检测猪伪狂犬病病毒gE抗体红细胞凝集试验的建立及应用

以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)—猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为抗原,建立了检测猪伪狂犬病毒gE抗体的红细胞凝集试验。利用方阵滴定试验筛选出最佳抗原工作浓度为55μg/mL,血清最佳稀释度为1∶20,作用时间15 min,与猪瘟(CSF)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪乙型脑炎(JE)、猪布氏杆菌病(Brucellosis)阳性血清和PRV gE缺失疫苗接种的猪免疫血清均不出现红细胞凝集现象,与PRV标准阳性血清反应出现肉眼可见的凝集圈。与美国进口的PRV抗体检测gE-ELISA诊断试剂盒检测结果比较,50份猪血清的阴、阳性检出符合率均为100%。红细胞凝集试验检测方法具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。

白细胞凝集试验及白细胞硷性磷酸酶鉴别新生儿感染性疾病

对１０６例不同疾病的新生儿检测白细胞凝集；并用萘酚ＡＳ－ＭＸ法测定白细胞硷性磷酸酶（ＬＡＰ）活性。结果细菌感染组白细胞凝集率和ＬＡＰ活性均明显高于对照组、非感染组和病毒组；病毒感染组两种检验值均低于对照组。提示此两种检验均是诊断新生儿细菌感染性疾病有意义的检测指标，而且对鉴别细菌和病毒性感染有重要的临床价值。

《日本血吸虫抗体检测间接红细胞凝集试验》(WS/T 630-2018)标准解读

《日本血吸虫抗体检测间接红细胞凝集试验》(WS/T 630-2018)是我国关于日本血吸虫抗体检测(间接红细胞凝集试验)的第一个系统的技术标准文献。本标准于2018年9月26日发布,从2019年4月1日始开始实施。本文从本标准的制定背景、编制过程与方法、主要内容、施行和宣传重点等方面进行了深入解读,以期为各级疾病预防控制机构和医疗机构专业技术人员开展人体血清中日本血吸虫抗体检测提供有益参考。

杂交瘤细胞凝集试验诊断血吸虫病的实验研究

目的 用杂交瘤细胞凝集试验(hybridoma cells agglutination test,HCAT)诊断实验日本血吸虫病,并探讨杂交瘤细胞在特异性血清中凝集的机制。方法 分泌抗血吸虫31/32kDa抗原单抗的杂交瘤细胞H226经特定处理后分别与感染日本血吸虫尾蚴10、30和50条的小鼠血清孵育,动态观察感染后不同时间的凝集反应。上述杂交瘤细胞涂片后与日本血吸虫感染兔血清进行间接免疫荧光试验(IFT),以探讨凝集机制。结果 杂交瘤细胞在感染鼠血清中呈现凝集反应:感染后2wk时,50条尾蚴感染组中70％HCAT阳性,至第5周,全部感染小鼠均出现阳性反应。抗原滴度在感染后逐步升高,感染后6wk时达到最高。重度感染鼠的抗原滴度明显高于中、轻度感染鼠。IFT显示,在杂交瘤细胞膜表面呈现特异性的黄绿色荧光,而细胞内未见显色。结论 HCAT是一种血吸虫病诊断新方法。

自身红细胞凝集试验

自身红细胞凝集试验是近年来由澳大利亚学者研制的一种免疫学检测方法，它使用抗人红细胞单抗的Fab片段和特定抗原（如HIV－1gp41合成多肽）或抗体（如抗HB2）的Fab片段的化学交联物，以患者本身的外周血红细胞作为指示物以完成红细胞凝集试验，整个实验过程仅需2分钟，相当简单快速，本文介绍了这种新型免疫诊断技术的原理、方法、特点及研究进展。

白细胞凝集试验在急性细菌感染性疾病中的动态变化:附60例报告

我们采用白细胞凝集试验,对60例急性细菌感染患儿进行了动态观察,以探讨其临床意义,现报告如下。 方法和结果 一、对象 细菌感染组60例,男34例,女26例。年龄4天～1岁20例,～3岁10例,～7岁17例,～12岁13例。疾病:化脓性脑膜炎8例,化脓性扁桃体炎15例,细菌性肠炎12例(检出福氏痢疾杆菌4例,大肠杆菌6例,沙门氏菌属2例),化脓性兰尾炎5例,化脓性肺炎或脓胸6例,颌下蜂窝组织炎4例,新生儿脐炎6例,化脓性中耳炎、泌尿道感染,腹腔脓肿及左臀部脓肿各1例。病毒感染组60例,

用自身红细胞凝集试验检测肾综合征出血热病人全血中病毒特异性抗体

目的 验证微量快速自身血凝实验检测肾综合征出血热 (HFRS)病人全血中病毒抗体的实用性。方法 采用直接玻片自身血凝试验检测临床诊断为HFRS病人全血中的特异性抗体 ,采用ELISA法作平行对照。结果 检测HFRS病人全血 4 1份 ,自身血凝实验 2 9例 (70 73% )为阳性 ,ELISA法 31例 (75 6 1% )为阳性 ;用自身血凝实验检测 90例正常人全血 ,其中 89例不出现凝集。结论 应用自身血凝实验检测HFRS病人全血中病毒抗体 ,简便、微量、快速、特异性强 ,非常适合基层医疗单位使用。

日本血吸虫抗体检测 间接红细胞凝集试验

前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家卫生标准委员会寄生虫病标准专业委员会提出。本标准起草单位:安徽省血吸虫病防治研究所、中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所、浙江省医学科学院寄生虫病研究所、江苏省血吸虫病防治研究所、江西省寄生虫病防治研究所。本标准主要起草人:张世清、汪天平、许静、闻礼永、章乐生、郑彬、熊彦红、梁幼生、林丹丹。

基于IgY抗体检测日本血吸虫循环抗原的间接红细胞凝集试验的建立

目的建立基于I“的血吸虫循环抗原的间接红细胞凝集试验（indirect hemagglutination test，IHA）并初步探讨IgY在诊断日本血吸虫病中的应用价值。方法以日本血吸虫卵可溶性虫抗原（soluble egg antigen，SEA）免疫海蓝蛋鸡，获得抗SEA的IgY抗体。取人O型红细胞醛化、鞣化，形成鞣化后红细胞，并分别用磷酸盐、碳酸盐和柠檬酸盐缓冲液稀释抗SEA-IgY抗体，以确定IgY致敏红细胞最佳缓冲液。将IgY溶解于最佳的缓冲液中致敏鞣化后红细胞，形成IgY红细胞检测液，用此检测液分别检测感染30、20、10条日本血吸虫尾蚴和正常小鼠血清各10份，初步检测不同感染度小鼠血清的循环抗原。结果pH7．2磷酸盐缓冲液溶解的IgY所得致敏红细胞检测血清最佳，效价可达1：320。用此IgY—IHA法检测中、高感染度血清（感染20条和30条日本血吸虫尾蚴）阳性率为100％，低感染度血清（感染10条日本血吸虫尾蚴）阳性率为70％，对照组10只小鼠血清全为阴性，特异性为100％。结论建立了IgY-IHA法，此法检测日本血吸虫病循环抗原具有较高的敏感性。

自体红细胞凝集试验及其在动物传染病诊断中的应用

自体红细胞凝集试验（autologous erythrocyte agglutination,AGEN）由澳大利亚学者Kemp等[1]于20世纪80年代末期首次提出,是一种针对血液中被检物快速筛查的方法,已成功应用于人类艾滋病病毒Ⅰ型抗体、的检测。自体红细胞凝集试验的反应原理还是基于抗原抗体的特异性结合,能够和凝集反应一样,出现肉眼可见的颗粒凝集。

鸡红细胞凝集抑制试验影响因素的分析

红细胞凝集试验（HA）和红细胞凝集抑制试验（HI）是兽医界相关实验室最为常用的实验之一。由于其具有便于操作、快捷、成本较低的特点，是畜禽疫病诊断及免疫状态监测特别是禽流感、新城疫等重大动物疫病免疫监测最重要的方法之一。各省、市、县等各级畜牧兽医部门都针对疫苗免疫情况进行了大量的监测，正确运用和准确掌握血凝和血凝抑制试验方法对禽流感等重大动物疫病的诊断和免疫监测就显得尤为重要。

微量红细胞凝集抑制试验常见问题探析

微量红细胞凝集抑制（HI）试验作为一项抗体监测技术已在各大中型禽场和兽医门诊实验室工作中广泛应用。HI试验可检测新城疫、禽流感、减蛋下降综合征等HI抗体，依据抗体的监测结果，制定相关疫苗的最佳免疫程序，验证疫苗的免疫效果，进行疫病的辅助诊断，达到及早预报疫情的目的。但是如果试验操作技术不规范就会造成监测结果不准确。现就HI试验过程中出现的常见问题进行探析。

抗人红细胞非凝集单克隆抗体的研制与应用

目的 研制出抗人红细胞非凝集单克隆抗体,进而构建双功能抗体试剂,用于临床实验室诊断。方法 用自愿者O型红细胞免疫BALB/C小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗人红细胞非凝集单克隆抗体。结果 获得4株分泌抗人红细胞非凝集单克隆抗体的杂交瘤细胞株（7A1、7A2、1H7、7H3）。4株单克隆抗体免疫球蛋白的轻链均为k型,重链均为IgG1类。检测200例正常人红细胞（A、AB、B、O型）。Cooma’s试验均发生凝集;与实验所用10种动物的红细胞无交叉反应。进一步对其在检测肾综合征出血热抗体的全血凝集试验方法方面的应用进行了初探。结论研制的7A1抗人红细胞非凝集单克隆抗体可用于构建双功能试剂。

鸡新城疫红细胞凝集抑制试验操作注意事项

鸡新城疫抗体效价实验室检测最常用的方法是红细胞凝集抑制试验。该法对实验室条件要求低、操作简便、成本低,但影响试验结果的因素众多,必须注重细节操作,否则可能得到错误的结论。笔者结合自己多年工作经验,对红细胞凝集抑制试验操作过程中需要注意的事项进行归纳总结。