细胞分裂周期蛋白42基因在肿瘤中的研究进展

细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)是小G蛋白Rho亚家族中的核心成员,最初在酿酒酵母中被发现。研究表明Cdc42可通过调控上皮形态和极性的发生,调节肌动球蛋白和微管细胞骨架的蛋白质的极化输送和脂质组成的变化,在细胞黏附、囊泡运输、凋亡、吞噬作用、细胞迁移和胞质分裂等细胞生理过程中发挥着关键作用[1]。

细胞分裂周期蛋白42通过内皮-间充质转化参与动脉型肺动脉高压小鼠右心室纤维化

目的:探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是否通过内皮-间充质转化(EndMT)参与动脉型肺动脉高压(PAH)小鼠右心纤维化。方法:健康雄性C57BL/6小鼠(5~8周龄)18只,随机分成常氧对照(NC)组、PAH模型[SU5416(血管内皮生长因子受体2抑制剂)+低氧,SuHx]组和SuHx+ML141(Cdc42抑制剂)组,每组6只。所有存活小鼠在4周后用异氟烷麻醉,行心脏超声检查及右心室收缩压(RVSP)监测,之后处死小鼠。用HE和Masson染色观察小鼠右室心肌细胞改变及纤维化程度。使用磁珠分选小鼠心脏内皮细胞并用不同条件处理。通过Western blot检测小鼠心脏组织Cdc42表达水平及内皮细胞Cdc42和EndMT相关蛋白[波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血小板内皮细胞黏附分子1(PECAM-1/CD31)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)和锌指蛋白Snail]表达水平,同时用倒置显微镜观察各组内皮细胞形态。结果:体内实验结果显示,与NC组相比,SuHx组小鼠心脏组织Cdc42表达水平显著升高(P<0.05);预防给予ML141(8 mg/kg)可降低小鼠RVSP,增大三尖瓣环平面收缩期位移(TAPSE),减轻心脏(尤其是血管旁)纤维化(P<0.01)。体外实验结果显示,SuHx组和低氧72 h组小鼠心脏内皮细胞Cdc42表达水平显著升高,EndMT增强,EndMT相关蛋白vimentin和α-SMA的表达显著增加,CD31和VE-cadherin的表达显著降低(P<0.05);预防给予ML141(10μmol/L)后可缓解低氧72 h诱导的EndMT。结论:Cdc42可能通过上调EndMT参与PAH小鼠右心纤维化。

细胞分裂周期相关因子3对乳腺癌细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响

目的探讨细胞分裂周期相关因子3(CDCA3)对乳腺癌细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法(1)选取4种人乳腺癌细胞MDA-MB-361、CAMA-1、MCF-7、SKBR-3,采用Western blot及实时荧光定量PCR分别检测各细胞中CDCA3蛋白及mRNA的表达水平,选取CDCA3表达水平较高的人乳腺癌细胞进行后续实验。(2)将筛选出的人乳腺癌细胞分为空白组、si-NC组、si-CDCA3组,空白组不给予干预,si-NC组、si-CDCA3组分别给予si-NC、si-CDCA3转染。转染3 d后,检测各组细胞增殖抑制率、细胞周期及细胞凋亡率。结果(1)MCF-7细胞和MDA-MB-361细胞的CDCA3蛋白及mRNA表达水平均高于CAMA-1细胞和SKBR-3细胞(均P<0.05),故选取前两种细胞进行后续实验。(2)无论是MCF-7细胞还是MDA-MB-361细胞,空白组、si-NC组、si-CDCA3组细胞的增殖抑制率、G_(0)/G_(1)期比例、凋亡率均依次升高(均P<0.05)。结论CDCA3在人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-361中呈高表达。沉默CDCA3的表达可抑制MCF-7细胞和MDA-MB-361细胞的增殖,使细胞周期阻滞于G_(0)/G_(1)期,并促进细胞凋亡。

细胞分裂周期蛋白42在神经系统疾病中机制的研究进展

细胞分裂周期蛋白42(CDC42)是一种小GTP酶,在细胞的生长、存活、黏附、增殖和迁移等生理过程中发挥重要作用,这些功能参与了神经系统疾病的发病机制。CDC42在精神分裂症、阿尔茨海默病、癫痫、脑卒中等神经系统常见疾病的发病机制中发挥了重要作用。在精神分裂症中,CDC42可能与背外侧额叶皮质的第3层椎体细胞棘缺失有关; CDC42在额叶皮质功能下调中有必不可少的作用,这可能与阿尔茨海默病的发病机制有关;CDC42的活性降低可能与慢性复发性癫痫的发作减少相关; CDC42还可能通过神经炎症介导了脑卒中引起的脑损伤,这些可能为各种神经系统疾病的诊疗提供新思路。

细胞分裂周期相关蛋白5的功能及其在癌症发生中作用的研究进展

细胞分裂周期相关蛋白5 (CDCA5)又名Sororin,最初作为一种调控细胞周期的蛋白被发现,它在姐妹染色单体粘连、细胞周期调控、DNA损伤修复中具有重要作用。近年来CDCA5在癌症发生发展中的作用被逐渐发现,CDCA5在包括肝细胞癌、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、膀胱癌、乳腺癌、胃癌、口腔鳞状细胞癌和食管鳞状细胞癌在内的多种癌症中具有肿瘤促进因子的作用。CDCA5参与癌症发生发展的机制主要有:AKT通路、ERK通路、细胞周期调控、蛋白互作等。CDCA5具有作为多种癌症诊断、预后分子标志物及治疗靶点的应用前景。

缺血性脑卒中后抑郁患者外周血CDC42、Th17细胞表达及与抑郁程度的相关性分析

目的观察缺血性脑卒中患者外周血细胞分裂周期蛋白42(CDC42)、辅助性T细胞17(Th17)表达并探究其表达与患者抑郁程度的相关性。方法选取2022年1月—2023年1月河北北方学院附属第一医院收治的200例缺血性脑卒中患者为观察组,另选取同期该院200例体检健康者为对照组。患者入院后均接受常规抗血小板聚集、降脂等对症支持治疗,并采用多感官刺激方案对患者进行干预。采用蒙哥马利抑郁评定量表评估患者的抑郁状态,并将患者分为无抑郁组116例、轻度抑郁组38例、中度抑郁组31例、重度抑郁组15例。比较各组医院焦虑抑郁量表(HADS)和简易精神状态评价量表(MMSE)评分,比较观察组干预前后日常生活活动能力(ADL)评分;检测各组外周血CDC42 mRNA、Th17细胞、调节性T细胞(Treg)、Th17/Treg表达。以Pearson相关系数分析HADS评分与患者外周血CDC42 mRNA、Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg表达水平的相关性。结果观察组HADS-A评分、HADS-D评分均高于对照组(P<0.05),MMSE评分低于对照组(P<0.05)。重度抑郁组HADS-A评分、HADS-D评分高于其他组(P<0.05),MMSE评分低于其他组(P<0.05);中度抑郁组HADS-A评分、HADS-D评分高于轻度抑郁组和无抑郁组(P<0.05),MMSE评分低于轻度抑郁组和无抑郁组(P<0.05);轻度抑郁组HADS-A评分、HADS-D评分高于无抑郁组(P<0.05),MMSE评分低于无抑郁组(P<0.05)。观察组外周血CDC42 mRNA、Treg细胞的表达水平低于对照组(P<0.05),外周血Th17细胞、Th17/Treg的表达水平高于对照组(P<0.05)。重度抑郁组Th17细胞、Th17/Treg表达水平高于其他组(P<0.05),Treg细胞表达水平低于另外组(P<0.05),中度抑郁组Th17细胞、Th17/Treg表达水平高于轻度抑郁组、无抑郁组(P<0.05),Treg细胞表达水平低于轻度抑郁组、无抑郁组(P<0.05),轻度抑郁组Th17细胞、Th17/Treg表达水平高于无抑郁组(P<0.05),Treg细胞表达水平低于无抑郁组(P<0.05)。观察组干预后HADS-A评分、HADS-D评分低于干预前(P<0.05),MMSE评分、ADL评分高于干预前(P<0.05)。观察组干预前后外周血CDC42 mRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组干预后外周血Th17细胞、Th17/Treg表达水平低于干预前(P<0.05),外周血Treg细胞表达水平高于干预前(P<0.05)。观察组患者外周血Th17细胞、Th17/Treg表达与HADS评分呈正相关(r=0.673、0.603,均P<0.05),外周血Treg细胞表达与HADS评分呈负相关(r=-0.586,P<0.05),外周血CDC42 mRNA与HADS评分无相关性(r=-0.375,P>0.05)。结论缺血性脑卒中患者外周血CDC42mRNA表达明显降低、Th17细胞表达明显升高,随着患者抑郁程度加重,Th17细胞表达逐渐升高,而CDC42mRNA表达与患者的抑郁程度无相关性,可通过合理的干预措施减轻抑郁情绪,防止病情加重。

细胞分裂周期蛋白42在肿瘤中的作用及其分子机制研究进展

细胞分裂周期蛋白42(CDC42)是小G蛋白Rho家族的核心成员,在与GTP结合/活化状态和与GDP结合/失活状态之间循环切换,在复杂的细胞信号转导网络中,发挥开关作用,调控细胞的微丝骨架结构,与细胞的生长、迁移和黏附等重要生物学行为事件关系密切。已有研究发现,CDC42在肺癌、结直肠癌和乳腺癌等多种恶性肿瘤中明显上调表达,与肿瘤细胞的恶性演进密切相关,是肿瘤治疗的潜在靶点。围绕着CDC42在肿瘤细胞的分裂增殖、侵袭迁移,以及代谢中的作用及其分子机制,近年来取得了许多新的研究进展,是肿瘤学的热点研究领域之一,对此本文进行了系统综述。

细胞分裂周期蛋白42在肿瘤发生发展和治疗中作用的最新进展

细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是一类广泛表达的小三磷酸鸟苷(GTP)酶,因其具有GTP酶活性,因而又被称为Rho GTP酶。Cdc42可以调节细胞骨架的形态学改变,并调节诸如细胞生长和增殖、细胞活力、细胞极性等生理过程中涉及的膜运输功能。Cdc42在多种恶性肿瘤中呈现高表达,并和肿瘤的发生、侵袭和转移密切相关,提示Cdc42可能为肿瘤治疗的潜在靶点。该文拟从Cdc42的形态结构、功能、信号通路上下游效应分子以及在人类肿瘤侵袭和转移中的作用等方面进行综述。

FGD4/细胞分裂周期蛋白42通路调控良性前列腺增生-1细胞增殖、凋亡的机制

目的探讨FGD4/细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)通路对良性前列腺增生(BPH)-1细胞增殖、凋亡的影响。方法选取2017年8月至2018年8月空军军医大学西京医院收治的行尿道前列腺电切术的42例BPH患者的BPH组织作为前列腺增生组,选择同期同一医院收治的行膀胱癌根治术的25例膀胱癌患者的正常前列腺组织作为正常前列腺组;并体外培养BPH-1细胞,分为对照组、siRNA NC组(转染siRNA NC)、FGD4 siRNA组(转染FGD4 siRNA)、Cdc42 NC组(转染FGD4 siRNA+pcDNA3.1)和pcDNA3.1-Cdc42组(转染FGD4 siRNA+pcDNA3.1-Cdc42)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测组织和细胞中FGD4 mRNA、Cdc42 mRNA的表达水平;采用CCK-8法检测细胞增殖情况;采用流式细胞仪检测细胞凋亡及周期分布情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6和IL-8水平;采用蛋白印迹(Western blot)法检测FGD4、Cdc42、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达情况。结果与正常前列腺组相比,前列腺增生组组织中FGD4、Cdc42蛋白水平升高(P<0.05)。与siRNA NC组相比,FGD4 siRNA组BPH-1细胞中FGD4 mRNA、Cdc42 mRNA水平,细胞吸光度(OD)值,S期细胞、G_(2)/M期细胞占比,细胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-8水平及细胞中FGD4、Cdc42、Bcl-2、PCNA蛋白水平均降低(P<0.05),细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期细胞占比及细胞中Bax蛋白水平均升高(P<0.05);对照组与siRNA NC组以上指标比较,差异无统计学意义(P>0.05);与Cdc42 NC组相比,pcDNA3.1-Cdc42组BPH-1细胞中Cdc42 mRNA水平,细胞OD值,S期细胞、G_(2)/M期细胞占比,细胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-8水平及细胞中Cdc42、Bcl-2、PCNA蛋白水平均显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期细胞占比及细胞中Bax蛋白水平均显著降低(P<0.05);FGD4 siRNA组与Cdc42 NC组以上指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论FGD4、Cdc42蛋白在BPH-1细胞中高表达,FGD4可能通过促进Cdc42的表达影响BPH-1细胞周期进程,促进其增殖,同时抑制其凋亡。

细胞分裂周期因子25-A与胃癌化疗药物奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶耐药的相关性研究

目的探讨细胞分裂周期因子25-A(CDC25A)与胃癌化疗药物奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶耐药的相关性。方法选取2016年7月至2020年11月本院收治的100例胃癌患者作为观察组,进行奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶方案化疗,根据化疗后疗效评估标准,分为敏感组(n=53,完全缓解+部分缓解)和耐药组(n=47,稳定+进展),另选取同期于本院行胃镜检查的100例胃炎患者作为对照组,通过免疫组化比较CDC25A在胃癌组织、胃炎组织中的表达情况,并结合临床及病理资料统计分析其表达水平与肿瘤分级、淋巴结转移、TNM分期的相关性,比较CDC25A在敏感组和耐药组中的表达情况,分析CDC25A与胃癌化疗药物奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶耐药的相关性。结果观察组CDC25A的阳性率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。CDC25A在胃癌中的表达水平与分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05),与性别、年龄、解剖位置无关。100例胃癌患者中有47例对奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶耐药,耐药率为47.00%。敏感组CDC25A阳性率低于耐药组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,CDC25A表达水平与胃癌化疗药物奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶耐药呈正相关(r=0.582,P<0.05)。结论CDC25A的表达水平与分化程度、淋巴结转移、TNM分期等相关,且CDC25A表达较低者接受奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶化疗后,耐药性更低。

细胞分裂周期蛋白42在帕金森病模型小鼠认知功能障碍中的作用

目的:研究细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在帕金森病(PD)模型小鼠认知功能障碍中的作用。方法:腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导PD小鼠模型,检测认知功能的变化,海马神经元树突棘密度及海马区Cdc42的活性变化。结果:与对照组相比,PD模型小鼠认知功能显著降低(P<0.01),海马组织CA1区的神经元树突棘密度显著降低(P<0.01),活化Cdc42的表达减少(P<0.01)。结论:PD模型小鼠认知功能障碍可能与Cdc42活性降低导致海马神经元树突棘密度降低有关。

缺血性脑卒中患者的外周血CDC42表达水平、炎症相关Th和细胞因子水平及其与神经功能缺损、焦虑/抑郁及认知功能障碍程度的相关性

目的分析缺血性脑卒中患者的外周血细胞分裂周期蛋白42(CDC42)表达水平、炎症相关Th和细胞因子水平,并探讨上述指标与神经功能缺损、焦虑/抑郁及认知功能障碍程度的相关性。方法纳入200例缺血性脑卒中患者、200例健康体检者分别作为观察组、对照组。比较两组外周血的CDC42 mRNA表达水平及Th1、Th2、Th17、白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。分析观察组上述指标与美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分、焦虑自评量表(SAS)评分、抑郁自评量表(SDS)评分、简易智力状况检查(MMSE)量表评分的相关性。结果观察组的IL-6、TNF-α、Th1、Th17水平高于对照组,而CDC42 mRNA表达水平及Th2、IL-10水平低于对照组(P<0.05)。观察组Th1、Th17、IL-6、TNF-α水平与NIHSS评分、SAS评分、SDS评分呈正相关,与MMSE量表评分呈负相关(P<0.05),而CDC42 mRNA表达水平及IL-10、Th2水平与NIHSS评分、SAS评分、SDS评分呈负相关,与MMSE量表评分呈正相关(P<0.05)。结论缺血性脑卒中患者外周血促炎性Th(Th1、Th17)及细胞因子(IL-6、TNF-α)水平升高,而抗炎性Th(Th2)及细胞因子(IL-10)水平降低,免疫调节因子CDC42表达水平下调,上述指标可在一定程度上反映患者的神经功能缺损、焦虑/抑郁及认知功能障碍程度,有助于监测患者的病情程度及进展情况。

细胞分裂周期蛋白42结构域突变真核表达质粒的构建与鉴定

目的:构建细胞分裂周期蛋白(Cdc42)的结构域突变质粒,即鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)结构域突变质粒。方法:根据NCBI中小鼠Cdc42全长cDNA序列找到结构域GEF,将GEF的氨基酸突变成丙氨酸,根据突变后的序列设计引物,PCR扩增得到目的片段588bp,限制性内切酶EcoRI和HindⅢ双酶切后插入到编码红色荧光蛋白(RFP)和his标签的真核表达载体PM-his-RFP中,构建PM-his-Cdc42(GEF)-RFP重组质粒,进行酶切电泳及DNA测序验证。用脂质体介导方法将重组质粒瞬时转染HT22细胞,通过荧光显微镜观察转染效率。结果:经酶切及测序结果显示突变后结构域插入的位置和序列正确,成功构建Cdc42蛋白GEF结构域突变质粒;荧光结果表明,重组质粒顺利转染HT22细胞。结论:成功构建的Cdc42结构域突变质粒为Cdc42蛋白的功能研究提供有效的操作工具。

lnc85通过调节CDC42的表达促进肝癌细胞增殖

目的:探讨长链非编码RNA RP11-85G21.1(lnc85)对肝癌细胞增殖的作用及可能机制。方法:RNA全转录组测序结合实时荧光定量PCR(RT-qPCR)筛选验证肝癌中差异高表达的lnc85;利用lnc85过表达/空载慢病毒感染细胞,构建lnc85过表达肝癌细胞株(OE)和对照细胞(control);RNA下拉实验(RNA pull-down)联合质谱筛选lnc85互作蛋白并进行蛋白免疫印迹(western blotting)验证;MTT实验、细胞克隆形成实验分析lnc85过表达对细胞增殖的影响;生物信息学分析lnc85互作蛋白表达水平及对生存的影响。结果:RNA全转录组测序发现,与对照相比,lnc85在肝癌患者血浆外泌体中明显高表达(P<0.001),RT-qPCR验证lnc85在3种肝癌细胞中显著升高(P<0.01,P<0.001);RNA pull-down联合质谱分析发现CDC42为lnc85的互作蛋白,RT-qPCR证实CDC42水平在肝癌细胞显著升高(P<0.001);且lnc85过表达的肝癌细胞中,CDC42蛋白水平显著上调(P<0.001),细胞增殖能力显著增强(P<0.01);生物信息学分析发现,肝癌患者CDC42的表达水平显著高于健康对照(P<0.001),并随着肿瘤等级的增高而增高;高表达CDC42的肝癌患者预后不良(P<0.001)。结论:lnc85在肝癌中高表达,可能通过靶向调节CDC42的表达促进肝癌细胞的增殖。

半滑舌鳎细胞分裂周期蛋白42基因克隆与结构预测

细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是Rho超家族酶中的一个亚类,具有调节细胞骨架和肌动蛋白作用,并参与免疫与炎症反应。设计半滑舌鳎Cdc42基因(即CsCdc42)特异性引物,采用RT-PCR方法、生物信息学方法等进行CsCdc42基因克隆及结构预测。结果获得CsCdc42基因片段长度为847 bp,推测编码191个氨基酸,含有7个抗原表位(27-28、61-63、90-92、120-122、131-133、164-166和181-183 aa)、1个RHO结构域(6-179 aa),其中含有1个ATP/GTP结合位点和1个酰基化位点;蛋白结构预测主要为α螺旋(30.9%)、β折叠(24.6%)和无规则卷曲(44.5%)。序列比对结果表明,CsCdc42与斑马鱼、青鳉、虹鳟、大菱鲆和虾等氨基酸序列同源性分别为99.43%、97.91%、95.81%、94.76%和91.10%;构建系统发育树显示CsCdc42与斑马鱼、人和海水鱼类Cdc42亲缘关系最近,自然聚为一支。以上结果为研究半滑舌鳎细胞分裂周期蛋白相关基因功能提供科学参考。

表皮生长因子受体可能通过调控ABCC1和CDC37的表达促进破骨细胞分化

目的 观察表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)在小鼠破骨细胞分化过程中的表达趋势,探究破骨细胞分化过程中EGFR相关信号通路及关键基因。方法 从24只6~8周龄健康SPF级雄性C57BL/6小鼠(体质量19~21g)中提取骨髓来源巨噬细胞,随后采用M-CSF和RANKL共刺激构建小鼠破骨细胞分化模型,并用TRAP染色法、RT-qPCR检测破骨细胞分化状况及EGFR的表达量变化。通过生物信息学方法系统鉴定破骨细胞分化过程中EGFR相关基因,并通过RT-qPCR和EGFR激活及抑制模型进行验证。结果 体外破骨细胞分化模型显示,EGFR在小鼠破骨细胞分化过程中表达量持续上升(P<0.01)。RNA-seq数据表明,EGFR表达与MAPK等多条信号通路呈显著相关(P<0.05)。通过WGCNA及PPI分析,鉴定出ATP结合盒亚家族C成员1 (ATP binding cassette subfamily C member 1, ABCC1)和细胞分裂周期蛋白37(cell division cycle 37, CDC37)与EGFR之间存在共表达及相关性(P<0.01)。RT-qPCR检测结果显示,ABCC1(P<0.05)和CDC37(P<0.01)在分化过程中表达量显著上升,且在激活EGFR时二者表达水平进一步升高(P<0.01),抑制EGFR时二者表达明显降低(P<0.05)。结论 激活EGFR信号可诱导破骨细胞分化,并上调ABCC1和CDC37的表达水平。

RNA干扰细胞分裂周期蛋白6基因表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其机制研究

目的探讨RNA干扰细胞分裂周期蛋白6(CDC6)基因表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法采用蛋白质印迹法(Western blot)检测永生化结直肠细胞株(FHC)、结直肠癌细胞株(SW620、LOVO、HT29)中CDC6蛋白的表达情况。利用Lipofectamine 2000将CDC6 siRNA转染至SW620细胞,以转染si-con的SW620细胞作为阴性对照,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移情况。采用Western blot检测Janus激酶2(JAK2)、磷酸化-JAK2(p-JAK2)、信号转导及转录激活因子3(STAT3)及磷酸化-STAT3(p-STAT3)蛋白的表达情况。采用JAK2/STAT3信号通路激活剂colivelin处理转染CDC6 siRNA的SW620细胞,观察其对SW620细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。结果永生化结直肠细胞株FHC中CDC6蛋白的相对表达量低于结直肠癌细胞株SW620、LOVO、HT29,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。转染CDC6 siRNA能够抑制SW620细胞增殖,促进细胞凋亡,减少侵袭细胞数目、迁移细胞数目,降低p-JAK2、p-STAT3蛋白的相对表达量,而对JAK2、STAT3蛋白的相对表达量无明显影响。采用colivelin激活JAK2/STAT3信号通路可以逆转CDC6 siRNA对SW620细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。结论转染CDC6 siRNA可通过下调JAK2/STAT3信号通路,抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移,并诱导细胞凋亡。

Cdc42基因在表皮生长因子促进HepG2细胞丝状伪足形成中的作用

目的:探讨表皮生长因子(EGF)对HepG2细胞丝状伪足形成和细胞体外侵袭能力的影响以及细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在其中的作用.方法:将Cdc42siRNA转染HepG2细胞株,RT-PCR和Westernblot检测EGF组、EGF+siRNA干扰组、siRNA干扰组及空白对照组细胞Cdc42mRNA转录以及蛋白的表达水平,微丝绿色荧光探针(actin-trackergreen)染色检测HepG2细胞丝状伪足形成,侵袭小室检测细胞体外侵袭能力.结果:经EGF处理后HepG2细胞可见明显丝状伪足形成,EGF组细胞内Cdc42mRNA及总蛋白(Total-Cdc42)表达量无显著变化,但活性Cdc42(Active-Cdc42)显著增高(0.713±0.021vs0.423±0.015,P<0.05),siRNA干扰组Cdc42表达及活性受到明显抑制(0.118±0.017vs1.128±0.024;0.351±0.021vs0.936±0.024,均P<0.05),并抑制EGF诱导的细胞丝状伪足形成,EGF组细胞体外侵袭能力显著高于其余各组(98.43±3.11vs61.09±3.58,50.53±2.34,62.73±2.64,均P<0.05).结论:EGF通过激活Cdc42诱导HepG2细胞丝状伪足形成并增强其体外侵袭能力.

有氧运动对青年期小鼠海马体Cdc42及DNA损伤反应相关因子的短期和长期影响

目的:探讨有氧运动对青年期小鼠海马体细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle protein 42,Cdc42)及DNA损伤反应(DNA-damage response,DDR)相关因子的短期和长期影响。方法:构建运动小鼠模型,将40只8周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为安静组和运动组,每组20只,均使用普通饲料喂养。运动组小鼠进行12周的中等强度(75%VO_(2)max)跑台运动,安静组小鼠在不跑步的情况下暴露于跑步机噪声和振动中。12周训练结束后,从安静组和运动组中随机选取小鼠各10只(5月龄),分别为安静青年期小鼠(Sed-young)组和运动青年期小鼠(Exe-young)组;剩余的10只安静组小鼠和10只运动组小鼠继续喂养至老年期(18月龄),作为安静老年期小鼠(Sed-old)组和运动老年期小鼠(Exe-old)组。所有小鼠均收集Y迷宫、体成分数据及海马体组织,通过Cdc42活性检测和Western blot法比较各组小鼠海马体Cdc42-GTP活性及Cdc42蛋白表达情况,通过RT-qPCR比较各组小鼠海马体Cdc42、Pak4、Pak5、Cofilin、Chk2、Atm和P53等DDR相关因子的mRNA水平。结果:与安静组比较,有氧运动可显著降低青年期小鼠脂肪百分比(P<0.05),显著提高空间识别记忆能力(P<0.05),并维持至老年期(P<0.05)。与安静组比较,运动青年期小鼠和运动老年期小鼠海马体Cdc42表达及活性均显著降低(P<0.05)。与安静组比较,有氧运动显著降低青年期小鼠海马体Cdc42、Pak4、Pak5、Cofilin、Atm、Chk2和P53的转录水平(P<0.05);其中,Cdc42、Pak4、Pak5、Cofilin、Chk2和P53的转录水平下降可维持至老年期(P<0.05)。结论:青年期进行的有氧运动可持续抑制小鼠海马体Cdc42及DDR相关因子的表达,保护海马体神经元细胞免受DNA损伤而死亡或衰老直至老年期。