细胞因子信号传导抑制蛋白-3(SOCS-3)作用的研究进展

细胞因子信号传导抑制蛋白-3(SOCS-3)可以对多种细胞因子和激素(包括LIF,IL-11,生长激素,胰岛素和瘦素)产生的信号传导过程进行负性调节,这些信号传导过程的作用涉及到启动免疫反应,控制炎症过程,调节生长发育以及淋巴细胞的分化等方面。最新研究表明,SOCS-3与中枢神经系统的免疫、炎症反应和人体肥胖等有着重要的联系,本文主要就SOCS-3这两方面的作用作一综述。

细胞因子信号转导抑制蛋白SOCS-3在成年大鼠脑内的基础表达

采用免疫组织化学方法 ,探讨细胞因子信号转导途径抑制蛋白 SOCS-3在大鼠脑内的基础表达与细胞定位。结果显示 :SOCS-3免疫阳性细胞在脑内分布广泛 ,阳性产物主要分布在神经元核内 ;部分神经元的胞浆、神经纤维、胶质细胞及血管内皮细胞也呈 SOCS-3免疫阳性。结果表明 :SOCS-3蛋白在脑内具有广泛的基础表达 。

信号传导和转录激活因子3及其蛋白抑制剂在狼疮小鼠肾组织中的表达

目的探讨信号传导和转录激活因子3(STAT3)及其蛋白抑制剂(PIAS3)在MRL/lpr狼疮小鼠肾组织中的表达。方法以18周龄雌性MRL/lpr小鼠作为狼疮肾炎组,相同周龄的BALB/C小鼠作为正常对照组。分别取两组小鼠肾组织,应用荧光定量RT-PCR法检测STAT3和PIAS3 mRNA的表达,采用Western blot和免疫组织化学方法检测磷酸化STAT3(p-STAT3)和STAT3的蛋白表达,同时检测小鼠实验室指标以及肾脏组织病理的表现。结果 MRL/lpr小鼠尿蛋白、血尿素氮、血肌酐均高于BALB/C小鼠(P<0.05)。MRL/lpr小鼠肾脏组织病理主要表现为肾小球系膜细胞增生,肾小管间质炎症细胞浸润,而BALB/C小鼠肾小球、肾小管无异常。MRL/lpr小鼠肾组织STAT3 mRNA和p-STAT3蛋白的表达均较BALB/C小鼠升高(P<0.05),其PIAS3mRNA表达则较BALB/C小鼠明显降低(P<0.01),而两组小鼠STAT3总蛋白的表达无明显差别。结论 MRL/lpr小鼠肾组织STAT3 mRNA和p-STAT3蛋白的表达均高于对照组,而其PIAS3 mRNA表达低于对照组。

上调急性淋巴细胞白血病中细胞因子信号传导抑制因子3的表达促进NK细胞杀伤活性的机制研究

目的:检测细胞因子信号传导抑制因子3(SOCS3)在急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达水平,并探讨NK细胞对过表达SOCS3细胞系Jurkat细胞的杀伤作用。方法:采用RT-PCR技术检测20例ALL患儿及20例健康体检儿童(正常对照组)外周血单个核细胞中SOCS3 mRNA表达水平。免疫磁珠分选健康人外周血NK细胞,采用流式细胞术检测其纯度。慢病毒载体感染Jurkat细胞使之过表达SOCS3,RT-PCR检测慢病毒感染后细胞中SOCS3 mRNA表达情况。将NK细胞与Jurkat细胞共培养,LDH释放法检测杀伤活性,ELISA检测TNF-α和IFN-γ浓度。流式细胞术检测过表达SOCS3后Jurkat细胞表面NKG2D配体MICA与MICB的表达。Western blot检测过表达SOCS3对Jurkat细胞中STAT3蛋白磷酸化水平的影响。结果:ALL患儿外周血单个核细胞中SOCS3 mRNA表达水平较正常对照组显著降低。流式细胞术检测分离NK细胞纯度可达70%以上。慢病毒感染的Jurkat细胞中SOCS3 mRNA表达显著增加。过表达SOCS3的Jurkat细胞可显著促进NK细胞对其杀伤能力,且可上调NK细胞TNF-α和IFN-γ的分泌。流式细胞术检测结果显示,过表达SOCS3后Jurkat细胞表面NKG2D配体MICA与MICB表达水平均显著增加。Western blot结果显示,过表达SOCS3后可显著降低Jurkat细胞中JAK/STAT信号通路中STAT3蛋白的磷酸化水平。结论:在ALL中SOCS3 mRNA表达显著降低,而过表达SOCS3可能通过负性调控JAK/STAT信号通路上调Jurkat细胞表面NKG2D配体MICA与MICB的表达,进而促进NK细胞的杀伤能力。

白藜芦醇通过上调SOCS-3蛋白抑制脂多糖诱导的成骨细胞表达MIP-2

目的:探讨白藜芦醇是否依赖细胞因子信号转导抑制因子3(suppressor of cytokine signaling-3,SOCS-3)蛋白发挥对牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodontalis,P.e)脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)诱导成骨细胞产生巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatory protein-2,MIP-2) mRNA的抑制作用。方法:以不同浓度的白藜芦醇(0、5、10和20μmol/L)诱导MC3T3-El细胞和以20μmol/L白藜芦醇作用于细胞不同时间(0、10、30、60、120和180 min)后,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测SOCS-3蛋白的表达。SOCS-3的si RNA(si-SOCS-3)和对照si RNA(si-control)转染成骨细胞后,以实时反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法检测SOCS-3沉默效率;在有或无白藜芦醇预处理转染细胞1 h后,用20μg/mL P.e-LPS刺激MC3T3-E1细胞24 h,实时RT-PCR检测MIP-2 mRNA的变化。采用SPSS 13.0软件包对结果进行单因素方差分析和Dunnett t检验。结果:不同浓度白藜芦醇诱导MC3T3-El表达SOCS-3蛋白具有剂量依赖性;在所观察的180 min内,20μmol/L白藜芦醇作用成骨细胞60 min时,SOCS-3蛋白表达量最大。si-SOCS-3对SOCS-3 mRNA的沉默效率是63.7%,转染si-SOCS-3后,增加LPS诱导成骨细胞产生MIP-2 mRNA,并且削弱白藜芦醇对MIP-2 mRNA表达的抑制作用。结论:白藜芦醇通过上调SOCS-3蛋白,抑制P.e-LPS诱导成骨细胞表达的MIP-2 mRNA。

冬凌草甲素调节JAK2/STAT3/SOCS-1信号通路对糖耐量异常大鼠胰岛素抵抗的影响

目的探讨冬凌草甲素(Oridonin,Ori)对糖耐量异常(impaired glucose tolerance,IGT)大鼠胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的影响及作用机制。方法采用高脂饮食喂养联合链脲佐菌素注射法构建IGT大鼠IR模型,大鼠分为正常组(CT组)、IGT模型组(IGT组)、Ori组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1))、Ori+Colivelin(COL)组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1)Ori+2 mg/kg COL),每组6只。血糖检测仪测定空腹血糖(FPG)、葡萄糖耐量试验(OGTT)2 h血糖(2 hPG),ELISA试剂盒测定空腹胰岛素(FINS)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),血液自动分析仪测定血清胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,HE染色观察肝脏病理形态,Western blot验证附睾脂肪磷酸化(p)-激活Janus激活激酶2(JAK2)、JAK2、p-信号转导和转录激活因子3(STAT3)、STAT3、p-细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS-1)、SOCS-1蛋白表达。结果与CT组比较,IGT组大鼠肝脏细胞肿胀,胞浆内可见大量大小不一的脂肪空泡,细胞核被脂肪空泡挤压偏位,且发生炎性细胞浸润,FPG、2hPG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、MCP-1、TNF-α以及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-SOCS-1/SOCS-1蛋白表达水平升高,血清HDL-C水平下降(P<0.05);与IGT组相比,Ori组大鼠肝脏细胞胞浆内脂肪滴及空泡数量明显减少,细胞肿胀有所缓解,未见炎性细胞浸润,FPG、2hPG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、MCP-1、TNF-α以及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-SOCS-1/SOCS-1蛋白表达水平下降,血清HDL-C水平升高(P<0.05);与Ori组相比,Ori+COL组大鼠肝脏脂肪变状况加剧,细胞肿大,血清FPG、2hPG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、MCP-1、TNF-α以及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-SOCS-1/SOCS-1蛋白表达水平升高,血清HDL-C水平下降(P<0.05)。结论Ori对IGT大鼠IR的缓解作用可能与抑制JAK2/STAT3/SOCS-1信号通路激活有关。

进展期结直肠癌合并的低蛋白血症与癌组织中细胞因子信号转导抑制因子-3表达的相关性研究

目的研究细胞因子信号转导抑制因子-3(suppressor of cytokine signaling-3,SOCS-3)在进展期结直肠癌低蛋白血症发病中的作用及意义。方法根据入院第2天用溴甲酚绿法(bromcresol green,BCG)测量空腹血白蛋白(Albumin,Alb)的浓度,将63例进展期结直肠癌组织分为两组:低蛋白血症组(Alb<35g/L)38例及非低蛋白血症组(Alb≥35g/L)25例,应用RT-PCR半定量的方法检测socs-3mRNA在低蛋白血症组以及非低蛋白血症组中的表达。结果 SOCS-3mRNA在低蛋白血症组癌组织中的阳性表达率较非低蛋白血症组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SOCS-3在进展期结直肠癌低蛋白血症的发生及发展中起到重要作用。

细胞因子信号抑制蛋白3与瘦素抵抗、胰岛素抵抗

细胞因子信号抑制蛋白（suppressors of cytokinesignaling,SOCS）是由3个研究小组分别采用不同的方法发现的,也称为细胞因子信号转导抑制因子。它主要通过抑制JAK/STAT通路对细胞因子进行负反馈调节,被称为细胞的“分子刹车”。SOCS家族包括SOCS-1、SOCS-2、SOCS-3、CIS（cytokine—inducible SH2-containing protein）以及SOCS-4-SOCS-7。

IL-10上调SOCS3抑制BmpA刺激的小鼠巨噬细胞炎性因子分泌

目的探索白细胞介素10(IL-10)对Borrelia疏螺旋体基础膜蛋白A(Bmp A)致炎作用的抑制效应,并观察IL-10对抗炎信号通路关键分子-细胞因子信号传送阻抑物3(SOCS3)表达影响。方法培养小鼠RAW264.7细胞,分为对照组、20μg/m L Bmp A组、20μg/m L Bmp A联合10 ng/m L IL-10处理组、20μg/m L Bmp A联合20 ng/m L IL-10处理组。于分组刺激后12、24 h,收集细胞上清液,ELISA检测上清液IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,实时荧光定量PCR检测各组细胞SOCS3 mRNA相对表达水平。结果两时间点IL-10处理组,上清液IL-6、TNF-α剂量均较Bmp A组明显下降。与对照组相比,其他各组SOCS3mRNA相对表达量均明显升高,且IL-10处理组SOCS3 mRNA相对表达量较Bmp A组升高更明显。结论 IL-10通过上调SOCS3降低Bmp A的致炎作用,减少小鼠巨噬细胞炎性因子的分泌。

细胞因子信号转导蛋白抑制因子1,3与乙型肝炎病毒感染

细胞因子信号转导蛋白抑制因子(suppressor of cytokine signaling proteins,SOCS)是一种细胞因子通路抑制蛋白,在调节干扰素抗病毒作用中发挥着重要的作用.目前的研究显示,SOCS1和SOCS3与乙型肝炎病毒(hepatitis B viruses,HBV)感染之间密切相关,抑制或者刺激SOCS1和SOCS3的表达,可能通过调节干扰素的产生影响其抗病毒效果,也可能与其他细胞因子或转录调节因子共同作用影响HBV的致病性.该文主要讨论SOCS1和SOCS3在HBV感染过程中可能的作用机制.

老年急性胰腺炎患者血清热休克蛋白70细胞因子信号转导抑制因子-3淀粉酶表达与磁共振成像严重指数的相关性分析

目的 探讨老年急性胰腺炎(AP)患者血清热休克蛋白70(HSP70)、细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)、淀粉酶表达与磁共振成像(MRI)严重指数(MRSI)的相关性分析。方法 选取2017年10月至2019年10月96例急性胰腺炎患者作为观察组,根据中华医学会外科学分会胰腺外科学制定的《急性胰腺炎诊治指南》分为轻度20例、中度41例、重度35例;另选取96名健康体检者作为对照组。对比2组临床资料、血清HSP70、SOCS-3、淀粉酶表达,分析血清指标对急性胰腺炎的诊断价值,并对比不同病情程度血清指标水平、MRSI,分析血清指标、MRSI与病情程度相关性及血清指标与MRSI的相关性。结果 观察组血清HSP70、淀粉酶水平高于对照组,SOCS-3水平低于对照组(P<0.05);SOCS-3诊断急性胰腺炎曲线下面积(AUC)(0.809)>淀粉酶(0.802)>HSP70(0.739),选取诊断价值最优的血清指标做联合诊断发现,SOCS-3、淀粉酶联合诊断急性胰腺炎AUC为0.891,敏感度为73%、特异度为91%;血清HSP70、淀粉酶表达、MRSI随病情程度加重上升,而血清SOCS-3表达则随病情程度加重降低(P<0.05);血清HSP70、淀粉酶水平、MRSI与急性胰腺炎病情程度呈正相关,SOCS-3与病情程度呈负相关(P<0.05);血清HSP70、淀粉酶水平与急性胰腺炎患者MRSI呈正相关,血清SOCS-3水平与MRSI呈负相关(P<0.05)。结论 血清HSP70、SOCS-3、淀粉酶水平在老年急性胰腺炎患者中呈异常表达,并与MRSI存在一定相关性,有望成为老年急性胰腺炎诊断的有效血清标志物,为临床评估病情程度提供数据支持。

孟鲁司特钠联合卡络磺钠治疗儿童过敏性紫癜疗效及对血清细胞因子、信号转导抑制蛋白3和低糖基化IgA1水平的影响

目的:探讨孟鲁司特钠联合卡络磺钠对儿童过敏性紫癜的应用价值。方法:选取2014年1月至2017年1月我院收治并确诊的过敏性紫癜患儿128例,按照随机数表法分为研究组和对照组各64例。两组患儿基础治疗护理相同,研究组患儿给予孟鲁司特钠联合卡络磺钠治疗,对照组给予孟鲁司特钠治疗,观察两组患儿的临床症状消退时间、临床疗效、不良反应发生情况及血清IL-6、TNF-α、细胞因子信号转导抑制蛋白3(SOCS3)、低糖基化IgA1(Gd-IgA1)水平。结果:研究组患儿的皮肤紫癜、消化道病变、关节肿痛、肾脏病变消失时间均短于对照组(P均<0.01)。研究组总有效率为93.75%,高于对照组的73.44%(P<0.01);研究组不良反应发生率为20.31%,与对照组的18.75%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组患儿治疗后IL-6、TNF-α、SOCS3 mRNA、Gd-IgA1水平均下降,且研究组均低于对照组(P均<0.05)。结论:孟鲁司特钠联合卡络磺钠能够有效治疗儿童过敏性紫癜,减轻炎症反应,降低血清SOCS3、Gd-IgA1水平,改善毛细血管通透性,值得临床推广应用。

高糖环境LIF介导STAT3/SOCS3信号通路参与成骨细胞分化机制研究

目的研究高糖环境下白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)介导STAT3/SOCS3信号通路对成骨细胞分化的影响及其作用机制。方法利用ELISA检测2型糖尿病患者血清白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)家族中LIF及炎性因子的水平;通过RT-PCR、Western blot检测体外高糖环境下成骨分化标志物ALP、RUNX2、OCN、OPN以及细胞因子信号抑制因子3(suppressors of cytokine signaling,SOCS3)的m RNA和蛋白表达情况。结果 2型糖尿病患者血清炎性因子和LIF的水平明显升高。高糖或LIF显著降低了成骨分化标志物ALP、RUNX2、OCN和OPN的m RNA和蛋白水平,同时上调了SOCS 3和PSTAT3的表达。加入50 nmol/L或100 nmol/L STAT 3抑制剂JSI-124可改善成骨分化标志物的表达下调。结论 LIF通过介导STAT3/SOCS3信号通路参与高糖诱导下的成骨细胞分化。本研究为高糖导致的成骨障碍奠定了分子生物学理论基础并对靶点药物的研发提供了实验依据。

细胞因子信号传导抑制蛋白1对糖基化终末产物诱导的肾小管细胞转分化的影响

目的观察细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS-1)对糖基化终末产物(AGEs)诱导肾小管上皮细胞(HKC)转分化及JAK/STAT信号通路的影响。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HKC),应用脂质体2000分别转染pCR3.1/SOCS-1表达质粒和pCR3.1空质粒载体,G418筛选阳性克隆。分别采用白蛋白和AGEs进行刺激。采用Western印迹检测SOCS-1、α-SMA、E-钙黏着糖蛋白(E-cadherin)、Ⅰ型胶原(collagenI,ColI)、信号转导和转录活化因子1、3(STAT1、STAT3)及其磷酸化蛋白(p-STAT1、p-STAT3)的表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)测定细胞上清液中转化生长因子-β1(TGF-β1)的分泌;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测α-SMA和E-cadherin mRNA的表达。结果与对照组相比,AGEs组肾小管细胞α-SMA和ColI蛋白表达明显上调,细胞培养上清中TGF-β1含量增加,α-SMA mRNA的表达增加,而E-cadherin蛋白和mRNA表达下调。SOCS-1过表达能够抑制AGEs刺激引起的HKC细胞α-SMA和ColI的表达及STAT1和STAT3的磷酸化,减少TGF-β1的含量,下调AGEs刺激引起的HKC细胞α-SMA mRNA的表达,同时能够逆转AGEs刺激引起的HKC细胞E-cadherin蛋白和mR-NA的下调表达。结论SOCS-1过表达抑制AGEs诱导的肾小管上皮细胞转分化可能是通过抑制JAK/STAT信号通路活化实现的。

肝细胞癌组织SOCS1和STAT3蛋白的表达意义

目的:探讨SOCS1和STAT3蛋白在HCC组织中的表达、相互关系及在HCC发生发展中的意义.方法:应用免疫组化方法检测48例HCC组织和癌周肝组织、肝硬化(liver cirrhosis,LC)组织(n=11)及正常肝组织中(n=11)SOCS1和STAT3的表达水平.结果:癌周肝组织中SOCS1蛋白表达强度显著高于HCC组织,SOCS1蛋白在LC组织及正常肝组织中全部呈阴性表达.HCC组织和癌周肝组织STAT3蛋白阳性表达率显著高于LC组织和正常肝组织;SOCS1在瘤体大小间的表达有显著性差异(P<0.01).STAT3在表达AFP阴性和阳性癌组织组间有显著性差异(P<0.05).HCC组织中SOCS1和STAT3表达具有显著等级正相关(rs=0.431,P<0.01).结论:SOCS1和STAT3表达与HCC的发生密切相关,且两者之间的表达强度具有显著等级正相关.

17β-雌二醇通过SOCS3抑制泡沫细胞形成的机制初探

目的明确雌激素是否能够调节动脉粥样硬化斑块泡沫细胞中的胆固醇流出。方法在体研究通过对5周龄载脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)-/-小鼠进行双侧卵巢切除术(OVX,n=16)或假卵巢切除术(Sham组,n=8),将卵巢切除的小鼠分为2组:OVX+E2组(n=8)小鼠皮下注射溶于丙酮的17-β雌二醇(E2)5μg/d,OVX组(n=8)注射丙酮作为对照。观察2组动脉粥样硬化斑块形成、脂质沉积和胆固醇流出情况的差别;体外研究通过干预RAW264.7细胞,观察其胆固醇流出的水平。结果与OVX组相比,Sham组和OVX+E2组血清总胆固醇和甘油三酯水平均下降,差异有统计学意义(P<0.01~0.05)。与OVX组相比,Sham组和OVX+E2组斑块面积分别减少22.03%和21.84%,脂质沉积分别下降20.57%和30.36%(P均<0.01)。E2增加了斑块中ABCA1和SOCS3的表达。在细胞RAW264.7中,E2能够逆转janus激酶/信号转导和转录激活子(JAK/STAT)ABCA1表达的抑制,但这种逆转作用在SOCS3受抑制的细胞中未发现。SOCS3过表达能够通过抑制JAK2/STAT3的磷酸化提高ABCA1的表达。结论E2能够上调巨噬细胞ABCA1的表达,并可通过上调SOCS3进而调控胆固醇流出。

运动、膳食干预下细胞信号抑制因子3对肥胖大鼠外周瘦素抵抗作用机制的研究

目的:观察运动、膳食干预下肥胖大鼠肝脏细胞信号抑制因子3(SOCS3)、长型瘦素受体(LP-Rb)蛋白水平的变化,探讨SOCS3在肥胖大鼠外周瘦素抵抗发生及改善过程的作用。方法:以高脂饮食制备肥胖瘦素抵抗大鼠动物模型,随机分组为高脂膳食对照组(H16)、高脂膳食运动组(HHE)、普通膳食运动组(HNE)、普通膳食组(HN)及原有的空白对照组(N16)。运动、膳食干预8周后,采用Western blot法检测大鼠肝脏中SOCS3、LP-Rb水平,放射免疫法测定血清胰岛素水平,用酶联接免疫吸附法测定血清瘦素水平。结果:1)8周干预措施后,各组血清瘦素水平仍显著性高于与N16组(P<0.05),但HNE、HHE组已显著性低于H16组(P<0.05),且HNE显著性低于HHE及HN组(P<0.01);2)运动、膳食干预并未造成各干预组大鼠肝脏LP-Rb蛋白水平与H16组的显著性差异(P>0.05)3)H16组与N16组大鼠肝脏SOCS3蛋白水平无显著性差异,只有HNE组大鼠肝脏SOCS3蛋白较H16组及N16组有显著性下降(P<0.01),且显著性低与HHE及HN组(P<0.01)。结论:1)高脂膳食导致大鼠肝脏LP-Rb蛋白水平显著下降可能是外周瘦素抵抗的发生机制之一。但运动、膳食干预并不能提高大鼠肝脏LP-Rb蛋白水平,提示肥胖大鼠瘦素抵抗的改善可能与肝脏LP-Rb蛋白水平无关。2)运动联合膳食干预可以显著性下调大鼠肝脏SOCS3蛋白水平,但却对LP-Rb无任何影响作用,提示SOCS3可能是通过影响瘦素受体后信号水平调节体内物质能量代谢,而改善外周瘦素抵抗状态。

肾癌组织中SOCS3、TFAR19蛋白表达及其病理分级的相关性分析

分析肾癌组织中,SOCS3、TFAR19蛋白表达与病理分级的相关性。方法 本院(2023年1月-12月)78例肾癌患者,取78份癌旁正常组织、癌组织标本,根据不同的病理分级分为三组,Ⅰ级(29例)、Ⅱ级(25例)、Ⅲ~Ⅳ级(24例),开展SOCS3、TFAR19蛋白表达检测,分析其与病理分级的相关性。结果 肾癌组织SOCS3、TFAR19蛋白阳性表达率较正常组织低,P<0.05;Ⅰ级、Ⅱ级与Ⅲ~Ⅳ级患者SOCS3、TFAR19蛋白阳性表达率存在差异,P<0.05;SOCS3、TFAR19蛋白表达与病理分级均呈负相关,P<0.05。结论 SOCS3、TFAR19蛋白表达与病理分级呈负相关,两者的表达水平,在肾癌发生发展中具有较为显著的意义。

黄芪多糖诱导SOCS3表达对鸡巨噬细胞炎症反应的抑制作用

试验旨在探究黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对LPS诱导的鸡巨噬细胞(HD11)炎症模型的抗炎效果和作用机制。用不同浓度的LPS刺激鸡巨噬细胞(HD11),通过CCK8法检测细胞活力,实时荧光定量PCR检测白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA表达的变化,以确定构建细胞炎症模型的LPS最适添加浓度。将HD11分为对照组(C)、脂多糖(LPS)组(L)、黄芪多糖(APS)组(A)和黄芪多糖抑制脂多糖组(A+L),在LPS刺激后的2、6、12、24、48 h用实时荧光定量PCR法检测IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子(NF-κBp65)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)mRNA表达的变化,Western blotting法检测NF-κBp65、p38MAPK和SOCS3蛋白含量变化,ELISA检测IL-1β和TNF-α蛋白含量变化。细胞活力和IL-1β检测结果表明,构建细胞炎症模型的LPS最适添加浓度为0.5μg/mL。实时荧光定量PCR结果表明,与对照组相比,L和A组IL-1β、TNF-α、NF-κBp65、p38MAPK和SOCS3 mRNA表达均显著升高(P<0.05);与L组相比,A+L组在LPS刺激后的IL-1β、TNF-α、NF-κBp65和p38MAPK mRNA表达含量均显著降低(P<0.05),SOCS3 mRNA表达显著增加(P<0.05)。Western blotting结果表明,与对照组相比,A组P-NF-κBp65/NF-κBp65、P-p38MAPK/p38MAPK和SOCS3/α-tubulin比值均显著增加(P<0.05);与L组相比,A+L组P-NF-κBp65/NF-κBp65和P-p38MAPK/p38MAPK比值均显著降低(P<0.05);A+L组SOCS3/α-tubulin比值显著升高(P<0.05)。ELISA结果表明,与对照组相比,L组IL-1β和TNF-α蛋白含量在2~48 h均显著增加(P<0.05);与L组相比,A+L组IL-1β和TNF-α的蛋白含量在LPS刺激后12~48 h均显著降低(P<0.05)。以上结果表明,在LPS诱导的HD11细胞炎症模型中,APS通过促进SOCS3的表达抑制NF-κBp65和p38MAPK信号通路的过度活化,从而发挥抗炎作用。

瘦素对牦牛乳腺上皮细胞中SOCS3和STAT3蛋白表达的影响及催乳素的作用

[目的]本文旨在了解瘦素(LEP)对牦牛乳腺上皮细胞(YMEC)中细胞信号转导抑制因子3(SOCS3)和信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)蛋白表达的作用特点及催乳素(PRL)对LEP功能发挥可能产生的影响。[方法]以牦牛乳腺上皮细胞为载体,以添加和不添加催乳素(500 ng·mL^(-1))为前提,用不同剂量瘦素(0、50、100、200、400、800 ng·mL^(-1))作用YMEC 48 h以及添加JAK2/JAK3信号通路阻滞剂AG490作用48 h,采用Western blot技术检测SOCS3和STAT3蛋白的相对表达水平及STAT3蛋白磷酸化水平。[结果]无催乳素时,除50 ng·mL^(-1)瘦素外,其余各剂量均抑制SOCS3蛋白的表达,而各浓度LEP均抑制STAT3蛋白的表达,STAT3蛋白磷酸化水平高于蛋白表达水平。有催乳素时,SOCS3蛋白除了在100 ng·mL^(-1)LEP下被抑制之外,其余各剂量均有促进作用;800 ng·mL^(-1)LEP对STAT3蛋白表达有显著抑制作用,STAT3磷酸化水平除100 ng·mL^(-1)组外,均有所升高。添加AG490之后,SOCS3与STAT3都主要是通过JAK2激活诱导。[结论]高浓度瘦素会抑制SOCS3及STAT3蛋白的表达,瘦素主要通过JAK2/STAT3通路发挥生理功能,而SOCS3是JAK2/STAT3通路的负反馈调节因子;PRL能够缓解高浓度LEP导致的瘦素抵抗作用,并且能促进SOCS3和STAT3蛋白的表达。