Ⅱ型糖尿病合并牙周病患者龈沟液中细胞因子/趋化因子的表达水平

目的探讨Ⅱ型糖尿病合并牙周病患者与单纯牙周病患者龈沟液(gingival crevicular fluid,GCF)中细胞因子/趋化因子的表达水平。方法选取伴Ⅱ型糖尿病的牙周病患者52例,单纯牙周病患者40例,用Luminex FLEXMAP3D仪和Human Cytokine/Chemokine试剂盒检测GCF中14种细胞因子/趋化因子的表达水平。结果牙周病部位:嗜酸性粒细胞趋化因子、巨噬细胞炎症蛋白-1α、粒细胞-巨噬细胞集落刺激、白介素-6、肿瘤坏死因子-α和白介素-12的浓度,糖尿病组受试者高于非糖尿病组受试者(P<0.0035)。结论糖尿病可影响牙周病部位细胞因子/趋化因子的表达,糖尿病可能是牙周病的促进因素。

吡非尼酮可抑制肺泡巨噬细胞中细胞因子/趋化因子释放

目的评估吡非尼酮对特发性非特异性间质性肺炎(iNSIP)和特发性肺纤维化(IPF)患者肺泡巨噬细胞(AMs)细胞因子/趋化因子的影响。方法以2015年1月至2018年12月在南华大学附属第一医院确诊的10例iNSIP患者和11例IPF患者为研究对象,同期具有正常肺泡灌洗液(BALF)细胞分类且没有任何间质性肺疾病的8例患者为对照。取所有患者BALF的AMs在有和没有脂多糖(LPS)刺激的条件下进行培养,分别以0、0.03、0.10、0.30 mg/ml吡非尼酮处理,采用基于荧光珠的多重技术Luminex检测培养上清液中Th1型细胞因子[肿瘤坏死因子(TNF-α)、可溶性肿瘤坏死因子受体-1(sTNFR)-1、sTNFR-2、白细胞介素-1(IL)-1β]、Th2型细胞因子[IL-10、单核-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)]、促血管形成趋化因子[IL-18、巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)]和抗血管形成趋化因子[重组人干扰素-γ诱导单核细胞因子(MIG)、干扰素诱导蛋白-10(IP-10)]水平。结果iNSIP和IPF组患者的AMs在自发(基础状态下)和LPS刺激下释放的TNF-α、sTNFR-1、sTNFR-2、IL-1β、IL-10、MIP-1β、MIG和IP-10水平均显著高于对照组(P均<0.05),3组间IL-18水平在自发状态下差异无统计学意义(P>0.05),iNSIP和IPF组患者IL-18水平在LPS刺激下均显著低于对照组(P均<0.05);iNSIP组患者AMs产生的MIG和IP-10浓度在自发和LPS刺激下均显著高于IPF组(P均<0.05)。吡非尼酮在浓度为0.10和0.30 mg/ml时均可显著抑制iNSIP和IPF患者AMs释放上述所有细胞因子/趋化因子,两组间差异无统计学意义(P均>0.05)。结论iNSIP组患者AMs产生的MIG和IP-10水平高于IPF患者。0.10和0.30 mg/ml吡非尼酮可显著抑制对iNSIP组和IPF组患者AMs释放的细胞因子/趋化因子,但对两者无明显差异。

6种中药四气药性对大鼠细胞因子/趋化因子影响的实验研究

目的通过附子、干姜、肉桂3种温里药及黄连、栀子、知母3种清热药对大鼠细胞因子/趋化因子的影响探索四气药性的免疫分子机理。方法用6种中药大剂量的水煎浓缩制剂对大鼠进行与临床一致的整体灌胃给药,用Luminex x MAP technology液相悬浮芯片技术对大鼠血浆进行EOTAXIN、MIP-1α、MCP-1、IP-10、GRO-KC细胞因子/趋化因子指标的定量测定。结果可使附子组的大鼠MCP-1增加有显著性差异,栀子组的大鼠MIP-1α增加有显著性差异。结论为受试中药药性的细胞因子/趋化因子信号转导表征免疫分子机理探索提供中医理论的实验基础。

细胞因子/趋化因子在单纯疱疹病毒脑炎小鼠表达及生物信息学分析

目的 探讨单纯疱疹病毒脑炎(herpes simplex encephalitis, HSE)中细胞因子/趋化因子谱的表达情况,确定差异表达的因子及其相关的生物信息学作用。方法 单纯疱疹病毒1型(HSV-1)接种于Vero细胞,Reed-Muench法测定病毒滴度;实验组小鼠鼻腔接种HSV-1,建立动物感染模型,观察至接种后第7天,处死小鼠,左半脑制备石蜡切片用于病理学检测,右半脑制备脑组织匀浆用于观察其致Vero细胞病变作用及高通量细胞因子/趋化因子表达谱芯片检测。GO、KEGG和PPI等分析技术用于差异表达蛋白的生物信息学研究。结果 实验组小鼠接种HSV-1后几乎都出现了病毒性脑炎的症状(发病率为100%),7 d内15只小鼠中死亡3只(死亡率20%),而对照组小鼠均正常,但实验组动物的发病率和死亡率与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。脑组织病理学检测发现实验组小鼠脑组织轻度水肿伴大量炎性细胞浸润,见少量出血灶,对照组小鼠脑组织正常。实验组小鼠脑组织匀浆接种Vero细胞后发现大量细胞脱落、融合,出现明显的细胞病变效应,对照组细胞无明显改变。脑组织匀浆经PCR扩增出了病毒UL36的基因片段,而对照组未扩增出。细胞因子/趋化因子芯片于实验组筛选出了7个差异表达蛋白,GO富集分析发现其涉及多个生物学过程,与炎性细胞的活化和趋化有关;KEGG通路富集分析筛选出了7个有意义的信号通路,涉及TNF信号通路和NOD样受体信号通路等;PPI分析发现大多数差异表达蛋白组成了一个相互作用网络,其中IL-6、IL-1、IFN-γ和TNF-α是该网络的主要因子。结论 单纯疱疹病毒脑炎小鼠模型中筛选出了7种差异表达的细胞因子/趋化因子,和与之相关的信号通路可能参与了HSE的病理生理机制。

基质细胞衍生因子-1/趋化因子受体4轴在促红细胞生成素动员骨髓间充质干细胞治疗脊髓损伤中的作用

目的 观察基质细胞衍生因子-1/趋化因子受体4（SDF-1/CXCR4）轴在促红细胞生成素（EPO）动员骨髓间充质干细胞（BMSCs）治疗大鼠脊髓损伤中的作用.方法 将96只成年雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、EPO组、BMSCs组、BMSCs＋ EPO组和BMSCs＋ EPO＋AMD3100组,每组16只,采用改良Allen法制作大鼠脊髓损伤模型,通过Basso-Beattie-Bresnahan （BBB）评分估计神经功能恢复情况,通过酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定脊髓损伤后肿瘤坏死因子（TNF-α）和SDF-1水平,应用免疫荧光检测损伤的脊髓中BMSCs的分布,通过Transwell实验探索EPO对BMSCs迁移功能的影响,原位缺口末端标记法（TUNEL）法检测各组凋亡指数,Western blot检测损伤局部促红细胞生成素受体（EPOR）和CXCR4的水平.结果 术后第7天各组BBB评分分别为：（20.7±3.4）、（6.4±1.7）、（9.5±2.7）、（9.9±1.9）、（11.4±3.6）、（7.0±1.2）分;术后第28天各组BBB评分分别为：（21.0±3.8）、（10.5±2.8）、（15.3±3.6）、（16.2±3.9）、（18.5±4.0）、（10.8±2.2）分,BMSCs＋ EPO组运动功能改善显著优于其他各组（P＜0.05）,EPO能够显著降低受损脊髓中TNF-α水平并上调SDF-1水平（P＜0.05）,EPO较对照组能显著促进BMSCs的迁移（P＜0.05）.结论 EPO可以通过上调SDF-1/CXCR4轴的表达动员骨髓基质干细胞向脊髓损伤部位迁移,并促进BMSCs对脊髓损伤的修复作用.

特异性敲除巨噬细胞CXCR4基因对单侧输尿管梗阻小鼠肾间质纤维化的缓解作用及机制

目的观察特异性敲除巨噬细胞的CXCR4基因对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾间质纤维化的缓解作用,并探讨其作用机制。方法构建巨噬细胞CXCR4基因敲除小鼠模型(KO小鼠)16只并随机分为KO UUO组、KO Sham组各8只;将16只野生型C57小鼠(WT小鼠)随机分为WT UUO组、WT Sham组各8只。构建UUO模型,造模后第12天处死小鼠取左肾组织。用HE染色法评估肾小管病变程度;用Masson染色法评估肾间质胶原沉积程度;用免疫组化染色法评估肾组织巨噬细胞浸润情况并行M1、M2型巨噬细胞计数,计算两型细胞比值(M1/M2);用Western blotting法检测肾组织中基质细胞衍生因子1(SDF-1)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)及CD206蛋白表达。结果与KO Sham组、WT Sham组比较,KO UUO组、WT UUO组肾小管损伤程度减轻、肾间质胶原沉积程度及浸润的巨噬细胞数量减少,M1/M2升高,肾组织中i NOS、SDF-1蛋白表达升高(P均<0.05),KO UUO组以上指标比WT UUO组变化更明显(P均<0.05)。结论特异性敲除巨噬细胞的CXCR4基因可缓解UUO小鼠的肾间质纤维化程度,其机制可能为阻止巨噬细胞通过SDF-1/CXCR4轴趋化到肾间质中,减少M1型巨噬细胞向M2型转化。

miR-3613-3p通过调节SDF1/CXCR4通路对非小细胞肺癌细胞A549凋亡的影响

目的探讨miR-3613-3p通过调节基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor 1,SDF-1)/趋化因子受体4(C-X-C chemokine receptor type 4,CXCR4)通路对A549细胞凋亡的影响。方法运用TargetScan在线分析miR-3613-3p与CXCR4的相关性:将CXCR4的3端非编码区克隆进pMIR-REPORT Luciferase载体,利用双荧光素酶报告系统检测miR-3613-3p是否靶向调控CXCR4;转染miR-3613-3p mimics或者miR-3613-3p inhibitor进A549细胞,通过免疫印迹法检测SDF1/CXCR4通路相关蛋白和凋亡标志蛋白的表达量;同时采用Annexin V染色法测定细胞凋亡水平。结果TargetScan分析后,miR-3613-3p仅在一个区域与CXCR4具有较高匹配度;通过双荧光素酶报告系统发现,miR-3613-3p靶向结合CXCR4的3端非编码区;梯度转染miR-3613-3p mimics时,CXCR4、cleaved-caspase3/caspase3、cleaved-caspase9/caspase9表达量下降,BAX表达量上升,Bak表达量下降,细胞凋亡水平下降(0.206±0.033 vs 0.062±0.015,P=0.021);而用梯度转染miR-3613-3p inhibitor时,CXCR4、cleaved-caspase3/caspase3的表达量上升,cleaved-caspase9/caspase9、BAX表达量下降,Bak表达量上升,细胞凋亡水平上升(0.201±0.017 vs 0.613±0.061,P=0.019);外源SDF-1刺激的同时转染miR-3613-3p inhibitor,细胞凋亡水平没有明显变化(0.204±0.029 vs 0.197±0.030,P=0.82)。结论miR-3613-3p通过抑制SDF1/CXCR4通路抑制非小细胞肺癌细胞A549的凋亡。

基质衍生因子1诱导高血压脑出血患者内皮祖细胞增殖迁移的机制

目的 观察基质衍生因子-1（SDF-1）对高血压脑出血患者内皮祖细胞（EPCs）增殖迁移能力的影响并探讨其作用机制.方法 抽取急性期高血压脑出血患者空腹外周静脉血,分离并贴壁培养EPCs 6 d后,用含有不同浓度SDF-1培养基培养24h,测定细胞增殖、迁移能力,趋化因子受体4（CXCR4）和黏附分子整合素α5β1（α5β1）蛋白表达水平;采用小于扰RNA （siRNA）转染法观察CXCR4 siRNA对EPCs增殖、迁移能力的影响;加入抗α5β1抗体,进一步探讨α5β1在EPCs增殖迁移中的作用.结果 SDF-1剂量依赖性增加高血压脑出血患者EPCs增殖及迁移能力,在浓度为80 μg/L时达到高峰（A值：0.57 ±0.03 P ＜0.05）;进一步分析表明,SDF-1能够诱导CXCR4蛋白大量表达[（2.30±0.05）倍,P＜0.05],CXCR4 siRNA处理后,SDF-1诱导的EPCs增殖及迁移能力明显下降（A值：0.363±0.020）;此外,SDF-1显著性诱导α5β1的表达[（1.65±0.06）倍,P＜0.05],且CXCR4 siRNA预处理后SDF-1诱导的α5β1的表达明显下降[（0.71±0.04）倍];加入o5β1抗体后,SDF-1/CXCR4诱导的EPCs增殖及迁移能力明显下降[A值：0.311±0.037,迁移细胞数：（25.52±5.60）个].结论 SDF-1剂量依赖性地增强急性期高血压脑出血患者EPCs增殖及迁移能力,主要是通过CXCR4介导α5β1通路来实现的,提示SDF-1/CXCR4-α5β1可作为受损后血管修复的潜在靶点.

加味四妙丸介导SDF-1/CXCR4信号通路对痛风性关节炎的治疗作用

目的研究加味四妙丸介导基质细胞衍生因子(SDF)-1/趋化因子受体(CXCR4)信号通路对痛风性关节炎的治疗作用。方法将75只SPF级大鼠随机分成健康组、模型组、研究组各25例,对模型组和研究组大鼠建立痛风性关节炎模型,只对研究组进行加味四妙丸治疗,通过大鼠步态分级和关节炎症程度评定检测模型是否成立;容积法对大鼠关节肿胀程度进行测定;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测关节液炎症指标及SDF-1表达;苏木素-伊红(HE)染色了解大鼠关节组织内在形态;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western印迹检测滑膜软骨组织中SDF-1、CXCR4、基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-9、MMP-13等的基因、蛋白表达水平。结果模型组关节炎症指数及步态分级较健康组显著上升(P<0.05);研究组较模型组关节炎症指数及步态分级显著降低(P<0.05);与模型组对比,研究组6、12、24、48 h时踝关节肿胀度显著下降(均P<0.05);研究组较模型组关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA显著降低,SOD显著升高,SDF-1含量、SDF-1 mRNA和蛋白、CXCR4、MMP-3、MMP-9、MMP-13 mRNA及其蛋白表达显著下降(均P<0.05)。结论加味四妙丸能够通过抑制SDF-1/CXCR4信号通路的表达降低痛风性关节炎大鼠的关节肿胀程度及抑制炎症反应从而达到治疗目的。

类风湿关节炎骨破坏作用机制及中医药治疗研究进展

类风湿关节炎(RA)是一种累及多个关节的全身性自身免疫性疾病,常累及小关节,病变呈对称性、侵袭性和致残性,发病后期常易造成不可逆转的软骨、骨和其他邻近组织的破坏,最终导致严重的关节畸形甚至残疾,给患者及其家庭造成严重的身体和心理损害,严重影响生活质量。迄今为止,虽然治疗RA的药物很多,但RA仍然无法完全得到彻底根治,究其原因在于RA及其骨破坏的发病机制仍未完全明确。因此,对于RA骨破坏的发病机制及如何治疗显得格外重要。RA骨破坏的发病机制总的来说是成骨细胞与破骨细胞之间的失衡导致的,本文通过整理近年来参与RA关节软骨破坏及骨侵蚀病程的相关研究文献进行综述和讨论,分别从细胞因子/趋化因子、非编码RNA、信号通路等三个不同方面阐述了对成骨细胞与破骨细胞之间的作用造成RA骨破坏的发病机制,以期为RA骨破坏发病机制研究提供新的思路。中医药在预防RA骨破坏的发病过程中起着重要的作用,在保证疗效的前提下还能保证其安全性。因此,对于RA骨破坏的发病机制进行深入地研究及研究中医药在其治疗中的作用,为其治疗能够提供新的研究思路。

火麻仁油对代谢综合征大鼠NF-κB/MCP-1/CCR2信号通路及促炎因子表达影响

目的:观察火麻仁油对代谢综合征(metabolic syndrome,MS)大鼠核因子-κB(NF-κB)/单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR2)信号通路及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。方法:采用喂养高盐高脂高糖饲料,建立实验性MS大鼠模型,然后用火麻仁油2. 0、8. 0ml/kg和二甲双胍70mg/kg灌胃给药,每天1次,连续4周,每天观察实验大鼠一般状况。实验大鼠分别于给药后的第2周和第4周进行实验,检测大鼠血压(BP)、肥胖相关指标(体重、腹围、体长,计算Lee's指数和肥胖指数);进行血液中空腹血糖(FBG)、胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和TNF-α、IL-1β和IL-6含量分析;取肝组织进行组织形态学分析;实时定量PCR检测肝组织中MCP-1和CCR2的mRNA表达; Western blot检测肝组织中MCP-1、CCR2和NF-κB p65蛋白表达。结果:火麻仁油2. 0、8. 0ml/kg和二甲双胍70mg/kg可显著改善MS模型大鼠的一般状况,降低BP、体重、腹围、Lee's指数和肥胖指数,降低血液中FBG、FINS、FAA、TG、TC、LDL-D及TNF-α、IL-1β和IL-6含量,升高血液中HDL-D含量,抑制肝组织脂肪变性及炎症细胞浸润,降低肝组织中NF-κB p65和MCP-1、CCR2表达。结论:火麻仁油对大鼠MS具有较好的治疗作用,其作用机制可能与抑制MCP-1、CCR2表达、NF-κB活化及促炎因子的生成相关。

复方甘草酸苷调控SDF-1/CXCR-4轴治疗特应性皮炎小鼠的作用机制

目的:探讨复方甘草酸苷调控基质细胞衍生因子-1/趋化因子受体-4(SDF-1/CXCR-4)轴治疗特应性皮炎小鼠的作用机制。方法:120只Nc/Nga小鼠随机分成6组:正常对照组、模型组、复方甘草酸苷低(10 mg·kg^-1)、中(20 mg·kg^-1)、高(40 mg·kg^-1)剂量组、地塞米松组(30 mg·kg^-1),每组20只。模型组、地塞米松组、复方甘草酸苷各剂量组建立特应性皮炎模型。造模成功24 h后地塞米松组、复方甘草酸苷各剂量组分别灌胃给予相应药物,1次/d,连续给药14 d,正常对照组及模型组给予等体积生理盐水。试验结束后,游标卡尺测量小鼠右耳厚度,实时荧光逆转录法(RT-PCR)法及蛋白质免疫印迹(Western-blot)法测定右耳组织SDF-1、CXCR-4 mRNA及蛋白表达水平。结果:模型组右耳厚度、耳部皮炎组织SDF-1、CXCR-4 mRNA及蛋白表达水平显著高于正常对照组(P<0.05);地塞米松组、复方甘草酸苷各剂量组右耳厚度、耳部皮炎组织SDF-1、CXCR-4 mRNA及蛋白表达水平显著低于模型组(P<0.05),且随着复方甘草酸苷给药剂量的增加,各指标呈下降趋势(P<0.05);复方甘草酸苷低、中剂量组各指标与地塞米松组差异有统计学意义(P<0.05)。模型组耳部皮肤结构缺失,细胞水肿明显,大量淋巴细胞浸润;地塞米松组及复方甘草酸苷高剂量组皮肤结构较为完整,细胞水肿及炎细胞浸润明显减少;复方甘草酸苷低、中剂量组皮肤结构仍有缺失,细胞水肿、淋巴细胞浸润较模型组减轻。结论:复方甘草酸苷能明显抑制小鼠耳部特应皮炎反应、抑制小鼠耳部炎症细胞浸润;其机制与复方甘草酸苷能抑制SDF-1、CXCR-4 mRNA及蛋白表达水平有关。

三焦针法通过激活SDF-1α/CXCR4通路对快速老化模型小鼠学习和记忆能力的改善作用

目的:探讨三焦针法对快速老化模型(SAMP8)小鼠神经功能和基质细胞衍生因子1α/趋化因子受体4(SDF-1α/CXCR4)通路的改善作用,探讨三焦针法在SAMP8小鼠中的作用机制。方法:实验分为模型组(SAMP8小鼠)、非穴位针刺组(SAMP8小鼠+非穴位针刺)、穴位针刺组(SAMP8小鼠+穴位针刺)、穴位针刺+AMD3100组(SAMP8小鼠+穴位针刺+AMD3100处理)和对照组(SAMR1小鼠),每组10只小鼠。Morris水迷宫实验检测各组小鼠学习和记忆功能指标,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组小鼠海马组织中β淀粉样蛋白(Aβ)1-42水平,胆碱乙酰基转移酶(chAT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)试剂盒检测各组小鼠海马组织中chAT和AchE活性,Western blotting法检测各组小鼠海马组织中SDF-1α和CXCR4蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.05),海马组织中Aβ1-42水平升高(P<0.05),穿越平台次数、原象限游泳距离与总距离比值、原象限游泳时间与总时间比值和海马组织中chAT及AchE活性、SDF-1α及CXCR4蛋白表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,穴位针刺组小鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),海马组织中Aβ1-42水平降低(P<0.05),穿越平台次数、原象限游泳距离与总距离比值、原象限游泳时间与总时间比值和海马组织中chAT活性、SDF-1α及CXCR4蛋白表达水平升高(P<0.05);与穴位针刺组比较,穴位针刺+AMD3100组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.05),海马组织中Aβ1-42水平升高(P<0.05),穿越平台次数、原象限游泳距离与总距离比值、原象限游泳时间与总时间比值和海马组织中chAT活性、SDF-1α及CXCR4蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:三焦针法可能通过激活SDF-1α/CXCR4通路减少Aβ1-42的积累,改善SAMP8小鼠的神经功能。

厚朴酚通过调节SDF-1/CXCR4信号通路减轻LPS诱导的肾小球血管内皮细胞损伤

目的:研究厚朴酚对脂多糖(LPS)诱导的肾小球血管内皮细胞(GECs)损伤的影响以及基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/趋化因子受体-4(CXCR4)信号通路的作用。方法:体外培养人肾小球血管内皮细胞(HRGEC),将HRGEC分为正常组,模型组,厚朴酚-L、M、H组,厚朴酚+NUCC-390组共6组。除正常组外,其余组均用LPS诱导建立HRGEC损伤模型;CCK8法检测各组HRGEC增殖情况;流式细胞术检测各组HRGEC凋亡情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组HRGEC上清液白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组HRGEC中SDF-1、CXCR4 mRNA水平;Western blot检测各组HRGEC的SDF-1、CXCR4、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl2相关X蛋白(Bax)蛋白水平。结果:与正常组比较,模型组HRGEC存活率降低、凋亡率升高,IL-6、TNF-α水平显著升高,SDF-1mRNA、CXCR4 mRNA、SDF-1蛋白、CXCR4蛋白、Bax蛋白表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与模型组比较,厚朴酚-L、M、H组HRGEC存活率升高、凋亡率降低,IL-6、TNF-α水平显著降低,SDF-1mRNA、CXCR4 mRNA、SDF-1蛋白、CXCR4蛋白、Bax蛋白表达水平显著降低,Bcl-2蛋白表达水平显著升高,且呈剂量依赖性,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与厚朴酚-H组比较,厚朴酚+NUCC-390组HRGEC存活率降低、凋亡率升高,IL-6、TNF-α水平显著升高,SDF-1mRNA、CXCR4 mRNA、SDF-1蛋白、CXCR4蛋白、Bax蛋白表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:厚朴酚可能通过抑制SDF-1/CXCR4信号通路和HRGEC炎症反应、凋亡,而减轻LPS诱导的HRGEC损伤。

益肾养阴合剂通过CXCR4/STAT3信号通路对MRL/lpr小鼠肾脏发挥保护作用

目的：研究益肾养阴合剂对系统性红斑狼疮小鼠肾脏的保护作用并探讨其作用机制。方法：MRL/lpr疾病模式小鼠饲养发病后,益肾养阴合剂灌胃给药（17.25 g·kg-1）,同时阳性药组用醋酸泼尼松灌胃给药（0.65 mg·kg-1）,正常C57背景小鼠和实验MRL/lpr小鼠组灌胃同体积生理盐水,每天2次,连续给药28 d,每7 d收集尿液,检测尿蛋白变化情况;第29天取材肾脏组织,免疫荧光染色检测免疫球蛋白G（IgG）沉积情况;Raybiotech抗体芯片检测308个细胞因子变化情况,酶联免疫吸附测定（ELISA）验证部分变化因子（小鼠肾脏组织与患者血清水平）;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Janus激酶2/信号转导和转录活化蛋白3（JAK2/STAT3）信号的磷酸化水平、基质细胞衍生因子1/趋化因子受体4（SDF1/CXCR4）信号轴、辅助性T细胞17（Th17）分泌因子白细胞介素-17（IL-17）的表达情况。结果：与MRL/lpr组比较,在中药和激素给药组,随着给药时间延长,尿蛋白含量逐渐降低,在第4周变化最为明显（P〈0.05）,在给药28 d后,益肾养阴合剂组与醋酸泼尼松组的肾脏IgG沉积均有减轻（P〈0.05）。经Raybiotech抗体芯片筛查后发现,与C57正常小鼠,MRL/lpr疾病小鼠的肾脏SDF1,CXCR4蛋白信号表达有显著增强（P〈0.01）;与MRL/lpr疾病小鼠比较,益肾养阴合剂组的小鼠肾脏SDF1,CXCR4蛋白信号表达显著降低（P〈0.01）,经大样本量ELISA实验验证后,SDF1/CXCR4蛋白的抗体芯片结果可靠,进一步经Western blot实验检测发现,与正常C57小鼠比较,MRL/lpr小鼠肾脏组织中JAK2/STAT3信号通路被激活,其磷酸化蛋白表达增高（P〈0.05）,SDF1,CXCR4,IL-17蛋白表达明显升高（P〈0.05）;与模型小鼠比较,给予中药和激素灌胃处理28 d后JAK2,STAT3的磷酸化水平明显降低（P〈0.05）,SDF1,CXCR4蛋白表达下降（P〈0.05）,IL-17的表达也有明显的减少（P〈0.05）。结论：益肾养阴合剂可降低MRL/lpr模型小鼠的尿蛋白水平,其可通过抑制JAK2/STAT3与SDF1/CXCR4信号通路的激活,降低辅助性T细胞17的活性,减少IL-17的分泌,起到肾脏保护作用。

黄芪-莪术配伍对结肠癌原位移植瘤模型小鼠SDF-1/CXCR4/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨黄芪-莪术抑制结肠癌原位移植瘤模型小鼠肿瘤生长的可能作用机制。方法:运用分子对接技术预测黄芪、莪术中主要活性成分与通路靶点蛋白基质细胞衍生因子-1(SDF-1),趋化因子受体4(CXCR4),核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的分子间相互作用。建立CT26.WT结肠癌原位移植瘤模型进行体内实验验证。将60只BALB/c雄性小鼠随机分为假手术组,模型组,5-氟尿嘧啶(5-Fu)组、黄芪-莪术低、中、高剂量组,每组10只。假手术组和模型组给予生理盐水灌胃,5-Fu组(30 mg·kg^(-1))腹腔注射,黄芪-莪术低、中、高剂量组(0.32,0.64,1.28 g·kg^(-1))灌胃。干预15 d后,完整剥离原位瘤,取肿瘤相邻结肠组织5~6 cm。测量并计算肿瘤体积,苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤组织及结肠组织病理学变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中趋化因子SDF-1及其受体CXCR4,磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达,Western blot和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤组织趋化因子SDF-1及其受体CXCR4,NF-κB p65,细胞周期蛋白D1(Cyclin D1),癌基因c-Myc蛋白及mRNA表达水平。结果:与模型组比较,5-Fu与黄芪-莪术治疗均能降低原位瘤体积(P<0.05,P<0.01),5-Fu组抑瘤率最高(61.38±2.34)%,黄芪-莪术中剂量组抑瘤率(43.43±3.71)%。与模型组比较,各药物组肿瘤与结肠组织的病理学改变转轻。与模型组比较,黄芪-莪术显著下调了肿瘤小鼠结肠组织SDF-1,CXCR4,p-NF-κB p65蛋白表达水平(P<0.01),对肿瘤组织SDF-1,CXCR4,NF-κB p65,Cyclin D1,c-Myc的蛋白及mRNA表达明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芪-莪术能够抑制结肠癌原位移植瘤的生长,其干预机制可能与调节SDF-1/CXCR4/NF-κB信号通路中相关蛋白及其mRNA表达有关。

乳癌术后方通过SDF-1/CXCR4信号通路对4T1小鼠乳腺癌肺转移的影响

目的:研究乳癌术后方通过SDF-1/CXCR4信号通路对乳腺癌肺转移小鼠模型中肺转移灶的影响。方法:建立4T1乳腺癌小鼠移植瘤肺转移模型,随机分为模型组、中药组、西药组、联合用药组,观察各组小鼠肺转移情况;采用RT-PCR、Western Blot法及免疫组化法检测肺组织中SDF-1/CXCR4信号通路相关分子mRNA及蛋白表达。结果:接种4周后小鼠的成瘤率及肺转移率为100%。中药组、西药组、联合用药组的肺转移抑制率为42.85%、49.35%、52.59%,较模型组显著下降(P<0.05)。与模型组比较,各治疗组NF-κB、CXCR4、CXCL12、CD147 mRNA表达显著降低(P<0.05,P<0.01);同时CXCR4、SDF-1、NF-κB、p-NF-κB、CD147蛋白表达亦显著下降(P<0.01)(中药组CD147除外)。结论:乳癌术后方可以抑制乳腺癌肺转移发生,同时降低肺转移灶中SDF-1/CXCR4信号通路相关分子的表达。