结肠癌组织微小RNA-3607-3p、细胞周期蛋白E2表达及其与患者术后5年预后关系研究

目的:探讨结肠癌组织微小RNA-3607-3p(miR-3607-3p)、细胞周期蛋白E2(CCNE2)表达及其与患者术后5年预后的关系。方法:选取行结肠癌根治术治疗的88例结肠癌患者癌组织和癌旁组织。RT-qPCR法测定组织miR-3607-3p、CCNE2 mRNA表达。免疫组化法检测组织CCNE2蛋白表达。随访术后5年内结肠癌患者生存情况,根据生存情况将患者分为生存组(48例)和病死组(40例)。分析miR-3607-3p、CCNE2 mRNA与TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移的相关性。Cox回归分析结肠癌患者术后5年预后的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-3607-3p、CCNE2 mRNA对患者术后5年内生存的预测价值。结果:结肠癌组织miR-3607-3p表达水平低于癌旁组织,CCNE2 mRNA表达水平和CCNE2蛋白阳性表达率高于癌旁组织(均P<0.05)。miR-3607-3p低表达和CCNE2 mRNA高表达患者TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、有淋巴结转移的占比更高(均P<0.05)。结肠癌组织miR-3607-3p与CCNE2 mRNA、TNM分期、淋巴结转移呈负相关,与肿瘤分化程度呈正相关(均P<0.05)。CCNE2 mRNA与TNM分期、淋巴结转移呈正相关,与肿瘤分化程度呈负相关(均P<0.05)。miR-3607-3p高表达、CCNE2 mRNA低表达患者5年总生存率高于miR-3607-3p低表达、CCNE2 mRNA高表达患者(均P<0.05)。病死组TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、有淋巴结转移的患者占比更高(均P<0.05)。病死组结肠癌组织CCNE2 mRNA和蛋白阳性表达率高于生存组,miR-3607-3p低于生存组(均P<0.05)。TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、有淋巴结转移、miR-3607-3p低表达、CCNE2 mRNA高表达、CCNE2蛋白阳性表达是影响结肠癌患者术后5年生存的独立危险因素(均P<0.05)。结肠癌组织miR-3607-3p、CCNE2 mRNA两者联合预测患者术后5年内生存的曲线下面积(AUC)高于miR-3607-3p、CCNE2 mRNA单独预测的AUC(均P<0.05)。结论:结肠癌组织miR-3607-3p呈低表达,CCNE2呈高表达,两者与患者术后5年预后有关,有望成为结肠癌患者术后5年内生存的预测指标。

长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18通过微RNA-497-5p/细胞周期蛋白E1轴调节弥漫性大B细胞淋巴瘤的增殖、凋亡和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测2018年5月至2021年5月收集的恩施土家族苗族自治州中心医院DLBCL病人淋巴组织、良性淋巴结增生病人的淋巴组织、人正常B细胞永生化细胞HMy2.CIR、DLBCL细胞系SU-DHL-1、OCI-LY8、U2932中HCG18、miR-497-5p表达及CCNE1蛋白表达,将OCI-LY8细胞分为Ct组(正常培养的OCI-LY8细胞)、pcDNA组(细胞转染过表达物阴性对照)、pcDNA-HCG18组(细胞转染HCG18过表达物)、si-NC组(细胞转染小干扰RNA阴性对照)、si-HCG18组(细胞转染HCG18小干扰RNA)、si-HCG18+inhibitorNC组(细胞转染HCG18小干扰RNA和抑制物阴性对照)、si-HCG18+miR-497-5p inhibitor组(细胞转染HCG18小干扰RNA和miR-497-5p抑制物),CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测CCNE1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,双萤光素酶验证HCG18与miR-497-5p、miR-497-5p与CCNE1的关系。结果 在DLBCL淋巴组织和细胞中,HCG18、CCNE1蛋白高表达,miR-497-5p低表达,且在OCI-LY8细胞中HCG18、CCNE1蛋白表达上调最高,miR-497-5p表达下调最多(P<0.05),因此,以OCI-LY8细胞进行后续研究,与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18(0.26±0.03比1.01±0.01)、CCNE1蛋白(0.45±0.03比1.44±0.19)表达降低,miR-497-5p(1.95±0.14比1.03±0.02)表达升高(P<0.05),与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18(1.96±0.23比1.02±0.01)、CCNE1蛋白(2.33±0.21比1.42±0.18)表达升高,miR-497-5p(0.28±0.02比1.02±0.02)表达降低(P<0.05),与siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组比较,miR-497-5p表达降低(1.21±0.09比1.95±0.14、1.94±0.13),CCNE1蛋白(0.87±0.08比0.45±0.03、0.44±0.04)表达上调(P<0.05),沉默HCG18可抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭行为及PCNA、MMP-9蛋白表达,诱导细胞凋亡及Bax蛋白表达,而上调HCG18则呈相反趋势,下调miR-497-5p逆转了沉默HCG18对OCI-LY8细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,HCG18靶向调控miR-497-5p/CCNE1。结论 沉默HCG18可能通过调控miR-497-5p/CCNE1抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡。

miRNA-144-3p靶向CCNE2调控肺腺癌细胞周期并抑制其增殖

目的探究微小RNA(MicroRNA,miRNA)-144-3p靶向细胞周期蛋白E2(Cyclin E2,CCNE2)调控肺腺癌细胞周期和增殖的机制。方法通过TCGA数据库分析miRNA-144-3p和CCNE2的相对表达水平。在肺腺癌细胞中转染miRNA-144-3p模拟物(miRNA-144-3p mimic)或miRNA-144-3p抑制剂(miRNA-144-3p inhibitor),实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction)检测miRNA-144-3p和CCNE2的mRNA表达水平,应用细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期的分布。免疫印迹(Western blot,WB)检测细胞周期蛋白CCNE2的表达水平,双荧光素酶报告基因实验鉴定miRNA-144-3p和CCNE2的靶向关系。结果miRNA-144-3p在肺腺癌细胞中显著低表达,转染miRNA-144-3p mimic后,肺腺癌细胞的增殖能力受到显著抑制,肺腺癌细胞周期阻滞于G1期。miRNA-144-3p靶向结合于CCNE2,并且miRNA-144-3p可下调CCNE2的表达。结论肺腺癌细胞中miRNA-144-3p通过靶向负调控CCNE2的表达,抑制细胞增殖和细胞周期进展。

细胞周期相关蛋白cyclin E、cdk2和p27^(kip1)在垂体腺瘤中的表达

目的观察细胞周期相关蛋白cyclin E、cdk2和p27kip1在垂体腺瘤中的表达情况,探讨其与垂体腺瘤临床生物学行为的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测37例非侵袭性垂体腺瘤和21例侵袭性垂体腺瘤组织中cyclin E、cdk2和p27kip1蛋白的表达情况。结果在侵袭性垂体腺瘤中cyclin E和cdk2的表达明显高于非侵袭性垂体腺瘤(均P<0.01),p27kip1的表达明显低于非侵袭性垂体腺瘤(P<0.01);cyclin E与cdk2在垂体腺瘤中的表达呈正相关(r=1,P<0.01),两者与p27kip1的表达呈负相关(均r=-1,P<0.01);cyclin E和cdk2的表达与垂体腺瘤的侵袭性呈正相关(r=0.685,r=0.667,均P<0.01),而p27kip1的表达与垂体腺瘤的侵袭性呈负相关(r=0.659,P<0.01)。结论cyclin E、cdk2及p27kip1的表达情况可以作为判断垂体腺瘤的侵袭性和预后的指标。

细胞周期蛋白E2基因mRNA在胃癌组织中的表达

目的了解细胞周期蛋白E2(Cyclin E2)基因mRNA在胃癌组织中的表达情况及Cyclin E2与临床肿瘤病理的关系,探讨Cyclin E2在胃癌发生、发展、侵袭与转移中的作用。方法收集40例手术切除并经病理检查证实的胃癌组织标本,用于RNA提取。按Lauren方案分为肠型胃癌11例,弥漫型胃癌29例;按有无胃周围淋巴结转移分为转移组28例,非转移组12例。临床分期采用UICC的TNM方案,Ⅰ、Ⅱ期13例,Ⅲ、Ⅳ期27例。用RT-PCR法检测胃癌组织Cyclin E2基因mRNA表达。结果肿瘤组织表达Cyclin E2 mRNA均明显高于正常对照组织(P<0.05)。在肿瘤组织中可见Cyclin E2 mRNA在有淋巴结转移的肿瘤组织表达明显高于非淋巴结转移的肿瘤组织(P<0.01),TNM分期中Ⅲ、Ⅳ期者Cyclin E2 mRNA表达明显高于Ⅰ、Ⅱ期者(P<0.05)。肿瘤组织中Cyclin E2 mRNA表达与性别及Lauren分型无关(P>0.05)。结论Cyclin E2基因可能促使胃癌转移,其表达水平可能有助于临床分期。

CyclinE/CDK2及p27在胃癌细胞周期G_1/S调控中的研究

目的探讨胃癌组织中Cyclin E/CDK2和p27蛋白表达及细胞增殖与胃癌发生及发展的关系。方法采用流式细胞术检测Cyclin E/CDK2及p27蛋白在胃癌组织及正常胃壁组织细胞中的表达,结合患者的年龄、性别以及肿瘤细胞分化程度、癌组织浸润深度及有无淋巴结转移等临床病理因素进行综合分析。结果胃癌组织及正常胃组织细胞增殖指数分别为(40.62±5.07)%和(24.99±3.11)%,二者比较有显著性差异(P<0.01);FCM检测胃癌组织及正常胃组织细胞中Cyclin E蛋白表达荧光强度分别为(482.67±19.45)A.U.和(442.46±20.49)A.U.,CDK2蛋白表达荧光强度分别为(469.04±21.62)A.U.和(436.64±11.24)A.U.,p27蛋白表达A.U分别为(449.10±19.98)A.U.和(502.17±18.78)A.U.,二者比较均有显著性差异(P<0.01)。结论胃癌具有旺盛的增殖能力。Cyclin E、CDK2及p27蛋白的异常表达引起了细胞异常增殖,从而引起早期胃癌的发生。联合检测Cyclin E、CDK2及p27蛋白的表达可为临床上胃癌早期诊断提供实验依据,对于提高临床上胃癌早期诊断的准确率具有重要的意义。

细胞周期蛋白E2基因的过度表达与胃腺癌细胞迁徙的关系

从基因芯片筛选出差异表达的基因中一个细胞周期蛋白 (cyclin)E2基因 ,深入研究周期蛋白E2在高转移性胃腺癌细胞系RF 4 8细胞中的生物学作用 .首先通过合成硫代磷酸化修饰的反义、正义和错配寡核苷酸片段 ,使用半定量RT PCR和Western印迹方法分别检测被 3种寡核苷酸转染的RF 4 8细胞在 1～ 5d内周期蛋白E2基因及它可能调控下游靶基因之一FGFR基因和蛋白质的表达 ,检测寡核苷酸转染的RF 4 8细胞周期和凋亡细胞 ,观察寡核苷酸转染RF 4 8细胞的软琼脂集落形成、运动能力和体外侵袭能力 .结果表明 ,修饰的反义寡核苷酸在有效地抑制RF 4 8细胞中周期蛋白E2表达上调后 ,RF 4 8细胞的迁徙能力被显著降低 ,其增殖、运动能力没有变化 .周期蛋白E2基因的主要作用并不是促细胞分裂 ,也与细胞的增殖、运动能力无关 ,周期蛋白E2基因的过度表达与胃腺癌的迁徙性存在相关性 ,其触发肿瘤的侵袭性可能通过某种机制调控其下游靶基因之一成纤维细胞生长因子受体 (FGFR)

食管上皮癌变过程中细胞周期蛋白E细胞周期蛋白依赖性激酶2表达及DNA含量的研究

本文探讨食管上皮癌变过程中DNA含量的变化．以及细胞周期蛋白E（cyclinE）和细胞周期蛋白依赖性激酶2（cyclin-dependent kinase2，CDK2）表达的变化及其意义。

养心通脉片对家兔动脉硬化血管中细胞周期蛋白E及其依赖性激酶2的影响

目的:观察细胞周期蛋白E(Cyclin E)及其依赖性激酶(CDK)2在家兔动脉粥样硬化(AS)血管组织中的表达及养心通脉片的干预作用。方法:参照"高脂饲养喂饲法"造模,设养心通脉片组和辛伐他汀片组、模型组(高脂饮食喂养)和健康对照组,分别用养心通脉片、辛伐他汀片稀释液及蒸馏水灌胃。30 d后,采用免疫组化法检测四组血管组织中CyclinE和CDK2的表达强弱。结果:养心通脉片组CyclinE和CDK2的表达明显低于模型组(P<0.01或<0.05),而与健康对照组、辛伐他汀片组比较差异无显著性;但辛伐他汀片组CyclinE和CDK2的表达显著高于健康对照组(P<0.05)。结论:动脉粥样硬化与Cyclin E和CDK2表达增加有关,养心通脉片能调节Cyclin E和CDK2的表达,从而可能抑制细胞的异常增殖,有效地逆转或消退动脉粥样硬化斑块。

DNA损伤反应中细胞周期检查点蛋白p27^(Kip1)表达及其调控机制

为了研究DNA损伤反应中p2 7Kip1的表达及其调控机制 ,应用免疫印迹的实验结果表明 :10Gy 60 Coγ射线照射后 3h ,HeLa细胞中p2 7Kip1蛋白水平开始下降并持续到 2 4h ,进而失去它对CDKs的抑制功能 .Northern印迹结果显示 ,电离辐射 (IR)对p2 7Kip1mRNA表达水平无明显影响 ,说明电离辐射诱导p2 7Kip1表达水平的降低主要与蛋白质降解相关 ,但其具体的调控机制还不清楚 .已知在G1—S期p2 7Kip1蛋白的降低主要依赖细胞周期蛋白E Cdk2激酶将其磷酸化后的泛素化蛋白酶体途径 (ubiquitin proteasomepathway) .酶动力学研究结果揭示 :电离辐射后细胞周期蛋白E Cdk2激酶活性增高 ,12h细胞周期蛋白E Cdk2激酶活性达到最大 .当在照前用细胞周期蛋白E Cdk2抑制剂olomoucine (10 μmol L)抑制细胞周期蛋白E Cdk2激酶活性时 ,p2 7Kip1蛋白表达水平增加 .此外 ,还观察到电离辐射可诱导p2 7Kip1泛素化水平的增高 ,而在使用蛋白酶体抑制剂MG 132 (5 μmol L)处理HeLa细胞后 ,可抑制辐射诱导p2 7Kip1蛋白水平的下调 .研究结果提示 :泛素化蛋白酶体途径参与了辐射诱导P2 7Kip1蛋白表达下调的降解机制 .

肾细胞癌细胞中PBRM1-SWI/SNF复合体通过E2F1参与细胞周期控制

目的探讨敲减PBRM1是否会影响ccRCC细胞增殖以及在转录水平上PBRM1如何调控这一过程。方法通过RNA干扰、RT-PCR、Western blot、MTT和FACS实验,对于敲减PBRM1后的细胞增殖、E2F1家族成员的表达进行了分析;同时也通过ChIP实验研究了E2F1与PBRM1的相互转录调控机制。结果数据显示,在SN12C细胞中敲减PBRM1显著增加有丝分裂指数(MI),并伴随E2F1转录因子的上调。PBRM1被招募到E2F1启动子,与该启动子的活性组蛋白修饰共同发生。E2F1也被招募到PBRM1启动子,并通过结合其应答元件对PBRM1的表达起抑制作用。结论含有PBRM1的SWI/SNF复合体具有抗增殖作用;PBRM1缺陷以及PBRM1和(或)E2F成员的下游调控基因,可能在ccRCC的发生和发展中起协同作用。

茶多酚联合莱菔硫烷对肺癌组织蛋白激酶A锚定蛋白95和细胞周期蛋白E2表达的影响

目的探讨茶多酚联合莱菔硫烷对肺癌组织中蛋白激酶A锚定蛋白95和细胞周期蛋白E2表达的影响。方法选取经病理证实并手术治疗的肺癌患者56例,随机分为联合给药组和对照组,每组28例。采用ELISA测定所有患者肺组织中蛋白激酶A锚定蛋白95及细胞周期蛋白E2的含量;免疫组化SP法测定组织中蛋白激酶A锚定蛋白95及细胞周期蛋白E2的表达并统计微血管密度(microvascular density,MVD);Western Blot检测组织中蛋白激酶A锚定蛋白95及细胞周期蛋白E2蛋白表达情况。结果对照组肺癌患者组织中蛋白激酶A锚定蛋白95及细胞周期蛋白E2的含量均高于联合给药组,差异有统计学意义(P<0.01);免疫组化SP法结果显示肺癌患者癌变组织中蛋白激酶A锚定蛋白95及细胞周期蛋白E2的表达均呈阳性表达,且对照组织中MVD高于联合给药组(P<0.01);Western Blot结果显示对照组组织中蛋白激酶A锚定蛋白95及细胞周期蛋白E2蛋白表达高于联合给药组(P<0.01)。结论蛋白激酶A锚定蛋白95及细胞周期蛋白E2在肺癌患者组织中均存在表达升高现象,2者表达呈正相关,与药物治疗呈负相关,可以作为肺癌的评估检测指标。

CDK6及E2F-1参与细胞周期调控pRb通路的研究进展

目前肿瘤的本质被认为是一种细胞周期病,细胞周期的调控是一种受多条件限制、由多因素参与的复杂并且精细的过程,其经典途径包括pRb途径及p53途径,其中任何一个环节出现异常,均可能导致肿瘤的发生。细胞周蛋白依赖性激酶6(CDK6)、核转录调节因子E2F-1均参与细胞周期调控的RB通路,在G1期向S期转换过程中起到非常关键的作用。现有研究已证实,在人体的很多肿瘤中CDK6、E2F-1表达均呈现异常,其与肿瘤的发生发展有密切联系。因此,进一步了解二者在细胞周期调控中的作用及其在不同类别肿瘤中的表达异常对了解肿瘤的发生发展有重大意义。

葡萄糖6-磷酸脱氢酶调控细胞周期蛋白E1和细胞周期蛋白依赖性激酶2促进细胞增殖及其在肾透明细胞癌中的预后价值

肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)是一种转移率高、预后差的细胞代谢性疾病,对其有效诊疗及预后分子标志物的研究十分重要。葡萄糖6-磷酸脱氢酶(glucose 6-phosphatedehydrogenase,G6PD)在ccRCC中高表达,并提示患者不良预后,其促进ccRCC细胞增殖的分子机制有待进一步揭示。本研究发现,降低G6PD可抑制细胞周期G_(1)/S期转化并显著抑制ccRCC细胞增殖。G6PD可在细胞水平调控G_(1)/S期转化及增殖相关因子Cyclin D1,CDK4,CDK6,Cyclin E1和CDK2基因表达。TCGA数据库分析结果表明,ccRCC中Cyclin D1,Cyclin E1和CDK2的mRNA水平显著升高,而CDK4表达无明显差异,CDK6表达却显著降低。相关性分析结果显示,G6PD与Cyclin D1呈显著负相关(P<0.0001),G6PD与CDK4,CDK6之间无显著相关性(P>0.05),G6PD与Cyclin E1(P<0.0001)以及CDK2(P<0.05)显著正相关。进一步免疫组化检测结果表明,Cyclin E1和CDK2在ccRCC肿瘤组织中表达显著升高。生存预后分析结果显示,Cyclin D1高表达提示ccRCC患者整体预后更为良好,CDK4和CDK6表达水平在ccRCC患者总生存率预测中无意义;而Cyclin E1和CDK2高表达均可提示ccRCC患者预后不良。进一步细胞水平检测发现,Cyclin E1、CDK2表达降低可显著逆转G6PD促进ccRCC细胞增殖的能力。综上,与增殖相关因子Cyclin D1,CDK4和CDK6相比,G6PD有可能通过促进Cyclin E1和CDK2表达升高而发挥促进ccRCC肿瘤细胞增殖的作用,并且这3者的异常高表达有望成为ccRCC患者不良预后的独立生存预测因素。

细胞周期蛋白E2在人鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的:研究细胞周期蛋白E2(Cyclin E2)在人鼻咽癌(NPC)组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学法和RT-PCR法检测NPC组织及鼻咽非肿瘤组织Cyclin E2蛋白和mRNA的表达。结果:Cyclin E2蛋白在NPC和鼻咽非肿瘤组织中的表达率分别为75%(45/60)和9.5%(2/21),两者相比有统计学意义(P<0.01);鼻咽癌组织中Cyclin E2蛋白的过表达对同年龄、性别的患者无统计学差异(P>0.05),但与淋巴结转移、分期和5年生存率有相关性(P<0.01)。鼻咽癌组与对照组相比,Cyclin E2 mRNA表达亦有统计学差异(P<0.01)。结论:Cyclin E2表达对判断鼻咽癌病变进展、生存率及转移有重要参考价值。

细胞周期蛋白依赖性激酶cdk2和cdk4在前列腺增生和癌变组织中的表达

目的：探讨细胞周期蛋白依赖性激酶ｃｄｋ２和ｃｄｋ４在前列腺增生（ＢＰＨ）和前列腺癌（ＰＣ）的发生发展过程中作用及其与ＰＣＮＡ之间关系。方法：应用免疫组化ＳＰ法检测１８例正常前列腺（ＮＰ）、６２例ＢＰＨ和３３例ＰＣ组织中ｃｄｋ２、ｃｄｋ４和ＰＣＮＡ的表达。结果：前列腺上皮和间质组织中均见ｃｄｋ２和ｃｄｋ４表达。ＮＰ中两者表达均分别显著低于ＢＰＨ和ＰＣ；ＢＰＨ的上皮细胞中两者表达均分别显著低于ＰＣ，但ＢＰＨ的间质细胞中两者表达与ＰＣ相比均无显著性差异。ＢＰＨ和ＰＣ中ｃｄｋ２及ｃｄｋ４表达与ＰＣＮＡ指数均呈正相关。结论：ｃｄｋ２和ｃｄｋ４异常表达参与ＢＰＨ和ＰＣ的发生发展过程，其可能是通过改变细胞周期及促进细胞异常增殖而起作用的。

细胞周期蛋白E2反义脱氧寡核苷酸对K562细胞增殖及凋亡的调控作用

目的研究细胞周期蛋白E2(cyclin E2)反义脱氧寡核苷酸(ASON)对人红白血病细胞K562增殖的调控作用。方法采用反义技术合成ASON并与K562细胞共培养。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测转染ASON和脂质体lipofectamineTM2000后的细胞活力,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测转染细胞cyclin E2mRNA表达水平及流式细胞术和形态学观察检测细胞凋亡。结果 Cyclin E2特异的ASON能显著地抑制cyclin E2mRNA水平的表达(F=26.442,P<0.01);白血病细胞的生长明显受抑制(P<0.01),细胞凋亡明显增加。结果表明反义脱氧寡核苷酸能有效地抑制K562细胞的增殖,抑制K562细胞cyclin E2mRNA表达上调,并显著地诱导细胞凋亡。结论脂质体转染cyclin E2的反义寡核苷酸能够有效地抑制K562细胞cyclin E2mRNA的表达,同时对白血病细胞K562的生长有明显的抑制作用,并可诱导K562细胞凋亡。提示cyclin E2在细胞周期调控中起作用,cyclinE2基因有望作为反义技术治疗急性白血病中的一个较有意义的新靶点。

细胞周期蛋白E及相关因子表达与肾癌发生、侵袭及转移的相关性研究

目的探讨肾癌细胞周期蛋白E(cyclinE)、周期依赖性激酶2(CDK2)和周期依赖性激酶抑制因子P27的表达状况及其意义。方法应用免疫组化SP法及RT-PCR检测37例肾癌组织、13例癌周正常肾组织中cyclinE、CDK2和P27蛋白及mRNA表达。并将上述指标与临床病理特征进行统计学分析。结果肾癌组织中cyclinE、CDK2阳性表达率分别为51.4%、43.2%,明显高于癌旁正常肾组织(P<0.05),并且随肿瘤分级及分期的升高、肿瘤转移而升高;两者mRNA含量变化同蛋白表达水平相符;相反,P27在肾癌和癌旁正常肾组织中表达量分别为48.6%、69.2%,二者差异显著(P<0.05),P27表达随肿瘤分级及分期升高、肿瘤的远位转移出现降低趋势。结论cyclinE、CDK2、P27参与了肿瘤形成及侵袭过程,是反映肾癌生物学特征有价值的标志物。

低浓度MNNG诱发细胞周期相关基因DK6及E2F7表达研究

目的研究低浓度N-甲基-N′-硝基-N-甲基亚硝基胍对人羊膜FL细胞的细胞周期相关基因表达的影响,以助于阐明MNNG引起细胞应答反应的基因及其调控机制。方法用实时荧光定量PCR方法,检测FL细胞在0.2μmol/L MNNG处理后细胞周期相关基因CDK6及E2F7基因表达的改变。数据用AB I公司的SDS2.1软件分析。结果MNNG处理后,细胞周期相关基因CDK6及E2F7表达显著下调(P<0.05)。结论低浓度MNNG攻击可使人羊膜FL细胞周期发生异常。

Bcl-2和Hrk及细胞周期素E在胃癌组织中的表达及其意义

目的探讨凋亡抑制蛋白Bcl-2、凋亡促进蛋白Hrk及细胞周期素E(Cyclin E)在胃癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化(S-P)法检测58例胃癌患者的癌组织蜡块标本及正常癌旁组织中Bcl-2蛋白、Hrk蛋白及Cyclin E蛋白的表达情况。结果 Bcl-2蛋白在胃癌组织中阳性表达38例,阳性率为65.5%,癌旁组织中阳性表达14例,阳性率为24.1%,两种组织中Bcl-2蛋白阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=20.077,P<0.05)。不同肿瘤分化程度、临床分期及有无淋巴转移胃癌患者中Bcl-2蛋白阳性率比较,差异均有统计学意义(P<0.05);不同年龄、肿瘤直径、Borrmann分型、浸润深度胃癌患者中Bcl-2蛋白阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。Hrk蛋白在胃癌组织中阳性表达12例,阳性率为20.7%,癌旁组织中阳性表达36例,阳性率为62.1%,两种组织中Hrk蛋白阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=20.471,P<0.05)。Cyclin E蛋白在胃癌组织中阳性表达34例,阳性率为58.6%,癌旁组织中阳性表达11例,阳性率为18.9%,两种组织中Cyclin E蛋白阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=19.206,P<0.05)。Spearman相关分析表明,Bcl-2蛋白与Hrk蛋白呈负相关(r=-0.286,P<0.05),与Cy-clin E蛋白呈正相关(r=0.749,P<0.05)。结论胃癌的形成与多种蛋白的相互作用及基因水平上正负信号转导、调控密切相关,凋亡抑制蛋白Bcl-2、凋亡促进蛋白Hrk及Cyclin E共同参与胃癌的发生发展。