细胞凋亡易感蛋白在恶性肿瘤中作用及机制的研究进展

细胞凋亡易感蛋白(CAS)与多种肿瘤细胞凋亡、侵袭、转移及疾病预后等相关,包括神经系统肿瘤、消化系统肿瘤及生殖系统肿瘤等。本研究从CAS在恶性肿瘤中的表达、在肿瘤发生发展过程中发挥的作用及其机制方面对其在恶性肿瘤诊疗中的最新研究进展做一综述,为肿瘤疾病的预防、诊断及治疗提供辅助工具。

乙型肝炎病毒DNA多聚酶RNase H对细胞凋亡易感基因表达的上调作用

目的探讨乙型肝炎病毒DNA多聚酶(HBV DNA P)结构域蛋白RNase H对细胞凋亡易感基因(CAS)的转录激活作用。方法以HBV DNA P结构域蛋白RNase H的反式调节因子的基因表达谱芯片结果为基础,利用生物信息学技术确定CAS的启动子区域(CASp),扩增CASp并克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-CASp报告载体。分别以该质粒单独或与pcDNA3.1(-)-RH共转染肝癌细胞系HepG2细胞,ELISA法检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性,并以pCAT3-Basic空载体、pCAT3-TXNRD1p分别转染HepG2细胞作为阴性和阳性对照。结果pCAT3-CASp和pcDNA3.1(-)-RH瞬时共转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3-CASp的1.5倍,是pCAT3-Basic空载体的2.7倍。结论本实验进一步验证了我室利用基因表达谱技术研究RNase H蛋白反式激活作用的结果。我室克隆的CAS启动子具有顺式激活下游基因的活性;HBV的RNase H蛋白具有对CAS的反式激活作用。

细胞凋亡易感基因的研究进展

细胞凋亡易感基因（cellular apoptosis susceptibihtygene，CAS／CSE1L）最初在乳癌细胞中发现，位于染色体的20q13区域，与酵母染色体分离基因（CSE1）同源，CAS编码蛋白是一种核转运因子，参与了细胞凋亡与细胞增生这2个过程。CAS在人类肿瘤细胞系、睾丸、胚胎肝脏以及包含有分裂活跃细胞的组织（如淋巴组织）中表达明显增强，

颅脑损伤后冷环境下神经细胞凋亡及相关蛋白表达

目的探讨冷环境下大鼠颅脑损伤后神经细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。方法 80只健康SD大鼠随机分为冷环境致伤组、常温致伤组、冷环境对照组和常温对照组,每组20只;致伤组以撞击法制作重型颅脑损伤模型,对照组仅行开颅手术。采用免疫组化法检测各组神经细胞凋亡及凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达;比较各组大鼠的体温变化、凋亡细胞及凋亡蛋白阳性率差异。结果冷环境致伤组致伤后大鼠体温显著下降。不同致伤组致伤后凋亡细胞阳性率均显著增加,且两组同时间段比较存在显著差异(P<0.05)。不同致伤组致伤后凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达均增高,两组同时间段Bax表达差异有统计学意义(P<0.05);冷环境致伤组Bax/Bcl-2比值明显高于常温致伤组(P<0.05)。结论冷环境可引起颅脑损伤后大鼠体温降低,促进神经细胞凋亡。

乳腺癌组织CAS蛋白的表达及其与细胞增殖和凋亡的关系

目的分析乳腺癌组织CAS蛋白的表达水平与细胞增殖、凋亡指数及患者临床指标的关系。方法收集普通导管增生20例、异型导管增生20例、导管原位癌10例、浸润性导管癌53例、正常乳腺组织14例的标本,用免疫组织化学方法观察标本组织中CAS蛋白的表达,用ki-67标记细胞增殖指数,用TUNEL法测定凋亡指数,并进行相关统计学分析。结果 CAS在正常乳腺、普通导管增生、异型导管增生、导管原位癌、浸润性导管癌中的阳性率逐渐升高,分别为14.3%(2/14)、25.0%(0/20)、40.0%(8/20)、60.0%(6/10)、75.5%(40/53),差异有统计学意义(χ2=29.382,P=0.000);CAS的表达与乳腺浸润性导管癌患者的年龄、肿瘤大小、肿瘤分期无关,与肿瘤的组织学分级、核分裂像、淋巴结转移有关(P<0.01,P<0.05);CAS评分与细胞增殖指数呈正相关(r=0.439,P=0.003),而与凋亡指数无相关性(r=0.248,P=0.083)。结论乳腺癌组织中,CAS的表达和细胞增殖指数间具有一定的相关性。

组蛋白H2A去泛素化酶BAP1对恶性胶质瘤细胞发生发展的作用及临床应用价值研究

目的探索乳腺癌/卵巢癌易感基因1相关蛋白1(breast/ovarian cancer susceptibility gene 1 associated protein 1,BAP1)对人源恶性胶质瘤发生、发展的作用与BAP1作为恶性胶质瘤临床诊断标志物的可行性。方法基于基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)的子数据集GSE4290,GSE90598,分析BAP1在正常组织及胶质瘤组织中的差异性表达情况;受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析BAP1对恶性胶质瘤的早期诊断价值;选取自主收集的非配对28例恶性胶质瘤患者的原发灶组织、5例颅脑外伤患者内减压术切除的非瘤脑组织,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测BAP1的表达水平;利用靶向BAP1的特异性小干扰RNAs(small interfering RNAs,siRNAs)瞬时转染U251细胞系,进一步检测其干涉效率;基于流式细胞仪分析BAP1下调的U251细胞系,其细胞周期、凋亡的变化情况。结果生物信息学结果显示,BAP1在恶性胶质瘤组织中的表达水平均低于正常脑组织(GSE4290:1209±18.49 vs 1476±53.90;GSE90598:5.19±0.10 vs 5.65±0.21),差异具有统计学意义(t=5.115,2.267,均P<0.05)。ROC曲线显示,BAP1可高效区分恶性胶质瘤组织与正常脑组织(GSE4290:AUC=0.78;GSE90598:AUC=0.75,均P<0.05)。临床标本结果显示,BAP1在恶性胶质瘤原发灶组织中的表达水平显著低于非瘤脑组织(0.27±0.04 vs 1.06±0.07),差异具有统计学意义(t=10.22,P<0.001)。在U251细胞系中下调BAP1的表达,其细胞周期中S期细胞比例明显增多,由17.59%分别增至27.21%(siBAP1-1)和25.79%(siBAP1-2),差异具有统计学意义(t=6.576,6.642,均P<0.01),而细胞凋亡水平则有所下降,由10.17%分别降至2.70%(siBAP-1)和3.00%(siBAP-2),差异具有统计学意义(t=10.31,9.428,均P<0.01)。结论组蛋白H2A去泛素化酶BAP1能够通过抑制恶性胶质瘤细胞周期快速进展并促进其凋亡,进而发挥肿瘤抑癌基因的功能,可作为潜在的恶性胶质瘤临床诊断标志物。

针刺肥胖合并高脂血症大鼠时Bcl-2的变化对肝细胞凋亡的影响

观察针刺肥胖合并高脂血症大鼠时Bcl-2表达的变化对肝细胞凋亡的影响。方法:将50只SD雄性大鼠随机分为正常组(n=10)和高脂组(n=40),正常组用普通饲料喂养;高脂组用自制高脂致肥饲料喂养。造模12周,将高脂组符合肥胖合并高脂血症模型的动物20只再随机分为模型组和针刺组,每组10只。针刺组取足三里穴、内庭穴和天枢穴行针刺治疗。治疗14d,每天1次。观察大鼠体重、体长、Lee’s指数和血脂的变化;用HE染色法,在光镜下观察肝组织形态学变化;运用TUNEL方法检测肝细胞凋亡的情况;通过免疫组织化学方法检测肝组织Bcl-2蛋白表达的变化。结果:针刺组体重、体长较模型组体重明显下降(P<0.01);针刺组与模型组相比TC、TG、VLDL-C含量均显著降低(P<0.01),HDL-C含量显著升高(P<0.01);针刺组大鼠肝细胞凋亡指数则较模型组明显降低(P<0.01);针刺组与模型组比较,肝组织Bcl-2蛋白的阳性率明显升高,差异有显著性(P<0.01)。结论:针刺可以降低肥胖合并高脂血症大鼠的体重和Lee’s指数,起到减肥作用;针刺可以改善血脂代谢紊乱;Bcl-2表达改变在针刺降低肥胖合并高脂血症大鼠肝细胞凋亡中可能有重要作用。

CASC19低表达对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探讨癌症易感候选基因19(CASC19)低表达对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法常规培养人口腔角质细胞NOK及OSCC细胞SCC9、HSC3、CAL-27,并用实时荧光定量PCR法确定SCC9细胞作为实验细胞。取对数生长期SCC9细胞并随机分组,用脂质体法将CASC19过表达对照质粒(pcDNA)、CASC19过表达质粒(pcDNA-CASC19)、CASC19抑制表达对照质粒(si-NC)、CASC19抑制表达质粒(si-CASC19)、miR-802阴性对照质粒(miR-NC)、miR-802模拟物(miR-802)分别转染至pcDNA组、pcDNA-CASC19组、si-NC组、si-CASC19组、miR-NC组、miR-802组;将si-CASC19与miR-802抑制剂阴性对照质粒(anti-miR-NC)、miR-802抑制剂(anti-miR-802)共转染至si-CASC19+anti-miR-NC组、si-CASC19+anti-miR-802组,用实时荧光定量PCR法检测细胞内miR-802、CASC19表达确认转染效率。用双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA CASC19与miR-802的靶向关系,Western blotting法检测细胞内细胞周蛋白D1(Cyclin D1)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果CASC19与miR-802存在结合位点。与pcDNA组比较,pcDNA-CASC19组miR-802相对表达量低(P<0.05);与si-NC组比较,si-CASC19组miR-802相对表达量高。细胞培养48、72 h,与si-NC组比较,si-CASC19组OD值低,细胞凋亡率高,Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达低,p21、Bax蛋白表达高(P均<0.05)。与si-NC组比较,si-CASC19组培养48、72 h细胞增殖活力低,细胞凋亡率高,Cyclin D1、Bcl-2蛋白相对表达量低,p21、Bax蛋白相对表达量高(P均<0.05);与si-CASC19+anti-miR-NC组比较,si-CASC19+anti-miR-802组培养48、72 h细胞增殖活力高,细胞凋亡率低,Cyclin D1、Bcl-2蛋白相对表达量高,p21、Bax蛋白相对表达量低(P均<0.05)。结论CASC19低表达可抑制OSCC细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与靶向调控miR-802表达有关。

LncRNA CASC2靶向调控miR-155-5p及其对HCC细胞恶性表型的影响

目的:长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)癌易感性候选基因2(cancer susceptibility candidate gene 2,CASC2)在卵巢癌、肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)等多种恶性肿瘤中发挥抑癌基因的作用,但其在HCC中的作用机制尚未完全清楚。本研究旨在分析CASC2在HCC组织中的表达及临床意义,并探讨CASC2对人肝癌细胞系Huh-7细胞恶性表型的影响及其可能的作用机制。方法:采用real-time RT-PCR检测HCC组织和HCC细胞系中CASC2和miR-155-5p的表达水平,分析CASC2的表达水平与HCC患者临床病理特征及预后的关系;采用双荧光素酶报告基因实验检测CASC2和miR-155-5p的靶向关系;将pcDNA3.1-CASC2重组质粒、pcDNA3.1空质粒、miR-155-5p模拟物(mimic)及miR-155-5p模拟物的阴性对照(miR-NC)分别或共同转染至Huh-7细胞中,并根据感染物的不同将细胞分为空白对照组、pcDNA3.1组、pcDNA3.1-CASC2组、pcDNA3.1-CASC2+miR-155-5p组、pcDNA3.1-CASC2+miR-NC组,再分别采用四甲基噻唑蓝(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)法、Annexin V/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染色法、Transwell实验检测CASC2靶向调控miR-155-5p对Huh-7细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。结果:CASC2在HCC组织和细胞系中均表达下调,miR-155-5p在HCC组织和细胞系中均表达水平升高,两者呈显著负相关(r=−0.388,P<0.05)。HCC患者中CASC2的表达与甲胎蛋白水平、肿瘤大小、TNM分期、分化程度、肝内转移及不良预后均密切相关(均P<0.05)。CSAC2靶向负调控miR-155-5p的表达,pcDNA3.1-CASC2组细胞增殖活力显著低于空白对照组和pcDNA3.1组(均P<0.05);与pcDNA3.1-CASC2组相比,pcDNA3.1-CASC2+miR-155-5p组细胞的增殖活力增强,差异具有统计学意义(P<0.05)。pcDNA3.1-CASC2组细胞凋亡率明显高于空白对照组和pcDNA3.1组(均P<0.05);与pcDNA3.1-CASC2组相比,pcDNA3.1-CASC2+miR-155-5p组细胞的凋亡率显著降低(P<0.05)。与空白对照组和pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-CASC2组迁移和侵袭细胞数量均显著降低(均P<0.05);与pcDNA3.1-CASC2组相比,pcDNA3.1-CASC2+miR-155-5p组迁移和侵袭的细胞数量均显著升高(均P<0.05)。结论:CASC2在HCC组织和细胞中呈低表达,与HCC预后密切相关,过表达CASC2可通过靶向调控miR-155-5p抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。

人乳腺癌易感基因1(BRCA1)的研究进展

BRCA1为具有遗传倾向的乳腺癌和卵巢癌的易感基因,BRCA1基因的突变与家族性乳腺癌及它在细胞周期的调节,DNA损伤修复,基因的转录调控和诱导细胞凋亡方面起着重要作用。BRCA1基因的突变与家族性乳腺癌及卵巢癌的发生密切相关,对BRCA1分子功能的研究,将有利于阐明肿瘤发生的机理。本文就BRCA1基因生物学特性、与肿瘤的关系及其作用机制做一综述。

胃肠肿瘤易感基因调控网络的生物信息学研究

基因调节是一个连续而复杂的过程，正常细胞中的基因通过多途径、多步调节的网络来控制细胞生长、发育和细胞凋亡，也是细胞分化和肿瘤生成等生物现象的深层原因。基因调控网络是连续的多层次动力系统模型，具有稳定性、层次性、复杂性、

细胞凋亡易感蛋白在睾丸癌中的表达及其对NT-2细胞增殖的影响

目的探讨细胞凋亡易感蛋白(cellular apoptosis susceptibility protein,CAS)在睾丸生殖细胞肿瘤(testicular germ cell tumor,TGCT)中的表达及其对NT-2细胞增殖的影响。方法免疫组化法检测CAS在正常人睾丸细胞及各种睾丸癌细胞中表达及定位;经转染腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)沉默CAS质粒(AAV-shCAS质粒)敲减NT-2细胞中CAS后,CCK-8法检测NT-2细胞生长活力,Western blot法检测CAS对NT-2细胞凋亡信号分子表达水平的影响。结果CAS在正常人睾丸组织中呈中等强度表达,在癌旁睾丸组织中呈中、高强度表达,其中仅1份组织样本呈阴性;CAS在精原细胞瘤和胚胎瘤中呈低、高表达,其中,胚胎瘤中有1份样本呈阴性。CAS在正常人睾丸组织和癌旁睾丸组织中,主要表达于精母细胞胞核;精原细胞瘤和胚胎瘤中,CAS主要表达于细胞质。敲减CAS表达的NT-2细胞生长活力显著下降(P<0.001),CAS、p65、RelB、Bcl-XL、Bcl-2的表达水平显著降低(P均<0.05),p53表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论正常人睾丸组织及TGCT中,CAS的表达位置不同;沉默NT-2细胞中CAS表达可通过抑制NF-κB/Bcl-2信号通路分子的表达从而抑制细胞增殖。

P65、survivin、bcl-2与PARP蛋白在非小细胞肺癌中的表达及相关性

目的探讨人非小细胞肺癌(NSCLC)中P65与凋亡相关蛋白survivin、bcl-2和聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)蛋白的相关性。方法采用免疫组织化学染色方法检测112例NSCLC患者肺癌组织中survivin、bcl-2,PARP及P65蛋白的表达。结果 P65、survivin、bcl-2、PARP蛋白阳性表达率分别为67.9%、88.4%、58.0%、28.6%。survivin与NSCLC临床分期相关;bcl-2与肿瘤组织学类型相关;survivin与bcl-2表达呈正相关(P均<0.05)。P65表达随肿瘤恶性程度的增加递增,且与survivin、bcl-2、PARP表达呈正相关(P<0.05)。结论 NSCLC中survivin、bcl-2蛋白表达上调,P65蛋白过度活化可能是其发生发展的重要原因。survivin蛋白可作为判断NSCLC预后的参考指标。P65蛋白促进survivin、bcl-2蛋白的转录,并可能参与PARP蛋白的调节。

原发性胃癌中细胞凋亡易感基因扩增的研究

目的 探讨原发性胃癌中CAS基因扩增情况及其与胃癌临床病理学特征之间的关系.方法 用实时荧光定量PCR方法检测37例胃癌中CAS基因DNA拷贝数.结果 原发性胃癌中CAS基因平均拷贝数显著高于癌旁组织（0.771比0.437,P＜0.05） CAS扩增率为29.7%（11/37）.淋巴结转移者CAS基因扩增率高于无淋巴结转移者（45.0%比11.8%,P＜0.05）.结论 CAS基因可促进胃癌的形成,并与胃癌的淋巴结转移关系密切.

LncRNA CASC9通过调控miR-423-5p/NRSN2轴促进口腔鳞状细胞癌细胞增殖并抑制细胞凋亡

口腔鳞状细胞癌(OSCC)是一种侵袭性强的头颈部恶性肿瘤,严重威胁着人类的身体健康。该研究旨在探讨长链非编码RNA肿瘤易感候选者9(Lnc RNA CASC9)调控mi R-423-5p/neurensin-2(NRSN2)轴对OSCC细胞增殖和凋亡的影响。采用qRT-PCR检测OSCC癌组织及HSC-3、CAL-27、SCC-15细胞中CASC9水平;将SCC-15细胞分为对照组、sh-NC-1组、sh-CASC9组、miR-NC组、miR-423-5p mimics组、anti-miR-NC组、anti-miR-423-5p组、sh-NC组、sh-NRSN2组、shCASC9+anti-miR-NC组、sh-CASC9+anti-miR-423-5p组,qRT-PCR检测CASC9和miR-423-5p表达,CCK-8、流式细胞术、Western blot分别检测细胞增殖、凋亡及NRSN2蛋白表达情况;裸鼠体内移植瘤实验观察CASC9对肿瘤生长的影响;RNA pull down及双荧光素酶报告基因实验检测miR-423-5p与CASC9、NRSN2的靶向关系。结果显示,在OSCC组织和细胞中CASC9呈高表达,且在SCC-15细胞中CASC9表达量最高,故以SCC-15细胞为研究对象;沉默CASC9可抑制SCC-15细胞增殖、促进凋亡并抑制裸鼠体内肿瘤的形成(P<0.05);CASC9靶向负调控miR-423-5p表达,miR-423-5p靶向负调控NRSN2表达;抑制miR-423-5p可促进SCC-15细胞增殖、抑制凋亡;下调NRSN2可抑制SCC-15细胞增殖、促进凋亡;抑制miR-423-5p表达减弱了沉默CASC9对OSCC细胞所发挥的作用(P<0.05)。总之,沉默CASC9可能通过靶向上调mi R-423-5p来抑制NRSN2表达进而抑制SCC-15细胞的增殖,促进细胞凋亡。

脂蟾毒配基对人胃癌BGC-823细胞系细胞生长的干预效应

目的:观察中药蟾酥主要成分之一——脂蟾毒配基对体外培养人胃癌BGC-823细胞系细胞生长的干预及其与细胞色素C和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活化的关系。方法:实验于2004-09/2005-12在北京大学医学部细胞生物学系实验室完成。体外培养人胃癌BGC-823细胞系,脂蟾毒配基各组加入不同浓度的脂蟾毒配基(先用二甲基亚砜溶解,再经RPMI-1640培养液稀释至终浓度。细胞增殖及增殖抑制实验、细胞核形态观察及核DNA含量测定实验中脂蟾毒配基浓度分别为0.1,1,10μmol/L;细胞周期分布实验、细胞凋亡率实验、线粒体膜电位实验中脂蟾毒配基浓度分别为0,1,2.5,5μmol/L)。空白对照组加入RPMI-1640培养液。盐酸阿克拉霉素组加入5μmol/L盐酸阿克拉霉素。采用酸性磷酸酶法检测细胞增殖抑制作用;细胞荧光分光光度仪观察细胞核形态及核DNA含量测定;流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及其线粒体膜电位变化;Westernblot检测与细胞凋亡相关基因蛋白表达的变化。结果:①经0.1,1,10μmol/L脂蟾毒配基分别作用24,48,72h后,细胞生长显著抑制,脂蟾毒配基对癌细胞的生长抑制百分率与剂量、时间呈正相关,其IC50分别为3.9,2.0,1.5μmol/L。②随脂蟾毒配基作用浓度和时间的延长,癌细胞核荧光强度减弱,细胞核DNA含量明显降低。③0.1,1μmol/L脂蟾毒配基作用24～48h后癌细胞阻滞在S期,5μmol/L脂蟾毒配基作用72h时,细胞阻滞在G2+M期;盐酸阿克拉霉素与癌细胞作用24～48h,细胞阻滞在S期,作用72h时细胞阻滞在G2+M期。④脂蟾毒配基作用后,细胞凋亡率明显高于对照组。⑤脂蟾毒配基引起细胞线粒体膜电位下降,释放入胞质中的细胞色素C增多,促进半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白活化,抑制Bcl-2蛋白表达,诱导细胞凋亡。结论:体外实验条件下,脂蟾毒配基抑制人胃癌BGC-823细胞生长并诱导细胞发生凋亡,其诱导凋亡作用机制与线粒体通路有关。

夏枯草提取物联合化疗药物对淋巴瘤细胞增殖的影响

目的:研究中药夏枯草提取物(Prunella vulgaris Linn.extract,PVE)联合化疗药物对人淋巴瘤Raji细胞增殖的影响。方法:MTT法检测PVE分别联合紫杉醇(paclitaxel,TAX)、多柔比星(adriamycin,ADM)对Raji细胞的生长抑制率;FCM法检测PVE与TAX联合对Raji细胞周期分布及凋亡的影响;免疫组织化学法检测PVE对Raji细胞内survivin及caspase-3蛋白表达的影响。结果:PVE、TAX及ADM对淋巴瘤Raji细胞的生长均表现出明显的抑制作用,低剂量PVE在0.8～0.0008μg/mL浓度范围内可增强TAX对Raji细胞的抑制作用(P<0.01);在0.08～0.0008μg/mL浓度范围内与ADM联合使用时细胞生长抑制率较单用ADM时明显增高(P<0.01)。与TAX单用组比较,PVE与TAX联用组的S期细胞数下降,G2/M期细胞数明显升高。免疫组织化学检测结果显示,PVE(30μg/mL)可使Raji细胞中caspase-3蛋白表达增强,survivin蛋白表达减弱。结论:PVE可增强Raji细胞对TAX及ADM的敏感性。

细胞凋亡相关斑点样蛋白与半胱氨酸蛋白酶-1在肝癌中的表达及临床意义

目的分析细胞凋亡相关的斑点样蛋白（ASC）与半胱氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）在肝癌与癌旁组织中的表达及临床意义。方法对30例术前未使用放疗与化疗的肝癌与癌旁组织标本采用免疫组化LSAB法进行ASC、Caspase-1测定，并对各指标进行分析。结果ASC阳性率在肝癌与癌旁组织中分别为10．00％（3／30）和73．33％（22／30），组间阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．01）；Caspase．1阳性率分别为23．33％（7／30）和66．67％（20／30），组间阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．01）。ASC与Caspase-1两指标在癌组织中的表达均降低，两者不相关（P〉0．05），在癌旁组织中表达均显著增高，两者呈正相关（r=0．722，P〈0．01）。结论ASC、Caspase-1在肝癌中表达低，且显著低于癌旁组织，提示ASC、Caspase-1与肝癌的凋亡、发生及发展过程密切相关，可作为肝癌的诊断及治疗有希望的靶点。

乳腺浸润性导管癌组织中CAS蛋白表达的临床病理意义

目的研究乳腺浸润性导管癌组织中细胞凋亡易感蛋白(CAS)表达的临床病理意义。方法选取乳腺浸润性导管癌53例、普通导管增生20例、异型导管增生20例、导管原位癌10例、正常乳腺组织14例,应用免疫组化方法观察CAS蛋白的表达,并探讨CAS与乳腺癌临床病理因素的关系,分析CAS和HER2、ER、PR以及ki-67指数的关系。结果 CAS在正常乳腺、普通导管增生、异型导管增生、导管原位癌、浸润性导管癌中的阳性率逐渐升高,分别为14.3%、25.0%、40.0%、60%、75.5%(P=0.000),CAS、HER2均与乳腺癌组织学分级、核分裂像、淋巴结转移有关;CAS评分与ki-67指数(r=0.439,P=0.003)和HER2评分(r=0.598,P=0.000)正相关。结论 CAS与乳腺癌的发生、发展、增殖、淋巴结转移有关,可能作为反映乳腺癌生物学行为的肿瘤标记物,CAS蛋白的表达和HER2有一定的相关性。

布比卡因致高糖培养SH-SY5Y细胞内质网应激增强与活性氧簇增多及凋亡增加

目的将布比卡因作用于高糖培养的SH-SY5Y细胞，观测其对细胞内活性氧簇（reactiveoxygenspecies，ROS）及细胞凋亡的影响。方法不同浓度葡萄糖培养基培养SH-SY5Y细胞，经1mmol／L布比卡因作用6h。采用流式细胞仪检测细胞内ROS产量及细胞凋亡情况、MTT法检测细胞存活率、Westernblot技术检测细胞内GRP78相关蛋白的变化。结果葡萄糖浓度为5．6、6．1、7．0mmol／L的3组间ROS含量差异无统计学意义（P〉0．05）；葡萄糖浓度为7．8、11．1、13.3mmol／L时ROS产量分别高于5．6、6．1、7．0mmol／L组（P〈0．05）。各组细胞存活率（％）依次为（4．29±0．20）、（3．30±0．19）、（6．31±0．14）、（7．89±0．09）、（2．81±0．12、（1．01±0．11，组间差异均具有统计学意义（砌．05）。各组细胞凋亡率（％）依次为（1．80±0．09）、（2．82±0．11）、（3．30±0．21）、（4．31±0．18）、（6．28±0．13）、（7．89±0．08），组间差异均具有统计学意义（P〈0.05）。Grp78表达结果为5．6mmol／L组和6．1mmoUL组分别为（1．02±0．12）和（0．97±0．06），均高于7．0mmol／L组（0．39±0．04）；7．8mmol]L组（0．98±0．06）高于7．0mmol／L组（0．39±0．04）；11．1mmol／L与13．3mmo]／L组低于其他各组，差异均具有统计学意义（P〈0．05）；5．6mmol／L组、6．1mmol／L组和7．8mmo]／L组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论细胞内ROS增多及细胞凋亡增加可能与布比卡因增强高糖培养的SH-SY5Y细胞内质网应激有关，引起细胞内ROS爆发，从而导致细胞损伤和凋亡；而Grp78功能减弱进一步增强细胞内质网应激。