细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27kip1在翼状胬肉中的表达

目的 探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p2 7kip1在翼状胬肉中的表达及其在翼状胬肉发病机制中的作用。方法 采用免疫组化法对手术切除的翼状胬肉标本和正常结膜组织进行增殖性核抗原及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 p2 7kip1蛋白检测。结果 正常结膜组织中和翼状胬肉中增殖性核杭原表达分别为 0 .2 6 8± 0 .0 2 1和 0 .4 75± 0 0 4 6 (P<0 .0 5 ) ,p2 7kip1分别为 0 .4 2 3± 0 .0 31和 0 .2 4 2± 0 0 17(P <0 .0 5 )。结论 结膜中细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p2 7kip1的低表达可能与翼状胬肉的发生、发展有关。

细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂——p27kip1研究进展

p2 7kip1是一个广谱的周期蛋白依赖激酶抑制剂 ,在细胞周期的调控中起重要的作用 ,本文综述 p2 7kip1的发现 ,p2 7kip1的功能、作用机制以及 p2

细胞周期依赖性激酶抑制剂P27、P21在人角膜上皮的表达研究

目的 探讨细胞周期依赖性激酶抑制剂 (CKI) P2 7、P2 1在角膜上皮细胞的表达情况。方法 应用 SP免疫组化法 ,检测 P2 7、P2 1等细胞周期依赖性激酶抑制剂和增殖细胞核抗原 (PCNA)在角膜上皮不同部位的表达情况。结果 角膜缘上皮区 PCNA呈阳性表达 ,主要位于基底细胞层 ,中央区角膜上皮内未见阳性表达 ,差异有显著意义 (P <0 .0 1) ;P2 7、P2 1在中央区角膜上皮内呈阳性表达 ,角膜缘上皮内未见阳性表达 ,差异均有显著意义(P <0 .0 1)。结论 细胞周期依赖性激酶抑制剂 P2 7、P2 1和 PCAN在角膜上皮不同部位的表达差异 ,提示在角膜缘上皮基底层内存在着一群有较高的增殖能力、处于 G1 期的细胞群 。

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B反义RNA1靶向微小RNA-339-5p对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B反义RNA1(lncRNA CDKN2B-AS1)对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及分子机制。方法 收集南阳市中心医院2017年1月2019年1月收治的37例乳腺癌患者的癌组织及癌旁组织。将MDA-MB-453细胞分为CDKN2B-AS1阴性对照(si-NC组)、CDKN2B-AS1小分子干扰RNA(si-CDKN2B-AS1组)、CDKN2B-AS1小分子干扰RNA+miR-339-5p阴性对照(si-CDKN2B-AS1+anti-miR-NC组)以及CDKN2B-AS1小分子干扰RNA+miR-339-5p特异性寡核苷酸抑制剂(si-CDKN2B-AS1+anti-miR-339-5p组)。采用RT-qPCR法对CDKN2B-AS1及微小RNA-339-5p(miR-339-5p)表达水平进行检测;细胞周期及增殖活性检测分别采用流式细胞术及MTT实验;采用Transwell小室技术对细胞迁移和侵袭进行检测;采用Western blotting法对增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki67)、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(P21)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达进行检测;荧光素酶报告实验检测CDKN2BAS1对miR-339-5p的靶向调控。结果 在乳腺癌组织中CDKN2B-AS1表达水平上调[(2.23±0.08)比(1.00±0.06)](P<0.05)。抑制CDKN2B-AS1可增加G0期细胞比例[(43.29±3.76)%比(30.25±3.01)%]、P21表达水平升高,S期细胞比例[(21.91±3.10)%比(34.19±3.32)%]、细胞存活率[(53.02±5.38)%比(100.00±7.12)%]、迁移、侵袭数以及Ki67、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05)。CDKN2B-AS1靶向调控miR-339-5p,抑制miR-339-5p逆转抑制CDKN2B-AS1对MDA-MB-453细胞增殖、迁移、侵袭的作用。结论 抑制CDKN2B-AS可抑制乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖、迁移、侵袭,且靶向调控miR-339-5p表达。

高糖培养的系膜细胞肥大与周期素激酶抑制剂p27的关系

目的 研究周期素激酶抑制剂ｐ２７在高糖培养系膜细胞（ＭＣ）肥大中的作用。方法 蛋白印迹（ｗｅｓｔｅｒｎ杂交）方法测定ＭＣ裂解液ｐ２７ 蛋白水平，［３Ｈ］胸腺嘧啶核苷（３Ｈ］ＴｄＲ）及［３Ｈ］亮氨酸（［３Ｈ］ｌｅｕ）掺入方法测定ＭＣ细胞的肥大情况，观察ｐ２７反义寡核苷酸（ＯＤＮ）转染对高糖培养ＭＣ肥大的影响。结果 高糖（４５０ｍｇ／ｄｌ）无血清培养的ＭＣ同正常糖（１００ ｍｇ／ｄｌ）无血清培养的 ＭＣ相比，ｐ２７水平增高，［３Ｈ］ ｌｅｕ掺入增加，［３Ｈ］ ＴｄＲ掺入减少；ｐ２７反义 ＯＤＮ转染后高糖无血清培养 ＭＣ［３Ｈ］ ｌｅｎ掺入减少，［３Ｈ］ ＴｄＲ掺入增加；用甘露醇提高正常糖培养液渗透压并不增加 ＭＣ中Ｐ２７水平。结论 高糖培养的ＭＣ中ｐ２７水平明显增高，增高的ｐ２７在高糖培养ＭＣ细胞肥大中起重要作用。

氨基胍通过降低周期素激酶抑制剂P27水平减轻高糖培养系膜细胞肥大程度

目的 :研究氨基胍 (AG)减轻高糖培养系膜细胞 (MC)肥大程度与周期素激酶抑制剂 P2 7的关系。方法 :Western印迹方法测定 MC裂解液 P2 7水平 ,[3H]胸腺嘧啶核苷 ([3H]Td R)及 [3H]亮氨酸 ([3H ]L eu)掺入方法测定 MC肥大情况。 结果 :同正常糖 (10 0 mg/ dl)培养相比 ,高糖 (45 0 mg/ dl)培养 MC中 P2 7水平增高 (P<0 .0 1) ,MC肥大 ;[3H ]L eu掺入增加及[3H]Td R掺入降低 (P<0 .0 1) ;AG(0 .2 5 mm ol/ L )降低高糖培养 MC中 P2 7水平 [(2 .5± 0 .6 ) vs (4.0± 0 .8) ,P<0 .0 5 ],使MC肥大程度减轻 ;[3H]leu掺入降低 ,[(342 6± 5 32 ) vs (46 5 2± 30 9) cpm/孔 ,P<0 .0 1],[3H ]Td R掺入增加 [(12 33± 6 9)vs (5 4 3± 2 7) cpm/孔 ,P<0 .0 1]。 结论 :AG可能通过降低高糖培养 MC中 P2 7水平减轻

细胞周期素依赖激酶抑制剂研究进展

过去十年中,有关细胞增殖周期的研究进展十分迅速.细胞增殖周期受细胞周期素依赖激酶(cyclin depend kinase,CDKs)调节.CDKs与细胞周期素结合被活化,其中cyclin作为调节亚基、CDKs作为催化亚基、cyclin-CDKs复合物对细胞周期具有正调节的作用,促进细胞分裂.cyclin-CDKs复合物的抑制因子:细胞周期素依赖激酶抑制剂(cyclindepend kinase inhibitor,CKIs,CDKIs)对细胞周期具有负调节的作用.CKIs通过与cyclin-CDKs1复合物再形成稳定的复合物,抑制CDKs催化亚单位的活性而发挥负调节作用,从而阻止细胞分裂.

周期素激酶抑制剂P27与心血管疾病

P2 7蛋白是一种细胞周期激酶抑制剂 ,通过抑制cyclin CDK复合物活性使细胞停滞于G1期。P2 7蛋白能显著抑制血管平滑肌细胞等增殖 。

系膜增生性肾炎大鼠肾小球周期素激酶抑制剂P27的变化及意义

目的 :探讨周期素激酶抑制剂 P2 7在系膜增生性肾炎模型 Thy1肾炎大鼠系膜细胞 (MC)增生中的作用。 方法 :利用抗胸腺细胞抗体制成 Thy1肾炎模型 ,Western印迹法测定肾小球裂解液 P2 7蛋白水平 ,RT- PCR方法测定肾小球 P2 7m RNA,EL ISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM)蛋白 (纤维连接蛋白及 型胶原 )。 结果 :Thy1肾炎第 1天 P2 7水平即有明显下降 ,第 3天 (MC增生最为明显 ) P2 7水平最低 ,第 5天 (MC增生开始消散 ) P2 7水平有所回升 ,提示 P2 7水平与MC增生程度有关 ;Thy1肾炎第 3天肾小球 P2 7m RNA与正常对照组比较无明显差别 ;而 Thy1肾炎大鼠肾小球纤维连接蛋白和 型胶原均升高 (P<0 .0 1) ,在第 3天达峰值 ,第 5天略有回降 ,但仍显著高于正常对照组 (P<0 .0 1)。结论 :P2 7水平下降可能在 Thy1肾炎 MC增生中起重要作用。

微小RNA-K1-5p调控G1/S期相关基因的表达影响内皮细胞周期

目的探讨卡波西肉瘤(Kaposi's sarcoma,KS)相关疱疹病毒(KSHV)编码的微小RNAs(miR),如miR-K1-5p,对KS细胞周期的调控作用及其机制。方法该研究进行于2020年1—12月,人脐静脉内皮细胞购自美国ScienCell。生物信息学软件预测miR-K1-5p的靶基因。双萤光素酶试验验证miR-K1-5p的靶基因[细胞周期素依赖性激酶抑制剂4(CDKN4)]。将miR-K1-5p模拟物转染后,行蛋白质印迹法(Western blotting)和q-PCR检测,分析G1/S期相关基因CDKN4、细胞周期蛋白A/细胞周期素依赖性激酶2(Cyclin A/CDK2)、细胞周期蛋白D2/细胞周期素依赖性激酶4(Cyclin D2/CDK4)的表达。碘化丙啶(PI)染色检测miR-K1-5p对内皮细胞(HUVECs)周期的影响。结果miR-K1-5p靶向CDKN4(miR-K1-5p mimics+CDKN4-WT组、mimics NC+CDKN4-WT组、miR-K1-5p mimics+CDKN4-MUT组、mimics NC+CDKN4-MUT组萤光素酶活性分别为0.42±0.05、0.81±0.04、0.82±0.03、0.80±0.05),负性调控CDKN4的表达(P<0.001),正性调控Cyclin A/CDK2和CyclinD2/CDK4的表达(P<0.05)。此外,miR-K1-5p可以加速细胞周期进程,促进G1/S期转换[S+G2期/G1+S+G2期:mimics组(23.37±0.29)%比mimics NC组(15.00±0.75)%,G1期:mimics组(76.63±0.28)%比mimics NC组(85.00±0.76)%,S期:mimics组(15.34±0.36)%比mimics NC(8.45±0.20)%,G2期:mimics组(8.02±0.17)%比mimics NC组(6.55±0.80)%]。结论miR-K1-5p调控G1/S期相关基因的表达影响内皮细胞周期。

盐酸埃克替尼对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞周期及Cy-clinD1、P27表达的影响

目的:研究表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂盐酸埃克替尼对体外培养的人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞周期的影响。方法:分别应用0、10、20和40μmol/L盐酸埃克替尼处理体外培养的Tca8113细胞24、48和72h后,采用流式细胞仪分析细胞周期变化。采用间接免疫荧光流式定量检测技术及免疫细胞化学方法检测0、20μmol/L盐酸埃克替尼作用48h后Tca8113细胞CyclinD1及P27蛋白的表达。结果:随盐酸埃克替尼浓度、作用时间的增加,G0/G1期细胞比例逐渐增加(F浓度=34.791,F时间=19.934,F浓度×时间=9.028,P<0.001)。盐酸埃克替尼作用后Tca8113细胞CyclinD1表达降低,P27表达增加。结论:盐酸埃克替尼通过降低CyclinD1的表达、增加P27的表达,改变Tca8113的细胞周期分布,有明显的G0/G1期阻滞作用。

细胞周期蛋白E及相关因子表达与肾癌发生、侵袭及转移的相关性研究

目的探讨肾癌细胞周期蛋白E(cyclinE)、周期依赖性激酶2(CDK2)和周期依赖性激酶抑制因子P27的表达状况及其意义。方法应用免疫组化SP法及RT-PCR检测37例肾癌组织、13例癌周正常肾组织中cyclinE、CDK2和P27蛋白及mRNA表达。并将上述指标与临床病理特征进行统计学分析。结果肾癌组织中cyclinE、CDK2阳性表达率分别为51.4%、43.2%,明显高于癌旁正常肾组织(P<0.05),并且随肿瘤分级及分期的升高、肿瘤转移而升高;两者mRNA含量变化同蛋白表达水平相符;相反,P27在肾癌和癌旁正常肾组织中表达量分别为48.6%、69.2%,二者差异显著(P<0.05),P27表达随肿瘤分级及分期升高、肿瘤的远位转移出现降低趋势。结论cyclinE、CDK2、P27参与了肿瘤形成及侵袭过程,是反映肾癌生物学特征有价值的标志物。

急性肾损伤组织中细胞周期调控蛋白的表达变化及其意义

目的观察细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)、细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶4(CDK4)、p21在不同原因所致急性肾损伤(AKI)组织中的表达变化,并探讨其意义。方法选择行肾穿刺活检术的患者纳入研究,包括AKI患者108例和无器质性肾脏病变的肾功能异常的患者(对照组)39例。AKI患者中,肾毒性AKI 63例(肾毒性AKI组)、缺血性AKI 45例(缺血性AKI组)。取各组肾穿刺活检标本,采用免疫组织法检测Cyclin B1、CDK4、p21蛋白。结果肾毒性AKI组、缺血性AKI组的肾小管细胞和肾间质中p21、Cyclin B1、CDK4蛋白表达积分均高于对照组(P均<0.05)。肾毒性AKI组及缺血性AKI组肾组织中Cyclin B1、CDK4、p21蛋白表达积分相比,P均>0.05。结论 AKI组织中p21、Cyclin B1、CDK4蛋白表达上调,在肾毒性AKI和缺血性AKI中三种细胞周期调控蛋白表达变化的趋势一致;细胞周期调控蛋白的表达与AKI病因无关。

粘膜白斑损害中HPV DNA的检测及细胞周期相关因子的表达

目的 探讨人乳头瘤病毒 (HPV)感染和细胞周期相关因子周期素E(cyclinE)及周期素依赖性蛋白激酶抑制蛋白p2 7在外生殖器粘膜白斑损害发病中的作用。方法 采用通用型引物PCR方法对 3 2例外生殖器粘膜白斑损害进行粘膜型HPVDNA的检测 ,并应用SP免疫组化方法检测病变中cyclinE和p2 7表达。结果 3 2例粘膜白斑损害中粘膜型HPVDNA全部阴性 ;粘膜白斑损害cyclinE表达阳性率及阳性强度均高于正常对照 ,且有统计学差异 (P <0 .0 5) ;而p2 7表达阳性率及阳性强度均低于正常对照 ,但无统计学差异 (P >0 .0 5) ,粘膜白斑损害中cyclinE和p2 7的表达有显著相关性。结论 外生殖器粘膜白斑损害的发生可能与HPV感染关系不大 ;细胞周期相关因子cyclinE和p2

Jab1和p27kip1蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达

目的探讨Jun激活区域-连接蛋白1(c-Jun activation domain-binding protein1,Jab1)和p27kip1的表达与喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinomas,LSCC)发生、发展的关系及两种蛋白之间的相关性。方法免疫组织化学SP法检测23例正常喉黏膜(normal laryngeal tissues,NLT)和68例LSCC组织中Jab1和p27kip1的表达。结果NLT和LSCC组织中,Jab1和p27kip1蛋白阳性表达率差异均有显著性(P<0.01)。LSCC中Jab1的过表达与临床分期及颈淋巴结转移显著相关(P<0.05),p27kip1的表达与颈淋巴结转移显著相关(P<0.05),Jab1的表达与p27kip1的表达呈负相关(P<0.05)。生存率分析表明,Jab1的过表达与患者的总生存率呈负相关(P<0.05)。结论Jab1可能通过对周期素依赖性蛋白激酶抑制因子(cell cycle inhibitory protein,CKI)p27kip1蛋白的降解而参与LSCC的发生、发展,联合检测Jab1及p27kip1蛋白的表达有助于综合评估LSCC的生物学行为及预后。

CDK2、p21和p27在生长激素腺瘤中的表达及CDK2抑制剂的体外应用

目的分析细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期调节因子p21和p27在生长激素腺瘤中的表达水平,观察CDK2抑制剂环O6-己基甲基鸟嘌呤(O6)对GH3细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法构建包含3例垂体和46例腺瘤标本的组织芯片,按Knosp分级将肿瘤分为侵袭组(n=15)和非侵袭组(n=31),免疫组织化学技术分析CDK2、p21和p27的蛋白水平,结合随访信息分析其与临床特性的关系。GH3细胞分为O6组(0.4μmol/L和4μmol/L)和二甲基亚砜组(DMSO),细胞增殖实验MTS法检测细胞活力;Annexin V实验检测细胞凋亡;Brdu实验检测细胞周期,Western blotting实验检测CDK2、p21和p27变化。结果腺瘤标本中CDK2、p21和p27的H-score评分分别为(104.8±28.3)分、(195±39.2)分、(158.8±32.3)分,CDK2在侵袭组表达较非侵袭组明显增高[(140±31.7)分vs.(87.8±26.7)分],p21[(152.3.1±35.2)分vs.(215.7±41.2)分]和p27[(118.1±28.4)分vs.(173.7±34.3)分]则明显降低(P<0.05)。O6处理GH3细胞后,细胞活力与DMSO组相比,不同剂量O6处理组细胞活力分别为DMSO组的(84.5±7.6)%和(76.2±7.1)%(24 h)、(75.7±7.3)%和(69.6±6.2)%(48 h)、(70.2±6.4)%和(61.3±5.5)%(72 h)。处理24 h后,O6组Annexin V阳性细胞分别为(8.86±1.78)%(P<0.05)和(19.36±4.20)%(P<0.01),而DMSO组为(3.35±0.73)%,PI阳性则分别为(3.82±0.53)%(P<0.05)、(10.14±2.65)%(P<0.01)和(1.34±0.33)%。Brdu实验显示,O6将GH3细胞阻滞在G1期,分别为(50.4±4.1)%和(59.4±4.7)%(P<0.05),DMSO组为(45.7±3.7)%。同时,蛋白印迹实验显示,O6处理后p21和p27呈现升高趋势(P<0.05)。结论CDK2、p21和p27表达与生长激素腺瘤侵袭密切相关,其抑制剂O6-己基甲基鸟嘌呤诱导GH3细胞凋亡,抑制细胞增殖。

对肿瘤细胞中p27^(kip1)蛋白功能的再认识

p27kip1（以下简称p27）蛋白是一种调控细胞周期并抑制细胞分裂的重要因子,被认为是人类多种肿瘤独立的预后因子和未来可能的肿瘤治疗靶点。传统经典观点认为p27是细胞周期素依赖性激酶抑制因子（cyclindepen dent kinaseinh ibitor，CDKI），