研究型教学模式在“细胞吞噬作用”实验教学中的应用

研究型教学是在教学过程中渗透运用科学研究的方法与思维模式,引导学生在学习中主动发现问题。研究型教学模式尤其适用于实验操作较多的医学细胞生物学设计性实验课。首先由教师提供实验研究题目与参考资料,学生分组讨论确定可行的研究方案;学生自主完成实验并提交研究报告;最后教师进行教学评价。研究型教学模式有利于培养学生研究型学习能力、分析解决问题的能力,加深了学生对知识点的领悟,取得了良好的教学效果。

抗HER2单抗报告基因法检测抗体依赖性细胞吞噬作用生物学活性方法的建立及应用

目的利用报告基因法建立抗人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)单抗的抗体依赖性细胞吞噬作用(antibody-dependent cell-mediated phagocytosis,ADCP)生物学活性检测方法。方法以Jurkat/NFAT/CD32a-FcεRIγ转基因细胞系作为效应细胞,SKBR3细胞系为靶细胞,通过荧光素酶检测系统建立抗HER2单抗的ADCP测活方法,并运用实验设计(design of experiment,DOE)方法进行实验优化和方法学验证。结果该方法量效关系符合四参数方程:y=(A-D)/[1+(x/C)^(B)]+D,方法优化确定量效范围为400~3.959 ng·mL(-1),靶细胞接种密度为每孔1.5×10^(4)个,效靶比为5∶1,诱导时间为7 h。该方法具有良好的专属性;不同稀释组样本百分相对效价分别为(55.04±1.35)%、(78.10±6.33)%、(102.69±5.21)%、(133.32±2.58)%和(152.87±8.11)%;回收率在101%~110%,相对标准偏差(RSD)均小于10%。结论本研究成功建立抗HER2单抗ADCP生物学活性方法,该方法专属性强、重复性好,准确性高,可作为抗HER2单抗ADCP生物学活性的评价方法。

氯化三丁基锡对牡蛎2种免疫相关酶活性及血细胞吞噬作用的影响

将牡蛎(Crassostrea gigas)暴露于不同浓度的氯化三丁基锡(TBTCl),96 h后取样,测定牡蛎组织碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性和血细胞的吞噬作用。结果表明,随着TBTCl浓度的增加AKP活性呈现先降低后升高的趋势,而SOD的活性呈逐渐降低的趋势,TBTCl对血细胞的吞噬作用具有抑制效应。

全血白细胞吞噬功能测定的改进及临床应用

目的建立一个同时测定多个样品的全血白细胞吞噬功能测定的方法,缩短临床标本检测的时间。方法在全血白细胞吞噬功能测定实验中,通过编程和进样的改进,实现多个循环的连续测定的时间优化。增加一个分配器为进样器,满足大体积一次进样的要求。结果改进后的方法与原方法的对比实验相关性很好(R2=0.99),而效率提高了24倍。21例肺癌患者手术治疗恢复后,其CL的CL60min,和CPM和Pt强度明显增加(P<0.05)。结论该文探讨的改进方法是可行的,使全血CL测定可能成为肺癌患者白细胞活性功能及观察疗效的一个指标,增强了全血白细胞吞噬功能检测的临床实用性。

Ficolin 3的表达、纯化及其对RAW264.7巨噬细胞的活化作用

目的构建人ficolin-3基因的原核表达载体在大肠杆菌中表达后纯化,检测可溶性His-ficolin在诱导巨噬细胞系RAW264.7活化中的作用。方法从人外周血单个核细胞cDNA中扩增人ficolin-3基因的cDNA序列,将其插入pET22原核表达载体中,酶切鉴定并测序验证重组质粒pET22b-ficolin 3后,在大肠杆菌BL21中诱导表达并纯化His-ficolin 3。以His蛋白为对照,利用流式细胞术检测不同浓度可溶性His-ficolin 3对RAW264.7细胞吞噬鸡红细胞能力的影响,利用ELISA检测His-ficolin 3对RAW264.7细胞分泌IL-6、IL-12和TNF-α的影响。结果酶切鉴定获得预期目的片段,测序证实重组质粒pET22b-ficolin 3构建成功。SDS-PAGE提示相对分子质量(Mr)33 000处有可溶性目的蛋白His-ficolin 3表达,His柱纯化后产物纯度在90%以上。Western blot法检测证实纯化产物为His-ficolin 3。和His蛋白相比,His-ficolin 3对RAW264.7细胞的吞噬能力具有剂量依赖性,即His-ficolin3浓度越高,吞噬能力越强;此外,His-ficolin3能显著诱导RAW264.7细胞分泌IL-6、IL-12和TNF-α等炎性细胞因子。结论成功构建了pETb-Ficolin 3重组载体并获得了纯度为90%以上的His-ficolin 3。His-ficolin 3能够显著促进巨噬细胞RAW264.7的活化。

喜炎平注射液联合头孢唑林对金黄色葡萄球菌感染小鼠外周血中性粒细胞和腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响研究

目的探讨喜炎平注射液联合头孢唑林对金黄色葡萄球菌感染小鼠外周血中性粒细胞和腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。方法选取昆明种小鼠70只,经腹腔注射9×108/ml金黄色葡萄球菌菌液0.2 ml,选择其中出现明显发热反应小鼠40只,根据发热程度编号并随机分为空白对照组、头孢唑林组、喜炎平注射液组及联合用药组,每组10只;另选10只直肠温度正常小鼠作为正常对照组。正常对照组和空白对照组小鼠给予0.9%氯化钠溶液腹腔注射,头孢唑林组小鼠给予头孢唑林腹腔注射,喜炎平注射液组小鼠给予喜炎平注射液腹腔注射,联合用药组给予喜炎平注射液联合头孢唑林腹腔注射;各组小鼠均连续腹腔注射给药7 d。计算各组小鼠外周血中性粒细胞实际吞噬率、吞噬指数及腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数。结果空白对照组、头孢唑林组小鼠外周血中性粒细胞实际吞噬率、吞噬指数低于正常对照组,喜炎平注射液组、联合用药组小鼠外周血中性粒细胞实际吞噬率、吞噬指数高于空白对照组和头孢唑林组(P<0.05)。空白对照组、头孢唑林组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数低于正常对照组,喜炎平注射液组、联合用药组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数高于空白对照组和头孢唑林组(P<0.05)。结论喜炎平注射液联合头孢唑林可促进金黄色葡萄球菌感染小鼠外周血中性粒细胞和腹腔巨噬细胞吞噬功能恢复正常,继而增强机体抗感染能力及药物杀菌作用。

昆虫天然免疫的研究进展

对果蝇等昆虫天然免疫的研究有利于揭示人类自身的免疫机制,并为感染性疾病和自身免疫病等的治疗提供新思路。昆虫的天然免疫机制包括物理防线、体液免疫和细胞免疫等方面。在病原体入侵昆虫体内后,昆虫可通过模式识别机制识别病原体并通过Toll途径和Imd途径等机制启动昆虫的体液及细胞免疫反应。昆虫的体液免疫和细胞免疫并不是绝然独立的,而是相互联系、相互促进和协作。在昆虫的各种免疫反应中,抗菌肽的产生、黑化包被反应和细胞吞噬作用是最为重要的防御机制。

姜黄素逆转系统性红斑狼疮患者外泌体诱导的巨噬细胞吞噬功能受损

目的探讨姜黄素对系统性红斑狼疮(SLE)患者外泌体刺激后巨噬细胞吞噬能力的影响。方法选取2016年2月至2017年11月广州市皮肤病防治所和中山大学孙逸仙纪念医院诊治的活动期SLE患者18例,健康对照18例。提取受试者血清外泌体,分为健康对照者外泌体(CON-exo)、SLE患者外泌体(SLE-exo)、CON-exo +姜黄素.SLE-exo +姜黄素用于刺激THP-1源性巨噬细胞,pHrodo-Red指示剂与巨噬细胞共孵育,流式细胞仪检测平均荧光强度,免疫荧光染色计算pHrodo-Red阳性细胞比例,评价巨噬细胞吞噬功能。Western印迹法检测CON-exo组、SLE-exo组、SLE-exo +姜黄素(浓度分别为1、5、20μmol/L)组CD14蛋白水平。两组比较使用Student-Z检验,多组间对比采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。结果流式细胞仪检测显示,CON-exo组、CON-exo +姜黄素组>SLE-exo组、SLE-exo +姜黄素组相对荧光强度分别为101.3%± 14.05%,94.27 ± 14.13%、41.02%± 9.54%.87.33%± 15.01%,差异有统计学意义(F= 10.81,P < 0.01);免疫荧光染色pHrodo检测显示,阳性细胞比例分别为82.16%± 5,20%.81.33%± 4.51%.54.20%± 9.31%.71.23%± 5.43%,差异有统计学意义(F=12.42, P< 0.01), SLE-exo组巨噬细胞荧光强度、阳性细胞比例均低于CON-exo组Q值分别为5.26.5.35,均P <0.01)和SLE-exo +姜黄素组Q值分别为3.97.3.26,均P <0.05)。Western印迹法显示,CON-exo组、SLE-exo组SLE-exo +姜黄素(浓度分别为1、5、20μmol/L)组细胞CD14蛋白水平分别为96.33%± 13.65%.30.67%± 5.86%,45.24%±&89%,72.81 %± 6.62%.90.67%±12.66%,差异有统计学意义(F = 24.57,P < 0.01), SLE-exo 组低于 Con-exo组(t= 8.06, P< 0.001)和SLE-exo +姜黄素(5、20μmol/L)(t值分别为5.08.7.38,均P<0.001),随着姜黄素剂量增加,CD14水平有升高的趋势。结论SLE患者外泌体明显抑制巨噬细胞吞噬功能,而姜黄素可逆转SLE患者外泌体的作用。

低密度多孔性颗粒在干粉吸入剂中的应用

评述了低密度多孔性颗粒能从改善药物的给药剂量重现性、提高沉积性能和降低巨嗜细胞的吞噬作用等多方面提高干粉吸入剂的性能,并介绍了它的几种制备方法。

超短波治疗阑尾周围脓肿45例

资料与方法诊断明确的阑尾周围脓肿45例。男32例,女13例,年龄5岁——74岁。发病时间2—5天,入院时右下腹部均可触及包块,局限性压痛明显,体温38.5℃以下39例,38.5—39℃6例。采用上海医疗器械厂生产CDB—1型超短波电疗机。输出功率200W,输出波长7.3m,板状电极于右下腹部前后对置,皮距0.5—2.0cm。

人参地黄桑葚片对小鼠免疫功能的影响

目的探索人参地黄桑葚片对小鼠免疫功能的影响。方法将雄性ICR小鼠随机分为对照组、人参地黄桑葚片高剂量组(2.250g/kg)、人参地黄桑葚片中剂量组(0.750g/kg)、人参地黄桑葚片低剂量组(0.375g/kg),每组15只,连续灌胃人参地黄桑葚片30天,称量各组小鼠免疫重量并计算器官指数、测定绵羊红细胞(SRBC)诱导的迟发型变态反应(DTH)、自然杀伤(NK)细胞的活性、脾淋巴细胞增殖能力、腹腔巨噬细胞对鸡红细胞(CRBC)的吞噬能力。结果人参地黄桑葚片高、中、低剂量组均能显著增加小鼠胸腺指数及脾脏指数(P<0.05);人参地黄桑葚片高、中剂量组能显著增强小鼠NK细胞活性及SRBC诱导的小鼠DTH(P<0.05);人参地黄桑葚片高剂量组能显著提高腹腔巨噬细胞对CRBC的吞噬作用及Con A诱导的脾淋巴细胞的增殖力(P<0.05)。结论人参地黄桑葚片对小鼠的免疫器官指数、NK细胞活性、腹腔巨噬细胞对CRBC的吞噬作用、Con A诱导脾淋巴细胞的增殖能力以及SRBC诱导的小鼠DTH具有的提高作用。

药熨疗法的临床应用

药熨疗法的临床应用李宗国（四川省开江县中医院，６３６２５０）藤药疗法即药熨疗法，是一种古老而又简单实用的外治疗法；它是外治疗法中的一朵奇花，它是通过温热的刺激和药物的作用，达到活血通络，消肿散瘀，行气止痛之功。现代研究证实，该法通过温热的刺激特别是药...

电针疗法能排出体内金属汞

汞对于人和动物的毒性是众所周知的,但在工业、实验室等生产和使用汞的环境仍有汞中毒发生,在医务部门由于使用汞剂和含汞制剂也时有汞中毒病例报导。汞和它的化合物经呼吸道、皮肤、溃疡伤口等不同途径进入人体,贮存在肾、

自血疗法治疗48例热型痤疮的临床效果观察

自血疗法是将患者自身的血液从静脉血管内抽出来再注入自身穴位（西医多直接进行臀部肌肉注射）的一种治疗方法。它能刺激机体的非特异性免疫反应,促进白细胞吞噬作用,达到调理人体内环境,降低机体的敏感性和增强机体免疫力,中医认为可以持久刺激穴位,调节经气,以治疗某些疾病的方法。痤疮为皮肤科常见病，好发于青春期的男女，是毛囊皮脂腺的慢性炎症。

旋转培养与发酵罐深层连续培养制造高效价葡萄球菌毒素与类毒素的实验

临床上广泛长期使用抗菌素,耐药性菌株日增,对葡萄球菌病的治疗往往效果不佳。用类毒素免疫治疗葡萄球菌病,不仅有特异性免疫治疗作用,并有脱敏作用和促进白细胞吞噬作用。

结核性渗出性胸膜炎的医院感染

对我院1988年1月～1991年5月住院的结核性渗出性胸膜炎患者76例,其中男54例,女22例,年龄15～67岁,住院时间10～81天,均使用过强的松、最大剂量40mg/d,用药时间均小于4周。共发生医院感染18例,其中上感10例,急性肠炎3例,浅部真菌感染3例,尿路感染1例,皮肤疖肿1例,医院感染病人的住院天数明显延长,平均住院天数40.78±16.85天。

消炎痛的新用途(之一)

消炎痛是一非类同醇消炎药物,由于具有抑制前列腺素的合成,从而产生抗炎作用对抗组织胺、五羟色胺、缓激肽、稳定溶酶体,抑制白细胞趋化因子,减弱细胞吞噬作用;抑制血小板的集聚,不利于血液凝固,有助于血管扩张;以及作用肾素——血管紧张素系统,改变血管张力等。消炎痛这一作用,开辟了与前列腺素有关疾病的治疗,近年消炎痛又出现一些新用途。

青黛蚤休汤治疗疱疹性咽峡炎48例疗效观察

疱疹性咽峡炎是儿童常见的一种急性传染性疾病.自1988年以来我科采用“青黛蚤休汤”治疗此病48例,疗效显著,现报告如下.一、临床资料:全部病例均系门诊患儿.治疗组48例,男31例、女17例;年龄:1岁12例、2岁31例、3～5岁5例.病程1天37例,2天11例.体温39℃以下13例,39℃以上35例,伴抽搐2例.对照组26例,男15例、女11例;年龄1岁8例、2岁16例、3～4岁2例.病程1天21例、2天5例.体温39℃以下7例、39℃以上19例.