丙型肝炎病毒核心蛋白上调细胞周期调节蛋白Weel基封表达研究

目的：了解丙型肝炎病毒核心蛋白和细胞周期调节蛋白Weel基因表达的关系，研究HCV核心蛋白在HCV致病的分子生物学机制中的作用．方法：应用聚合酶链反应(PCR)扩增Weel基因启动子，命名为Weep．以T-A克隆法，将Weep基因片段连入载体pGEM-T．将获得的质粒pT-Weep，与报告质粒pCAT3-basic分别用KpnI和XhoI双酶切后构建Weel启动子报告载体pCAT3-Weep，分别以重组报告载体pCAT3-Weep和pcDNA3．1(-)-core瞬时转染HepG2细胞，以转染pCAT3basic的HepG2细胞为阴性对照，48h后收获细胞．应用酶联免疫黏附方法(ELISA)检测细胞中氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性，以了解HCV核心蛋白对Weel基因启动子的反式激活作用．结果：构建的表达载体pcDNA3．1(-)-core和报告载体pCAT3-Weep经过序列分析和酶切鉴定正确．pCAT3-Weep和pcDNA3．1(-)-core瞬时转染的HepG2细胞的CAT表达活性是CAT3空载体的3．4倍，pCAT3-Weep的2．3倍．结论：丙型肝炎病毒核心蛋白可反式激活Weel基因启动子，进而上调细胞周期调节基因Weel的表达。

多球壳菌素诱导系膜细胞凋亡及对细胞周期调节蛋白基因表达谱的影响

目的观察多球壳菌素(ISP-1)对体外培养的正常大鼠肾小球系膜细胞(GMC)的促凋亡作用,研究ISP-1对细胞周期调节蛋白基因表达谱和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。方法体外培养大鼠GMC,加入100μmol/L ISP-1干预,分别于作用6、12、24、48 h后以流式细胞术检测GMC凋亡,Hoechst33258/PI染色观察凋亡细胞形态变化,琼脂糖DNA凝胶电泳法观察凋亡细胞核小体DNA的断裂现象,并通过SuperArray Real-Time PCR细胞周期基因芯片测定ISP-1对细胞周期调节蛋白基因表达谱的影响,Western blotting法观察Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果ISP-1可显著诱导GMC凋亡,并呈一定的时间依赖性,作用48 h后细胞凋亡最显著,Hoechst33258/PI荧光染色法可见亮蓝色的凋亡小体,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡梯度的出现;PCR细胞周期基因芯片检测结果发现ISP-1可显著上调GMC Rad51、Atm、Brcal、Caspase3、cyclinA2、cyclinC、chek1、cyclinB1、cyclinB2、cyclinD2、cyclinF、Cdc25a和P27等一些与DNA损伤、凋亡和细胞周期调节蛋白相关的基因的表达;Western blotting发现ISP-1可显著上调GMC Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达。结论ISP-1可时间依赖性诱导体外培养的正常大鼠GMC凋亡,其机制与影响细胞周期调节蛋白及凋亡相关基因的表达有关。

庆大霉素诱导肾小管上皮细胞凋亡及细胞周期调节蛋白表达

目的:观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的诱导作用;研究在细胞凋亡过程中细胞周期调节蛋白cy-clin E、CDK_2和p27^(Kipl)蛋白表达的改变,并探讨细胞凋亡与细胞周期调节蛋白表达之间的关系。方法:0.2～3.2 mg/ml的庆大霉素作用于体外培养的猪肾近端小管上皮细胞株(LLC-PK1细胞)24～96 h,MTT法测定庆大霉素对细胞增殖的抑制率,琼脂糖凝胶电泳法观察凋亡细胞DNA条带,流式细胞术测定细胞凋亡率(AI)和细胞增殖动力学,Western印迹分析检测培养96 h时细胞内cyclin E、CDK_2和p27^(Kipl)的蛋白表达。结果:庆大霉素对LLC-PK1细胞增殖有抑制作用,庆大霉素具诱导细胞凋亡的作用,AI呈药物浓度和作用时间依赖性;庆大霉素致细胞周期停滞于G_1期。随着庆大霉素浓度的增加,细胞内cy-clin E和 CDK_2蛋白表达逐渐下调,而p27^(Kipl)蛋白表达则逐渐上调。结论:庆大霉素诱导的LLC-PK1细胞凋亡与细胞周期调节蛋白cyclin E和 CDK_2表达下调以及p27^(Kipl)表达上调有关。

缺血性急性肾衰大鼠肾组织细胞周期调节蛋白表达的变化

目的 :探讨缺血性急性肾功能衰竭大鼠肾组织细胞周期调节蛋白cyclinE和CDK 2的表达及与肾小管上皮细胞增生的关系。 方法 :建立缺血性急性肾功能衰竭大鼠模型 ,分别在第 0、2、7、10、14天处死。以生化法测定血清肌酐 (SCr)值 ,以免疫组织化学染色技术观察肾组织内细胞增生程度以及cyclinE和CDK 2的表达和分布情况。 结果 :大鼠SCr值在缺血再灌注第 2天开始显著增高 ,第 7天最高 ,第 10天开始降低 ,第 14天基本降至正常。对照组肾组织细胞增生指数 (PI)为 0 1% ,肾缺血后第 2、7、10和 14天PI分别为 14 8%、30 9%、2 3 6 %和12 4%。cyclinE和CDK 2蛋白在肾组织内分布于皮质肾小管 ,少数在间质 ,且肾缺血后第 2天表达弱阳性 (+) ,第7天表达强阳性 (+++) ,第 10天表达阳性 (++) ,第 14天表达弱阳性 (+) ;肾小球内基本无表达。 结论 :缺血性急性肾功能衰竭大鼠肾组织cyclinE/CDK 2蛋白表达增强与肾小管上皮细胞增生程度相一致。表明cyclinE和CDK 2是调控缺血性急性肾衰大鼠肾小管上皮细胞增生的关键蛋白。

益肾汤对糖尿病大鼠肾脏细胞周期调节蛋白p27表达的影响

目的观察中药复方益肾汤对糖尿病大鼠肾脏细胞周期调节蛋白p27表达的影响。方法将41只SD大鼠随机分为正常对照组与糖尿病组。后者以链脲佐菌素腹腔内注射诱导糖尿病大鼠模型,成模大鼠按干预方法不同分为:益肾汤、缬沙坦、糖尿病未治疗3组。干预8周,观察大鼠体重、肾重、血糖、24 h尿总蛋白、24 h尿白蛋白、尿素氮、肾组织p27表达等指标。结果与糖尿病未治疗组比较,益肾汤及缬沙坦组肾组织p27表达显著减少,尿白蛋白含量降低;肾组织p27的表达量与24 h尿白蛋白浓度呈显著正相关。结论益肾汤防治糖尿病肾病的作用与降低肾脏p27表达有关。

补肾促卵颗粒对体外受精-胚胎移植技术周期颗粒细胞家族特异性受体α-1和细胞周期调节蛋白B1表达的影响

制约妊娠率的研究之一就是卵母细胞质量的提高。胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）家族特异性受体α-1（GFRα-1）表达于在小鼠、猪等哺乳动物卵母细胞和颗粒细胞[1]。Aravin-dakshan等[2]认为卵母细胞通过间隙连接的建立通过受体GFR-1调控着GDNF在颗粒细胞上的表达。

系膜细胞增殖与细胞周期调节蛋白

系膜细胞增殖是多种肾小球疾病的共同特征。包括免疫介导的肾小球疾病如IgA肾病、膜增殖性”肾小球肾炎、狼疮肾炎；代谢性肾病如糖尿病肾病；血流动力学异常介导的肾病如5／6肾切除等。继发于系膜细胞增殖的细胞外基质（ECM）增多和肾小球滤过功能下降是慢性肾脏病（CKD）进展的重要原因。因此。调控系膜细胞增殖具有重要的意．义。针对不同类型的损伤，肾脏的各种固有细胞可表现为增殖、肥大、凋亡、分化等。而不同细胞的不同反应决定了这种肾小球损伤的组织病理学和临床表现特征。这些细胞反应乍看上去毫不相关．实际上．细胞的最终命运是在细胞周期水平由共同的调控者——细胞周期调节蛋白决定的。

泛素-蛋白酶体途径介导的细胞周期调节蛋白的水解

泛素-蛋白酶体途径高选择性地降解细胞在应激和非应激条件下产生的异常蛋白质,对维持细胞正常生理功能具有十分重要的意义。在蛋白质降解过程中泛素的重要作用越来越得到研究者的重视。许多研究表明泛素-蛋白酶体途径介导的蛋白水解在真核细胞 G_1→S期过程中起着至关重要的作用。本文就细胞周期 G_1、S 期中由泛素介导的几种重要的细胞周期调节蛋白的水解作一综述。

细胞周期调节蛋白与腹膜纤维化

在腹膜透析的过程中,腹膜间皮细胞（human peritoneal mesothelial cell,HPMC）在高糖刺激下出现细胞肥大、胞核增多、细胞分裂停滞等改变,是进展至腹膜纤维化（peritoneal fibrosis,PF）的病变基础[1,2]。一般认为,腹膜纤维化的形成有腹膜上皮间质转分化（epithelial-to-mesenchymal transition,EMT）、

细胞周期调节蛋白与肾脏疾病

细胞周期调控是肾脏疾病发病机制研究的新领域。细胞周期调节蛋白调控细胞的生长方式 。

环氧化酶2、细胞周期调节蛋白依耐性激酶CDK2在胃癌中的表达

目的探讨环氧化酶2(COX-2)、细胞周期调节蛋白依耐性激酶(CDK2)在胃癌中表达及与胃癌侵袭转移的相关性。方法采用SP免疫组化技术检测90例胃癌组织、20例正常胃黏膜COX-2、CDK2指标。结果胃癌组织中COX-2、CDK2的表达明显高于正常对照组(P<0.05),高表达与胃癌淋巴结转移、浸润深度、TNM分期显著相关(P<O.05),COX-2与CDK2呈显著正相关性。结论COX-2、CDK2与胃癌的发生、侵袭、转移有关。在诊断和治疗胃癌中COX-2和CDK2可能是两个有重要作用的指标。

细胞周期调节蛋白P16在子宫内膜癌中的表达及意义

目的研究细胞周期调节蛋白P16在子宫内膜癌中的表达,探讨子宫内膜癌的病因及发病机制。方法选取子宫内膜癌组织(组织学分级G1组16例、G2组27例、G3组8例),子宫内膜非典型增生组织21例,正常子宫内膜组织10例。用免疫组化S-P法检测P16在子宫内膜癌组、子宫内膜非典型增生组和正常子宫内膜组中的表达。结果 P16在子宫内膜癌组和子宫内膜非典型增生组的表达明显低于正常子宫内膜组(P<0.01),在子宫内膜癌中G2、G3组的表达低于G1组,差异有显著意义(P<0.05,P<0.01)。结论 P16的低表达或缺失,失去对细胞周期的调节作用,导致细胞增殖过度,可能是子宫内膜癌发病机制之一。

细胞周期调节蛋白在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达及其与自然流产发生的相关性研究

目的：探讨细胞周期调节蛋白在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达情况并研究其与自然流产发生的相关性。方法：选取符合研究要求的人工流产女性与自然流产女性各35例，分为人工流产组与自然流产组。利用Western blotting与免疫组织化学法分别检测两组患者绒毛与蜕膜组织中细胞周期调节蛋白的表达情况。结果：人工流产组绒毛与蜕膜组织的细胞周期调节蛋白的表达量为75%~85%，自然流产组的表达量为45%~55%。人工流产组与自然流产组比较有统计学意义（P〈0.05）。结论：早期自然流产可能与细胞周期调节蛋白在绒毛与蜕膜组织中的含量相关。

细胞周期调节蛋白D_1表达与宫颈癌关系的研究

目的 :观察细胞周围调节蛋白 (Cyclin)D1 在宫颈癌组织中的表达并探讨其意义。方法 :应用SP免疫组化法检测 11例正常宫颈上皮 ,9例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)和 4 8例宫颈癌石蜡包埋组织切片中CyclinD1 基因蛋白表达情况。结果 :正常宫颈上皮、CIN和宫颈癌组织 ,CyclinD1 表达的阳性率分别为 9 0 9%、33 33%、4 1 6 7% ;从正常宫颈到CIN到宫颈癌组织中CyclinD1 表达呈现逐渐升高的趋势。宫颈癌组织CyclinD1 表达明显高于正常宫颈上皮 (P <0 0 5) ,CIN和正常宫颈上皮比较 ,CyclinD1 表达无显著性差异 (P >0 0 5)。CyclinD1 表达与宫颈癌的临床分期、组织类型、分化程度以及淋巴结转移均无显著相关性 (P >0 0 5)。结论 :CyclinD1

喉鳞状细胞癌患者视网膜母细胞瘤蛋白和细胞周期调节蛋白D1异常表达

目的:探讨喉鳞状细胞癌(LSCC)患者视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)和细胞周期调节蛋白D1(Cyclin D1)的异常表达及其相关性。方法:选择36例喉部疾病手术患者,包括LSCC(LSCC组)、声带息肉(息肉组)和癌前病变(癌前组)各12例,各组均于手术后取病变组织,采用Western-blotting检测pRb和Cyclin D1蛋白表达水平,统计学分析各组两指标差异及相关性。结果:与息肉组比较,癌前组pRb表达水平降低(P<0.01),Cyclin D1表达水平升高(P<0.01);与癌前组比较,LSCC组pRb水平更低(P<0.01),Cyclin D1水平更高(P<0.01)。三组pRb与Cyclin D1蛋白水平均呈显著负相关(r分别为-0.94、-0.83和-0.92,P均<0.01)。结论:LSCC的发生和发展与pRb表达降低和Cyclin D1表达增加有关。

缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏细胞周期调节蛋白p27表达的影响

目的探讨缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏细胞周期调节蛋白p27表达的影响。方法将大鼠分为正常与糖尿病两组。后者以链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,成模大鼠按干预方法不同分为:缬沙坦、糖尿病未治疗两组。干预8周,观察大鼠血糖、肾功能、肾组织p27表达等指标。结果与糖尿病未干预组比较,缬沙坦可显著减少肾组织p27表达、降低尿白蛋白含量;p27的表达量与尿白蛋白浓度呈显著正相关。结论缬沙坦防治糖尿病肾病作用与降低肾脏p27的表达有关。

细胞周期调节蛋白Skp2,p27在妇科恶性肿瘤中的研究进展

妇科恶性肿瘤是严重威胁妇女健康的疾病。虽然几十年来对妇科恶性肿瘤的诊断和治疗已经取得了巨大的进展,但是5年生存率仍然很低。如何早期诊断早期治疗是长久以来困扰临床的问题。随着近年来细胞周期调节基因相继被发现和克隆,以及细胞周期调节基因产物在其他恶性肿瘤中的诊断价值逐渐被认识和阐述,为妇科恶性肿瘤的早期诊断和治疗迎来了新的希望。本文就近年来对细胞周期调节蛋白p27和Skp2与妇科恶性肿瘤的相关研究作一综述。

细胞周期调节蛋白与肾脏疾病关系的研究进展

各种肾脏疾病有不同特征和形式的细胞增生,而近年研究表明各种生理病理因素最终的共同途径将作用于细胞周期,通过对参与细胞周期特异性调节蛋白的影响决定其结局(肥大、凋亡、增殖或分化)。探讨其在各种肾脏疾病病理过程中的作用,对此深入研究可为肾脏疾病的防治提供新的启示。

肾小管上皮细胞增生和肥大与细胞周期调节蛋白的关系

肾小管上皮细胞增生和肥大过程中细胞周期调节蛋白相应发生变化。本文综述细胞周期调节蛋白的分类、功能以及肾小管上皮细胞增生和肥大时细胞周期调节蛋白的改变。

肝脏再生、肝癌和细胞周期调节蛋白

恶性细胞的生长由复杂的遗传和非遗传因素调节。肝细胞癌(HCC)的发生通常有慢性肝病的基础,如肝硬化和慢性肝炎。伴随着肝脏的损伤存在着持续的肝脏再生,这就增加了调节细胞周期基因紊乱的机会,从而导致HCC。乙肝病毒(HBV)