细胞外信号调节激酶-1、细胞周期蛋白D1表达与儿童急性白血病关系研究

目的探讨细胞外信号调节激酶_1(ERK1)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达与儿童急性白血病(AL)的关系。方法50例儿童AL(AL组)和26例AL完全缓解(AL_CR组)患儿为病例组,23例非肿瘤性疾病患儿为对照组,采用超敏SP免疫组织化学法,检测各组骨髓细胞中ERK1、cyclinD1的表达情况。结果AL组ERK1、cyclinD1阳性率分别为68.00%和56.00%,明显高于AL_CR组(3.85%,3.85%)和对照组(0,0)(P<0.01);高危AL患儿中阳性率分别为90.91%、86.36%,明显高于标危AL患儿(P<0.01);16例AL患儿化疗前ERK1、cyclinD1阳性率分别为75.00%、68.75%,化疗缓解后阳性率均为0(P<0.01);AL组中ERK1、cyclinD1表达相同(χ2=2.5,P>0.05)。结论AL患儿ERK1、cyclinD1表达率较高,可作为近期疗效的观察指标;ERK1与cyclinD1过度表达相同,可能在AL发生发展过程中有协同作用。

补肾促卵颗粒对体外受精-胚胎移植技术周期颗粒细胞家族特异性受体α-1和细胞周期调节蛋白B1表达的影响

制约妊娠率的研究之一就是卵母细胞质量的提高。胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）家族特异性受体α-1（GFRα-1）表达于在小鼠、猪等哺乳动物卵母细胞和颗粒细胞[1]。Aravin-dakshan等[2]认为卵母细胞通过间隙连接的建立通过受体GFR-1调控着GDNF在颗粒细胞上的表达。

泛素-蛋白酶体途径介导的细胞周期调节蛋白的水解

泛素-蛋白酶体途径高选择性地降解细胞在应激和非应激条件下产生的异常蛋白质,对维持细胞正常生理功能具有十分重要的意义。在蛋白质降解过程中泛素的重要作用越来越得到研究者的重视。许多研究表明泛素-蛋白酶体途径介导的蛋白水解在真核细胞 G_1→S期过程中起着至关重要的作用。本文就细胞周期 G_1、S 期中由泛素介导的几种重要的细胞周期调节蛋白的水解作一综述。

14-3-3蛋白在细胞周期调节中的作用

14-3-3是一个在真核细胞中广泛表达、功能复杂的蛋白家族,主要通过磷酸化依赖的方式与靶蛋白结合,从而发挥其调控作用。细胞周期的调节对维持基因组的稳定性至关重要。近年来的研究发现,14-3-3蛋白可以和越来越多的细胞周期调节蛋白相互作用,调节G2/M期和G1/S期转换,从而对细胞周期起调控作用。简要综述了14-3-3蛋白在细胞周期调节中的作用。

在食管癌细胞增殖过程中蛋白酶激活受体-2(PAR-2)对细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的调控机制

目的:探讨在食管癌细胞增殖过程中蛋白酶激活受体-2(PAR-2)影响细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的机制。方法:方法:使用食管癌EC109细胞株,实验分为:空白对照组、PAR-2激动组(加入激动剂SLIGKV)、PAR-2反激动组(加入反激动剂VKGILS)、PAR-2 shRNA组(PAR-2shRNA成功转染)和MAPK抑制组(加入阻滞剂PD98059);取对数生长期的细胞,以6×104 cells/ml的密度接种于培养瓶中,置于孵育箱中培养24 h后使用PBS清洗3次,更换为无血清的1640培养基培养24 h,之后各实验组按实验设计分别加入所需试剂,每组设置3个复孔,于孵育箱中继续培养24 h,采用RT-PCR法检测PAR-2、ERK1、CyclinD1的mRNA的表达水平;采用Western blot法检测PAR-2、ERK1、p-ERK1、CyclinD1的蛋白表达水平。结果:与空白对照组相比,PAR-2激动组PAR-2mRNA、ERK1 mRNA、和CyclinD1 mRN表达明显升高(P<0.05),PAR-2、p-ERK1和CyclinD1蛋白表达升高(P<0.05);PAR-2 shRNA组PAR-2mRNA、ERK1 mRNA和CyclinD1 mRNA表达降低(P<0.05),PAR-2、p-ERK1和CyclinD1蛋白表达降低(P<0.05);MAPK抑制组ERK1 mRNA和CyclinD1 mRNA表达明显降低(P<0.05),p-ERK1和CyclinD1表达降低(P<0.05)。结论:PAR-2可通过MAPK通路调节CyclinD1的表达从而促进食管癌细胞EC109的增殖。

HO-1活性改变对肝癌细胞周期调控因子CKS1和Cyclin D的影响

目的探讨血红素加氧酶(HO)-1活性改变对肝癌细胞株Hep G2细胞周期蛋白(Cyclin)依赖性激酶调节亚基(CKS)1和Cyclin D的影响。方法采用靶向抑制HO-1的小分子RNA(siRNA)沉默细胞癌Hep G2细胞HO-1基因的表达,应用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)测定Hep G2细胞的增殖情况,应用RT-PCR法测定HO-1、CKS1和Cyclin D mRNA,应用Western印迹检测HO-1、CKS1和Cyclin D蛋白表达水平。结果 MTT实验结果显示,HO-1 siRNA转染组细胞转染后24 h和48 h的吸光度较空白对照组显著降低(P<0.01),HO-1 siRNA转染组细胞转染后48 h的HO-1、CKS1和Cyclin D mRNA水平较空白对照组显著降低(P<0.01),HO-1 siRNA转染组细胞转染后48 h的HO-1、CKS1和Cyclin D蛋白水平较空白对照组显著降低(P<0.01)。结论 HO-1的活性降低可抑制肝癌Hep G2细胞的增殖,其调控作用可能通过降低Hep G2细胞CKS1和Cyclin D表达而实现。

靶向着丝粒蛋白F的siRNA调节肝癌细胞增殖的实验研究

目的研究靶向着丝粒蛋白F(CENPF)的siRNA调节肝癌细胞增殖的作用及机制。方法培养肝癌细胞株中SMMC-7721、HepG2、BEL-7402及正常肝细胞株HL-7702,检测细胞中CENPF的表达水平;HepG2细胞进行分组处理,转染阴性对照(NC)siRNA或CENPF siRNA,给予对照溶剂二甲基亚砜(DMSO)或ERK1/2激动剂表皮生长因子(EGF),检测细胞增殖A490水平及细胞中CENPF、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)的表达水平。结果肝癌细胞株中SMMC-7721、HepG2、BEL-7402中CENPF的表达水平高于正常肝细胞株HL-7702,差异有统计学意义(P<0.05);HepG2细胞中CENPF的表达水平最高;转染siRNA后,si-CENPF组HepG2细胞的A490水平及CENPF、CyclinD1、Bcl-2、p-ERK1/2的表达水平低于si-NC组,差异有统计学意义(P<0.05);转染siRNA的同时给予ERK1/2激动剂EGF,EGF+si-CENPF组HepG2细胞的A490水平及CENPF、CyclinD1、Bcl-2、p-ERK1/2的表达水平均高于DMSO+si-CENPF组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论靶向CENPF的siRNA可显著抑制肝癌细胞的增殖,相关的分子机制可能是抑制ERK1/2的磷酸化并抑制下游CyclinD1、Bcl-2的表达。

胃肠道间质瘤组织中Ki-67、CyclinD1、ICAM-1、Livin及MMP-9蛋白表达与危险度分级

目的:探讨胃肠道间质瘤组织中Ki-67、细胞周期素D1(CyclinD1)、细胞间黏附分子(ICAM-1)、凋亡抑制蛋白(Livin)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达与Fletcher分级的相关性。方法:应用免疫组化SP法检测67例胃肠道间质瘤存档蜡块标本中各蛋白的表达情况,单因素和多因素分析各蛋白表达与Fletcher分级的关系。结果:单因素分析结果显示,不同危险度分组中,Ki-67、CyclinD1、Livin及MMP-9蛋白表达的差异有统计学意义(P均<0.05)。有序Logistic回归多因素分析结果显示,CyclinD1和MMP-9对Fletcher分级影响显著,是Fletcher分级的独立影响因子,CyclinD1和MMP-9的优势比分别为3.51和3.29。结论:CyclinD1、MMP-9蛋白在胃肠道间质瘤组织中的表达与Fletcher分级具有明确的相关性,可作为判定恶性程度的参照因素。

p53、Ki67、CK5/6、AR在三阴性乳腺癌组织中表达情况及意义

目的:分析肿瘤蛋白p53(tumor protein p53,p53)、细胞周期调节蛋白-67(Cell cycle regulatory protein-67,Ki67)、细胞角蛋白5/6(cytokeratin5/6,CK5/6)、雄激素受体(androgen receptor,AR)在三阴性乳腺癌组织中表达情况及意义。方法:选取2020年1月—2022年12月我院80例三阴性乳腺癌患者,采集全部患者切除后的癌组织及临近癌症超过3cm左右的癌旁组织,以免疫组化法检测癌组织及癌旁组织内p53、Ki67、CK5/6、AR水平,并分析三阴性乳腺癌组织中p53、Ki67、CK5/6、AR表达情况。结果:癌组织内的p53阳性检出率为67.50%(54/80)、Ki67阳性检出率为77.50%(62/80)、CK5/6阳性检出率为73.75%(59/80)、AR阳性检出率为27.50%(22/80),较癌旁组织中的7.50%(6/80)、6.25%(5/80)、5.00%(4/80)、3.75%(3/80)高(P<0.05)。p53、Ki67、CK5/6、AR阳性与三阴性乳腺癌患者的有无淋巴结转移、临床分期、组织学分级存在明显关联性(P<0.05)。结论:三阴性乳腺癌组织中的p53、Ki67、CK5/6、AR表达较高,且乳腺组织中的p53、Ki67、CK5/6、AR表达与有无淋巴结转移、临床分期、组织学分级具有明显相关性。

视神经损伤后脑衰反应调节蛋白-2表达及其磷酸化修饰的变化及意义

背景 脑衰反应调节蛋白-2（CRMP-2）具有促进中枢神经轴突生长的作用,但中枢神经损伤后在细胞周期素依赖蛋白激酶5（CDK5）诱导下CRMP-2会发生过度磷酸化修饰,从而导致生长锥塌陷,阻碍神经系统的修复.视神经作为一种特殊的中枢神经组织,其损伤后是否发生CRMP-2表达的变化和磷酸化修饰鲜见研究报道. 目的 探讨视神经钳夹伤小鼠模型视神经组织中CRMP-2表达及其磷酸化修饰水平的动态变化及意义.方法 选取8～9周龄健康BALB/c小鼠48只,雌雄不限.采用随机数字表法将小鼠随机分为假手术组和损伤后3、7、14 d组,每组12只.各损伤组小鼠右眼术中暴露视神经,用小号动脉夹于球后2 mm处夹持视神经10s,假手术组小鼠手术操作同各损伤组,但不钳夹视神经.分别于术后3、7、14 d获取小鼠视神经组织,采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠视神经组织中CRMP-2 mRNA的相对表达量;采用Western blot法检测各组小鼠视神经组织中CRMP-2蛋白、磷酸化CRMP-2（p-CRMP-2）及CDK5的表达变化,检测结果进行组间比较.结果 假手术组及损伤后3、7、14d组小鼠视神经组织中CRMP-2 mRNA及蛋白相对表达量的总体比较差异均无统计学意义（CRMP-2 mRNA：F=2.971,P=0.097;CRMP4蛋白：F=1.202,P=0.370）.假手术组及损伤后3、7、14 d组小鼠视神经组织中p-CRMP-2蛋白的相对表达量分别为0.001±0.000、0.064±0.003、0.136±0.005和0.346±0.012,CDK5蛋白的相对表达量分别为0.440±0.009、0.723±0.011、0.874±0.015和0.952±0.019,总体比较差异均有统计学意义（p-CRMP-2：F=445.600,P＜0.001;CDK5：F=186.600,P＜0.001）,其中损伤后3、7、14 d组小鼠视神经组织中p-CRMP-2和CDK5蛋白的相对表达量均明显高于假手术组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.结论 小鼠视神经钳夹伤后视神经组织中CRMP-2的表达无明显变化,但视神经组织中CDK5和p-CRMP-2蛋白表达均明显上调,且随着损伤后时间的延长上调更为明显.

α-酮酸配伍低蛋白饮食对糖尿病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂p27的关系

目的 探讨α 酮酸配伍低蛋白饮食对糖尿病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂 p2 7的关系。 方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM )模型 ,分别予正常蛋白 (蛋白占饲料重量的 10 % ,NPD组 )、低蛋白 (蛋白占饲料重量的 5 % ,LPD组 )、α 酮酸 +低蛋白 (蛋白占饲料重量的 5 % ,其中α 酮酸提供1%的蛋白 ,LPD +α KA组 )饮食治疗 8周。蛋白印迹 (Western杂交 )方法测定肾小球裂解液p2 7蛋白水平 ,ELISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM )蛋白 (Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白 )和尿白蛋白 ,采用图像分析系统测定肾小球面积。结果 各组DM大鼠肾小球 p2 7水平及ECM蛋白水平均增高 ,尿白蛋白排泄增多 ,肾重 /体重比例增高 ,肾小球面积增大 ,但LPD组及LPD +α KA组大鼠的变化较NPD组轻。LPD +α KA组肾小球p2 7水平 (8.6± 2 .3)较LPD组 (11.1± 3.6 )显著降低 (P <0 .0 1) ,ECM蛋白水平进一步下降 ,尿白蛋白排泄减少更明显 (P <0 .0 1) ,DM大鼠肾重 /体重比例下降更显著 (P <0 .0 5 ) ,肾小球面积进一步减少 (P <0 .0 5 )。DM大鼠肾小球 p2 7水平与肾重 /体重比例呈直线相关。LPD组、LPD +α KA组和NPD组间的血糖水平及血白蛋白水平差异无显著性。结论 α 酮酸配伍低蛋白饮食可能通过降低肾?

Cyclin D1、Ki-67、CK19联合评估甲状腺乳头状癌的效能及与颈部淋巴结转移的相关性分析

目的:探讨细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞增殖抗原-67(Ki-67)、细胞角蛋白19(CK19)联合评估甲状腺乳头状癌(PTC)的效能,分析三者与颈部淋巴结转移的相关性。方法:选取我院2017年9月至2021年9月收治的91例PTC患者为PTC组,取同期收治的结节性甲状腺肿患者52例为对照组。两组均通过手术获取病变组织,检测Cyclin D1、Ki-67、CK19表达情况,分析三者对PTC的诊断价值。根据PTC患者有无颈部淋巴结转移,分成转移组、非转移组,比较两组病理组织中Cyclin D1、Ki-67、CK19表达情况,经多元Logistic回归模型分析三者与PTC患者颈部淋巴结转移的关系。结果:PTC组Cyclin D1、CK19阳性表达率分别为83.52%、85.71%,高于对照组的17.31%、17.31%(P<0.05);PTC组Ki-67>1%占比为93.41%,高于对照组的13.46%(P<0.05)。Cyclin D1、Ki-67、CK19单独诊断PTC的敏感度分别为83.52%、93.41%、85.71%,特异度分别为82.69%、86.54%、82.69%,三者联合诊断的敏感度、特异度分别为91.21%、96.15%。转移组的Cyclin D1、CK19阳性表达率分别为97.06%、97.06%,高于非转移组的75.44%、78.95%(P<0.05)。多元Logistic回归分析显示,Cyclin D1阳性表达会增加PTC患者颈部淋巴结转移风险(OR:3.446,95%CI:1.041~11.407,P<0.05)。结论:PTC患者的Cyclin D1、Ki-67、CK19阳性表达率较高,三者联合对PTC有较好的诊断效能,其中Cyclin D1阳性表达与颈部淋巴结转移相关。

宫颈癌组织中p16、p53、Ki-67蛋白表达及其与临床病理特征的相关性

目的研究宫颈癌组织中p16蛋白(p16)、肿瘤蛋白p53(p53)、细胞周期调节蛋白-67(Ki-67)表达及其与临床病理特征的相关性。方法选取2018年1月至2020年12月驻马店市中心医院收治的宫颈癌患者96例为试验组,另按照1∶1比例选取驻马店市中心医院正常宫颈组织的健康体检者96例为健康组。均以免疫组化法检测宫颈正常组织和癌组织内p16、p53、Ki-67水平,比较两组及试验组中不同病变类型的p16、p53、Ki-67阳性表达率,并分析与临床病理特征的相关性。结果试验组p16、p53、Ki-67蛋白阳性表达率均高于健康组(P<0.05)。试验组鳞状细胞癌、高级别鳞状上皮内病变及腺癌的Ki-67蛋白阳性表达率(75.00%,72/96)较p16蛋白阳性表达率(52.08%,50/96)、p53蛋白阳性表达率(45.83%,44/96)高(P<0.05)。p16、p53、Ki-67阳性与宫颈癌患者年龄、有无淋巴结转移无明显关联性(P>0.05);ⅡB~Ⅳ期、G3级宫颈癌患者的p16、p53、Ki-67阳性表达率较Ⅰ~ⅡA期、G1~G2级高(P<0.05)。结论p16、p53、Ki-67蛋白表达与宫颈癌病变状况具有密切联系,且宫颈癌细胞内p16、p53、Ki-67表达与病理分级、临床分期具有明显相关性。

环氧合酶-2、细胞周期调节蛋白在评价食管鳞癌患者预后中的意义

食管鳞癌（ESCC）的预后在胃肠道肿瘤中最差，临床病理因素是其通用的预后评价指标，但对术后复发的风险判断仍不尽人意，因此，需要一项能反映ESCC预后的指标。研究显示，生物分子在评价ESCC的预后中已显示其较临床病理因素独特的优势，环氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）不但在ESCC中高表达，且与其预后密切相关。Ki-67抗原及细胞周期素A（cyclinA）均可加快细胞增殖的进程；p27为细胞增殖的负性调控因子。本研究旨在探讨上述生物分子在ESCC中的预后及意义。

泛素-蛋白酶体通路及其与胆道疾病相关性研究进展

泛素-蛋白酶体通路（UPP）是真核生物细胞质和细胞核内依赖于ATP、非溶酶体途径的蛋白质降解通路。UPP通路不仅能降解变性、异常或起短暂作用的蛋白质，而且能降解植物色素、转录因子、内膜蛋白和细胞周期蛋白等天然蛋白质，因而在转录水平调节、蛋白质降解、蛋白质稳定状态调节、程序性细胞死亡、

细胞周期调节蛋白依赖性激酶2-关联蛋白-1小干扰RNA表达载体构建及鉴定

细胞周期调节蛋白依赖性激酶2-关联蛋白-1（CDK2AP1）是一种细胞周期调控基因[1].我们构建小干扰RNA（siRNA）序列的载体,并转染乳腺癌细胞株MCF-7,筛选出干扰CDK2AP1表达的最佳的siRNA. 一、材料与方法 1．材料：乳腺癌细胞株MCF-7；大肠杆菌感受态细胞DH50α；载体质粒pGCSIL—GFP。

MTDH、Ets-1及p21WAF1蛋白在咽喉癌组织中的表达及临床意义

目的分析异黏蛋白(MTDH)、转录调节因子-1(Ets-1)及细胞周期调控蛋白(p21WAF1)在咽喉癌组织中的表达及临床意义。方法收集66例咽喉癌患者的临床资料,手术留取咽喉癌细胞癌组织66例(研究组)及42例癌旁黏膜组织(对照组)。比较两组MTDH、Ets-1及p21WAF1蛋白表达情况,分析上述蛋白与咽喉癌临床病理特征的关系。采用多元Logistic回归分析影响咽喉癌患者预后死亡的独立危险因素。结果研究组MTDH、Ets-1及p21WAF1阳性表达率分别为63.64%、72.73%、42.42%,对照组分别为16.67%、23.81%、78.57%,对照组MTDH、Ets-1阳性表达率显著低于研究组,p21WAF1阳性表达率显著高于研究组,差异有统计学意义(P<0.05)。临床分期Ⅲ~Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移者MTDH、Ets-1阳性表达率明显高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、高分化及无淋巴结转移者,差异有统计学意义(P<0.05)。中低分化者p21WAF1阳性表达率明显高于高分化者,差异具有统计学意义(P<0.05)。术后对患者进行1年随访,预后死亡12例(18.18%)。经非条件多因素logistic回归模型分析得,临床分期Ⅲ~Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移、MTDH、Ets-1阳性表达及p21WAF1阴性表达是影响咽喉癌患者预后死亡的独立危险因素(P<0.01)。结论 MTDH、Ets-1及p21WAF1蛋白在咽喉癌组织中表达异常,并可能参与咽喉癌发生、病情进展。

异氟醚麻醉所致认知损害的微清蛋白中间神经元相关机制初步研究

目的观察神经调节蛋白-1受体亚型(ErbB4)、微清蛋白(PV)及谷氨酸脱羧酶67(GAD67)在异氟醚麻醉所致小鼠认知损害中的表达变化,并探讨其可能机制。方法 40只14月龄雄性C57BL/6小鼠随机均分为四组:对照1d组(C1组)、对照7d组(C7组)、异氟醚1d组(Iso1组)和异氟醚7d组(Iso7组)。C1、C7组持续吸入O22h;Iso1、Iso7组以1.8%异氟醚+O2麻醉诱导15min,随后持续吸入1.5%异氟醚+O22h。气体吸入后1、7d,采用旷场实验检测小鼠的运动距离及中心区域活动时间;采用条件恐惧性实验检测环境和声音诱发僵直时间百分比。行为学结束后取小鼠海马组织,采用Western Blot法检测ErbB4、p-ErbB4、PV及GAD67蛋白表达水平。结果在旷场实验中,各组小鼠的运动距离和中心区域活动时间差异无统计学意义。在条件恐惧性实验中,与C1组比较,Iso1组环境诱发僵直时间百分比显著下降(P<0.05);与C7组比较,Iso7组环境诱发僵直时间百分比显著下降(P<0.05)。与C1组比较,Iso1组小鼠海马中的p-ErbB4、PV和GAD67表达水平显著下降(P<0.05);与C7组比较,Iso7组p-ErbB4、PV和GAD67表达水平显著下降(P<0.05)。结论异氟醚麻醉所致小鼠认知损害可能与海马p-ErbB4、PV和GAD67表达水平下降有关。

弥漫性大B细胞淋巴瘤中Skp2表达的临床意义

目的探讨Skp2、p27及Ki-67在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中表达的临床意义。方法应用免疫组化染色检测60例DLBCL及20例正常淋巴结中Skp2、p27和Ki-67的表达情况,并检测12例DLBCL和12例正常淋巴结中Skp2和p27 mRNA的水平,分析Skp2、p27及Ki-67的表达与DLBCL的关系。结果60例DLBCL中,Skp2、Ki-67表达阳性率均明显高于正常淋巴结(P<0.01);p27表达阳性率明显低于正常淋巴结(P<0.01);Skp2与p27表达呈明显负相关,与Ki-67表达呈明显正相关(P<0.05);Skp2的表达与Ann Arbor分期、疗效及预后显著相关,而与性别、年龄及结外病灶数均无明显相关性,即Ann Arbor分期为Ⅲ/Ⅳ期者以及疗效差者Skp2为高表达,Skp2低表达组生存率明显高于Skp2高表达组。p27和Ki-67的表达与上述临床指标无明显相关性。12例DLBCL的Skp2 mRNA表达水平相对量升高(P<0.05),而p27 mRNA表达水平相对量并无明显降低。结论Skp2的高表达可能在DLBCL的发生发展中起着重要的作用,且与病程的进展、疗效及预后密切相关,可以作为DLBCL极有价值的分子生物学预后指标。

FSH和17β-雌二醇联合作用对CyclinD1mRNA和CyclinE1mRNA表达的影响

为了确定FSH和雌激素联合作用对培养条件下未成熟仔猪睾丸支持细胞中Cyclin D1mRNA和Cyclin E1mRNA表达的影响。以培养的仔猪睾丸支持细胞为研究材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,应用实时荧光定量PCR检测Cyclin D1mRNA和Cyclin E1mRNA的相对表达量。FSH(50ng·mL-1)和17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)联合作用时对Cyclin D1mRNA和Cyclin E1mRNA表达的影响与FSH或17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)单独作用相比无显著影响(P>0.05);环磷酸腺苷抑制剂(Rp-cAMP)、L-Ca2+离子通道抑制剂(Verapamil)和ERK1/2抑制剂(U0126)单独作用时对Cyclin D1mRNA和Cyclin E1mRNA表达与空白对照组相比无显著影响(P>0.05),但以剂量依赖的方式抑制了FSH(50ng·mL-1)与17β-雌二醇(10-9 mol.L-1)联合作用对Cyclin D1mRNA和Cyc-lin E1mRNA的表达(P<0.05)。FSH和17β-雌二醇联合作用时通过cAMP、Ca2+内流和ERK1/2途径参与了FSH和17β-雌二醇对Cyclin D1mRNA和Cyclin E1mRNA在细胞中的表达。