性相关钙结合蛋白(sorcin)表达的变化,寻求参与PD多巴胺能神经元细胞神经变性的蛋白质改变,为阐明PD的发病机制提供理论依据。方法:应用1.0mmol.L-1 MPP+处理未分化的SH-SY5Y细胞24h,在体外建立PD细胞模型,应用荧光染色双向差异凝胶电泳(2D-DIGE)、图像分析、基质-辅助激光解析/电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和生物信息学的方法,对该模型的差异表达蛋白质进行研究。结果:蛋白质组学分析在对照组和MPP+处理组之间发现22个差异表达蛋白质,其中1个蛋白质点被确切的鉴定为sorcin。sorcin的表达明显上调,荧光丰度比值为1.97倍。该蛋白的最小肽片段覆盖率、最大概率期望值、相对分子质量和等电点分别为25.7、0.006、21 940和5.3。结论:sorcin在功能上与钙离子稳态和凋亡有关,可能参与了MPP+在SH-SY5Y细胞诱导的毒性,并可能与PD的发病机制有关。

NaCl浓度改变对人类神经元钙传感蛋白结构的影响:来自分子动力学模拟证据

背景:人类神经元钙传感蛋白是一个含有高电荷的蛋白,对溶液温度极其敏感,但溶液中离子浓度的变化是否能够改变蛋白结构,进而影响其正常功能的发挥,尚未发现相关研究。目的:探讨溶液中NaCl浓度的微小改变对人类神经元钙传感蛋白结构动力学影响的分子机制。方法:采用全原子计算机动力学模拟的方法,将蛋白质数据库中ID为2LCP的人类神经元钙传感蛋白前两个能量最低的结构作为初始结构,能量最小化后,将蛋白置于NaCl浓度分别为0.1,0.3和1 mol/L的水溶液中,以高速摄像速度(ps,10-12s)记录蛋白在模拟体系中的运行和变化情况。结果与结论:溶液中NaCl浓度升高,(1)人类神经元钙传感蛋白柔性增加,整体结构和局部的疏水口袋体积增大;(2)蛋白C端尾部L3蜷缩,首尾氨基酸D176和V190之间的次联系路径数量明显减少,导致两者之间的联系减弱;(3)蛋白N段和C段氨基酸之间的联系削弱,但两段段内氨基酸联系明显增强;(4)蛋白正负电荷间形成的盐桥数量和百分比均降低,尤其在0.3 mol/L NaCl水溶液中的减少更为明显。(5)结果说明,人类神经元钙传感蛋白对溶液NaCl浓度的改变非常敏感,NaCl浓度的微小变化能够引起蛋白关键结构的改变,从原子-分子的视角,为人类神经元钙传感蛋白在不同溶液环境中的结构变化提供理论参考。

钙离子与肌细胞代谢的关系

钙离子(Ca2 + )具有多种生理功能。近年来随着实验技术的改进与发展 ,人们对Ca2 + 的作用有了进一步了解。Ca2 + 作为第二信使参与肌细胞活动的调节 ,开始引起广泛的重视。肌细胞内Ca2 + 浓度的变化 ,可能是肌细胞增殖的启动因子。它启动“早期应答基因”(c -myc,c -fos)和细胞膜受体(如CaM,β-受体)的高表达 ,引起肌细胞有丝分裂 ,最终实现蛋白质在细胞内沉积 。

大麻素WIN55 212-2对牛眼小梁细胞内钙离子及组织型转谷氨酰胺酶表达的影响

青光驭主要与病理性眼压升高有关。跟压升高的重要发病机制是小梁细胞形态和功能发生改变以及细胞外基质增多致房水流出阻力增加。研究表明小梁细胞有平滑肌样功能，而钙离子使小梁细胞收缩，增加房水流出阻力。组织型转谷氨酰胺酶（tTG）是一种钙依赖性转移酶，具有催化蛋白质交联和结合的功能，且阻碍蛋白酶水解，促进其在细胞外堆积，增加房水流出阻力。研究提示，大麻素能不同程度地影响小梁细胞的功能从而调节房水流出嗍。大麻素有降眼压和视神经保护作用，