洛伐他汀对BRCA1高表达MCF-7乳腺癌细胞周期调控蛋白的影响

目的 探讨胆固醇合成抑制剂洛伐他汀 (lovastatin ,LOV)对BRCA1基因高表达MCF 7乳腺癌细胞株细胞周期调控蛋白表达的影响。方法 将BRCA1基因进行扩增、鉴定后 ,运用脂质体转染MCF 7乳腺癌细胞 ,通过MTT比色法检测细胞增殖功能 ,RT PCR方法检测细胞周期调控蛋白cyclinD1、cyclinD3、CDK2、CDK4的mRNA以及Westernblot检测cy clinD1、CDK4蛋白表达水平。结果 LOV处理后 ,细胞的增殖能力减弱 ,cyclinD1、cyclinD3、CDK2、CDK4mRNA表达及cy clinD1、CDK4蛋白表达均降低 ,其中 ,以BRCA1基因高表达MCF 7乳腺癌细胞株经LOV处理后变化更为显著。结论 BR CA1基因在LOV诱导的细胞周期蛋白抑制中可能起重要作用 ,其高表达增强了MCF

细胞周期调控蛋白在K562细胞的表达及意义

探讨细胞周期调控蛋白CyclinD1,CyclinE ,Cdk2 ,Cdk5在K5 6 2细胞增殖和分化时的不同表达。方法 :本实验采用Western -Blotting -ECL方法分析了苦参碱作用K5 6 2细胞前、后 2 4,48,72h ,CyclinD1,Cy cliE ,Cdk2 ,Cdk5的不同表达。结果 :在增殖的K5 6 2细胞中 ,伴随着DNA合成增加 ,CyclinE和Cdk2保持高表达 ;而在分化的细胞中 ,随着DNA合成减少 ,CyclinD1,Cdk5表达增强。结论 :在细胞从增殖向分化途径逆转时 ,伴随着一些特殊的Cyclin/Cdk表达的改变。

急性肾损伤组织中细胞周期调控蛋白的表达变化及其意义

目的观察细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)、细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶4(CDK4)、p21在不同原因所致急性肾损伤(AKI)组织中的表达变化,并探讨其意义。方法选择行肾穿刺活检术的患者纳入研究,包括AKI患者108例和无器质性肾脏病变的肾功能异常的患者(对照组)39例。AKI患者中,肾毒性AKI 63例(肾毒性AKI组)、缺血性AKI 45例(缺血性AKI组)。取各组肾穿刺活检标本,采用免疫组织法检测Cyclin B1、CDK4、p21蛋白。结果肾毒性AKI组、缺血性AKI组的肾小管细胞和肾间质中p21、Cyclin B1、CDK4蛋白表达积分均高于对照组(P均<0.05)。肾毒性AKI组及缺血性AKI组肾组织中Cyclin B1、CDK4、p21蛋白表达积分相比,P均>0.05。结论 AKI组织中p21、Cyclin B1、CDK4蛋白表达上调,在肾毒性AKI和缺血性AKI中三种细胞周期调控蛋白表达变化的趋势一致;细胞周期调控蛋白的表达与AKI病因无关。

HBV-DNA阳性血清对足细胞增殖、凋亡及其细胞周期调控蛋白mRNA表达的影响

目的:探讨人类乙肝病毒DNA阳性血清对体外培养小鼠足细胞增殖、凋亡及cyclin D1及p27mRNA表达的影响,并探讨其意义。方法:以体外培养的小鼠肾小球足细胞为对象,分别用健康人血清(C组)、携带HBV无肾损害者阳性血清(B组)和乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-GN)者HBV-DNA阳性血清[依据其HBV-DNA含量分为A1组(<103copy/ml)、A2组(104copy/ml)及A3组(106copy/ml)]刺激,采用MTT检测足细胞增殖水平,Annexin V法检测足细胞凋亡,RT-PCR法检测足细胞cyclin D1及p27mRNA的表达水平。结果:人类HBV-DNA阳性血清对小鼠分化足细胞有明显刺激增生作用,与C组比较,A1组对足细胞增殖无明显影响,而A2、A3组及B组血清均能显著刺激足细胞发生增殖,但各组之间比较差异无统计学意义。HBV-DNA阳性血清对小鼠足细胞的凋亡无明显影响。与空白组及C组比较,A1、A2、A3组和B组阳性血清对小鼠足细胞cyclin D1mRNA的表达无明显影响,但可明显下调足细胞p27mRNA的表达,但各组之间差异无统计学意义。结论:人类HBV-DNA阳性血清可刺激小鼠分化足细胞发生增殖,但对细胞中cyclin D1的表达和凋亡没有影响,其刺激增殖作用可能与下调p27mRNA的表达有关。

细胞型局灶节段性肾小球硬化症的病理变化及其细胞周期调控蛋白的表达(英文)

目的 :探讨细胞型局灶节段性肾小球硬化症 (focalsegmentalglomerulosclerosis ,FSGS)的病理学特征及其细胞周期调控蛋白的表达。方法 :收集细胞型FSGS病例 1 7例 ,肾活检标本进行系统的光镜、免疫荧光及电镜观察 ,通过免疫组化及免疫电镜方法 ,检测细胞周期蛋白 (cyclinD1 ,cyclinE ,cyclinA及cyclinB1 ) ,细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂 (cyclindependentkinaseinhibitor CKI ,包括p2 1 ,p2 7及 p5 7)的表达。 结果 :细胞型FSGS以上皮细胞增生肥大伴有毛细血管襻的节段硬化或塌陷为突出特征 ;免疫荧光可见部分病例节段性IgM阳性或阴性 ;超微结构观察显示增生的细胞兼具足细胞及壁层上皮细胞的特征。细胞型FSGS的增生细胞 ,cyclinE、cyclinA、cyclinB1及p2 1表达阳性 ,而cyclinD1、p2 7及p5 7转为阴性。 结论 :细胞型FSGS的增生细胞可能为损伤的足细胞重现幼稚足细胞的表型特征 ,重新进入细胞周期进行增殖而形成细胞增生病变 ;细胞周期蛋白 (cyclinE ,cyclinA ,cyclinB1 )表达增加及CKI(p2 7,p5 7)表达降低与细胞增生病变的细胞周期调控有关。

细胞周期调控蛋白的生物学功能

与细胞周期调控相关的蛋白类物质主要有周期蛋白、周期蛋白依赖性蛋白激醇和周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物,本文就其相互关系及生物学功能进行简要介绍。

细胞周期蛋白激酶抑制调控蛋白p21在HHV-8病毒裂解复制周期的作用

目的研究细胞周期蛋白激酶抑制调控蛋白p21对人类疱疹病毒8型(human herpesvirus 8,HHV-8)病毒裂解复制周期的影响。方法组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂SAHA预处理后,倒置荧光显微镜观察红色荧光蛋白(RFP)阳性的iSLK.219细胞数,实时定量PCR检测TREx-K-Rta BCBL-1细胞中HHV-8病毒相关基因的mRNA水平。脂质体转染p21-siRNA后,免疫印迹法检测iSLK.219和TREx-K-Rta BCBL-1细胞中p21蛋白表达,计算RFP阳性iSLK.219细胞百分率,检测TREx-K-Rta BCBL-1细胞中ORF50和PAN的mRNA水平,CCK-8法和台盼蓝染色观察细胞存活情况。结果SAHA显著增强iSLK.219细胞RFP阳性率、TREx-K-Rta BCBL-1细胞中HHV-8裂解复制周期相关基因ORF50、PAN及K8.1的mRNA水平和p21蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05)。siRNA沉默p21后,iSLK.219细胞RFP阳性率、TREx-K-Rta BCBL-1细胞中HHV-8裂解复制周期相关基因ORF50和PAN mRNA水平显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),且保护SAHA介导的TREx-K-Rta BCBL-1细胞死亡。结论抑制HDAC活性通过调控p21促进HHV-8病毒裂解复制。

流式细胞术对食管癌组织中四种细胞周期调控蛋白的定量检测及意义

目的探讨细胞周期调控蛋白cyclinE、cyclinD1、CDK4和p27在食管癌的表达及其与食管癌的分化和淋巴结转移的关系。方法采用流式细胞术对65例食管鳞状细胞癌组织中cyclinE、cyclinD1、CDK4和p27的表达强弱进行定量检测,结果用荧光指数FI表示。结果cyclinE、cyclinD1和CDK4在低分化型鳞癌的表达量显著高于分化型鳞癌(P值分别为0.0275,0.0001和0.0174);而p27在低分化型鳞癌的表达量显著低于分化型鳞癌(P=0.0042)。cyclinD1与cyclinE,cyclinD1与CDK4之间呈显著正相关;而cyclinD1与p27呈显著负相关。4种基因蛋白的表达与淋巴结转移均无相关性。结论cyclinE、cyclinD1、CDK4和p27的表达与食管癌的分化密切相关;正负性细胞周期调控蛋白表达的失衡是导致癌变的重要原因之一。

洛伐他汀对MCF-7细胞核转录因子和细胞周期调控蛋白表达的影响

目的 探讨胆固醇合成抑制剂洛伐他汀 (LOV)对MCF 7乳腺癌细胞核转录因子 (IκBα)和细胞周期调控蛋白表达的影响。方法 MCF 7乳腺癌细胞经 4 μmol/L、8μmol/L和 16 μmol/L终浓度的LOV处理后 ,流式细胞仪观察细胞周期分布状况 ,Westernblot分析胞浆中IκBα、CDK4、p16、pRb的蛋白表达及核内IκBα的蛋白表达。结果 不同剂量的LOV处理 4 8～ 72h能显著阻滞MCF 7细胞细胞周期于G0 /G1期 ,且具有一定的剂量 效应和时间依赖关系 ;同剂量的LOV能显著下调胞浆内IκBα、CDK4和pRb蛋白表达 ,上调核内IκBα蛋白表达 ,但对p16蛋白表达无明显影响。结论 洛伐他汀可能通过影响IκBα和细胞周期调控蛋白的表达 ,诱导MCF 7细胞周期受阻于G0 /G1期。

细胞周期调控蛋白在人类肾小球肾炎中肾小管及间质细胞的表达及其意义

目的 观察人类肾小球肾炎时肾小管-间质细胞的细胞周期调控蛋白的表达情况。方法 采用免疫组织化学技术,检测19例肾小球肾炎患者肾穿刺标本中细胞周期正性调控蛋白周期素D1(cyclin D1)、周期素A(cyclin A)、细胞周期负性调控蛋白p21CIPI(p21)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果 在人类肾小球肾炎中肾小管上皮细胞及间质细胞均见cyclin D1、cyclin A及p21的表达,并与PCNA呈正相关。小管的阳性表达以间质病变Ⅰ级和Ⅱ级组显著,间质阳性细胞数与小管间质病变程度及患者尿NAG活性呈显著正相关。结论 人类肾小球肾炎时,细胞周期调控蛋白参与肾小管上皮细胞及间质细胞的增殖,参与肾间质纤维化的发展。

蛋白激酶C信号通路对温石棉介导的肺成纤维细胞细胞周期调控蛋白表达的影响

目的 研究细胞周期调控蛋白在温石棉所致人胚肺成纤维细胞 (HEPF)增殖中的表达和蛋白激酶C(PKC)对细胞周期调控蛋白的影响。方法 利用体外细胞培养技术 ,用流式细胞仪测定温石棉介导的HEPF的细胞周期调控蛋白的表达 ,同时设立阳性对照 (标准SiO2 )、阴性对照 (标准TiO2 )、正常对照 (未经粉尘处理的兔肺泡巨噬细胞 )和空白对照。结果 温石棉组细胞周期蛋白 (cyclin)CyclinD1、CyclinE、增殖细胞核抗原 (PCNA)和CyclinA表达阳性率分别为 19.0 %、2 2 .8%、79.7%和 6 5 .1% ,均较各对照组低 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,且CyclinD1和CyclinE表达阳性率低于PCNA和CyclinA ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;而CyclinB1和p34cdc2激酶的阳性表达率较空白对照和正常对照略高。当PKC信号通路被阻断后 ,PCNA在温石棉组表达的阳性率明显降低 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,p34cdc2激酶的阳性表达率改变不明显。结论 这几种蛋白可能均参与了温石棉所致HEPF增殖 。

细胞周期调控蛋白在乙型肝炎病毒相关性IgA肾病与原发性IgA肾病肾组织表达对比研究

目的探讨细胞周期调控蛋白cyclinD1、p27及p57在乙型肝炎病毒相关性IgA肾病（HBV—IgAN）与原发性IgA肾病（plgAN）中肾组织表达变化及意义。方法以2008年1月至2010年7月在南京军区福州总医院并经肾穿刺活检病理诊断为HBV—IgAN患者29例、pIgAN患者32例为研究对象。采用免疫组化方法检测29例HBV—IgAN和32例plgAN患者肾活检组织中cyclinD1、p27及p57的表达情况，分析其与临床病理指标的关系。8例正常肾组织为对照。结果在正常肾组织的肾小球中cyclinD1呈微弱表达或不表达，p27及p57呈高表达。。随着病变加重，肾小球中cyclinD1逐渐上调，p27表达逐渐下调，两种疾病之间差异无统计学意义；与正常组相比，p57表达在plgAN11级组无明显变化，而HBV—IgAN11级组明显下调（P〈0．01），plgANBI～1V级和HBV—IgANm～IV级组表达最弱，差异无统计学意义。肾小球发生球囊粘连、硬化时cyclinD1表达上调，p27和p57表达均下调；伴新月体者肾小球p57的表达明显下调，而p27和cyclinD1无明显变化。肾小球p57表达在尿蛋白〉1．0g／24h组显著低于≤1．0g/24h组（P〈0．05），两种疾病之间差异无统计学意义。结论HBV—IgAN与plgAN中cyclinD1上调和p27下调促进肾小球病变的进展。足细胞p57表达下调在HBV—IgAN出现较早，促进蛋白尿的形成及新月体的形成。

细胞周期调控蛋白与肾脏疾病

无论是生理情况下或病理情况下,细胞都在进行着分裂、增殖、肥大或凋亡与坏死,而这一系列细胞分裂增殖活动受到细胞周期调控蛋白的调节。本文主要就细胞周期调控蛋白与肾脏疾病之间的关系和相关进展作一综述。

细胞周期相关调控蛋白在胰腺癌中的表达及其意义

目的 了解细胞周期相关调控蛋白在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌细胞增殖的影响。方法 应用高压锅抗原修复免疫组化ABC法 ,检测 47例胰腺癌标本的细胞周期相关调控蛋白 (p5 3、p16、p2 1及Rb蛋白 )的表达 ,并用一种新的ki s5抗体检测胰腺癌细胞ki 6 7增殖指数。结果 p5 3、p16、p2 1及Rb蛋白阳性表达均位于细胞核 ,胰腺癌中 p5 3、p16、p2 1和Rb蛋白表达阳性率分别为 5 5 % (2 6 /47)、5 3 % (2 5 /47)、6 4% (35 /47)和 98% (46 /47) ;p16、p2 1及Rb蛋白表达与ki 6 7增殖指数呈负相关 ;p5 3蛋白表达与p2 1蛋白表达无关。 结论 大部分胰腺癌的异常增殖可能与 p16、p2 1蛋白阴性表达有关 ,而由Rb蛋白阴性表达导致的胰腺癌细胞的异常增殖少见。p5 3蛋白表达与 p2

实时定量测定多发性骨髓瘤中细胞周期调控蛋白D1 mRNA的表达

目的研究多发性骨髓瘤（MM）患者细胞周期调控蛋白D1（CyclinD1）不同水平的表达，探讨CyclinD1在多发性骨髓瘤中的作用机制和临床意义。方法采用荧光实时定量RT．PCR方法检测32例多发性骨髓瘤患者CyclinD1 mRNA水平表达，其中初发未治患者19例，难治复发患者13例，良性血液病对照组20例。结果多发性骨髓瘤组CyclinD1 mRNA表达明显高于对照组，难治复发组CyclinD1 mRNA表达水平明显高于初发未治组。结论CyclinD1与多发性骨髓瘤的发病有一定的关系，CyclinD1mRNA水平可作为评估疾病预后的指标之一及靶向治疗的靶点。

细胞周期调控相关蛋白p14arf,p16ink4a和p53在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的探讨细胞周期调控相关蛋白p14arf,p16ink4a和p53在子宫内膜癌(EC)组织中表达情况。方法采用免疫组化S-P法,检测42例EC,36例正常子宫内膜组组织中p14arf、p16ink4a及p53的表达程度,并对比其差异,分析它们之间的关系。结果p14arf阳性表达率在子宫内膜癌与正常内膜组织中分别为73.81%(31/42)、100%(36/36),两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。子宫内膜癌中p14arf表达缺失的比例高于正常子宫内膜;p14arf表达水平与病理分级、临床分期相关;与组织学类型和肌层浸润深度、淋巴结转移无关。p16阳性表达率在子宫内膜癌与正常内膜组织中分别为57.14%(24/42)、100%(36/36)、两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。子宫内膜癌中p16ink4a表达缺失的比例高于正常子宫内膜;p16ink4a表达水平与临床分期、病理分级和淋巴结转移相关;与组织学类型和肌层浸润深度无关。p53阳性表达率在子宫内膜癌与正常增生内膜组织中分别为47.62%(20/42)、22.22%(8/36),两组比较差异有统计学意义(P<0.05),子宫内膜癌中p53阳性表达的比例高于正常子宫内膜;p53表达与临床分期、病理分级、盆腔淋巴结转移和肌层浸润深度相关,与组织学类型无关。在子宫内膜癌组织中p14arf与p53表达密切相关(P<0.01)。结论p14arf、p16ink4a和p53异常表达提示细胞的过度增殖和增殖-凋亡相关基因的表达失衡在子宫内膜恶性转化过程中起重要作用。其异常表达可作为子宫内膜增生性疾病不同发展阶段的诊断及预测其生物学行为的参考指标。

葛根素对血管平滑肌细胞周期相关蛋白表达的影响

目的:研究葛根素对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导增殖的血管平滑肌细胞(vascular smooth musclecell,VSMC)细胞周期的影响及其相关机制。方法:建立oxLDL诱导的兔VSMC增殖模型,与不同浓度的葛根素共同培养48h后,用流式细胞仪检测VSMC细胞周期变化及细胞周期调控相关蛋白E(cyclin E)和p27的表达。结果:葛根素组G0/G1期细胞数明显增多,S期细胞数明显减少,与LDL组相比差异显著(P<0.01);cyclin E表达量随葛根素剂量增加而减少,p27蛋白表达量则明显增加。结论:葛根素抑制VSMC增殖,其机制与下调cyclin E、上调p27蛋白表达有关。

软肝冲剂对肝硬化大鼠p^(21)及细胞周期调控的影响

目的:研究软肝冲剂对CCl_4肝硬化大鼠p^(21)mRNA表达及细胞周期各时相DNA含量的影响,从mRNA、DNA水平探讨软肝冲剂阻止肝硬化的作用机理。方法:采用RT-PCR及流式细胞计数仪分别检测CCl_4肝硬化大鼠P^(21)mRNA表达、DNA含量。结果:软肝冲剂能降低CCl_4肝硬化大鼠p^(21)mRNA表达,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.01),大剂量组的疗效与小剂量组比较无明显差异(P>0.05)。正常肝组织p^(21)mRNA呈相当低水平表达,其表达相对值为(0.17±0.06)U。定量DNA图像分析发现模型组中处于G1期的细胞数要明显多于其他各组(P<0.01),软肝冲剂大剂量组中处于G1期的细胞数要明显少于软肝冲剂小剂量组(P<0.01)。结论:软肝冲剂能调节p^(21)基因表达,调节细胞周期,促进肝细胞再生,抑制肝纤维化、肝硬化的形成。