lncRNA NEAT1促进宫颈癌发展的作用及机制研究

目的:探讨长链非编码核富含丰富的转录本1(lncRNA NEAT1)在宫颈癌中的表达,及其对宫颈癌细胞HeLa增殖、细胞周期与凋亡的影响。方法:选取2018年3月至2020年3月在四川省人民医院进行外科切除病灶的宫颈癌患者50例作为研究对象,取同期50例因子宫平滑肌瘤(宫颈无任何病变)等良性疾病而切除子宫的正常宫颈组织作为对照,qRT-PCR检测lncRNA NEAT1在肿瘤组织与正常组织中的表达。分析lncRNA NEAT1的表达与宫颈癌患者临床病理参数的关系。细胞实验分为3组:正常组:(不加任何药物,常规培养)、对照组:(细胞转染150 nmol/L的lncRNA NEAT1-siRNA-NC后,常规培养);实验组:(细胞转染150 nmol/L的lncRNA NEAT1-siRNA后,常规培养)。CCK-8法检测各组细胞的增殖;DNA ladder分析各组细胞DNA的损伤情况;流式细胞术检测各组细胞的细胞周期和凋亡率;裸鼠皮下种植瘤模型检测各组细胞的体内生长能力;Western blot检测各组细胞中磷酸化组蛋白(γ-H2AX)、毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白激酶(ATM)蛋白表达水平。结果:与正常组织相比,lncRNA NEAT1在肿瘤组织中的表达明显升高。lncRNA NEAT1的相对表达与宫颈癌患者的肿瘤大小、组织学分级相关(均P<0.05);与正常组相比,实验组细胞增殖能力明显下降,DNA出现明显的凋亡“阶梯图谱”,处于G1期细胞的比例明显下降,处于S期细胞的比例明显升高,形成S期阻滞,细胞凋亡率、细胞中γ-H2AX、ATM蛋白的表达明显升高,差异均具有统计意义(均P<0.05)。结论:在宫颈癌组织中lncRNA NEAT1的表达明显升高,沉默其表达后,宫颈癌细胞的HeLa细胞的DNA损伤明显,细胞周期被阻滞于S期,体外增殖与体内生长明显受限,凋亡率明显升高。