皮肤黑素瘤中细胞分裂周期相关蛋白8的表达水平及功能学分析

目的基于生物信息学方法分析CDCA8在皮肤黑素瘤组织中的表达水平及其相关生物学功能。方法TCGA数据库中下载皮肤黑素瘤数据集,分析CDCA8在皮肤黑素瘤组织中的表达,K-M曲线分析皮肤黑素瘤组织中CDCA8表达水平与总体生存率的关系,UALCAN数据库筛选皮肤黑素瘤中与CDCA8的共表达基因,并对共表达基因进行GO和KEGG富集分析。TIMER数据库分析皮肤黑素瘤组织中CDCA8与免疫细胞浸润的相关性。HPA数据库验证CDCA8在皮肤黑素瘤组织及正常组织中的表达差异。结果与正常组织相比,CDCA8在皮肤黑素瘤组织中明显高表达(P<0.5);与皮肤黑素瘤TP-53野生型相比,CDCA8表达水平在TP-53突变型中明显升高(P<0.05)。皮肤黑素瘤中CDCA8高表达组总体生存率显著低于CDCA8低表达组(HR=1.500,P=0.005)。皮肤黑素瘤组织中CDCA8共表达基因主要富集于细胞核、细胞质、细胞分裂、细胞周期、DNA修复、蛋白结合、RNA结合、细胞周期、DNA复制及细胞核质转运等过程。皮肤黑素瘤中CDCA8与B细胞(r=0.166,P<0.001)、CD8^(+)T细胞(r=0.176,P<0.001)、中性粒细胞(r=0.193,P<0.001)及树突状细胞(r=0.230,P<0.001)浸润程度存在显著正相关性。免疫组化显示CDCA8在皮肤黑素瘤组织中均呈现高强度表达,而在正常组织中无表达或低表达。结论CDCA8在皮肤黑素瘤组织中呈现高表达状态,与患者不良预后显著相关,CDCA8可能通过调控细胞周期及免疫细胞浸润参与皮肤黑素瘤的发病机制。

细胞分裂周期相关基因8表达水平与肿瘤发展及预后关系的研究进展

细胞分裂周期相关基因8(CDCA8)表达水平异常可影响多种信号通路,尤其是对于多种癌症的发生及发展过程起到增殖促进作用,相关机制主要包括影响细胞分裂周期、作为PI3K和p53等信号通路的共性调控因子加速癌症发生与发展、影响趋化因子细胞通路等。同时,CDCA8表达水平与肿瘤预后存在关联。本文综述了CDCA8与膀胱癌、女性生殖系统肿瘤、前列腺癌等疾病发生及发展的关系、作用机制及CDCA8与肿瘤不良预后、病理分期等的关系,为多种肿瘤的治疗和预后预测提供新思路。

肺腺癌组织细胞分裂周期相关蛋白8蛋白表达及与临床病理参数、预后关系分析

目的:分析肺腺癌(LUAD)组织细胞分裂周期相关蛋白8(CDCA8)蛋白表达水平,并探究CDCA8蛋白表达与临床病理参数、预后的关系。方法:选择98例LUAD患者,按照CDCA8蛋白表达水平分为高阳性组(67例)和低阳性组(31例)。收集并比较两组临床病理参数,并通过生存曲线来比较两组LUAD患者无病生存率和总生存率。结果:以CDCA8蛋白表达为因浓度变量,并以TNM分期、肿瘤体积、淋巴结转移、脏层胸膜侵犯为协变量,Logistics回归分析结果显示肿瘤体积(10~30 mm^(2)、>30 mm^(2))、淋巴结转移是CDCA8蛋白高阳性表达的影响因素(P<0.05)。CDCA8蛋白高阳性组无病生存率、总生存率为28.5%、60.9%,低于低阳性组的51.6%、80.0%(均P<0.05)。结论:LUAD组织CDCA8(1∶500稀释)蛋白表达与临床病理参数、预后存在直接关联,检测CDCA8(1∶500稀释)蛋白表达水平可以帮助临床医生判断LUAD患者病情进展和预后,利于指导治疗方案制定。

过敏性鼻炎伴哮喘综合征患者细胞分裂周期相关蛋白5基因表达和临床意义

目的研究过敏性鼻炎伴哮喘综合征(combined allergic rhinitis and asthma syndrome,CARAS)患者淋巴细胞差异表达基因及相关功能,寻找参与调控CARAS的重要基因,并探讨其表达水平与疾病进展的关系。方法通过过敏性哮喘mRNA表达芯片数据集筛选正常人和过敏性哮喘患者差异表达基因,并对基因进行功能注释,根据基因注释结果筛选参与过敏性哮喘调控的重要基因。对筛选出的细胞分裂周期相关蛋白5(cell division cycle associated 5,CDCA5)基因在过敏性鼻炎、CARAS患者外周血淋巴细胞中验证其表达水平,并分析其表达水平与过敏性鼻炎和哮喘之间的关系。结果 GSE104472数据库分析过敏性哮喘患者与正常人外周血淋巴细胞共有2971个差异表达的基因。KEGG通路富集分析发现有16个差异基因参与胰岛素信号通路调节。GO基因功能注释分析发现有191个基因参与无膜细胞器的构成。CDCA5基因参与无膜细胞器构成和细胞分裂的调控,并在过敏性鼻炎和CARAS患者升高。CDCA5高表达组患CARAS的概率明显高于CDCA5低表达组。结论 CDCA5在CARAS患者外周血淋巴细胞表达水平显著增高,并可能与哮喘疾病进展相关。

微小RNA-140-3p靶向细胞分裂周期相关蛋白8抑制肺腺癌细胞侵袭转移的生物信息学分析及验证

目的在生物信息学基础上探讨微小RNA(miR)-140-3p靶向细胞分裂周期相关蛋白8(CDCA8)抑制肺腺癌细胞的侵袭和转移。方法通过GEO数据库中的GEO2R分析肺腺癌芯片数据中差异表达的miRNA。Target Scan Human7.2和miRWalk数据库查找miR-140-3p的靶基因。Cytoscape3.7.2软件筛选出Hub基因。GEPIA数据库查询靶基因在肺腺癌组织和正常肺组织中的表达水平,在肺腺癌不同分期中的表达水平以及靶基因的表达水平与肺腺癌患者总体生存率的关系。Star Base数据库查找miR-140-3p在肺腺癌中的生存分析及与CDCA8的表达水平在肺腺癌中的相关性。Real-time PCR检测miR-140-3p在正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺腺癌细胞A549的表达水平以及感染效率。Real-time PCR和Western blotting实验检测过表达miR-140-3p后CDCA8 m RNA和蛋白的表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p是否与CDCA8直接结合。Transwell侵袭实验检测过表达miR-140-3p和CDCA8对肺腺癌细胞侵袭力的影响。结果通过GEO等数据库的分析结果显示,miR-140-3p在正常肺组织中的表达水平明显高于在肺腺癌中的表达水平,其预测靶基因CDCA8在肺腺癌中的表达水平明显高于在正常肺组织中的表达水平,且CDCA8与miR-140-3p的表达水平在肺腺癌中成负相关。实验结果显示,miR-140-3p在A549细胞中的表达明显低于在BEAS-2B细胞中的表达(P<0.05);用过表达慢病毒感染细胞后miR-140-3p的表达水平明显升高(P<0.05);过表达miR-140-3p后CDCA8的m RNA和蛋白表达水平明显下调(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-140-3p能与CDCA8直接结合(P<0.05);与对照组相比,过表达miR-140-3p可抑制肺腺癌细胞A549的侵袭转移,而CDCA8可逆转miR-140-3p对肺腺癌细胞A549侵袭力的抑制作用(P<0.05)。结论MiR-140-3p靶向CDCA8抑制肺腺癌细胞的侵袭转移。

CDCA8在肿瘤发生发展及耐药中的研究进展

细胞分裂周期相关基因(CDCA)8是CDCA家族中的一个成员,早期在胚胎干细胞中被发现,用于调控有丝分裂期间着丝粒的定位及纺锤体的稳定性。近年越来越多的研究发现CDCA8在肺癌、肝癌、黑色素瘤和胰腺癌等多种肿瘤组织中呈高表达,并与肿瘤的分级、不良预后密切相关。干扰CDCA8的表达会显著抑制肿瘤的生长以及转移,诱导细胞周期的阻滞及细胞凋亡,同时提高肿瘤细胞对顺铂和他莫昔芬的灵敏度,而对正常细胞影响较小。故认为CDCA8是治疗恶性肿瘤的一个潜在干预靶点。本文从预后情况、作用机制以及耐药关系出发,对CDCA8在肿瘤中的功能和作用的机制通路进行讨论,旨在为临床上肿瘤生物标志物的筛选及靶向药物研发提供新思路。

胃癌组织中miR-135a-5p、CDCA8表达与患者临床病理特征及预后的关系

目的探讨胃癌组织中微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)、细胞分裂周期相关基因8(CDCA8)的表达与患者临床病理特征及预后的关系。方法收集胃癌组织、正常胃组织各82份。实时荧光定量PCR法检测组织中miR-135a-5p、CDCA8 mRNA表达,免疫组化法检测组织中CDCA8蛋白表达。术后随访,统计患者3年的生存情况。Pearson相关法分析胃癌组织中miR-135a-5p与CDCA8 mRNA表达的关系;用Kaplan-Meier法分析miR-135a-5p、CDCA8蛋白表达与患者生存期、3年总生存率的关系;Cox回归分析胃癌患者预后的影响因素。结果胃癌组织中miR-135a-5p表达低于正常胃组织(P<0.05),CDCA8 mRNA表达及蛋白阳性表达率均高于正常胃组织(P均<0.05)。基于ENCORI数据库预测miR-135a-5p与CDCA8的关系,结果显示,miR-135a-5p与CDCA8存在结合位点;胃癌组织中miR-135a-5p与CDCA8 mRNA表达呈负相关(r=-0.580,P<0.05)。胃癌组织中miR-135a-5p、CDCA8蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤最大径及分化程度无关(P均>0.05),与肿瘤浸润深度及淋巴结转移有关(P均<0.05)。随访3年,生存59例。miR-135a-5p低表达者生存时间及3年总生存率低于miR-135a-5p高表达者(P均<0.05);CDCA8蛋白阳性表达者生存时间及3年总生存率低于CDCA8蛋白阴性表达者(P均<0.05)。淋巴结转移、miR-135a-5p低表达及CDCA8蛋白阳性表达是胃癌患者预后的独立危险因素(P均<0.05)。结论胃癌组织中miR-135a-5p低表达,CDCA8高表达;二者与胃癌浸润深度、淋巴结转移有关,可作为评估胃癌预后的指标。

CDCA8和INCENP mRNA在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨CDCA8和INCENP mRNA在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法:使用Illumina Nextbio芯片数据库分析原发性HCC组织和相应癌旁组织中CDCA8和INCENP mRNA表达情况,在癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)肝癌数据库中使用RNA-Seq mRNA表达数据进行验证,并结合TCGA临床数据分析CDCA8和INCENP mRNA表达水平与HCC患者临床病理特征及预后的关系,使用基因集富集软件分析目的基因高表达的相关通路。结果:CDCA8和INCENP mRNA在HCC组织中表达水平显著上调(P<0.01)。CDCA8 mRNA表达水平与HCC的组织学分级、瘤体大小、肿瘤复发、美国东部肿瘤协作组织(ECOG)评级、血清AFP水平、肿瘤基因拷贝数变异显著相关(P<0.05);INCENP mRNA表达水平与HCC的组织学分级、肿瘤复发、ECOG评级、血清AFP水平、肿瘤基因突变总数和肿瘤基因拷贝数变异显著相关(P<0.05)。CDCA8高表达组患者的OS及TFS显著低于CDCA8低表达组患者(P<0.01);INCENP高表达组患者的OS显著低于INCENP低表达组患者(P<0.05),而TFS无显著差异(P>0.05)。多因素分析显示,CDCA8 mRNA水平是预测HCC患者不良预后的独立因素(P<0.01)。基因集富集分析表明,CDCA8和INCENP可能在细胞周期之外的其他生物学信号通路中发挥一定作用。结论:CDCA8和INCENP mRNA在HCC组织中呈现显著高表达。CDCA8可能成为HCC预后的独立风险因素和新的治疗靶点。

基因Cdca2敲除对小鼠精子发生和生育力无明显影响

目的探究睾丸高表达细胞分裂周期相关蛋白2基因(Cdca2)在小鼠精子发生和生育力中的生理功能。方法通过Q-PCR和Western blot检测Cdca2在小鼠不同组织部位的表达情况;利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和Cre-loxP介导的重组系统构建Cdca2组织特异性敲除的小鼠品系;通过苏木精-伊红(HE)染色和形态学分析了解小鼠CDCA2缺失对精子发生的各个阶段生精细胞形态的影响;通过精子全自动检测分析系统检测小鼠CDCA2缺失对精子活率及运动参数的影响;通过生育力测试实验检测CDCA2缺失对雄性小鼠生育能力的影响。结果Cdca2是一个睾丸高表达的基因;利用CRISPR/Cas9技术和生殖系统特异性Cre的工具鼠,成功获得了Cdca2生殖细胞特异性敲除的小鼠;小鼠CDCA2缺失对精子发生中各阶段生精细胞、精子运动参数及雄性生育能力的影响改变无统计学意义。结论基因Cdca2对于小鼠精子发生和雄性生育力的维持可能是非必需的。

CDCA8与肿瘤的相关研究现状

细胞分裂周期相关基因8(cell division cycle-associated8,CDCA8)是一种参与细胞生长周期的调控基因,在细胞发育和增值中起着关键作用。研究表明CDCA8在各种恶性肿瘤中都检测到过表达,并被认为与癌细胞增殖和细胞周期进展密切相关,其机制可能是CDCA8在染色体的分离以及染色体与纺锤体的结合中发挥重要作用。CDCA8有望成为肿瘤新的标记物,为肿瘤的治疗提供基因靶点。本文在国内外一些研究成果进行系统总结基础上,对CDCA8在肿瘤细胞中的相关性进行综述。

CDCA8沉默对人黑素瘤细胞A375增殖及侵袭的影响

目的通过生物信息学分析细胞分裂周期相关基因(CDCA)8在黑素瘤组织中的表达水平及其与预后的关系,探讨CDCA8基因沉默后对黑素瘤细胞A375增殖和侵袭的影响。方法通过生物信息数据库(TCGA)分析黑素瘤组织中CDCA8 mRNA表达水平,黑素瘤患者预后的影响因素采用Cox回归分析。采用Western印迹和实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测黑素瘤细胞系(A375、A875和SK-MEL-28)中CDCA8蛋白及mRNA表达水平,选择CDCA8高表达的细胞系A375,瞬时转染小干扰RNA敲低CDCA8表达,根据是否转染,分为空白对照组、NC组和si-CDCA8组,采用CCK-8、Transwell实验及Western印迹等分析CDCA8基因沉默对黑素瘤A375细胞系增殖、侵袭及p-P53蛋白表达水平的影响。结果黑素瘤组织中CDCA8 mRNA表达水平较正常组织水平显著升高(P<0.001)。与CDCA8低表达组相比,CDCA8高表达组总体生存期显著降低(P<0.05)。Cox结果显示,T期(T3和T4)、N期(N2和N3)和CDCA8表达(高表达)均是黑素瘤患者预后的独立危险因素(均P<0.05)。与黑素瘤A875和SK-MEL-28细胞系相比,CDCA8蛋白及mRNA在黑素瘤A375细胞系显著高表达(P<0.05)。在72、96 h,si-CDCA8组细胞OD值均显著低于空白对照组和NC组(均P<0.05)。与空白对照组和NC组相比,si-CDCA8组细胞侵袭细胞数显著减低,p-P53蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论CDCA8 mRNA在黑素瘤组织中呈高表达,且CDCA8高表达与黑素瘤患者的不良预后有关。CDCA8可能通过调控P53信号通路参与黑素瘤细胞A375的增殖和侵袭。

胰腺癌组织中细胞分裂周期相关蛋白5的表达及其预后意义

目的:基于生物信息学方法分析胰腺癌组织中细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)的表达及其与预后的相关性。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中下载2021年1月至2021年12月168例胰腺癌样本RNA测序数据(HTSeq-FPKM)和相应的临床信息,从GEPIA2数据库中下载2021年1月至12月179例胰腺癌患者数据,同时整合TCGA和GTEx数据库中的171个正常胰腺组织样本。分析GEPIA2数据库中胰腺癌患者CDCA5 mRNA相对表达量及其与患者总生存(OS)和无病生存(DFS)的关系;结合患者临床资料,采用单因素和多因素Cox比例风险模型分析胰腺癌患者OS的影响因素;使用基因集富集分析(GSEA)探讨CDCA5在胰腺癌中可能参与的信号通路。结果:在GEPIA2数据库中,胰腺癌组织中CDCA5 mRNA相对表达量较正常胰腺组织升高,差异有统计学意义( P<0.05)。根据CDCA5 mRNA相对表达量的中位值将胰腺癌患者分为高表达组(89例)和低表达组(89例)(等于中位值者未分组),CDCA5 mRNA高表达的胰腺癌患者较低表达患者OS( P=0.024)和DFS差( P=0.025)。TCGA数据库中,N分期( HR=2.15,95% CI 1.24~3.72, P=0.006)和CDCA5( HR=1.71,95% CI 1.23~2.38, P=0.001)表达为胰腺癌患者OS的独立影响因素。GSEA富集分析结果表明,CDCA5 mRNA高表达主要富集在13个生物学通路[均 P<0.05,错误发现率(FDR)<0.005],其中包括细胞周期、DNA复制、同源重组、嘧啶代谢、错配修复、磷酸戊糖途径、糖酵解糖异生和p53等信号通路。CDCA5 mRNA的表达与HK2、PKM、PGK1、ALDOA、EN01和LDHA的表达均呈正相关(均 P<0.05)。 结论:CDCA5在胰腺癌组织中高表达,且与患者预后不良有关,可以作为胰腺癌的预后标志物。

慢病毒介导CDCA5敲低的三阴乳腺癌细胞的构建及鉴定

目的:利用RNA干扰技术与慢病毒感染体系构建稳定干涉细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)基因的三阴乳腺癌细胞系,研究CDCA5在三阴乳腺癌细胞增殖过程中发挥的功能。方法:首先通过分子克隆技术构建稳定干涉CDCA5基因的慢病毒短发夹RNA(shRNA)质粒,并用PCR、琼脂糖凝胶电泳和深度测序技术进行验证;在此基础上,利用慢病毒感染体系将干涉质粒进行病毒包装、感染三阴乳腺癌细胞系MDA-MB-231,通过SDS-PAGE、Western印迹检测MDA-MB-231细胞中CDCA5蛋白质的表达水平;通过细胞活力检测实验研究干涉CDCA5对三阴乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞增殖能力的影响。结果:琼脂糖凝胶电泳与DNA测序结果显示稳定干涉CDCA5载体构建成功;SDS-PAGE及Western印迹结果显示稳定干涉CDCA5质粒在MDA-MB-231中获得表达,并能够敲低CDCA5蛋白表达水平,稳定干涉CDCA5的三阴乳腺癌细胞系构建成功;细胞活力检测实验结果表明,与对照组相比,干涉CDCA5蛋白表达水平能有效抑制MDA-MB-231细胞的增殖能力。结论:运用RNA干扰技术与慢病毒感染体系能够构建稳定干涉CDCA5的三阴乳腺癌细胞系,该细胞系的建立为进一步研究CDCA5在三阴乳腺癌发生、发展及转移过程中的作用及分子机制提供了重要的实验材料。

CDCA8通过调控增殖促进前列腺癌发生的作用机制研究

目的 探讨细胞分裂周期相关蛋白 8(CDCA8)在前列腺癌(PCa)中的表达及作用机制。方法 通过生物 信息学方法分析正常前列腺组织和 PCa组织中 CDCA8 mRNA水平差异。利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库中 RNA表达测序数据分析 CDCA8表达相关的 PCa患者无病生存期(DFS)。免疫组织化学方法检测根治性前列腺切除 术后 56例 PCa组织和癌旁组织中 CDCA8蛋白表达差异,并依据染色指数将 PCa患者分为 CDCA8蛋白高表达组(31 例)和低表达组(25例),分析患者临床特征与 CDCA8表达水平的相关性。利用 siRNA沉默 PCa细胞 CDCA8基因,实 时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测 CDCA8 mRNA的表达水平,细胞克隆形成实验检测 PCa细胞增殖能力,蛋白 免疫印迹法检测 CDCA8、Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)以及磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶 B(AKT)信号通路 蛋白表达的变化。结果 TCGA数据库中 PCa组织中 CDCA8 mRNA水平明显高于正常组织,CDCA8 mRNA高表达的 患者预后更差(P<0.01)。PCa组织 CDCA8的蛋白表达水平明显高于癌旁组织,且表达水平与患者总前列腺特异性 抗原(tPSA)、Gleason评分、T分期和术后切缘情况呈正相关(P<0.01)。CDCA8蛋白高表达组tPSA≥10 μg/L、T3期、术 后切缘阳性患者比例大于 CDCA8 蛋白低表达组(P<0.05)。沉默 CDCA8 基因后 PCa 细胞增殖能力减弱,Ki67、 PCNA、p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平均下调(P<0.01)。结论 CDCA8通过调控增殖促进 PCa发生,其作用机制可 能与 PI3K/AKT信号通路有关。

过敏性鼻炎患者外周血CDCA5、HLA-DPB1、IL-23水平差异及意义研究

目的探讨细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)、人类白细胞抗原基因(HLA-DPB1)在过敏性鼻炎(AR)患者中的差异表达及细胞白细胞介素-23(IL-23)差异表达,寻找与AR发生的相关性。方法以52例AR患者为病例组,以及36例健康体检者为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测CDCA5表达水平。对HLA-DPB1基因分型检测AR的关系。检测IL-23水平差异及与免疫球蛋白E(IgE)水平变化的相关性。根据AR患病的严重程度,检测与CDCA5、IL-23、IgE水平变化的关系。结果与体检健康者比较,CDCA5基因在AR患者中表达水平升高(P<0.05);CDCA5高表达组患AR的概率明显高于CDCA5低表达组(P<0.05)。病例组和对照组检测出HLA-DPB1等位基因8种,基因频率最高的为HLA-DPB1*0501。HLA-DPB1*0502和HLA-DPB1*040101基因型在病例组中的频率高于对照组(P<0.05)。病例组血清IL-23、IgE水平均高于对照组(P<0.05),经过Pearson相关性分析,IL-23与IgE呈正相关(P<0.05)。AR重度患者CDCA5 mRNA相对表达水平、IL-23、IgE水平高于轻、中度患者(P<0.05)。结论AR外周血CDCA5、HLA-DPB1、IL-23表达水平与对照组有显著差异,这可能与AR疾病发生相关。

miR-101对结直肠癌细胞放疗敏感性的影响及机制探讨

目的观察miR-101对结直肠癌细胞放疗敏感性的影响,并探讨其分子机制。方法取结直肠癌细胞株SW620、SW480,稳定过表达miR-101细胞株SW620(miR101-SW620)及其阴性对照GV209-SW620,瞬时沉默miR-101表达细胞株SW480(SW480-miR101)及其阴性对照SW480-NC,采用Western blotting法检测细胞中miR-101靶基因Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)及其下游关键蛋白细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)、人Ras同源基因家族成员A(Rho A)。取SW620、GV209-SW620、miR101-SW620细胞,分别给予0、2、4、6、8 Gy射线处理24 h;Western blotting法检测DNA损伤标志性蛋白γ-H2AX、细胞凋亡标志蛋白Caspase-3判断细胞放疗敏感性变化,同时检测细胞Rac1、Cdc42、Rho A蛋白。结果与SW620、GV209-SW620细胞比较,miR101-SW620细胞Rac1、Cdc42、Rho A蛋白表达降低(P均﹤0.05);与SW480、SW480-NC细胞比较,SW480-miR101细胞Rac1、Cdc42、Rho A蛋白表达均增高(P均﹤0.05)。随着照射剂量增加,结直肠癌细胞γ-H2AX、Caspase-3表达均增高,而Rac1、Rho A、Cdc42蛋白表达均降低(P均﹤0.05);与同等照射剂量下SW620、GV209-SW620细胞比较,miR101-SW620细胞γ-H2AX、Caspase-3蛋白表达均增高,而Rac1、Rho A、Cdc42蛋白表达均降低(P均﹤0.05)。结论 miR-101可能通过调控Rac1/Cdc42/Rho A信号通路增强结直肠癌细胞对放疗的敏感性。

CDCA7L在人脑胶质瘤组织中的表达及意义

目的探讨细胞分裂周期相关7样蛋白(CDCA7L)在胶质瘤组织中的表达及其与病人预后的关系。方法免疫组织化学染色法检测2012年1月至2013年5月手术切除的112例胶质瘤组织和2018年1~12月颅脑损伤内减压术中切除的45例正常脑组织中CDCA7L的表达水平,根据染色情况将胶质瘤病人分为高表达组和低表达组。胶质瘤病人随访截止2019年6月,记录总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)。结果胶质瘤组织CDCA7L高表达率(66.96%,75/112)明显高于正常脑组织(17.78%,8/45;P<0.05)。高级别胶质瘤组织CDCA7L高表达率(79.41%,54/68)明显高于低级别胶质瘤(47.73%,21/44;P<0.05)。多因素Cox比例风险回归模型分析结果显示,CDCA7L高表达是胶质瘤病人OS和PFS较短的独立影响因素(P<0.05)。生存曲线分析显示,高表达组中位OS(21个月,四分位区间16~41个月)和中位PFS(18个月,四分位区间13~38个月)均明显低于低表达组[分别为60个月(48~65个月)和45个月(41~52个月);P<0.05]。结论胶质瘤组织CDCA7L呈高表达,而且与胶质瘤不良生存预后和肿瘤进展有关。

四君子汤含药血清通过抑制RhoA/Rac1/Cdc42通路影响卵巢癌细胞的上皮间质转化

目的探索四君子汤含药血清对卵巢癌细胞增殖迁移、侵袭及上皮间质化的影响,并初步研究其作用机理。方法体外培养人卵巢癌细胞(SKOV3)和人卵巢上皮细胞,随机分为空白对照组、舒尼替尼组、四君子汤Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组。噻唑蓝法检测各组SKOV3细胞和人卵巢上皮细胞增殖变化情况;划痕实验和侵袭(transwell)实验检测各组SKOV3细胞迁移和侵袭能力;蛋白免疫印迹分析法检测各组SKOV3细胞上皮型钙粘蛋白(Ecadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)和细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)蛋白表达情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组SKOV3细胞RhoA、Rac1和Cdc42 mRNA表达变化。结果各组人卵巢上皮细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组相比,舒尼替尼组SKOV3细胞存活率、划痕愈合率、侵袭数量、N-cadherin、Vimentin蛋白、RhoA、Rac1、Cdc42 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。四君子汤Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组SKOV3细胞存活率、划痕愈合率、侵袭数量、N-cadherin、Vimentin蛋白、RhoA、Rac1、Cdc42 mRNA和蛋白表达依次降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达依次升高(P<0.05),呈剂量依赖性。四君子汤Ⅲ组上述指标和舒尼替尼组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论四君子汤含药血清能够抑制人卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质化,可能与RhoA/Rac1/Cdc42信号通路激活受阻相关。

血清TAP、bFGF及CDCA5在老年宫颈癌患者中表达水平及其与预后的关系

目的 探讨血清肿瘤异常蛋白(TAP)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及细胞分裂周期相关蛋白(CDCA)5在老年宫颈癌患者中的表达水平及其与预后的关系。方法 选取98例宫颈癌患者为癌症组,另选取同期女性体检健康的56例为健康组,比较两组血清TAP、bFGF及CDCA5的表达水平并应用Cox比例风险模型分析其与预后的关系。结果 癌症组TAP、bFGF及CDCA5的表达水平明显高于健康组(P<0.05);多因素分析结果显示,病理类型、FIGO分期、TAP、bFGF及CDCA5的表达水平均为影响老年宫颈癌患者预后的独立危险因素(P均<0.05)。结论 血清TAP、bFGF及CDCA5在老年宫颈癌患者中表达水平较高,可作为预测患者预后的重要因素。

皮肤黑色素瘤放疗耐药基因的筛选及初步鉴定

目的筛选出皮肤恶性黑色素瘤放疗敏感性基因,并在生物信息学和细胞水平验证筛选出的候选基因对皮肤恶性黑色素瘤发生、发展的作用。方法通过全转录组测序及表达谱分析比较野生型人皮肤黑色素瘤细胞SK-MEL-1与辐射耐受型SK-MEL-1的差异基因,以表达量差异最大的基因作为候选基因。TCGA数据库挖掘该候选基因在皮肤恶性黑色素瘤中的表达特征及其对预后的影响。进一步通过构建该基因的敲低、过表达SK-MEL-1细胞株,比较敲低、过表达该基因的细胞对SK-MEL-1细胞增殖、辐射敏感性的影响。结果通过比较野生型SK-MEL-1与辐射耐受型SK-MEL-1的表达谱,筛选出CDCA8基因为差异表达量最大的基因。该基因在辐射耐受型SK-MEL-1中表达上调。基于TCGA数据库的生物信息学分析提示,该基因在皮肤恶性黑色素瘤中高表达,且表达量与临床分期相关,临床分期高的样本表达量高于低临床分期的样本。此外,高表达组的总生存率和无病生存率均低于低表达组。细胞学水平实验证明,敲低CDCA8基因能明显抑制SK-MEL-1的增殖和提高SK-MEL-1对辐射的敏感性;相反,过表达CDCA8基因能促进SK-MEL-1的增殖和降低SK-MEL-1对辐射的敏感性。结论CDCA8基因是皮肤恶性黑色素瘤发生、发展的关键基因,且与肤恶性黑色素瘤SK-MEL-1细胞的放疗敏感性相关。抑制CDCA8基因表达是提高皮肤恶性黑色素瘤放疗敏感性的潜在的方法 。