细胞外信号调节激酶在应激性溃疡发病中的作用

目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)在实验性应激性溃疡发病中的作用。方法:采用浸水束缚(water-immersion restraint,WIR)应激实验复制大鼠应激性溃疡模型。检测WIR应激5 min、15 min、30 min、1 h、2 h和3.5 h各时间点的胃黏膜ERK1/2活化情况,并观察特异性ERK1/2抑制剂PD98059预处理(1 mg/kg,iv.)对胃黏膜损伤的影响。采用Western印迹检测ERK1/2和caspase-3表达,激酶活性分析方法检测ERK1/2活性,电泳迁移率变动分析(EMSA)检测转录因子活化蛋白1(AP-1)和核因子κB(NF-κB)DNA结合活性,Northern印迹检测TNF-α和IL- 1βmRNA表达,采用溃疡指数(UI)计分和病理学检查评价胃黏膜病变程度,TUNEL技术检测和定量细胞凋亡。结果:正常大鼠胃黏膜仅检测到极微弱的磷酸化ERK1/2表达,WIR应激15 min后胃黏膜ERK1/2即发生活化并于3.5 h后达到峰值。PD98059抑制ERK活化后,胃黏膜AP-1和NF-κB活性及TNF-α和IL-1βmRNA表达显著下调,胃黏膜损伤程度也明显减轻,同时伴有胃黏膜caspase-3活化和凋亡轻度增加。结论:ERK1/2活化在浸水束缚应激诱导的胃黏膜损伤中发挥了重要作用。