细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)在人类肿瘤中致癌作用的泛癌分析

CDCA5高表达已被发现在多种肿瘤中具有致癌作用.运用生物信息学方法探讨CDCA5在泛癌中的表达特征,通过TCGA和GTEX数据库获得CDCA5在肿瘤样本和癌旁样本中的表达情况,从基因表达、生存分析、基因变异和免疫浸润等方面探讨了CDCA5在不同肿瘤发病机制中的作用;通过GSCA(Gene Set Cancer Analysis)分析CDCA5表达与药物IC_(50)(半数抑制浓度)的关系并用免疫组化验证了该基因;通过STRING和GEPIA2数据库获取与CDCA5相关的基因并进行KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)富集分析.结果表明:CDCA5在大多数肿瘤中高表达,且与部分肿瘤患者的预后存在明显的相关性.CDCA5表达与肿瘤浸润免疫细胞(TIICs)显著相关并且TIICs标记物表现出不同的免疫浸润模式.拷贝数变异(CNV)与CDCA5的表达呈正相关,甲基化与CDCA5的表达呈负相关.IC_(50)数据显示多种药物可显著抑制CDCA5的表达.免疫组化实验证实了CDCA5在肝恶性肿瘤和结肠恶性肿瘤中具有促癌作用,可作为肿瘤治疗的生物标志物,为肿瘤治疗提供了一种新的研究方向.

生存素与细胞分裂周期相关蛋白5在胃癌及胃间质瘤中的表达及其临床意义

目的:检测生存素与细胞分裂周期相关蛋白5(cell division cycle associated protein 5,CDCA5)在胃癌及胃间质瘤中的表达,分析两者相关性及其对临床病理学参数的评估价值。方法:首先通过GEPIA数据库分析生存素的编码基因BIRC5 mRNA与CDCA5 mRNA在胃癌中的表达及相关性;采用免疫组化检测76例胃癌和63例胃间质瘤中生存素与CDCA5表达,应用Spearman相关检验分析两者相关性,并分析其与患者临床病理特征的相关性。接着,通过PROMO数据库分析可能作用于BIRC5与CDCA5启动子的转录因子。最后,利用HDOCK预测生存素与CDCA5的相互作用。结果:GEPIA数据库分析显示,BIRC5 mRNA和CDCA5 mRNA在胃癌组织中表达均明显高于正常胃组织(P<0.01),且两者在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.79,P<0.01);免疫组化结果显示,在胃癌和胃间质瘤中,生存素与CDCA5均在细胞核与细胞质中表达,两者表达量均明显高于对应癌旁/瘤旁组织(P均<0.001),且两者在胃癌、胃间质瘤组织中的表达呈一定的正相关(r_(胃癌)=0.410,r_(胃间质瘤)=0.347,P均<0.05)。胃癌中,生存素与肿瘤直径、淋巴管侵犯及TNM分期相关(P<0.05);CDCA5表达与肿瘤分化程度、TNM分期相关(P<0.05);两者共阳性表达与肿瘤直径、肿瘤分化程度、淋巴管侵犯及TNM分期相关(P<0.05)。胃间质瘤中,生存素与核分裂象及NIH危险度分级相关(P<0.05);CDCA5与肿瘤直径及NIH危险度分级相关(P<0.05);两者共阳性表达与肿瘤直径、核分裂象及NIH危险度分级相关(P<0.05)。另外,PROMO发现有13个转录因子可同时调控CDCA5与BIRC5启动子;HDOCK预测发现,生存素蛋白与CDCA5蛋白之间存在多对相互作用。结论:在多种转录因子的共同作用下,生存素与CDCA5在胃癌与胃间质瘤中均呈高表达,且呈正相关;两者均与胃癌、胃间质瘤的部分临床病理学参数相关,且联合检测临床价值大于单个分子的检测。

分裂相关增强子1、细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C在直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨分裂相关增强子1(Hairy and enhancer of split related protein 1,HESR-1)、细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(Cell division cycle 25C,CDC25C)在直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法选择166例行根治性手术的直肠癌患者为研究对象,采用免疫组织化学法检测癌组织及癌旁组织中HESR-1和CDC25C的表达,收集患者临床病理参数并进行随访,分析HESR-1和CDC25C表达对直肠癌患者临床病理参数及预后的影响。结果肠癌组织中CDC25C、HESR-1的阳性率均高于癌旁组织(46.9%vs 12.6%,41.6%vs 7.6%),差异有统计学意义(P<0.05)。在癌组织中,CDC25C mRNA与HESR-1 mRNA的表达呈正相关(r=0.862,P=0.003)。癌组织CDC25C及HESR-1表达阳性患者的肿瘤直径和淋巴结转移率均高于表达阴性者(P<0.05)。Cox多因素分析结果显示,肿瘤直径、淋巴结转移、CDC25C阳性及HESR-1阳性是影响直肠癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论HESR-1和CDC25C在直肠癌组织中表达升高,且与患者预后密切相关。

皮肤黑素瘤中细胞分裂周期相关蛋白8的表达水平及功能学分析

目的基于生物信息学方法分析CDCA8在皮肤黑素瘤组织中的表达水平及其相关生物学功能。方法TCGA数据库中下载皮肤黑素瘤数据集,分析CDCA8在皮肤黑素瘤组织中的表达,K-M曲线分析皮肤黑素瘤组织中CDCA8表达水平与总体生存率的关系,UALCAN数据库筛选皮肤黑素瘤中与CDCA8的共表达基因,并对共表达基因进行GO和KEGG富集分析。TIMER数据库分析皮肤黑素瘤组织中CDCA8与免疫细胞浸润的相关性。HPA数据库验证CDCA8在皮肤黑素瘤组织及正常组织中的表达差异。结果与正常组织相比,CDCA8在皮肤黑素瘤组织中明显高表达(P<0.5);与皮肤黑素瘤TP-53野生型相比,CDCA8表达水平在TP-53突变型中明显升高(P<0.05)。皮肤黑素瘤中CDCA8高表达组总体生存率显著低于CDCA8低表达组(HR=1.500,P=0.005)。皮肤黑素瘤组织中CDCA8共表达基因主要富集于细胞核、细胞质、细胞分裂、细胞周期、DNA修复、蛋白结合、RNA结合、细胞周期、DNA复制及细胞核质转运等过程。皮肤黑素瘤中CDCA8与B细胞(r=0.166,P<0.001)、CD8^(+)T细胞(r=0.176,P<0.001)、中性粒细胞(r=0.193,P<0.001)及树突状细胞(r=0.230,P<0.001)浸润程度存在显著正相关性。免疫组化显示CDCA8在皮肤黑素瘤组织中均呈现高强度表达,而在正常组织中无表达或低表达。结论CDCA8在皮肤黑素瘤组织中呈现高表达状态,与患者不良预后显著相关,CDCA8可能通过调控细胞周期及免疫细胞浸润参与皮肤黑素瘤的发病机制。

基于数据挖掘技术探讨细胞分裂周期相关蛋白在肝细胞癌中的表达及对预后的影响

目的 基于数据挖掘技术研究细胞分裂周期相关蛋白(CDCA)在肝细胞癌(HCC)中的表达特征及其与临床病理分期和预后的关系。方法 通过TCGA数据库获得266例HCC组织及50例正常肝组织样本数据,分析CDCA在HCC与正常肝组织中表达的差异,再以CDCA基因表达中位数为界将HCC组织分为高、低表达组,每组133例。Kaplan-Meier法比较高、低表达组患者总生存期(OS)差异。采用单因素和多因素Cox比例危险回归模型识别独立预后因素。另收集江苏省淮安市第一人民医院2019年6月至2020年6月被病理证实的HCC组织及对应的癌旁组织24例,采用随机数字表法将其分为8组,每组3对,采用免疫组织化学染色检测CDCA在HCC及癌旁组织中表达的差异。结果CDCA1-8在HCC标本中表达量高于正常肝组织(P<0.05)。CDCA1/2/5/6/8高表达组总生存率低于低表达组(P<0.05)。CDCA6(HR=1.51,95%CI:1.29~1.75,P<0.001)、CDCA8(HR=1.69,95%CI:1.08~2.64,P<0.05)、年龄(HR=1.03,95%CI:1.01~1.05,P<0.05)、患者肿瘤大小分期[T3(HR=1.46,95%CI:1.47~4.32,P<0.001)、T4(HR=6.61,95%CI:2.84~15.34,P<0.001)]是HCC OS的独立预测因子。结论 CDCA在HCC组织中表达升高,多数CDCA家族成员表达水平与HCC预后显著相关,其中,CDCA6/8是独立预测指标。

细胞分裂周期相关蛋白5的功能及其在癌症发生中作用的研究进展

细胞分裂周期相关蛋白5 (CDCA5)又名Sororin,最初作为一种调控细胞周期的蛋白被发现,它在姐妹染色单体粘连、细胞周期调控、DNA损伤修复中具有重要作用。近年来CDCA5在癌症发生发展中的作用被逐渐发现,CDCA5在包括肝细胞癌、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、膀胱癌、乳腺癌、胃癌、口腔鳞状细胞癌和食管鳞状细胞癌在内的多种癌症中具有肿瘤促进因子的作用。CDCA5参与癌症发生发展的机制主要有:AKT通路、ERK通路、细胞周期调控、蛋白互作等。CDCA5具有作为多种癌症诊断、预后分子标志物及治疗靶点的应用前景。

肺腺癌组织细胞分裂周期相关蛋白8蛋白表达及与临床病理参数、预后关系分析

目的:分析肺腺癌(LUAD)组织细胞分裂周期相关蛋白8(CDCA8)蛋白表达水平,并探究CDCA8蛋白表达与临床病理参数、预后的关系。方法:选择98例LUAD患者,按照CDCA8蛋白表达水平分为高阳性组(67例)和低阳性组(31例)。收集并比较两组临床病理参数,并通过生存曲线来比较两组LUAD患者无病生存率和总生存率。结果:以CDCA8蛋白表达为因浓度变量,并以TNM分期、肿瘤体积、淋巴结转移、脏层胸膜侵犯为协变量,Logistics回归分析结果显示肿瘤体积(10~30 mm^(2)、>30 mm^(2))、淋巴结转移是CDCA8蛋白高阳性表达的影响因素(P<0.05)。CDCA8蛋白高阳性组无病生存率、总生存率为28.5%、60.9%,低于低阳性组的51.6%、80.0%(均P<0.05)。结论:LUAD组织CDCA8(1∶500稀释)蛋白表达与临床病理参数、预后存在直接关联,检测CDCA8(1∶500稀释)蛋白表达水平可以帮助临床医生判断LUAD患者病情进展和预后,利于指导治疗方案制定。

细胞分裂周期相关蛋白5在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

目的探讨细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)在肝细胞肝癌中的表达及临床意义。方法取260例原发性肝细胞肝癌患者的肝细胞肝癌组织,取52例肝脏良性病变患者的正常肝组织作为对照。蛋白质印迹法(Western blot)检测CDCA5、ERK、细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、细胞周期蛋白B1(cyclin B1)的相对表达量;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定CDCA5、ERK mRNA的相对表达量,并分析其与患者临床特征的关系。采用Pearson相关性分析CDCA5和ERK与肝细胞肝癌患者病理特征间的相关性。结果肝细胞肝癌组织中CDCA5、ERK mRNA的相对表达量均高于正常肝组织,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。肝细胞肝癌组织中CDCA5、ERK、CDK1和cyclin B1蛋白的相对表达量均高于正常肝组织,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。不同肿瘤直径、Edmondson分级、巴塞罗那临床肝癌(BCLC)分期、合并门静脉癌栓情况和甲胎蛋白(AFP)水平肝细胞肝癌患者肝细胞肝癌组织中CDCA5、ERK mRNA的相对表达量比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。CDCA5、ERK的表达与Edmondson分级为Ⅲ~Ⅳ级、BCLC分期为B~C期、有门静脉癌栓和AFP水平升高呈正相关(P﹤0.05)。结论CDCA5可能依赖ERK的磷酸化来促进CDK1、cyclin B1的表达,促进肿瘤细胞的恶性增殖,临床有望将其作为治疗肝细胞肝癌的新靶点。

长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18通过微RNA-497-5p/细胞周期蛋白E1轴调节弥漫性大B细胞淋巴瘤的增殖、凋亡和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测2018年5月至2021年5月收集的恩施土家族苗族自治州中心医院DLBCL病人淋巴组织、良性淋巴结增生病人的淋巴组织、人正常B细胞永生化细胞HMy2.CIR、DLBCL细胞系SU-DHL-1、OCI-LY8、U2932中HCG18、miR-497-5p表达及CCNE1蛋白表达,将OCI-LY8细胞分为Ct组(正常培养的OCI-LY8细胞)、pcDNA组(细胞转染过表达物阴性对照)、pcDNA-HCG18组(细胞转染HCG18过表达物)、si-NC组(细胞转染小干扰RNA阴性对照)、si-HCG18组(细胞转染HCG18小干扰RNA)、si-HCG18+inhibitorNC组(细胞转染HCG18小干扰RNA和抑制物阴性对照)、si-HCG18+miR-497-5p inhibitor组(细胞转染HCG18小干扰RNA和miR-497-5p抑制物),CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测CCNE1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,双萤光素酶验证HCG18与miR-497-5p、miR-497-5p与CCNE1的关系。结果 在DLBCL淋巴组织和细胞中,HCG18、CCNE1蛋白高表达,miR-497-5p低表达,且在OCI-LY8细胞中HCG18、CCNE1蛋白表达上调最高,miR-497-5p表达下调最多(P<0.05),因此,以OCI-LY8细胞进行后续研究,与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18(0.26±0.03比1.01±0.01)、CCNE1蛋白(0.45±0.03比1.44±0.19)表达降低,miR-497-5p(1.95±0.14比1.03±0.02)表达升高(P<0.05),与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18(1.96±0.23比1.02±0.01)、CCNE1蛋白(2.33±0.21比1.42±0.18)表达升高,miR-497-5p(0.28±0.02比1.02±0.02)表达降低(P<0.05),与siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组比较,miR-497-5p表达降低(1.21±0.09比1.95±0.14、1.94±0.13),CCNE1蛋白(0.87±0.08比0.45±0.03、0.44±0.04)表达上调(P<0.05),沉默HCG18可抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭行为及PCNA、MMP-9蛋白表达,诱导细胞凋亡及Bax蛋白表达,而上调HCG18则呈相反趋势,下调miR-497-5p逆转了沉默HCG18对OCI-LY8细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,HCG18靶向调控miR-497-5p/CCNE1。结论 沉默HCG18可能通过调控miR-497-5p/CCNE1抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡。

细胞分裂周期相关蛋白(CDCAs)与乳腺癌发生、发展和转移的生物信息学分析

目的利用生物信息学方法研究细胞分裂周期相关蛋白(CDCAs)介导乳腺癌的潜在靶向基因、信号传导通路及分子机制。方法从GEO和TCGA数据库下载正常乳腺组织和乳腺癌样本的基因芯片;使用R软件limma包分析正常乳腺组织和乳腺癌样本之间的差异表达基因;使用Kaplan-Meier Plotter评估乳腺癌患者的整体生存率、无复发生存率和无远处转移生存率;对筛选出的差异表达基因进行GO和KEGG信号通路富集分析。结果通过对差异表达基因的趋势分析,筛选出2015个显著上调的基因以及864个显著下调的基因,其中CDCA1/2/3/5/7/8可能为介导乳腺癌浸润性进展的相关基因。生存分析表明,乳腺癌CDCA1/2/3/5/7/8高表达与不良预后相关(均P<0.05)。GO分析结果主要富集于细胞有丝分裂周期、染色姐妹单体分离、染色体、着丝粒、纺锤体等;KEGG信号通路富集分析则在卵母细胞减数分裂、p53信号通路、DNA复制显著富集。结论整合生物信息学分析结果,表明CDCAs在乳腺癌组织中表达升高,并且CDCAs表达水平显著影响乳腺癌患者预后,与其他CDCAs相比,CDCA2/3/5/8可能是乳腺癌患者靶向治疗的合适靶点。

细胞分裂周期相关蛋白5基因在肝癌组织及肝癌细胞系中的表达

目的通过检测细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)mRNA在肝癌组织及肝癌细胞系中的表达,初步探讨CDCA5在肝癌发生中的作用。方法采用3'-甲基-4-二甲氨基偶氮苯诱导雄性F344大鼠肝癌模型,用qRT-PCR分析大鼠肝癌组织、人类肝癌组织和人类肝癌细胞系中CDCA5 mRNA的表达。结果大鼠肝癌组织CDCA5 mRNA表达量为正常大鼠肝脏的233.94倍(P<0.05)。人肝癌细胞系Hep3B和Huh7中CDCA5 mRNA表达量分别为正常肝细胞系HL7702的31.34和14.22倍(P<0.05)。85.71%(18/21)人肝癌组织的CDCA5表达量较相应癌旁组织升高,中位倍数为3.53(P<0.05)。结论 CDCA5 mRNA在大鼠肝癌组织、人类肝癌组织及细胞系中高表达,初步提示CDCA5可能是肝癌的癌基因。

过敏性鼻炎伴哮喘综合征患者细胞分裂周期相关蛋白5基因表达和临床意义

目的研究过敏性鼻炎伴哮喘综合征(combined allergic rhinitis and asthma syndrome,CARAS)患者淋巴细胞差异表达基因及相关功能,寻找参与调控CARAS的重要基因,并探讨其表达水平与疾病进展的关系。方法通过过敏性哮喘mRNA表达芯片数据集筛选正常人和过敏性哮喘患者差异表达基因,并对基因进行功能注释,根据基因注释结果筛选参与过敏性哮喘调控的重要基因。对筛选出的细胞分裂周期相关蛋白5(cell division cycle associated 5,CDCA5)基因在过敏性鼻炎、CARAS患者外周血淋巴细胞中验证其表达水平,并分析其表达水平与过敏性鼻炎和哮喘之间的关系。结果 GSE104472数据库分析过敏性哮喘患者与正常人外周血淋巴细胞共有2971个差异表达的基因。KEGG通路富集分析发现有16个差异基因参与胰岛素信号通路调节。GO基因功能注释分析发现有191个基因参与无膜细胞器的构成。CDCA5基因参与无膜细胞器构成和细胞分裂的调控,并在过敏性鼻炎和CARAS患者升高。CDCA5高表达组患CARAS的概率明显高于CDCA5低表达组。结论 CDCA5在CARAS患者外周血淋巴细胞表达水平显著增高,并可能与哮喘疾病进展相关。

细胞分裂周期蛋白20、微小RNA-34a-5p在膀胱尿路上皮癌组织中的表达及与临床病理的相关性

目的探讨细胞分裂周期蛋白20(CDC20)、微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)在膀胱尿路上皮癌(BUC)组织中的表达及与临床病理的相关性。方法 BUC病人80例,均接受手术治疗,术中留取癌组织(BUC组)及相对应的癌旁组织(对照组,距离癌缘2.5 cm)。实时荧光定量PCR法检测BUC组织中CDC20 mRNA、miR-34a-5p表达水平,免疫组化(S-P法)检测BUC组织及癌旁组织CDC20表达水平。分析CDC20、miR-34a-5p表达水平与临床病理特征的关系及影响BUC病人预后的危险因素。结果 BUC组组织中CDC20 mRNA表达水平高于对照组(P<0.05),miR-34a-5p表达水平低于对照组(P<0.05)。BUC组组织中CDC20阳性率高于癌旁正常组织(P<0.05)。BUC病人CDC20、miR-34a-5p表达与组织学分级、淋巴结转移、组织浸润、复发密切相关。CDC20阳性表达病人3年累积生存率低于CDC20阴性表达病人;miR-34a-5p高表达病人3年累积生存率高于miR-34a-5p低表达病人。多因素Cox分析显示,CDC20水平偏高、miR-34a-5p水平偏低是BUC不良预后的危险因素(P<0.05)。结论 BUC病人癌组织中CDC20高表达、miR-34a-5p低表达,与组织学分级、淋巴结转移、组织浸润、复发及不良预后密切相关,可能作为潜在的诊断标志物。

细胞分裂周期蛋白20、拓扑异构酶ⅡA、有丝分裂相关激酶2的表达与食管鳞状细胞癌患者临床病理特征的相关性

目的探讨食管鳞状细胞癌组织中细胞分裂周期蛋白20(CDC20)、拓扑异构酶ⅡA(TOP2A)、有丝分裂相关激酶2(NEK2)蛋白的表达与患者临床病理特征的相关性。方法选择2018年4月至2020年8月邯郸市第一医院收治的112例食管鳞状细胞癌患者为研究对象,所有患者行食管癌根治性手术,留取食管鳞状细胞癌组织、癌旁组织及正常食管组织,采用免疫组织化学法检测食管鳞状细胞癌组织、癌旁组织及正常食管组织中CDC20、TOP2A、NEK2蛋白的表达,并分析CDC20、TOP2A、NEK2蛋白的表达与食管鳞状细胞癌患者临床病理特征的相关性。结果食管鳞状细胞癌组织中CDC20、TOP2A、NEK2蛋白表达显著高于癌旁组织和正常食管组织(P<0.05),癌旁组织中CDC20、TOP2A、NEK2蛋白表达显著高于正常食管组织(P<0.05)。CDC20、TOP2A、NEK2蛋白的表达与食管鳞状细胞癌患者的性别、年龄、肿瘤直径及肿瘤位置无关(P>0.05),与肿瘤TNM分期、淋巴转移、肿瘤组织分化程度有关(P<0.05)。结论食管鳞状细胞癌组织中CDC20、TOP2A、NEK2蛋白均呈高表达,且其蛋白表达水平与食管鳞状细胞癌的TNM分期、淋巴转移及肿瘤组织分化程度有关,检测CDC20、TOP2A、NEK2蛋白表达水平有助于评估食管鳞状细胞癌患者的病情进展及预后。

CDCA5基因在子宫颈癌组织细胞中表达变化及对肿瘤细胞增殖的影响

目的 观察细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)基因在子宫颈癌组织细胞中的表达变化,观察CDCA5基因过表达对子宫颈癌细胞增殖能力的影响,并探讨可能的分子机制。方法 收集子宫颈癌组织和癌旁正常组织各60例,培养人宫颈上皮永生化细胞系H8和人子宫颈癌细胞系SiHa、C-33A、MS751、HeLa,采用实时荧光定量PCR法检测组织和细胞中的CDCA5 mRNA。将CDCA5 mRNA相对表达量最低的子宫颈癌细胞随机分为对照组、过表达组,分别转染pCDH空载体质粒、CDCA5过表达质粒,采用CCK-8实验、克隆形成实验检测细胞增殖能力,Western blotting法检测细胞中的p-ERK、p-AKT蛋白。结果 子宫颈癌组织中CDCA5 mRNA相对表达量高于癌旁组织(P<0.05);子宫颈癌细胞系SiHa、C-33A、MS751、HeLa中CDCA5 mRNA表达高于H8细胞,其中HeLa细胞中相对表达量最低(P均<0.05)。过表达组24、48、72 h细胞增殖能力高于对照组,过表达组细胞平板克隆形成数量及p-ERK、p-AKT蛋白表达高于对照组(P均<0.05)。结论 CDCDA5基因在子宫颈癌组织、细胞中高表达,CDCDA5基因过表达可增强人子宫颈癌细胞的增殖能力,该作用可能与调控ERK/AKT信号通路有关。

慢病毒介导的细胞分裂周期相关蛋白2基因沉默对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨应用慢病毒介导小干扰核糖核酸(siRNA)沉默细胞分裂周期相关蛋白2(CDCA2)基因对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(q RT-PCR)与蛋白质印迹法(Western blotting)法分别检测人正常乳腺上皮细胞株MCF-10A与乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、BT549中CDCA2 mRNA及蛋白表达。构建慢病毒表达载体转染乳腺癌MCF-7细胞,实验分为对照组、Lv-NC组、Lv-siRNA-CDCA2组。采用噻唑蓝(MTT)实验及克隆形成实验检测沉默CDCA2表达对细胞增殖能力的影响;采用流式细胞仪检测沉默CDCA2表达对细胞凋亡能力的影响。Western blotting法检测细胞周期素D1(Cyclin D1)、CDK4、P21、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)蛋白表达。采用裸鼠移植瘤实验观察LvsiRNA-CDCA2对移植瘤体积及体质量的影响。结果乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、BT549中CDCA2 mRNA[(2.18±0.13)、(1.56±0.09)、(1.83±0.10)比(1.02±0.06)]及蛋白表达水平[(1.13±0.15)、(0.56±0.08)、(0.79±0.11)比(0.23±0.04)]与MCF-10A相比显著升高(P<0.05),乳腺癌MCF-7细胞中CDCA2的表达水平升高最为显著;与Lv-NC组相比,Lv-siRNA-CDCA2组MCF-7细胞增殖活性与克隆形成率显著降低(P<0.05),而细胞凋亡率显著升高(P<0.05),可促进P21、Bax表达(P<0.05),而抑制Cyclin D1、CDK4、Bcl-2表达(P<0.05);与Lv-NC组比较,Lv-siRNA-CDCA2组移植瘤体积和体质量均显著降低(P<0.05)。结论慢病毒介导的CDCA2基因沉默可乳腺癌细胞细胞增殖,诱导细胞凋亡,并抑制肿瘤生长。

细胞分裂周期相关蛋白促肿瘤作用的研究进展

细胞分裂周期相关蛋白(cell division cycle-associated protein,CDCA)家族是细胞增殖的重要调控因子。越来越多的研究表明这类蛋白分子在肿瘤细胞中高表达,并具有调节肿瘤细胞生长周期、促进肿瘤细胞增殖和减少肿瘤细胞凋亡的作用,导致患者预后较差。本文就CDCA蛋白家族成员在肿瘤发生发展中的作用进行综述。

微小RNA-140-3p靶向细胞分裂周期相关蛋白8抑制肺腺癌细胞侵袭转移的生物信息学分析及验证

目的在生物信息学基础上探讨微小RNA(miR)-140-3p靶向细胞分裂周期相关蛋白8(CDCA8)抑制肺腺癌细胞的侵袭和转移。方法通过GEO数据库中的GEO2R分析肺腺癌芯片数据中差异表达的miRNA。Target Scan Human7.2和miRWalk数据库查找miR-140-3p的靶基因。Cytoscape3.7.2软件筛选出Hub基因。GEPIA数据库查询靶基因在肺腺癌组织和正常肺组织中的表达水平,在肺腺癌不同分期中的表达水平以及靶基因的表达水平与肺腺癌患者总体生存率的关系。Star Base数据库查找miR-140-3p在肺腺癌中的生存分析及与CDCA8的表达水平在肺腺癌中的相关性。Real-time PCR检测miR-140-3p在正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺腺癌细胞A549的表达水平以及感染效率。Real-time PCR和Western blotting实验检测过表达miR-140-3p后CDCA8 m RNA和蛋白的表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p是否与CDCA8直接结合。Transwell侵袭实验检测过表达miR-140-3p和CDCA8对肺腺癌细胞侵袭力的影响。结果通过GEO等数据库的分析结果显示,miR-140-3p在正常肺组织中的表达水平明显高于在肺腺癌中的表达水平,其预测靶基因CDCA8在肺腺癌中的表达水平明显高于在正常肺组织中的表达水平,且CDCA8与miR-140-3p的表达水平在肺腺癌中成负相关。实验结果显示,miR-140-3p在A549细胞中的表达明显低于在BEAS-2B细胞中的表达(P<0.05);用过表达慢病毒感染细胞后miR-140-3p的表达水平明显升高(P<0.05);过表达miR-140-3p后CDCA8的m RNA和蛋白表达水平明显下调(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-140-3p能与CDCA8直接结合(P<0.05);与对照组相比,过表达miR-140-3p可抑制肺腺癌细胞A549的侵袭转移,而CDCA8可逆转miR-140-3p对肺腺癌细胞A549侵袭力的抑制作用(P<0.05)。结论MiR-140-3p靶向CDCA8抑制肺腺癌细胞的侵袭转移。

circVANGL1/miR-134-5p/CDCA3轴调控乳腺癌干细胞增殖、迁移、侵袭的机制研究

目的探讨circVANGL1/miR-134-5p/细胞分裂周期相关因子3(CDCA3)轴调控乳腺癌干细胞增殖、迁移、侵袭的机制。方法收集2021年2月至2023年11月治疗乳腺癌患者的乳腺癌组织及相对应癌旁组织。体外培养乳腺癌MCF-7细胞干细胞亚群,根据不同处理方法将其分为Con组、si-NC组、si-circVANGL1组、pcDNA组、pcDNA-circVANGL1组、miR-NC组、miR-134-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-134-5p组、si-circVANGL1+anti-miR-134-5p组、si-circVANGL1+pcDNA-CDCA3组。采用qRT-PCR检测circVANGL1、miR-134-5p和CDCA3 mRNA在乳腺癌组织、癌旁组织及各组乳腺癌干细胞中的表达水平;Western blot检测CDCA3、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平。双荧光素酶报告实验验证circVANGL1与miR-134-5p、miR-134-5p与CDCA3靶向关系;CCK-8实验检测乳腺癌干细胞增殖活性,划痕实验检测细胞迁移能力,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。结果与癌旁组织比较,乳腺癌组织中circVANGL1、CDCA3 mRNA、CDCA3蛋白表达水平较高,miR-134-5p表达水平较低(P<0.05)。circVANGL1可靶向调控miR-134-5p的表达,miR-134-5p可靶向调控CDCA3蛋白的表达。干扰circVANGL1表达后,乳腺癌干细胞增殖活性、划痕愈合率、细胞克隆形成数、侵袭细胞数以及MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。下调miR-134-5p表达或过表达CDCA3可部分逆转干扰circVANGL1对乳腺癌干细胞增殖、迁移、侵袭的作用(P<0.05)。结论circVANGL1可能通过miR-134-5p/CDCA3轴调控乳腺癌干细胞的增殖、迁移、侵袭。

肺腺癌中细胞分裂周期相关蛋白家族预后价值的生物信息学分析

目的对肺腺癌(LUAD)中细胞分裂周期相关蛋白家族(CDCAs)的预后价值进行生物信息学分析。方法通过GEPIA、Kaplan-Meier、cBioPortal、GeneMANIA、String和TIMER2.0等数据库对肺腺癌患者CDCAs的差异表达、预后价值、临床肿瘤分期、基因改变和免疫细胞浸润结果进行分析。结果LUAD组织中CDCA1~8 mRNA水平较正常组织升高,CDCA1、2、3、4、5、7、8蛋白表达水平也较正常组织升高,但CDCA6蛋白表达水平较正常组织下降。CDCA1、3、4 mRNA与LUAD患者总生存期(OS)和无病生存期(DFS)呈正相关,CDCA2、5、8仅与OS呈正相关。CDCAs的功能主要与染色体位置、着丝粒、染色体分离调控和赤道板集合等有关。CDCAs的表达与肺腺癌中CD4^(+)T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、B细胞、CD8;T细胞、树突状细胞等6种免疫细胞的浸润呈显著相关。结论CDCAs可能对LUAD的发生和发展产生调控作用,CDCA1、2、3、4、5、8有望成为LUAD预后生物标志物与免疫治疗的新靶点。