汉黄芩素及其抑制物细胞周期蛋白依赖性激酶1对人脑胶质瘤干细胞作用机制的研究

目的研究汉黄芩素及其抑制剂细胞周期蛋白依赖性激酶1（CDKl）对人脑胶质瘤干细胞（BGSCs）的作用机制。方法使用不同浓度的汉黄芩素（1、10、1000μmol／L）对BGSCs进行浸染，并设空白对照组。采用四甲基偶氮唑盐（M1fr）比色法检测汉黄芩素对BGSCs增殖的影响；采用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）检测CDKlmRNA表达；同时检测脂质过氧化产物还原型谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量的变化。结果汉黄芩素对人BGSCs增殖具有明显的抑制作用，各剂量汉黄芩素组BGSCs增殖[吸光度（A）值]较空白对照组明显降低，随给药浓度增加，细胞生长抑制率（IR）较空白对照组逐渐增加，以汉黄芩素100tanol／L组作用更显著[A值：0．18±0．02比0．67±0．03，IR：（64．43±0．04）％比0，均P〈0．05]；各剂量汉黄芩素组CDKlmRNA表达（A值）均较空白对照组有不同程度的提高，在10tanol／L、100~mol／L汉黄芩素组出现显著提高（0．378±0．061、0．733±0．081比0．125±0．019，均P〈0．05）；脂质过氧化产物GSH（mg／g）、SOD（U／g）和MDA（nmol／g）在各个剂量汉黄芩素组与空白对照组比较差异均无统计学意义（GSH：474．51±38.63、479．67±15．89、481．17±36．41比487．00±28．53．SOD：26．58±2．26、26．75±1．96、27．08±1．52比27．31±1．89，MDA：4．92±0．45、4．72±0．73、4．61±0．47比4．45±0．26，均P〉0．05）。结论CDKl可能参与汉黄芩素抑制人BGSCs生长的作用机制，该作用与脂质过氧化产物无关。

细胞周期蛋白依赖性激酶1在人结直肠癌组织中的表达意义

目的验证细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent kinases 1,CDK1)在人结直肠癌组织中的表达。方法以首都医科大学附属北京天坛医院2018年10月至2019年9月诊治的30例病理证实为结直肠癌患者的结直肠癌组织及癌旁组织标本为研究对象,检测CDK1在结肠癌及癌旁正常黏膜组织中的相对表达量(ΔCt)。结果CDK1在结直肠癌组织中均呈高表达,对比癌旁组织差异有显著性(P<0.05),CDK1在结直肠癌组织中比癌旁组织中表达增高4.69倍。结论CDK1属于调控细胞周期的基因,在结直肠癌肿瘤组织中高表达。

细胞周期蛋白依赖性激酶16(CDK16)与细胞增殖指标Ki67在食管鳞癌中的表达及意义

目的探讨细胞周期蛋白依赖性激酶16(CDK16)及细胞增殖指标Ki67在人食管鳞癌组织中的表达及其生物学意义,并探讨二者在食管鳞癌中表达的相关性。方法采用免疫组织化学方法检测CDK16、Ki67蛋白在75例食管鳞癌/癌旁组织中的表达,使用数学统计分析软件分析这两种蛋白的表达与食管鳞癌临床病理特征之间的关系。结果 CDK16在食管鳞癌组织中的表达显著高于癌旁组织中的表达(P<0.05),CDK16的表达与食管鳞癌的分化程度、淋巴结转移及TNM临床分期密切相关(P<0.05),而与食管鳞癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤最大径及肿瘤的病理形态均无关(P>0.05)。另外,在食管鳞癌组织中,Ki67的表达与食管鳞癌的分化程度、淋巴结转移及TNM临床分期之间存在显著的相关性(P<0.05),且相关性分析显示,食管鳞癌中CDK16与Ki67二者的表达呈显著正相关(χ~2=24.36,P<0.001, Pearson列联系数=0.518)。结论 CDK16蛋白和Ki67蛋白在食管鳞癌中的表达明显升高,联合检测CDK16与Ki67的表达,可作为判断食管鳞癌恶性程度及评估患者预后水平的重要参考指标。

细胞周期蛋白依赖性激酶12在肿瘤中作用的研究进展

细胞周期蛋白依赖性激酶12(CDK12)属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族,其主要功能是调节转录和转录后过程,从而调控多种细胞的功能。早期研究认为CDK12是一种转录型CDK,它与cyclin K形成复合物,通过磷酸化RNA聚合酶Ⅱ介导基因转录。最近的研究表明,CDK12还参与DNA复制,影响发育。CDK12被证明能特异性地上调DNA损伤、应激和热激反应中相关基因的表达,目前已在食管癌、胃癌、乳腺癌、子宫内膜癌、卵巢癌、膀胱癌、结直肠癌和胰腺癌中被检测到CDK12基因发生改变,占被检测病例的5%～15%。越来越多的研究显示,检测CDK12能够预测肿瘤的治疗反应,包括聚ADP核糖聚合酶(PARP)抑制和PD-1抑制治疗。CDK12抑制是抑制肿瘤生长的有效策略,特定的遗传或细胞背景能够使CDK12抑制的敏感性增强,包括PARP和CHK1抑制、MYC依赖和EWS/FLI重排。多种不同化学结构和作用范围的CDK12抑制剂已经被用于临床前研究,CDK12有望成为肿瘤治疗的新靶点。

细胞周期蛋白依赖性激酶12、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探究细胞周期蛋白依赖性激酶12(CDK12)、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)在胃癌组织中的表达及临床意义。方法收集76例胃癌患者的胃癌组织标本及相应癌旁正常胃黏膜组织标本(距离肿瘤组织﹥5 cm)。采用免疫组化法检测CDK12蛋白、PARP1蛋白在胃癌组织及癌旁正常胃黏膜组织中的表达。利用Ualcan和GEPIA数据库对胃癌组织及癌旁正常胃黏膜组织中CDK12、PARP1 mRNA表达差异进行比较,并分析胃癌组织中CDK12、PARP1 mRNA表达相关性;采用Cox回归分析对胃癌患者预后影响因素进行分析。结果Ualcan和GEPIA数据库显示,胃癌组织中CDK12、PARP1 mRNA表达水平均明显高于癌旁正常胃黏膜组织(P﹤0.05)。CDK12 mRNA和PARP1 mRNA表达呈正相关(P﹤0.05)。胃癌组织中CDK12、PARP1阳性表达率均明显高于癌旁正常胃黏膜组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同TNM分期、分化程度、淋巴结转移情况的胃癌患者的胃癌组织中CDK12和PARP1蛋白表达情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。CDK12、PARP1蛋白阳性表达组胃癌患者5年生存率均明显低于阴性表达组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。CDK12蛋白阳性表达、PARP1蛋白阳性表达、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、分化程度低、淋巴结转移是影响胃癌患者预后的独立危险因素(P﹤0.01)。结论胃癌组织中CDK12、PARP1蛋白呈高表达,二者表达水平与TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关,可能作为提示胃癌患者预后不良的潜在生物标志物。

细胞周期蛋白依赖性激酶12:肿瘤治疗的潜在靶点

细胞周期蛋白依赖性激酶12(cyclin-dependent kinase 12,CDK12)参与多种生物学过程,包括基因转录、RNA剪接、mRNA翻译、内含子多聚腺苷酸化、表观遗传学修饰和DNA损伤修复等。在不同类型肿瘤中,CDK12起着原癌基因或肿瘤抑制因子的作用。因此,CDK12被认为是肿瘤治疗的潜在靶点。近期还有研究显示,CDK12在肿瘤的免疫调节中发挥着重要作用。本文简要介绍CDK12的生物学功能及其在肿瘤治疗中的研究进展。

存活素和细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子2B在骨髓增生异常综合征诊断及患者预后评估中的临床价值研究

目的:探讨存活素(Survivin)和细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子2B(P15INK4B)在骨髓增生异常综合征(MDS)诊断及患者预后评估中的临床价值。方法:选取MDS患者150例为观察组,另选取同期体检健康者150例为对照组,比较Survivin、P15INK4B阳性表达及mRNA相对表达水平。对观察组患者进行为期1年的预后随访,比较不同预后患者Survivin、P15INK4B mRNA相对表达水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC)曲线分析Survivin、P15INK4B对MDS的诊断价值,以及对MDS患者不良预后的评估价值。结果:观察组Survivin阳性表达率及mRNA表达水平高于对照组,P15INK4B阳性表达率及mRNA表达水平低于对照组(均P<0.05)。150例MDS患者中50例病死,1年生存率为66.67%(100/150),病死组Survivin mRNA表达水平高于存活组,P15INK4B mRNA表达水平低于存活组(均P<0.05)。Survivin、P15INK4B对MDS均有较高诊断价值,两者联合检测的诊断价值更高(均P<0.05)。Survivin、P15INK4B对MDS患者不良预后均有较高评估价值,两者联合检测的评估价值更高(均P<0.05)。结论:MDS患者Survivin高表达,且与患者预后呈正相关;P15INK4B低表达,且与患者预后呈负相关;两者均可用于MDS的诊断及不良预后的评估,联合检测有更高的价值。

细胞周期蛋白依赖性激酶4在胶质瘤中的表达及临床意义

目的探讨细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)在胶质瘤中的表达及临床意义。方法对基因型-组织表达(GTEx)、癌症基因组图谱(TCGA)和中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库中的资料进行挖掘和分析,提取胶质瘤中CDK4的RNA转录组数据。比较胶质瘤组织和正常脑组织中CDK4 mRNA表达水平,分析CDK4表达水平与胶质瘤分级的关系。根据TCGA和CGGA数据库中CDK4表达水平中位数,将患者分为CDK4高表达组与CDK4低表达组,比较两组患者的生存情况。采用Cox回归模型分析胶质瘤患者预后的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析CDK4对胶质瘤患者预后的预测价值,构建列线图,并进行验证。根据TCGA数据库中CDK4表达水平中位数,将患者分为CDK4高表达组与CDK4低表达组,对两组患者进行差异基因分析,对差异基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。结果胶质瘤组织中CDK4 mRNA表达水平明显高于正常脑组织(P﹤0.01)。CDK4表达水平与胶质瘤分级呈正相关。CDK4高表达组胶质瘤患者的总生存期短于CDK4低表达组。CDK4表达水平是胶质瘤患者预后的独立影响因素(P﹤0.01),对胶质瘤患者预后具有较好的预测效能。GO富集分析显示,差异基因与有丝分裂、离子通道、跨膜转运等有关,KEGG富集分析显示,差异基因主要富集于神经活性配体-受体相互作用、钙信号通路、环腺苷酸(cAMP)信号通路、细胞周期通路等。结论CDK4基因在胶质瘤的诊断和临床治疗中具有重要意义。

细胞周期蛋白及其依赖性激酶基因多态性与肝癌发生发展的相关性研究

目的:细胞周期蛋白(Cyclin)及其依赖性激酶(CDK)在调节细胞周期进展中起重要作用,并与多种癌症发生发展相关。本研究探讨了细胞周期蛋白及激酶家族基因多态性与肝脏炎癌转化风险之间的关联性。方法:运用SnapShot技术对本中心173例肝癌和171例肝炎患者血清中CCNA2、CCNB1、CCND1、CCND3、CCNE1、CDK1、CDK2及CDK4基因的14个位点单核苷酸多态性进行基因分型,并分析其分型与肝炎进展、肝癌发生发展的相关性。结果:一般临床资料表明,与肝癌患者相比,肝炎患者的ALT、TB和DB水平更高,而肝癌患者较肝炎患者血清白蛋白水平升高及发病年龄更高,通过SNP(SingleNucleotidePolymorphism)分型发现CyclinA2(rs769238)和CyclinD3(rs3218108)基因型与肝脏炎癌转化及发生发展呈一定相关性。结论:细胞周期蛋白及其依赖性激酶多态性与患者肝炎肝癌进展呈一定相关性,CyclinA2(rs769238)、CyclinD3(rs3218108)基因型分别与肝癌发生及肝功能损害有关。

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3对鸡前脂肪细胞分化的抑制作用

【目的】解析细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3(cyclin-dependent kinase inhibitor 3,CDKN3)在鸡前脂肪细胞分化中的作用,为阐明脂肪沉积的分子机制奠定理论基础。【方法】构建荧光表达载体pECFPCDKN3,转染至鸡永生化前脂肪细胞系(immortalized chicken preadipocyte cell line,ICP1),观察CDKN3蛋白的亚细胞定位;采用油酸钠诱导ICP1分化,qRT-PCR检测分化过程中CDKN3 mRNA表达水平;将pCMVHA-CDKN3和pCMV-HA分别转染到ICP1中,转染24 h后进行诱导分化,通过油红O染色检测脂肪细胞分化情况,并利用qRT-PCR检测过表达CDKN3后脂肪分化相关基因的mRNA表达水平。【结果】转染了pECFP-CDKN3的细胞主要在细胞核中呈青色荧光信号,提示鸡CDKN3定位于细胞核;在诱导ICP1成脂分化的过程中,CDKN3 mRNA表达量逐渐升高;油红O染色结果显示:过表达CDKN3细胞内脂滴聚集减少,且脂肪分化相关基因C/EBPα、PPARγ、FABP4和FAS的表达水平均呈下降趋势,其中FAS显著下降(P<0.05),PPARγ极显著下降(P<0.01)。【结论】CDKN3是核蛋白,可抑制鸡前脂肪细胞分化。

细胞周期蛋白依赖性激酶4/6抑制剂治疗激素受体阳性、人表皮生长因子受体2阴性的晚期乳腺癌的研究进展

激素受体阳性(hormone receptor positive,HR+)、人表皮生长因子受体2阴性(human epidermal growth factor receptor 2 negative,HER2−)的乳腺癌是乳腺癌中最常见的分子亚型,预后情况常取决于患者对内分泌治疗的敏感性。HR+、HER2−晚期乳腺癌多已对内分泌治疗药物耐药,而此往往会致患者生存期缩短、生命质量下降等不良结局,故临床上亟需有新的治疗策略/药物。近年来,一些新型口服靶向药物细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)4/6抑制剂陆续获准上市,它们因能为HR^(+)、HER2^(−)晚期乳腺癌患者提供显著的生存益处且安全性良好,成为该类患者的重要有效治疗选择之一。本文就CDK4/6抑制剂的作用机制、有效性、安全性和药物经济学研究进展作一概要介绍和对比分析。

周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物1A相互作用锌指蛋白1在临床相关疾病中的研究进展

周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物1A相互作用锌指蛋白1(Ciz1)作为细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p21^(Cip1/Waf1)的互相作用蛋白,不仅参与哺乳动物DNA复制,还参与细胞周期、细胞凋亡等生物学活动的调节。Ciz1在常见肿瘤(如肺癌、尤因肉瘤、结肠癌、胆囊癌、前列腺癌、乳腺癌)中过表达,表明Ciz1可能是肿瘤生长的驱动因素。Ciz1还与阿尔茨海默病、肌张力障碍等疾病发生相关。深入研究Ciz1与临床相关疾病的关系,可能为多种疾病的治疗提供新靶点。

循环细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1C mRNA对女性急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入术后心功能的预测价值

目的分析细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1C(CDKN1C)mRNA对女性急性心肌梗死(AMI)患者行经皮冠状动脉介入(PCI)术后心功能的预测价值。方法选取2018年1月至2020年1月遂宁市中心医院急诊PCI的AMI患者198例,术后1 d检测N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)和CDKN1C mRNA水平,术后4个月通过超声心动图检测心功能,根据左心室射血分数(LVEF)分为三组:A组(LVEF≥50%)112例;B组(40%≤LVEF<50%)54例;C组(LVEF<40%)32例。通过ROC曲线分析不同性别患者CDKN1C mRNA与NT-proBNP水平对心功能的预测价值。结果A组CDKN1C mRNA水平高于B组和C组(F=6.831,P<0.05),A组NT-proBNP水平低于B组和C组(F=3.421,P<0.05)。A组女性患者CDKN1C mRNA水平高于B组和C组女性患者(F=6.717,P<0.05)。CDKN1C mRNA的AUC为0.805(95%CI=0.732~0.864),预测价值优于NT-proBNP(Z=2.676,P<0.05),女性CDKN1C mRNA的AUC为0.887(95%CI=0.804~0.923)预测价值优于男性患者(Z=3.004,P<0.05)。结论术后1 d循环CDKN1C mRNA水平有助于预测AMI患者PCI后心功能情况,尤其适用于女性,CDKN1C mRNA可以作为预测女性AMI患者PCI后心功能的一个新的标志物。

细胞周期蛋白依赖性激酶11在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的检测细胞周期蛋白依赖性激酶11（CDK11）在乳腺癌组织中的表达，探讨CDK11的表达在乳腺癌病情评估、预后判断中的临床意义。方法Westernblot方法检测BT-474、MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-468乳腺癌细胞株及HBL-100永生化的正常乳腺细胞中CDK11的表达，应用细胞免疫荧光技术检测MCF-7和MDA—MB-468细胞中CDK11的表达及亚细胞定位。应用Westernblot方法检测18例乳腺癌组织标本及对应的癌旁组织标本中CDK11的表达。应用商品化的乳腺癌组织芯片，免疫组织化学技术检测组织芯片中每个组织中CDK11的表达，并分析CDK11的表达水平与肿瘤病理分级、TNM分期等临床病理特征及患者生存时间的关系，探讨CDK11的临床意义。结果CDK11在BT-474、MCF-7、MDA—MB-231和MDA．MB-468细胞中的相对表达强度分别为0．95±0．03、0．83±0．02、0．39±0．07和0．91±0．03，均明显高于永生化的正常乳腺细胞的0．07±0．01（P〈0．01）。细胞免疫荧光染色结果显示CDK11在MCF-7和MDA—MB-468细胞中的表达主要定位于细胞核，在细胞质中有少量表达。组织芯片检测结果显示，CDK11在乳腺癌组织中的表达水平显著高于对应的正常乳腺组织（3．56分比2．56分，P〈0．01），病理学分级Ⅲ级乳腺癌组织中CDK11的表达水平高于Ⅱ级乳腺癌组织（3．50分比2．59分，P〈0．05）。CDK11高表达（≥4分）的乳腺癌患者的生存时间小于CDK11低表达（≤3分）的患者（P〉0．05）。此外，TNMⅢ期乳腺癌组织中CDK11的表达水平高于TNM11期乳腺癌组织（3．25分比2．92分，P〉0．05），死亡患者乳腺癌组织中CDK11的表达水平高于存活患者（3．57分比2．97分，P〉0．05），但差异无统计学意义。结论CDK11在乳腺癌组织中高表达，并与乳腺癌患者的临床病理特征及预后相关。

细胞周期蛋白依赖性激酶11在乳腺癌细胞增殖中的作用及其机制

且的探讨细胞周期蛋白依赖性激酶11（CDK11）在乳腺癌细胞增殖中的作用与机制。方法将不同浓度（10、20、40nmol／L）的CDK11小干扰RNA（siRNA）转染乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-468沉默CDK11基因，并以转染非特异性siRNA为阴性对照。72h后，应用噻唑蓝（MTF）方法检测细胞的增殖活性改变，分别应用反转录一聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot方法检测转染细胞内CDK11mRNA和蛋白的变化，应用细胞免疫荧光技术观察细胞增殖及CDK11蛋白表达的变化。流式细胞术检测CDK11沉默后细胞凋亡与细胞周期的变化。结果MTF结果显示，转染10、20、40nmol／L的CDK11siRNA后，MCF-7细胞的490nm处吸光度（A490）值由1．47±0．06分别降至1．12±0．05、0．87±0．09、0．52±0．08（P〈0．05），MDA—MB-468细胞的A490值由1．81±0．10分别下降至0．88±0．06、0．62±0．04、0．34±0．03（P〈0．05），伴随细胞内CDK11mRNA和蛋白表达浓度依赖性的降低。细胞免疫荧光结果证实CDK11蛋白主亚定位于细胞核，转染40nmol／L的CDK11siRNA后细胞的增殖能力显著下降，伴随细胞内CDK11蛋白表达水平的降低。流式细胞术结果表明，20nmol／L的CDK11siRNA沉默CDK11表达后，MCF-7细胞的凋亡率由（1．6±0．3）％增加至（11．5±0．6）％（P〈0．01），MDA．MB-468细胞的凋亡率南（2．8±0．4）％增加至（16．1±0．3）％（P〈0．01），MCF-7细胞G0／G，期细胞数由（46．9±4．4）％增加至（68．1±4．3）％（P〈0．01），MDA—MB-468细胞G0／Gl期细胞数由（36．9±13．9）％增加至（70．5±6．6）％（P〈0．01）。结论CDK11在MCF-7和MDA—MB-468细胞的增殖中具有重作用，其可能通过加速细胞周期进程，抑制细胞凋亡促进细胞增殖。

脾相关酪氨酸激酶、蛋白激酶B、真核翻译起始因子4E、细胞周期蛋白依赖性激酶4在胃癌及癌前病变中的表达及相关性

目的探讨脾相关酪氨酸激酶(SYK)、蛋白激酶B(AKT)、真核翻译起始因子4E(EIF4E)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)在胃癌及癌前病变中的表达及相关性。方法收集90例患者的胃黏膜组织进行蛋白质印迹实验,其中癌旁正常组织30例,萎缩性胃炎组织30例,胃癌组织30例。另收集胃癌组织、萎缩性胃炎组织、癌旁正常组织存档蜡块各30例进行免疫组化实验。分别采用蛋白质印迹法和免疫组化法检测各组织中SYK、AKT、EIF4E、CDK4表达情况。分析萎缩性胃炎组织与胃癌组织中SYK、AKT、EIF4E、CDK4的相关性。结果癌旁正常组织中SYK蛋白表达水平及阳性表达率均高于萎缩性胃炎组织,萎缩性胃炎组织中SYK蛋白表达水平及阳性表达率均高于胃癌组织;癌旁正常组织中AKT、EIF4E、CDK4蛋白表达水平及阳性表达率均低于萎缩性胃炎组织,萎缩性胃炎组织中AKT、EIF4E、CDK4蛋白表达水平及阳性表达率均低于胃癌组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,胃癌组织和萎缩性胃炎组织中SYK与AKT、EIF4E、CDK4表达均呈负相关(P<0.05),AKT、EIF4E、CDK4三者表达均呈正相关(P<0.01)。结论SYK、AKT、EIF4E、CDK4可能通过相互作用共同参与了胃癌的发生,其可能的机制与磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/AKT信号通路有关。SYK、AKT、EIF4E、CDK4有希望成为胃癌诊断和防治的靶标,检测SYK、AKT、EIF4E、CDK4对胃癌诊断、早期治疗及预防具有重要价值。

细胞周期蛋白依赖性激酶10在瘢痕疙瘩中的表达及其临床意义

目的研究细胞周期蛋白依赖性激酶10在瘢痕疙瘩中的异常表达及其在瘢痕疙瘩发生机制中的作用。方法应用反转录聚合酶链式反应（1it．PCR）及Western Blot检测细胞周期蛋白依赖性激酶10mRNA及细胞周期蛋白依赖陛激酶10蛋白在人正常皮肤成纤维细胞及人瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达；将外源重组性真核质粒pCMV6-细胞周期蛋白依赖性激酶10转染到人瘢痕疙瘩成纤维细胞内为实验组；转染空质粒细胞及未处理细胞为对照组。用MTF法检测瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖状况。结果与正常皮肤成纤维细胞相比，细胞周期蛋白依赖陛激酶10mRNA和细胞周期蛋白依赖f生激酶10蛋白在瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达显著下调，差异具有统计学意义（P〈0．01）；与空pCMV6组和未转染组相比，pCMV6-细胞周期蛋白依赖性激酶10组细胞生长明显受到抑制，差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论CDKl0在瘢痕疙瘩中呈下调表达，以CDKl0为靶点的基因治疗有潜在的临床应用前景。

维甲酸对人胃癌细胞HGC-27增殖、细胞周期及细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白(P16、P21、P27)表达的影响

目的 观察维甲酸 (RA)作用人胃癌细胞系GHC - 2 7后 ,细胞增殖、细胞周期及细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白 (CKIs) (P16、P2 1、P2 7)表达的变化 ,探讨RA抑制HGC 2 7增殖 ,促进其分化的作用机制。方法 不同浓度RA作用HGC 2 7细胞后 ,MTT法检测细胞增殖情况 ,流式细胞仪检测细胞周期 ,Westermblot、Northernblot分别检测CKIs(P16、P2 1、P2 7)蛋白、mRNA水平。结果 在一定浓度范围之内 ,RA能抑制HGC 2 7细胞增殖 ,细胞周期发生G1→S期阻滞 ,并上调P2 1、P2 7的蛋白、mRNA水平 ,但对P16的蛋白、mRNA水平没有影响。结论 RA能通过上调CKIs尤其是P2 1、P2 7的表达而抑制HGC 2 7增殖 ,促进其分化。

细胞周期蛋白依赖性激酶调节亚基1和p27kip1在老年乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义

乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤〔1〕,欧美国家中的老年患者(60岁以上)约占49%〔2〕。细胞在基因水平上失去对本身生长的正常调控,生长周期失调紊乱,可发生肿瘤,p27 kip1作为抑癌基因,负性调控细胞周期,表达水平与细胞增殖程度紧密关联。CKS1正性调节细胞周期,是一种癌基因,能够促进肿瘤发生,在肝癌、乳腺癌、胃癌等癌组织中表达增高〔3,4〕。

牡荆素调节环磷酸腺苷激活的交换蛋白1/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ信号对大鼠心肌梗死后心肌肥大与纤维化的作用

目的探讨牡荆素调控环磷酸腺苷激活的交换蛋白1(Epac1)/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路抑制大鼠心肌梗死(MI)后心肌细胞肥大与纤维化的作用。方法24只SD大鼠随机分为:假手术组、MI组、牡荆素组。大鼠进行心脏左前降支结扎建立MI模型,假手术组只穿线不结扎。检测大鼠心功能变化;苏木精-伊红(HE)染色观察心脏病理学变化,天狼星红染色观察心脏纤维化,电镜观察心肌线粒体损伤情况;Western Blot检测Epac1、CaMKⅡ等蛋白变化。结果(1)大鼠MI 4周后,与假手术组比较MI组大鼠左心室短轴缩短率(LVFS)和左心室射血分数(LVEF)均降低(P<0.01),左心室收缩末期内径(LVIDs)、左心室舒张末期内径(LVIDd)和舒张末期左心室后壁厚度(LVPWd)、收缩末期左心室后壁厚度(LVPWs)增加(P<0.01),牡荆素组大鼠心脏LVIDs、LVIDd、LVPWs和LVPWd较MI组降低,LVFS和LVEF均升高,差异有统计学意义(P<0.05);(2)牡荆素可降低大鼠心脏重量指数(P<0.01),并减小MI组大鼠心肌细胞横截面积,同时减轻大鼠左心室壁心肌纤维化程度(P<0.01),牡荆素组大鼠心肌胞浆内线粒体肿胀较MI组减轻,线粒体形态较完整,空泡形成较少;(3)Western Blot结果显示牡荆素抑制大鼠MI后Epac1激活(P<0.01),抑制其下游CaMKⅡ激活与细胞外调节激酶的磷酸化(P<0.01),同时可抑制B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)上调(P<0.05),上调Bcl-2(P<0.01),抑制凋亡蛋白裂解半胱天冬酶3(Cleaved-Caspase 3)的活化(P<0.05)。结论牡荆素可通过抑制Epac1/CaMKⅡ通路,改善大鼠MI后心脏功能,抑制心肌肥大和纤维化。