模型化研究药物小分子阻滞细胞周期

基于扩散动力学与细胞信号传导动力学,研究药物小分子对细胞周期的阻滞特性.理论模型考虑药物小分子穿越细胞膜输运的动力学特性,以及进入细胞内的药物分子对细胞周期的阻滞效应.研究发现,穿越细胞膜内层进入细胞内的药物分子,将会在很大程度上决定药物分子对相关的靶向基因、蛋白的阻滞功效.细胞膜对药物分子的输运特性,是影响药物分子阻滞细胞周期的关键因素.另外,药物分子的降解程度,将会改变药物分子与靶向基因、蛋白作用时间,进而改变对相关细胞生长增殖的抑制效应.通过对模型中各参数的敏感度分析,我们确认了药物分子穿越细胞膜、进入细胞内过程的多种因素对细胞周期的抑制效应.本文理论结果符合模拟、实验观测,进一步深刻揭示了药物小分子阻滞细胞周期的物理机制,可为设计确切的疗法药物提供必要的参考和新方案.

USP7-MDM2-p53信号轴对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响

目的:探讨泛素特异性蛋白酶7(USP7)调节Mdm2 p53结合蛋白同源物(MDM2)-p53轴对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法:Western blot检测人子宫内膜癌组织、癌旁组织、人子宫内膜上皮细胞hEEC及人子宫内膜癌细胞系Ishikawa、HEC-1-A、KLE中USP7蛋白表达。将Ishikawa细胞分为NC组、P22077(USP7抑制剂)组、pcDNA组、pcDNA-MDM2组、P22077+pcDNA组、P22077+pcDNA-MDM2组,CCK-8法和克隆形成实验检测Ishikawa细胞增殖;流式细胞术检测Ishikawa细胞凋亡与细胞周期变化;Western blot检测Ishikawa细胞中USP7、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、周期素依赖性激酶2(CDK2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、MDM2、p53蛋白表达。以RG7388(MDM2抑制剂)或PFT-α(p53抑制剂)与20μmol/L P22077共处理Ishikawa细胞48 h以验证USP7-MDM2-p53信号轴上下游关系。结果:USP7蛋白在子宫内膜癌组织和细胞中高表达,且Ishikawa细胞中USP7蛋白表达量最高,因此,选择Ishikawa细胞为研究对象。与NC组比较,P22077组Ishikawa细胞OD 450值、克隆形成率、S期和G 2/M期细胞数、USP7、CyclinD1、CDK2、MDM2蛋白表达降低,细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期细胞数、p53、Bax蛋白表达升高(P<0.05);与NC组、pcDNA组比较,pcDNA-MDM2组Ishikawa细胞OD 450值、克隆形成率、S期和G 2/M期细胞数、USP7、CyclinD1、CDK2、MDM2蛋白表达升高,细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期细胞数、p53、Bax蛋白表达降低(P<0.05);与P22077组、P22077+pcDNA组比较,P22077+pcDNA-MDM2组Ishikawa细胞OD 450值、克隆形成率、S期和G 2/M期细胞数、USP7、CyclinD1、CDK2、MDM2蛋白表达升高,细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期细胞数、p53、Bax蛋白表达降低(P<0.05)。p53为USP7-MDM2通路下游分子。结论:抑制USP7表达可能通过下调MDM2来激活p53进而抑制Ishikawa细胞增殖、促进细胞凋亡及周期停滞。

苦参碱与3种抗肿瘤药物联合作用对KBV200耐药细胞株细胞周期的影响

目的：探讨苦参碱分别与3种常用抗肿瘤药物长春新碱（VCR）、阿霉素（ADM）、顺铂（DDP）合用对KBV200耐药细胞株细胞周期的影响。方法：将培养后的KBV耐药细胞分为对照组、抗肿瘤药物组及其与苦参碱合用组，采用流式细胞仪检测、分析各组细胞周期的变化及凋亡情况。结果：与抗肿瘤药物单用组比较，苦参碱与VCR、ADM合用组细胞处于不同周期的细胞比例及凋亡数均无明显变化；苦参碱与DDP合用组G0～G1期细胞数下降、G2～M期细胞数升高。结论：推测苦参碱逆转KBV200细胞对VCR和ADM的耐药作用可能与细胞周期及凋亡无关；苦参碱能轻度增强DDP的细胞毒作用。

左金丸药物血清对人乳腺癌MCF-7细胞周期和细胞凋亡的影响

目的探讨左金丸药物血清对人乳腺癌MCF-7细胞周期和凋亡的影响。方法制备左金丸药物血清,以MTT比色法检测5%、10%和20%左金丸药物血清在24h、48h和72h对MCF-7细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡;Western blot法检测Cyclin D1、Cyciln E、CDK2、CDK4、p21、p27、p53和Bax的表达。结果与无药物血清比较,左金丸药物血清显著抑制MCF-7细胞的增殖(P<0.05),以10%浓度48h给药效果最好。与无药物血清组(Sub-G_1期细胞:2.13%±1.83%;G_0/G_1期细胞:39.04%±6.84%)比较,10%左金丸药物血清组(Sub-G_1期细胞:12.47%±1.82%;G_0/G_1期细胞:46.80%±3.00%),显著增加了Sub-G1期和G_0/G_1期的细胞数(P<0.01)。而且,左金丸药物血清下调了Cyclin D1,Cyciln E表达,并上调了p21,p27,p53和Bax表达。结论左金丸药物血清具有抑制MCF-7人乳腺癌细胞增殖作用,其机制可能与阻滞细胞G0/G1周期并诱导细胞凋亡有关。

四物汤及其组方中药的药物血清对MCF-7细胞体外增殖和细胞周期的影响

目的:探讨四物汤及其组方的四味中药的药物血清对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞体外增殖、细胞周期和凋亡的影响,评价其植物雌激素活性。方法:正常性未成熟雌性SD大鼠,体重70±5g,按体重均衡和随机的原则分为7组(正常对照组、己烯雌酚组、四物汤组、熟地组、白芍组、当归组和川芎组),每天分别早、晚两次灌胃给药,给药均持续4d,第5d腹主动脉取血,分离血清,0.22μm微孔滤膜过滤,-20℃贮存备用,应用MTT法检测药物血清对MCF-7细胞增值率、流式细胞技术检测细胞周期和凋亡率。结果:白芍、当归和川芎等中药的药物血清均可显著促进MCF-7细胞体外增殖(P<0.01),熟地可促进MCF-7细胞体外增殖(P<0.05),熟地、当归和川芎等中药的药物血清均可显著促使MCF-7细胞S期细胞数和细胞增殖指数PI增加(P<0.01),白芍的药物血清均可促使MCF-7细胞增殖指数PI增加(P<0.05),而在本实验条件下四物汤复方的含药血清使MCF-7细胞数略有增加,但无统计学意义(P>0.05);白芍、当归、川芎和四物汤的药物血清均可显著抑制MCF-7细胞的凋亡(P<0.01);结论:熟地、白芍、当归和川芎等中药有植物雌激素活性,本实验配伍比例条件下,四物汤复方的植物雌激素活性弱于其组方的各味中药。

联合放/化疗对细胞周期特异性凋亡的影响

目的 以急性T淋巴细胞白血病细胞株MOLT 4为模型,探讨作用于细胞周期相同或不同时相的放疗/化疗药物联合应用时是否具有抗癌增效作用、引起细胞凋亡的周期时相性是否发生改变及对细胞周期检测点(ckeckpoint)的影响。方法 分别将作用于G1 期的X ray(10Gy)及药物金克(JinKe) (2.0g/L);S期的喜树碱(CPT) (0.25μmol/L)及阿糖胞苷(Ara C) (1.00μmol/L);G2 /M期的药物威猛(Vm 26) (0.5μg/mL)及长春花碱(Vinblastine, Vin) (0.05μg/mL)分别联合分组应用对其进行不同时间段的培养,采用流式细胞术中的API法对凋亡细胞进行定量并对凋亡细胞的周期时相性进行定位检测。结果 G1 期的药物JinKe和X ray(10Gy)联合应用时,具有协同作用,其作用点仍以G1 期细胞为主。S期的两种药物CPT和Ara C联合应用时,两者也具有协同作用,其细胞周期作用点仍以S期为主。作用于G2 /M期的两种药物VM 26和Vin联合应用时,两者还是具有协同作用,但其细胞周期作用点几乎发生在细胞周期的所有时相。作用于G1 期的药物JinKe和作用于S期的药物CPT联合应用, 具有增强效应, 联合应用时其细胞周期作用点以G1 期和S期细胞为主。作用于G1 期的药物金克和作用于G2 /M期的药物VM 26联合应用,两者具有增强效应。作用于G2

辐射诱导基因LRIGx的细胞周期特异性表达及编码产物同源性分析

低剂量辐射诱导表达新基因LRIGx被克隆 .Northern印迹杂交结果表明 ,在 0 2Gyγ射线照射后 2～ 4h ,人A5 4 9细胞中该基因mRNA表达水平显著上调 .当照射剂量增加到 2Gy时 ,其诱导表达水平明显低于 0 2Gy照射 .通过细胞周期同步化 ,观察到LRIGx基因表达高峰在G2 M期 .同源性比较和功能保守域分析结果显示 ,该基因编码产物与DNA修复和重组蛋白RAD5 4、ERCC 6 ,染色质重构和转录调节功能蛋白SWI2 SNF2等有同源性 ,其N端具有与染色质重构、基因转录调控和DNA修复有关的 3个功能结构域 ,即CHROMO。

化疗药物对原代肺癌细胞周期的影响

目的 探讨原代培养肺癌细胞对化疗药的敏感性。方法 取四种抗癌药物对原代肺癌细胞进行敏感性试验 ,以 MTT比色法和流式细胞术法观察肺癌细胞的生长抑制率和对细胞周期的影响。结果 5- FU、MTX对肺癌细胞敏感性强 ,流式细胞仪结果显示肺癌细胞的 G0 / G1 期细胞数增多 ,S期细胞减少。结论 在化疗前进行肿瘤细胞药敏试验 ,选择高效、敏感性强的药物用于患者的治疗 ,对于提高疗效 ,减少毒副作用具有重要意义和实际应用价值。

海洋生物活性药物对细胞周期与凋亡的调控在抗肿瘤治疗中的作用

作为生命的发源地，海洋具有丰富的生物多样性。多数无脊椎动物（如贝类和海绵类）不具有天然抵抗力，即内在免疫系统，需要合成具有生物学活性的次级代谢产物以获得相应的功能。这些代谢产物在保护宿主的生存和适应极端环境方面起着重要的作用，也是近年来药物研发的热点。

作用于微管的药物介导的细胞周期及凋亡信号通路

有机体及其组织完整性的维持有赖于增殖、分化和凋亡之间平衡的精细调节,某一阶段的不完全成熟或分化失常或正常的凋亡功能丧失所造成的生长失控均会导致这种平衡的显著变化。因此,可通过激活某一通路使细胞发生周期阻滞,分化或凋亡来控制癌细胞生长。

补肾促卵颗粒对体外受精-胚胎移植技术周期颗粒细胞家族特异性受体α-1和细胞周期调节蛋白B1表达的影响

制约妊娠率的研究之一就是卵母细胞质量的提高。胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）家族特异性受体α-1（GFRα-1）表达于在小鼠、猪等哺乳动物卵母细胞和颗粒细胞[1]。Aravin-dakshan等[2]认为卵母细胞通过间隙连接的建立通过受体GFR-1调控着GDNF在颗粒细胞上的表达。

TNF-α诱导Molt-4细胞周期特异性凋亡及cyclin B1的表达

目的:观察TNF-α诱导Molt-4细胞的凋亡现象以及cyclinB1的表达,探讨膜受体途径细胞凋亡机制。方法:用TNF-α处理指数生长期的Molt-4细胞;应用API、免疫印迹电泳等方法检测细胞凋亡和cyclinB1的表达。结果:Molt-4细胞经TNF-α诱导后出现了明显的细胞凋亡,细胞凋亡主要发生在细胞周期的G1期,cyclinB1在G1期呈阳性表达。结论:TNF-α诱导的细胞凋亡具有细胞周期特异性,cyclinB1在G1期细胞中表达升高可能与G1期细胞凋亡有关。

微RNA-145-5p对胃腺癌细胞增殖和细胞周期的影响及机制

目的探讨微RNA(miR)-145-5p对胃腺癌细胞增殖、细胞周期的影响及可能的调控机制。方法从癌症基因组图谱数据库中下载在胃腺癌中差异表达miRNA数据,对其进行差异分析并结合文献确定要研究的目标miRNA。利用TargetScan和Starbase数据库对miR-145-5p的下游信使RNA(mRNA)进行靶向预测并进行相关性分析。将对数生长期人胃腺癌细胞分为mimic NC组(转染mimic NC)、miR-145-5p mimic组(转染miR-145-5p mimic)、Inhibitor NC组(转染Inhibitor NC)、miR-145-5p Inhibitor组(转染miR-145-5p Inhibitor)、mimic NC+oe-NC组(同时转染mimic NC和oe-NC)、miR-145-5p mimic+oe-NC组(同时转染miR-145-5p mimic和oe-NC)、miR-145-5p mimic+oe-淋巴特异性解旋酶(HELLS)组(同时转染miR-145-5p mimic和oe-HELLS)。采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应检测人胃黏膜细胞和人胃腺癌细胞中miR-145-5p和HELLS mRNA的表达水平;细胞计数试剂盒-8和克隆形成实验检测胃癌细胞SGC-7901、BGC-823的增殖能力;流式细胞术检测胃癌细胞SGC-7901、BGC-823的周期分布情况;双荧光素酶报告实验验证miR-145-5p与HELLS的靶向关系;Western blot法检测HELLS蛋白的表达水平。结果生物信息学分析结果显示,胃腺癌组织中miR-145-5p的表达量显著低于正常胃组织,HELLS的表达量显著高于正常胃组织(P<0.05);HELLS与miR-145-5p呈显著负相关(r=-0.470,P<0.05)。人胃腺癌细胞中miR-145-5p的相对表达量显著低于人胃黏膜细胞,HELLS mRNA相对表达量显著高于人胃黏膜细胞(P<0.05)。转染后0、24 h时,mimic NC组与miR-145-5p mimic组SGC-7901细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);转染后48、72、96 h时,miR-145-5p mimic组SGC-7901细胞增殖能力显著低于mimic NC组(P<0.05)。转染后0、24 h时,Inhibitor NC组与miR-145-5p Inhibitor组BGC-823细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);转染后48、72、96 h时,miR-145-5p Inhibitor组BGC-823细胞增殖能力显著高于Inhibitor NC组(P<0.05)。miR-145-5p mimic组细胞克隆数显著少于mimic NC组(P<0.05),miR-145-5p Inhibitor组细胞克隆数显著多于Inhibitor NC组(P<0.05)。mimic NC+oe-NC组、miR-145-5p mimic+oe-HELLS组SGC-7901细胞克隆数显著多于miR-145-5p mimic+oe-NC组(P<0.05)。miR-145-5p mimic组G_(0)+G_(1)期SGC-7901细胞所占比例显著高于mimic NC组,S期和G_(2)+M期细胞所占比例显著低于mimic NC组(P<0.05)。miR-145-5p Inhibitor组G_(0)+G_(1)期BGC-823细胞所占比例显著低于Inhibitor NC组,S期和G_(2)+M期细胞所占比例显著高于Inhibitor NC组(P<0.05)。miR-145-5p mimic+oe-NC组G_(0)+G_(1)期SGC-7901细胞所占比例显著高于mimic NC+oe-NC组,S期和G_(2)+M期细胞所占比例显著低于mimic NC+oe-NC组(P<0.05)。miR-145-5p mimic+oe-HELLS组G_(0)+G_(1)期SGC-7901细胞所占比例显著低于miR-145-5p mimic+oe-NC组,S期和G_(2)+M期细胞所占比例显著高于miR-145-5p mimic+oe-NC组(P<0.05)。WT-HELLS+miR-145-5p mimic组细胞的荧光素酶活性显著低于WT-HELLS+mimic NC组(P<0.05),MUT-HELLS+miR-145-5p mimic组与MUT-HELLS+mimic NC组细胞中荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。miR-145-5p mimic组细胞中HELLS蛋白相对表达量显著低于mimic NC组(P<0.05)。mimic NC+oe-NC组、miR-145-5p mimic+oe-HELLS组细胞中HELLS蛋白相对表达量显著高于miR-145-5p mimic+oe-NC组(P<0.05)。结论miR-145-5p在胃腺癌中呈显著低表达。过表达miR-145-5p能够抑制胃腺癌细胞的增殖,同时将胃腺癌细胞阻滞在G_(0)和G_(1)期。miR-145-5p可能是通过靶向HELLS mRNA来抑制HELLS蛋白的表达和胃腺癌细胞的增殖。

双特异性抗体(GPC3和CD3)药物外渗致局部皮下细胞因子释放综合征1例护理

该文报道了1例药物临床试验使用双特异性抗体[磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)和CD3]发生药物外渗致局部皮下细胞因子释放综合征患者的护理体会,双特异性抗体类药物机制虽区别于传统的化疗药物,但毒性不容小觑,静脉输注时仍然首选中心静脉,同时,药物应尽可能进行稀释。对于药物毒性不明的双特异性抗体类药物,若发生药物外渗,应参照发泡性化疗药物进行管理,早期即进行封闭治疗,做好外渗部位的病情观察与记录,指导患者进行手臂功能锻炼,使用中药、西药交替外敷,必要时进行全身治疗,同时注重患者的心理护理。综合上述处理措施,可减轻外渗症状,避免免疫药物外渗导致的严重不良事件,确保患者的安全。

细胞周期蛋白依赖性激酶4/6抑制剂治疗激素受体阳性、人表皮生长因子受体2阴性的晚期乳腺癌的研究进展

激素受体阳性(hormone receptor positive,HR+)、人表皮生长因子受体2阴性(human epidermal growth factor receptor 2 negative,HER2−)的乳腺癌是乳腺癌中最常见的分子亚型,预后情况常取决于患者对内分泌治疗的敏感性。HR+、HER2−晚期乳腺癌多已对内分泌治疗药物耐药,而此往往会致患者生存期缩短、生命质量下降等不良结局,故临床上亟需有新的治疗策略/药物。近年来,一些新型口服靶向药物细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)4/6抑制剂陆续获准上市,它们因能为HR^(+)、HER2^(−)晚期乳腺癌患者提供显著的生存益处且安全性良好,成为该类患者的重要有效治疗选择之一。本文就CDK4/6抑制剂的作用机制、有效性、安全性和药物经济学研究进展作一概要介绍和对比分析。

细胞周期与肿瘤药物治疗

细胞周期（cell cycle）是指正常连续分裂的细胞从前一次分裂结束到下一次分裂完成所经历的连续动态过程，分为G1，S，G2和M期[1]，其中，G1，S，G2期为间期，M期为有丝分裂期。在G1期，细胞为遗传物质脱氧核糖核酸（DNA,Deoxyribo—nucleicacid）的合成作准备，

9-顺-维甲酸对肺癌细胞周期及周期因子表达的影响

目的 探讨 9 顺 维甲酸对肺癌细胞周期及周期因子cyclinD1和cdk4表达的影响。方法 用 9 顺 维甲酸处理细胞 2 4h后 ,在观察细胞生长、流式细胞仪分析细胞周期的基础上 ,用RT PCR方法分析细胞周期因子cyclinD1和cdk4表达的变化。结果 9 顺 维甲酸作用于肺癌细胞 2 4h以后 ,细胞增殖减慢 ,G0 G1期细胞明显增多 ,S期细胞减少 ;PG ,SPC A1和L78细胞的cyclinD1表达下降显著 ;PG ,A549和L78细胞的cdk4表达下降显著。结论 9 顺

续断对成骨细胞增殖、分化、凋亡和细胞周期的影响

在动物实验的基础上 ,探讨续断对成骨细胞增殖、分化、凋亡、细胞周期和 Ⅰ 型前胶原αmRNA表达影响。根据文献方法培养大鼠成骨细胞株UMR 10 6 /0 1,采用3 H Tdr法检测细胞增殖 ,PNPP法、RIA法、茜素红染色法以及定量RT PCR法分别检测碱性磷酸酶活性、骨钙素活性、矿化结节形成和Ⅰ 型胶原αmRNA的表达 ,从而了解续断对成骨细胞增殖、分化的影响 ;FCM法检测细胞周期。结果显示续断中、高剂量能显著促进成骨细胞的增殖、增加碱性磷酸酶的表达及矿化结节形成的数量 ,促进成骨细胞骨钙素和Ⅰ 型前胶原mRNA的表达 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,和雌激素组比较差异无显著性。续断高剂量组细胞增殖率、S期细胞比率和细胞增殖指数等均显著高于空白对照组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,和雌激素组比较差异也无显著性。细胞凋亡率和G0 G1期细胞比率显著低于空白对照组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。表明续断能有效促进成骨细胞的分化、增殖 ,防止成骨细胞凋亡 ,可能是该药促进骨折愈合、防治骨质疏松的机制之一。