胃癌中细胞周期调控因子D1、E的表达及其意义

目的探讨细胞周期调控因子(cyclyinD1、cyclyinE)在胃癌中的表达及其意义。方法用免疫组化检测胃癌、不典型增生及正常胃黏膜中cyclyinD1、cyclyinE的表达状况。结果cyclyinD1在同病变组织中的表达率:进展期胃癌65.00%(26/40)、早期胃癌60.00%(12/20)、Ⅱ、Ⅲ期不典型增生45.00%(9/20)差异正常胃黏膜组织15.00%(3/20)。而cyclyinE的表达率分别为:进展期胃癌60.00%(24/40)、早期胃癌55.00%(11/20)、Ⅱ、Ⅲ期不典型增生35.00%(7/20)及正常胃粘膜组织20.00%(4/20)。胃癌和胃黏膜不典型增生组织的cyclyinD、1cyclyinE的表达与正常胃黏膜组织相比差异有显著性(P<0.01及P<0.05);cyclyinD1在胃癌中的表达与分化及TNM分型无关,而cyclyinE与肿瘤分化程度、浸润深度及肿瘤分期相关。结论细胞周期调控因子cyclyinD1、cyclyinE的过度表达与胃黏膜上皮组织的过度增生及胃癌的发生有密切关系,检测cyclyinE作为胃癌的进展程度的一个指标。

细胞周期调控因子p27、Cyclin D1和DNA含量在食管癌中联合检测的意义

目的探讨食管癌中CyclinD1、p27的表达及与DNA含量联合测定的意义及相互关系。方法收集食管癌组织及癌周正常组织标本,应用免疫组织化学检测CyclinD1、p27蛋白表达,应用流式细胞术检测DNA含量。结果食管癌组织中CyclinD1和p27蛋白表达阳性率分别为45.8%和33.3%,CyclinD1表达阳性组的DNA含量显著高于CyclinD1表达阴性组分别为(1.54±0.21)和(1.08±0.43),(P<0.05),而p27表达阳性组的DNA含量和SPF值低于p27蛋白表达阴性组分别为(1.10±0.19),(5.56±5.18)%和(1.66±0.28),(19.78±6.12)%,(P<0.05)。结论CyclinD1、p27蛋白与食管癌的发生、发展有关,检测CyclinD1、p27及DNA含量可作为诊断和评估食管癌恶性程度的重要指标.

中药胃康宁对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子的影响

目的观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子CyclinD2、CyclinE、Cdk2(Cyclin dependant kinase2,CDK2)Cdk4、Cdk6和p16INK4a、p27KIP1mRNA及其蛋白表达的作用。方法分别将高、中、低不同剂量的中药胃康宁制剂对SD大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量含药血清培养胃癌细胞,用流式细胞仪检测细胞周期的变化;采用免疫组织化学SABC法及RT-PCR法检测各组胃癌细胞中CyclinD2、CyclinE、Cdk2、Cdk4、Cdk6和p16INK4a、p27KIP1蛋白和mRNA的表达。结果中药胃康宁能将增殖过程中的MGC-803胃癌细胞阻滞于G0-G1期,使之不进入或延迟进入S期(即DNA合成期),抑制胃癌细胞的生长;免疫组化法结果显示,与空白对照组比较,中药胃康宁高、中剂量组CyclinE和Cdk2,CyclinD2和Cdk4、Cdk6蛋白均有明显升高,而p27KIP1、p16INK4a蛋白则显著降低(P<0·01);RT-PCR结果显示,中药胃康宁高、中剂量组均能明显降低CyclinD2、CyclinE、Cdk2和Cdk4、Cdk6OPTD值,同时升高p27KIP1、p16INK4aOPTDI值(P<0·01)。结论中药胃康宁可抑制胃癌细胞促细胞周期相关因子CyclinD2、CyclinE、Cdk2、Cdk4和Cdk6的表达,同时增强胃癌细胞周期抑制因子p27KIP1、p16INK4a的表达,这可能是中药胃康宁抑制胃癌细胞生长的作用机制。

细胞周期调控因子在分化型甲状腺癌中的表达及相关性研究

目的:研究细胞周期调控因子p16、p27和CyclinD1在分化型甲状腺癌中的蛋白表达情况,及其在分化型甲状腺癌发生发展中的作用。方法:应用免疫组化S-P法对40例分化型甲状腺癌包括甲状腺乳头状癌和滤泡癌以及30例甲状腺腺瘤组织中p16、p27和CyclinD1的蛋白表达情况进行检测。结果:p16、p27和Cy-clinD1三种蛋白在40例分化型甲状腺癌的阳性表达率分别为57.5%、70.0%和62.5%;p16蛋白的阳性表达量与分化型甲状腺癌的颈淋巴结转移之间具有相关性(P<0.05);p27蛋白的阳性表达量与分化型甲状腺癌的颈淋巴结转移和原发灶的大小及包膜侵犯之间具有相关性(P<0.05);CyclinD1蛋白的阳性表达量与分化型甲状腺癌的颈淋巴结转移和原发灶的包膜侵犯之间具有相关性(P<0.05);p16的阳性表达与CyclinD1的阳性表达之间具有相关性(P<0.05),且呈负相关关系(rs=-0.283);p27的阳性表达与CyclinD1的阳性表达之间具有相关性(P<0.05),且呈负相关关系(rs=-0.279)。结论:p16、p27和CyclinD1三种蛋白的异常表达共同参与了分化型甲状腺癌的发生发展,可能成为判断分化型甲状腺癌恶性程度、转移及预后的指标。

细胞周期调控因子调控子宫内膜蜕膜化的研究进展

1子宫内膜蜕膜化的基本过程胚胎的植入和生长要求子宫各种组织高度的重构。基质细胞快速增生和分化,腔上皮细胞逐渐凋亡,继之发生胚胎着床。胚泡滋养层与容受性子宫内膜接触后,基质细胞分化成蜕膜细胞,这一反应称为蜕膜化[1-2]。人类蜕膜化一般发生于每个月经周期的第23天,受孕后持续至妊娠结束。

细胞周期调控因子p21和cyclinD1与胃癌相关性研究的进展

抑癌基因p21是一个广谱的细胞周期依赖性激酶(CDK)抑制剂和细胞周期的负调控因子,具有阻止细胞通过G1/S期的作用;癌基因cyclinD1参与G1/S期转换的调控,是细胞周期重要的正性调控因子;p21的低表达和cyclinD1的高表达与胃癌的发生、发展有关。本文就p21和cyclinD1与胃癌的相关性研究作一介绍。

细胞周期调控因子在中耳胆脂瘤上皮中的表达

目的根据细胞周期调控基因表达情况探讨中耳胆脂瘤上皮细胞增殖的分子机制。方法采用免疫组织化学方法检测胆脂瘤上皮细胞和胆脂瘤患者外耳道上皮细胞中周期蛋白依赖性激酶4(cyclindependentkinase4,CDK4)及其抑制因子p15、p16的表达,并结合炎症及骨质破坏程度作统计学分析。结果CDK4、p16在胞核、胞浆以棕黄色或棕褐色颗粒表达,并以胞核为主,而p15仅以胞核棕黄色或棕褐色颗粒表达。与皮肤相比,CDK4、p15、p16在胆脂瘤上皮细胞的表达显著增强,上皮下重度炎症可增强CDK4的表达;不同的骨质破坏程度上述指标的表达无显著性差异。结论胆脂瘤上皮细胞增殖活性增强,同时抑制细胞增殖的机制也增强;局部炎症可增强胆脂瘤上皮细胞的增殖活性。

细胞周期调控因子p21 WAF1/CIP1在瘢痕癌组织中的表达及意义

目的探讨细胞周期调控因子p21在皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌组织中的作用。方法 1采用激光扫描共聚焦显微技术,对瘢痕癌和病理性瘢痕石蜡切片组织进行p21免疫荧光双标记,同时采集三维立体图像;2应用免疫组织化学染色(SP)法,检测瘢痕癌组织、病理性瘢痕被覆上皮和正常皮肤表皮3组组织中p21蛋白的表达;3采用核酸分子原位杂交技术检测p21m RNA在3组组织中的表达;4对各项指标进行相关性分析,计算平均光密度和阳性面积,并结合图像分析,所有数据运用SPSS 17.0软件包进行统计学分析。结果 1免疫荧光双标记结果:p21蛋白在瘢痕癌癌组织中呈较强荧光,为高表达;在病理性瘢痕上皮中呈微弱荧光,为阴性表达;2免疫组织化学和原位杂交结果:p21蛋白和p21m RNA在瘢痕癌癌组织中呈高表达,在病理性瘢痕上皮中呈低表达,在正常皮肤表皮呈阴性表达。瘢痕癌组表达强度(平均光密度)和表达水平(阳性面积)分别与病理性瘢痕及正常皮肤组相比较,差异均有统计学意义(P<0.01);但病理性瘢痕组与正常皮肤组比较,差异无统计学意义(P>0.05);3相关性分析:在瘢痕癌组织中,p21蛋白与p21m RNA的表达呈正相关。结论瘢痕癌中细胞周期调控因子p21的过表达,其凋亡抑制调控作用有待进一步探讨,p21的表达可能具有组织特异性。

胃粘膜疾病组织芯片制作及13种细胞周期调控因子的检测

目的:探讨制作胃粘膜疾病组织芯片的方法学及组织芯片技术的优缺点。方法:采取免疫组织化学技术检测胃粘膜疾病组织芯片中13种细胞周期调控因子(Ubipuitim、P16、P21、P27、P53、P57、chclin A、chclin B、chclinD1、cyclin E、CDK2、CDK4、CDK6)表达情况。结果:肠型胃癌中,Ubipuitin的表达高于慢性浅表性胃炎和肠化生,P16、F27的表达低于慢性浅表性胃炎和肠化生,P21、P57的表达低于慢性浅表性胃炎,P53的表达高于慢性浅表性胃炎、肠化生和异型增生,cyclin A、cyclin B、cyclinD1、cyclin E、CDK2、CDK4、CDK6的表达高于慢性浅表性胃炎和肠化生。结论:采用病变组织芯片方法检测可在最短的时间内获取病变组织13种细胞周期调控因子的表达情况,且节约研究经费、降低劳动量,具有重要的科研和应用价值。

细胞周期调控因子的表达与肺癌预后关系的研究

应用细胞周期调控因子 P2 7kipl、Rb单克隆抗体和 CDK 4多克隆抗体 ,对 5 4例肺鳞状细胞癌的纤支镜活镜标本和 10例正常肺组织进行免疫组织化学染色研究。结果发现 :5 4例肺鳞癌中 ,P2 7kipl阳性表达率为 (2 8/ 5 4) 5 1.9%。表达水平与患者预后呈正相关。 P2 7kipl表达是影响肺癌患者预后的主要因素。 CDK4阳性表达率 (2 6 / 5 4)为 48.l%。 Rb阳性表达率 (33/5 4)为 6 1.1%。表达水平与患者预后呈正相关。结果表明 :P2 7kipl低表达可作为判断肺鳞癌患者预后差的一个独立的有效标记指标。 CDK 4表达对鉴别良恶性病变有一定意义。

细胞周期调控因子在肺癌活检组织中的表达

目的 探讨 P2 1 waf1和 Cyclin E在肺鳞癌组织中表达。方法 应用细胞周期调控因子 P2 1 waf1、 Cyclin E单克隆抗体 ,对 5 4例肺鳞状细胞癌的纤支镜活检标本和 10例正常肺组织进行免疫组化染色研究。结果 在肺鳞癌组织中 P2 1 waf1 呈低水平表达 ,其阳性表达率 (11/ 5 4)仅为 2 0 .4%。在肺鳞癌组织中 Cyclin E阳性表达率 (17/ 5 4)为 31.5 %。低分化及有淋巴结转移的病例 ,其 Cyclin E表达量明显高于高中分化及无淋巴结转移的病例。结论 P2 1 waf1在肺鳞癌组织中呈低表达 ,Cyclin

采用组织芯片技术分析胃癌中泛素对细胞周期调控因子p27表达的影响

目的研究胃癌组织中泛素(Ubiquitin)对细胞周期调控因子p27表达的影响及意义。方法采用组织芯片技术制作60例胃癌组织芯片,同时用S-P免疫组织化学和原位分子杂交(cDNA-mRNA)方法检测胃癌组织芯片中Ubiquitin、p27、p27mRNA的表达。结果60例胃癌组织中,Ubiquitin、p27、p27mRNA的阳性率分别为3.3%、40.0%、55.0%。淋巴结转移组的胃癌p27和p27mRNA阳性率显著低于无淋巴结转移胃癌(P<0.01)。Ubiquitin表达与p27低表达明显相关。结论应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的,具有快速、方便、经济、准确的特点。p27的表达水平可以作为评估胃癌预后的参考指标,Ubiquitin影响p27的低表达。

细胞周期调控因子p27、cyclinE和Ki-67在早期胃癌中的表达

目的:探讨早期胃癌中细胞周期调控因子p27、cyclinE和Ki-67表达异常的意义。方法:免疫组织化学(S-P)方法和显微摄像计算机图像分析技术。结果:早期胃癌中,p27阳性23例(42.6％),cyclinE阳性35例(64.8％),细胞增殖指数PI=65.22±9.471。结论:提示p27的低表达,cyclinE的过表达对细胞增殖有促进作用,p27的低表达与cyclinE的过表达与胃癌的发生发展明显相关。

应用组织微阵列技术研究细胞周期调控因子p27^kip1和p16^Ink4a在宫颈腺癌中的表达

目的 研究细胞周期调控因子p27^kip1、p16^Ink4a在宫颈腺中的表达及临床意义。方法 应用组织微阵列技术结合免疫组化（二步法）检测106例宫颈腺癌组织和22例慢性宫颈炎组织中p27^kip1和p16^Ink4a的表达。结果 宫颈腺癌组织中p27^kip1蛋白阳性表达率为58．5％，明显低于慢性宫颈炎组织（P〈0．05），p16^Ink4a在宫颈腺癌组织中的阳性表达率为70．8％，明显高于慢性宫颈炎组织（P〈0．01）；p16^Ink4a蛋白表达与宫颈腺癌病理分级和组织学类型无明显相关性；p27^kip1蛋白表达与官颈腺癌病理分级无明显相关性，而与组织学类型相关，透明细胞腺癌p27^kip1阳性表达率明显低于其它类型宫颈腺癌（P〈0．05）。结论 p27^kip1和p16^Ink4a在宫颈腺癌的癌变发生过程中起重要作用，二者可能作为宫颈腺癌恶性化的参考指标。

拟南芥细胞周期调控因子KRP2的原核表达及蛋白纯化

表皮毛是由高等植物地上部组织表皮细胞发育而来的一种特殊结构,细胞周期调控因子在植物表皮毛细胞形态的建成过程中发挥着重要作用。利用原核表达系统,构建pET-28a-KRP2-FLAG融合表达载体,在大肠杆菌中对拟南芥细胞周期依赖激酶抑制因子KRP2进行了体外表达,并利用蛋白标签FLAG和His对目的蛋白进行纯化。结果表明,在大肠杆菌系统中成功对KRP2-FLAG进行了体外表达并得到了纯化的蛋白,蛋白量为0.87mg。这为进一步研究KRP2在表皮毛细胞发育过程中的作用奠定了基础。

西立伐他汀对动脉平滑肌细胞周期调控因子和增殖反应的干预作用

目的 :探讨西立伐他汀对大鼠动脉球囊损伤后平滑肌细胞周期调控因子 p2 7、CDK2、PCNA表达和增殖反应的干预作用。方法 2 4只大鼠随机分为假手术组、手术组、西立伐他汀组 ,8只 /组。后两组行球囊内皮剥脱术 ,西立伐他汀组于术前 3d开始灌胃法给予西立伐他汀 ,0 .1mg/kg·d-1,假手术组和手术组同期给予等量生理盐水灌胃。术后 14d处死所有动物 ,取胸主动脉进行HE染色及p2 7、CDK2、PCNA免疫组织化学染色 ,并进行血管形态学检测。结果假手术组无新生内膜形成 ,手术组内膜增生显著 ,他汀组内膜增生减轻 (I/M :41.5 0± 9.5 4vs14.6 7± 7.36 ,P <0 .0 1)。免疫组织化学染色显示假手术组 p2 7高表达 ,CDK2、PCNA未见表达 ;手术组新生内膜处 p2 7低表达 ,CDK2、PCNA高表达 ;他汀组新生内膜p2 7表达强烈 ,而CDK2、PCNA表达被抑制。结论在活体内 ,他汀可通过影响细胞周期调控因子的表达而抑制动脉损伤后的内膜增殖反应。