甘草酸诱导人乳腺癌细胞凋亡和细胞内Ca^(2+)的相关性研究

目的探讨甘草酸对人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖抑制和诱导凋亡的作用,了解凋亡发生与细胞内Ca2+的相关性。方法MTT比色法测定细胞增殖能力,末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP末端标记法、An-nexinV流式细胞仪法和单细胞凝胶电泳(彗星试验)法检测凋亡细胞,Fura-2荧光负载方法测定[Ca2+]i的变化。结果从5mmol/L甘草酸浓度起对MCF-7细胞的增殖抑制率显著升高(P<0.01),呈剂量依赖性,半增殖抑制浓度(IC50)为15.84mmol/L。7.5mmol/L和10.0mmol/L甘草酸使细胞凋亡率显著升高(P<0.05和P<0.01)。甘草酸处理组的[Ca2+]i明显低于对照组(P<0.05)。甘草酸与BAPTA-AM组合处理组的凋亡率明显高于单纯的7.5mmol/L处理组(P<0.05和P<0.01)。结论甘草酸具有抑制MCF-7细胞增殖和诱导其凋亡的作用;其诱导凋亡可能与细胞内Ca2+水平下调有关。

流式细胞仪实时监测细胞内Ca^(2+)浓度变化

背景:多种信号转导途径可影响细胞内Ca2+浓度的变化,因而对细胞内钙离子变化的检测,有助于了解细胞功能的启动、加强或抑制。目的:利用流式细胞术实时监测细胞内钙离子浓度的动态变化。方法:选取健康人新鲜全血,用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞,使用Ca2+荧光指示剂Fluo-3/AM负载淋巴细胞,加入CD3单克隆抗体和CD28单克隆抗体刺激淋巴细胞活化,以流式细胞仪动态监测活化淋巴细胞内Ca2+的浓度变化。结果与结论:T淋巴细胞在静息状态时,钙离子的荧光值平稳,显示为基线;加入抗CD3单克隆抗体和抗CD28单克隆抗体后,T淋巴细胞被活化,钙离子的浓度迅速升高,持续大约两三分钟后下降,逐渐趋向平缓。结果提示采用钙离子指示剂Fluo-3负载细胞与流式细胞术分析可以跟踪细胞内钙离子的动态变化,成为钙离子动态变化监测的有效方法。

蛋白酪氨酸激酶抑制剂对RPE细胞趋化因子表达和Ca^(2+)的影响

目的研究蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)抑制剂染料木黄酮(Genistein)对白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞趋化因子表达和细胞内Ca2+的影响。方法应用不同剂量IL-1β对RPE细胞进行刺激,RT-PCR法观察细胞IL-8和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)mRNA表达的变化。应用Genistein对RPE细胞培养进行干预,观察其对IL-1β诱导RPE细胞IL-8和MCP-1 mRNA表达的影响。应用Fura2/AM、荧光分光光度计检测IL-1β和Genistein对RPE细胞内Ca2+的影响。结果 RT-PCR结果显示,0.1μg.L-1、1μg.L-1、10μg.L-1IL-1β刺激组IL-8 mRNA相对表达值分别为0.446±0.133、0.727±0.054和0.523±0.106,对照组为0.272±0.088;1μg.L-1、10μg.L-1IL-1β刺激组与对照组比较,差异有统计学意义(P=0.001、0.015)。10μg.L-1IL-1β诱导的RPE细胞MCP-1 mRNA相对表达值与对照组比较,差异有显著统计学意义(P=0.002)。10mg.L-1、50mg·L-1 Genistein对IL-1β诱导的IL-8和MCP-1 mRNA表达具有明显的抑制作用,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。IL-1β引起细胞内Ca2+浓度升高,Genistein对细胞内Ca2+作用与之相反。结论 Genistein对IL-1β诱导的IL-8和MCP-1 mRNA表达具有明显的抑制作用,其机制可能为抑制IL-1β诱导的细胞内Ca2+增加。

miR-101诱导上皮性卵巢癌细胞SKOV3凋亡及其与细胞内Ca^(2+)水平关系的研究

目的:研究microRNA-101(miR-101)对上皮性卵巢癌细胞SKOV3诱导凋亡的作用,并探讨凋亡发生与细胞内Ca^(2+)浓度的关系。方法:采用阳离子脂质体为载体将miR-101 mimics转染SKOV3细胞,随机分为空白对照组、miR-101 NC组和miR-101转染组;实时定量RT-PCR法检测细胞中miR-101表达量;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞内Ca^(2+)浓度;Western blot法检测凋亡相关蛋白caspase-3表达。结果:实时定量RT-PCR检测结果显示,miR-101转染组的miR-101表达(5.302±0.069)较空白对照组(1.038±0.036)和miR-101 NC组(1.126±0.062)分别上调了5.10倍和4.70倍(F=5326.276,P=0.000)。流式细胞术检测结果显示,miR-101转染组的细胞凋亡率、细胞内Ca^(2+)浓度分别为(66.36±13.54)%和(228.94±19.51)nmol/L,较空白对照组[(40.60±5.97)%,(62.91±7.73)nmol/L]和miR-101 NC组[(41.54±3.89)%,(59.09±10.66)nmol/L]明显增加,差异有统计学意义(P=0.019);Western blot结果显示,miR-101转染组的细胞凋亡相关蛋白caspase-3表达(1.325±0.052)较空白对照组(0.817±0.073)和miR-101 NC组(0.820±0.062)增加,差异有统计学意义(P=0.000)。结论:miR-101过表达具有诱导上皮性卵巢癌细胞SKOV3凋亡的作用,其诱导凋亡与细胞内Ca^(2+)浓度增加有关。

Cariporide对糖基化终末产物所致血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察cariporide对糖基化终末产物所致大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响。方法采用组织贴块法原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞。用体外制备的外源性糖基化终末产物和平滑肌细胞共孵育24h,加入不同浓度的cariporide(0.1、1.0和10μmol/L)处理。用噻唑蓝比色法所测得的细胞吸光度值及考马斯亮蓝法测得的细胞总蛋白含量来反映细胞增殖情况,利用2,7-二羧乙基-5,6羧基荧光素及钙荧光探针通过荧光分光光度计分别检测细胞内的pH值及Ca2+浓度。结果糖基化终末产物(10mg/L)与平滑肌细胞共孵24h,与正常对照组比较,细胞吸光度值(0.554±0.032比0.155±0.018)和细胞内总蛋白浓度均显著增加(193.3±10.7μmol/L比127.8±8.2μmol/L,P<0.01);cariporide0.1、1.0和10μmol/L使细胞吸光度值从0.554±0.032分别降至0.402±0.028、0.298±0.020、0.174±0.019;细胞内总蛋白浓度也从(193.3±10.7)μmol/L分别降至(180.9±9.8)μmol/L,(156.4±9.4)μmol/L,(130.6±8.8)μmol/L,同时cariporide也明显降低了糖基化终末产物处理后的平滑肌细胞内pH值及Ca2+水平。结论外源性糖基化终末产物能显著刺激平滑肌细胞的增殖;cariporide对糖基化终末产物诱导的平滑肌细胞增殖具有显著抑制作用,其机制可能与cariporide抑制细胞内糖基化终末产物诱导的pH值及Ca2+水平升高有关。

淫羊藿总黄酮对谷氨酸和咖啡因损伤PC12细胞的保护作用

目的探讨淫羊藿总黄酮(TFE)对谷氨酸和咖啡因损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12细胞)的保护作用及相关机制。方法制备谷氨酸和咖啡因诱导的PC12细胞损伤模型,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率、荧光染料Fura-2/AM法测定细胞内Ca^(2+)、比色法测定细胞培养液中的乳酸脱氢酶(LDH)活性、细胞内羟自由基(·OH)和三磷酸腺苷(ATP)酶活性来观察TFE对损伤细胞的保护作用。结果 TFE能剂量依赖性地提高细胞存活率,减轻细胞内Ca^(2+)超载,降低细胞外LDH活性和细胞内·OH活性,恢复细胞内ATP酶活性。结论 TFE对谷氨酸和咖啡因致PC12细胞损伤具有保护作用,其机制可能与抑制细胞内Ca^(2+)超载、抗氧化和改善能量代谢有关。

淫羊藿次苷Ⅱ对小鼠脾淋巴细胞体外增殖的影响及其机制研究

目的:研究淫羊藿次苷Ⅱ对正常小鼠脾淋巴细胞体外增殖的影响,并初步探讨其机制。方法:不同浓度的淫羊藿次苷Ⅱ与刀豆素A(Concanavalin A,ConA)体外处理小鼠脾淋巴细胞,观察淫羊藿次苷Ⅱ对细胞增殖的影响,初步确定其发挥作用的最佳浓度;然后以最佳浓度淫羊藿次苷Ⅱ在不同时间点与ConA协同处理细胞,采用细胞增殖-毒性检测试剂盒检测增殖能力;运用流式细胞仪检测细胞周期分布;用荧光定量分析仪检测细胞内游离Ca2+浓度的变化。结果:淫羊藿次苷Ⅱ在10-12～10-9mol/L的浓度范围作用48小时,对细胞增殖有一定的促进作用,呈浓度依赖性。在10-7～10-4mol/L范围出现抑制作用。以10-9mol/L的淫羊藿次苷Ⅱ处理细胞,发现其与ConA在不同时间点促进细胞增殖作用显著优于ConA单独应用;并且促进细胞由G0/G1期进入S与G2/M期,并以第24小时效果更明显;促进细胞内Ca2+浓度升高,效果以第12小时最明显。结论:不同浓度的淫羊藿次苷Ⅱ对小鼠脾淋巴细胞增殖具有促进作用,有浓度、时间依赖性,这种促增殖作用的机制可能与升高细胞内Ca2+浓度,进而加快细胞由G0/G1期进入S与G2/M期有关。

环匹阿尼酸对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞内钙浓度的影响

目的研究环匹阿尼酸(CPA)对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞(PVSMC)细胞内钙浓度([Ca2+]i)的影响及可能机制。方法原代培养大鼠远端PVSMC,并通过形态学和免疫荧光染色鉴定,利用荧光显微镜和InCyte细胞内钙浓度检测系统观测高钾(60 mmol/L KCl)溶液及CPA对PVSMC的[Ca2+]i影响。结果原代培养的PVSMC表现出典型血管平滑肌细胞生长特征,并对平滑肌α-actin免疫荧光染色呈阳性反应;高钾溶液使PVSMC的[Ca2+]i显著升高,5μmol/L硝苯地平能完全阻断PVSMC的[Ca2+]i对高钾溶液的反应;10μmol/LCPA能使含5μmol/L硝苯地平的无钙Krebs溶液孵育的PVSMC的[Ca2+]i短暂小幅升高,恢复细胞外Ca2+至2.5 mmol/L后,10μmol/L CPA能使含5μmol/L硝苯地平的Krebs溶液孵育的PVSMC的[Ca2+]i迅速升高。结论 CPA能够使大鼠远端PVSMC的[Ca2+]i升高,其机制可能与Ca2+从肌浆网释放,并诱发细胞外Ca2+通过钙池操纵性钙通道(SOCC)内流有关。

乐果对大鼠肝细胞凋亡作用的研究(英文)

通过给大鼠肝细胞培养液中加入乐果（染毒终浓度分别为0、3、10、30、100和300μmol·L^-1）,染毒12、24h后,AnnexinV/PI双染法检测肝细胞凋亡率;分别用Fluo-2/AM、双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄（DCFH-DA）和罗丹名123检测细胞内Ca^2＋浓度、活性氧（ROS）和线粒体膜电位（Δψm）变化,并在扫描电镜和荧光显微镜下观察凋亡细胞情况,研究乐果对大鼠肝细胞凋亡的影响。结果表明,肝细胞染毒12和24h后,出现了明显的细胞凋亡的形态学变化,细胞凋亡率明显升高,除3μmol·L-1组外,与对照组相比差异显著（P〈0.05或P〈0.01）,且呈时间-剂量效应。3μmol·L^-1组细胞内Ca2＋浓度极显著高于对照组（P〈0.01）,之后随染毒剂量的增加,细胞内Ca^2＋浓度逐渐下降;细胞内ROS水平在3-100μmol·L^-1范围内随染毒剂量的增大和染毒时间的延长而升高,而在300μmol·L^-1组略有下降,除3μmol·L^-1组外,与对照组相比均差异极显著（P〈0.01）;Δψm除24h300μmol·L^-1组外均出现持续下降。表明低剂量乐果染毒可诱导肝细胞发生凋亡,细胞内Ca^2＋、ROS和Δψm可能参与了这一过程。

急性缺氧对环匹阿尼酸诱导的大鼠远端肺静脉平滑肌细胞内钙浓度升高的影响

目的：研究急性缺氧对Ca2＋-ATPase抑制剂——环匹阿尼酸（CPA）诱导的大鼠远端肺静脉平滑肌细胞（PVSMC）内钙浓度（[Ca2＋]i）升高的影响及机制。方法：选用6只雄性SD大鼠（体重200~250 g）,培养大鼠PVSMC,运用荧光显微镜和细胞内钙浓度检测系统观测CPA及急性缺氧（4%O2）对PVSMC的[Ca2＋]i影响及钙池操纵性钙通道（SOCC）阻断剂氯化镍（Ni Cl2）和SKF96365的干预作用。结果：含5μmol/L硝苯地平（电压依赖钙通道阻断剂）的无钙Krebs溶液孵育PVSMC,10μmol/L CPA使PVSMC的[Ca2＋]i小幅度升高,急性缺氧能使[Ca2＋]i升高幅度增加;恢复细胞外Ca2＋至2.5 mmol/L后,10μmol/L CPA使[Ca2＋]i显著升高,急性缺氧可导致CPA诱导的[Ca2＋]i升高显著增强;SOCC阻断剂Ni Cl2（500μmol/L）和SKF96365（50μmol/L）均能明显抑制急性缺氧条件下CPA诱导的[Ca2＋]i升高,但对高钾（60 mmol/L KCl）Krebs溶液引起的[Ca2＋]i反应无影响。结论：急性缺氧能够使CPA诱导的大鼠远端PVSMC的[Ca2＋]i升高增强,[Ca2＋]i升高可被SOCC阻断剂阻断,提示急性缺氧能够增强SOCC活性,使细胞外Ca2＋通过SOCC内流增强,从而导致大鼠远端PVSMC的[Ca2＋]i升高。

体外循环不同氧分压对心脏瓣膜置换患者红细胞内钙的影响

目的观察体外循环(CPB)中不同氧分压对心脏瓣膜置换患者红细胞内Ca2+含量的影响。方法选择择期在CPB下行心脏瓣膜置换术的患者20例,随机分为高氧分压组(Ⅰ组)和常氧分压组(Ⅱ组),每组各10例。CPB中通过调节吸入氧浓度(FiO2)调节PaO2,Ⅰ组:全程PaO2在350~500 mmHg。Ⅱ组:控制PaO2在100~250 mHg。两组均在麻醉前(T1)、CPB前(T2)、转机后15 min(T3)、主动脉开放15 min(T4)、术后24 h(T5)抽动脉血测红细胞内Ca2+含量。结果两组患者红细胞内Ca2+含量组内T1~T4比较差异无统计学意义(P>0.05);术后24 h(T5)降低,与各时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组间相同时间点比较无明显差异(P>0.05)。结论 CPB高氧分压对心脏瓣膜置换手术患者的红细胞内Ca2+含量无明显影响。

细胞内高钙对小鼠小脑浦肯野细胞动作电位编码的影响

目的:通过向细胞内微量注射IP3受体激动剂诱发细胞内高钙,探讨细胞内高钙对小鼠小脑浦肯野细胞内在电生理特性变化的影响。方法:取小鼠小脑蚓部做矢状切片(400μm)。采用Axoclamp-2B放大器全细胞记录模式,记录细胞内Ca2+浓度升高前后浦肯野细胞动作电位的阈电位和绝对不应期;电信号输入pClamp9.2软件获取和分析群集发放的动作电位峰间距和动作电位峰时程标准差,进行数据采集和分析,观察细胞内Ca2+浓度升高早期浦肯野细胞内在电生理特性的变化。结果:细胞内Ca2+浓度升高后的短时间内,与高钙前相比,小脑浦肯野细胞群集发放动作电位的不应期缩短和激发动作电位的阈电位降低(P<0.001)。结论:细胞内高钙改变动作电位的不应期和阈电位,使浦肯野细胞兴奋增加,动作电位的编码能力降低。

15-KETE对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙离子浓度的影响

目的探讨15-KETE对大鼠肺动脉平滑肌细胞内Ca2+的作用及其来源。方法以酶法(胶原酶Ⅰ型和弹性酶)分离培养原代大鼠肺动脉平滑肌细胞,将细胞稀释所需密度(2×105个/mL),加样于6孔板中的盖玻片上,放入37℃孵箱中培养12 h,细胞贴壁后,取出6孔板中的盖玻片,放入特制的小槽内,D-Hanks液冲洗细胞3次,加入1×10-5mol/L的Flou-3/AM,置37℃孵箱中避光孵育约30 min,用D-Hanks液洗去细胞外残留染料,应用激光扫描共聚焦显微镜技术,测定了15-KETE对大鼠肺动脉平滑肌细胞游离钙离子浓度的影响。结果 1)15-KETE(1×10-8—1×10-6)mol/L可依赖性引起肺动脉平滑肌细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)增加;2)1×10-6mol/L维拉帕米(L-型钙离子通道阻断剂)和无钙离子细胞外液显著阻抑了1×10-6mol/L 15-KETE引起肺动脉平滑肌[Ca2+]i增加。结论 15-KETE可引起大鼠肺动脉平滑肌[Ca2+]i增加,并且此钙来源于细胞外液钙离子。

谷氨酸致脑缺血再灌注损伤中钙超载的信号转导机制

目的观察谷氨酸所致脑缺血再灌注的钙超载损伤,探究谷氨酸参与调控钙超载的分子机制。方法建立大鼠脑缺血再灌注模型以及体外培养小鼠的小脑颗粒神经元,随机分组:对照组(5只)、二甲基亚砜溶剂组(3只)、谷氨酸组(5只)、硝苯地平组(4只)、谷氨酸+硝苯地平组(4只)、TRPC1中和性抗体组(5只)、谷氨酸+TRPC1中和性抗体组(5只)。采用干湿重法测定大鼠脑水肿程度,采用激光共聚焦显微镜fura-2探针检测神经元细胞内Ca^(2+)水平。结果在大鼠MCAO模型中,谷氨酸明显增加脑水肿(P<0.05),硝苯地平显著抑制由谷氨酸引起的脑水肿(P>0.05),而TRPC1中和性抗体无此效应(P<0.05)。在体外神经元培养中,谷氨酸显著增加细胞内Ca2+水平,而硝苯地平能降低由谷氨酸引起的神经元内Ca2+升高,差异有统计学意义(P<0.05);TRPC1中和性抗体只能部分降低谷氨酸引起的神经元内Ca2+升高,差异无统计学意义(P>0.05)。结论谷氨酸在脑缺血再灌注中所致钙超载,主要通过L-型钙通道钙内流后激活钙库释放,最终导致脑水肿。钙库调控的TRPC1通道不参与谷氨酸所致的钙超载。

P2Y6受体在慢性癫痫发作大鼠海马组织中的表达及对Ca^(2+)的影响

目的:建立慢性癫痫发作SD大鼠模型并检测海马组织P2Y6受体表达改变,研究P2Y6受体-Ca2+信号通路改变。方法:采用氯化锂和匹罗卡品腹腔注射建立SD大鼠慢性癫痫发作模型(EPI组)并检测其脑电图,以腹腔注射生理盐水SD大鼠为对照(CON组)。采用免疫组织化学、RT-PCR和Western blot检测EPI组和CON组SD大鼠海马组织P2Y6受体mRNA和蛋白质表达并比较其差异。采用Fura-2/AM检测EPI组和CON组SD大鼠新鲜海马组织细胞内Ca2+浓度并对比其差异。结果:CON组正常SD大鼠脑电图波形主要以α波为主,并伴有低幅度的β波及少量的δ波,几乎未捕捉到棘波发放;EPI组SD大鼠的脑电图出现较为规律的棘波发放,其频率多集中于28Hz,波幅不高于200μV。EPI组慢性癫痫发作SD大鼠海马组织P2Y6受体表达、mRNA、蛋白质和细胞内Ca2+显著高于CON组正常SD大鼠(均P<0.05)。结论:P2Y6受体在慢性癫痫发作大鼠海马组织表达显著升高,激活下游信号传导通路导致细胞内Ca2+水平升高,可能在慢性癫痫发作的发病机制中具有重要作用。

心肌缺血再灌注损伤与钙超载

缺血性心脏病以其高发病率和死亡率正威胁着人们的生命。改善心肌缺血最理想的方法是恢复灌注,而恢复灌注会引起已经经历了缺血的、潜在的、有活性的细胞的杀伤或功能失调,这就是再灌注损伤(reperfusion injury RI)。引起心肌缺血再灌注损伤的机制复杂多样,如细胞内钙超载、氧自由基损伤、能量代谢障碍等。本文就心肌缺血再灌注时细胞内钙超载的发生机制进行综述。

镉致大鼠大脑皮质神经细胞凋亡的机理及N-乙酰半胱氨酸的保护作用

对神经细胞用不同浓度(0、5、10、20μmol/L)醋酸镉染毒和N-乙酰半胱氨酸(NAC)(100μmol/L)进行保护,通过流式细胞仪检测了细胞凋亡率、[Ca2+]i和活性氧(ROS)水平。结果表明,与对照组相比,各染毒组细胞凋亡率、细胞内[Ca2+]i和ROS水平明显升高,呈剂量-效应关系,除5μmol/L组ROS水平外,均差异极显著(P<0.01)。添加NAC组与相应染毒组比较,神经细胞凋亡率有降低趋势,但差异不显著(P>0.05);10、20μmol/L组细胞内[Ca2+]i和ROS水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。表明镉可诱导神经细胞凋亡,其机理可能与细胞内Ca2+和ROS水平升高有关,NAC对其有一定的保护作用。

甜菜碱促进小鼠脾淋巴细胞增殖作用的钙通道机制研究

目的:研究甜菜碱促进小鼠脾淋巴细胞的增殖作用与钙通道的关系。方法:采用清洁级BALB/c小鼠分离小鼠脾淋巴细胞后体外培养的方式获得小鼠脾淋巴细胞,分为阴性对照组、ConA组、甜菜碱0.04,0.4,4,20mmol.L-1组。分别采用MTT法观察甜菜碱对小鼠脾淋巴细胞增殖的作用,流式细胞术测定甜菜碱对小鼠脾淋巴细胞周期的变化,激光共聚焦扫描显微镜观察甜菜碱对小鼠脾淋巴细胞内钙浓度的变化及加入不同钙通道阻滞剂后细胞内钙浓度的变化。结果:4,20mmol.L-1甜菜碱体外作用于小鼠脾淋巴细胞12h促进小鼠脾淋巴细胞增殖,0.04,0.4,4,20mmol.L-1甜菜碱分别体外作用于小鼠脾淋巴细胞24,48h均促进小鼠脾淋巴细胞增殖,以4mmol.L-1甜菜碱作用24h效果最好;4mmol.L-1甜菜碱作用小鼠脾淋巴细胞4,6,18,24h能促使小鼠脾淋巴细胞由G0/G1期进入S期,并以18h效果最为明显;4mmol.L-1甜菜碱作用于淋巴细胞6,12,18h,脾淋巴细胞内Ca2+浓度明显升高(P<0.01),以6h效果最明显;钙通道阻滞剂硝苯地平、地尔硫卓、咪贝地尔、金雀异黄素对甜菜碱升高小鼠脾淋巴细胞内钙离子浓度没有影响,而维拉帕米、新霉素、肝素、普鲁卡因能阻断甜菜碱升高小鼠脾淋巴细胞内钙离子浓度。结论:甜菜碱通过升高小鼠脾淋巴细胞内钙离子浓度而促进小鼠脾淋巴细胞由G0/G1期进入S期,促小鼠脾淋巴细胞增殖的作用。细胞内钙离子浓度升高主要通过2个途径:影响G蛋白介导的L-型电压门控钙通道的α亚单位而引起外钙内流;影响胞内钙库的IPR钙通道和RyR钙通道而引起内钙释放。

地卓西平对甲基汞致大鼠脑皮质细胞内钙稳态失调的影响

目的研究地卓西平对甲基汞致大鼠脑皮质细胞内钙稳态失调的影响。方法 Wistar大鼠32只,按体重随机分成4组,每组8只。第1组为对照组,腹腔注射0.9%氯化钠;第2组为低剂量甲基汞染毒组,腹腔注射4μmol/kg的甲基汞溶液;第3组为高剂量甲基汞染毒组,腹腔注射12μmol/kg的甲基汞溶液;第4组为地卓西平预处理组,隔日皮下注射0.3μmol/kg地卓西平,2 h后腹腔注射12μmol/kg的甲基汞溶液;注射容量均为5 ml/kg,染毒4周,每周5次。观察神经细胞内Ca2+浓度及其凋亡情况,同时测定脑皮质Hg含量和与维持钙稳态相关的酶Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性。结果染毒4周后,随着染毒剂量的增加,脑皮质Hg含量和细胞内Ca2+浓度均明显升高(P<0.01);细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.01);脑皮质Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性均不同程度的受到抑制。地卓西平预处理可以明显缓解神经细胞凋亡和细胞内Ca2+超载,对Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性也有一定程度的恢复作用。结论甲基汞通过抑制与维持钙稳态相关的酶Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性,干扰神经细胞内钙稳态,进而造成神经细胞凋亡。地卓西平可以阻断Ca2+通道对钙稳态失调引起的细胞损伤有拮抗作用。

细胞内钙离子振荡的调制作用

分别考虑了简单周期性和复杂性钙离子振荡对一些特殊规律的细胞功能的影响,例如,肝细胞中磷酸化-去磷酸化循环的肝糖磷酸化激活酶的控制和基因表达等.结果表明简单周期的钙离子振荡表现出许多共同的表型且有很多数学模型.在简单钙离子振荡情况下细胞内钙离子振荡的周期随IP3浓度的增大而减少,Ca2+浓度的平均值在振荡发生区域内随IP3浓度的增大而增大.爆发性、混沌和准周期的复杂钙离子振荡会调制肝糖磷酸化激活酶在同样的区域内出现振荡.