不同吸氧方式对小鼠骨髓细胞辐射后凋亡的实验研究

目的:探讨在直线加速器照射下,低浓度氧吸入、碳和氧吸入和高低氧吸入等三种不同的方式对小鼠骨髓细胞辐射后的影响。方法:昆明小鼠随机分为对照组、高氧组,低氧组和高低氧组。采用6MVX线全身单次照射,剂量4.5Gy。照射后1d取小鼠股骨,各组照射后8h,免疫细胞化学检测bcl2蛋白的表达,图象分析仪测定相对含量;4.5Gy各组照射后8h,流式细胞仪PI染色测定骨髓细胞凋亡率。结果:1)高低氧组与空气组bcl2蛋白的表达分别为0.65±0.20和0.64±0.15,q=2.76,P=0.090。高氧组和低氧组bcl2的表达分别为0.43±0.11和0.96±0.20,与空气组比较差异有统计学意义,q=5.75,P=0.010;q=3.13,P=0.030。2)高氧组、空气组、低氧组和高低氧组的骨髓细胞凋亡率分别为35.20±5.99、27.57±5.36、11.63±3.34和23.18±4.53,高氧组和低氧组与空气组比较,骨髓细胞凋亡率分别增高和降低,q=6.24,P=0.009;q=3.79,P=0.030。而高低氧组与空气组比较差异无统计学意义,P=0.120。结论:bcl2免疫组化定量表达是辐射所致骨髓早期损伤的分子标志;低氧放疗减轻辐射所致骨髓细胞的凋亡,高氧放疗加重辐射所致骨髓细胞的凋亡;高低氧放疗可消除高氧加重的骨髓辐射损伤,在一定程度上具有放射防护作用。

放射诱导的六株细胞系细胞周期和细胞凋亡变化的观察

目的:探讨放射诱导的6株细胞系细胞周期和细胞凋亡的变化特点。方法:正常肝细胞系HL-7702,肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721,肺小细胞癌HCI-H460,肺腺癌A549和宫颈癌细胞系Hela常规培养48h后接受4GyX射线照射;收获受照前(0h)和受照后6、12、24、36和48h的细胞,采用流式细胞术(FCM)检测各细胞系细胞凋亡和细胞周期。结果:在4GyX线照射前,SMMC-7721和HCI-H460细胞凋亡率明显高于其他4株细胞系,两者差异有统计学意义(t=20.98,P<0.005);在照射后12h,与照射前相比6株细胞系细胞凋亡率均有显著增加(t=5.27,P<0.05),SMMC-7721、HCI-H460和A549同时伴有S期和G2～M期细胞比率的降低;在照射后36hHCI-H460出现第2个细胞凋亡峰,伴有极低比例的S期和G2～M期细胞;HepG2在照射后12h、HL-7702和Hela在照射后24h均有明显的G2/M期阻滞。结论:4GyX线诱导的细胞凋亡主要发生在射线照射后12～36h,6株细胞系可能均发生了"有丝分裂前凋亡";每株细胞还呈现了不同的细胞凋亡和细胞周期变化特点,具有组织细胞特异性。

极低频电磁场诱导人骨肉瘤细胞凋亡及其机制研究

目的：探索极低频电磁场对人骨肉瘤细胞增殖凋亡的影响及其分子机制。方法：采用50 Hz、1 mT 的极低频电磁场作用于人骨肉瘤细胞MG－63，通过MTT法检测MG－63细胞的存活率，通过流式细胞术检测MG－63细胞的凋亡率及活性氧水平，并检测 MG－63细胞给予活性氧抑制剂 N－乙酰半胱氨酸（ NAC ）及p38 MAPK抑制剂SB203580作用后细胞凋亡率的变化；通过蛋白质印迹法检测极低频电磁场处理及NAC干预后MG－63细胞p38 MAPK蛋白水平。结果：极低频电磁场能够显著抑制MG－63细胞的存活率，诱导MG－63细胞凋亡及活性氧生成；给予2．5 mmol／L NAC或SB203580干预后MG－63细胞凋亡率显著下降；极低频电磁场处理MG－63细胞后胞内p38 MAPK表达增多，而NAC干预后磷酸化p38 MAPK减少。结论：极低频电磁场可诱导人骨肉瘤细胞MG－63凋亡，其机制可能与活性氧生成增加、p38 MAPK激活有关。