PDZ结合激酶/T淋巴细胞因子激活的杀伤细胞源性蛋白激酶的作用机制及其在肿瘤治疗中的潜在价值

T淋巴细胞因子激活的杀伤细胞源性蛋白激酶(T-lymphokine-activated killer cell-originated protein kinase,TOPK)也被称为PDZ结合激酶(PDZ-binding kinase,PBK)。PBK/TOPK在有丝分裂进程中起至关重要的作用。PBK/TOPK被证实与恶性肿瘤的增殖、转移、侵袭及临床预后有关,因此,PBK/TOPK成为了肿瘤治疗一个具有吸引力的靶点。本文综述PBK/TOPK通过不同作用机制参与肿瘤的发生和发展,以进一步证实PBK/TOPK有望成为肿瘤治疗的靶点。

脐血细胞因子激活的杀伤细胞治疗肝癌患者的护理

目的探讨脐血细胞因子激活的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞治疗肝癌患者的护理方法。方法回顾性分析总结2012年5月至2014年4月解放军第105医院收治的接受脐血CIK细胞治疗的20例肝癌患者的临床资料。结果 20例患者均顺利完成治疗,无严重并发症发生,平均住院日(5.6±1.8)d。结论合理的护理可以有效避免接受脐血CIK细胞治疗的肝癌患者出现严重并发症,减轻焦虑心理。

肿瘤患者自体细胞因子激活的杀伤细胞治疗初步观察

目的研究细胞因子激活的杀伤细胞对肿瘤患者的免疫治疗效果。方法选择3例恶性实体瘤患者术后行细胞因子激活的杀伤细胞治疗,观察细胞因子激活的杀伤细胞体外的生长和增殖情况,同时观察患者细胞因子激活的杀伤细胞回输后的反应。结果细胞因子激活的杀伤细胞体外增殖良好,培养14 d可以扩增100倍左右,各种检测结果符合临床应用要求,回输后患者精神体力有明显提高。结论初步观察显示自体细胞因子激活的杀伤细胞体外增殖良好,回输治疗对患者安全有效。

细胞因子激活的杀伤细胞联合放化疗治疗直肠癌术后1例

直肠癌是常见的恶性肿瘤,常规治疗是手术后结合放疗和化疗。本例患者在手术后放化疗基础上早期接受了细胞因子激活的杀伤细胞输注治疗,不仅减轻了放化疗的不良反应,而且提高了生活质量,随访5年依然状况良好。

脐血来源淋巴因子激活的杀伤细胞对人卵巢癌裸鼠移植瘤治疗的实验研究

目的研究脐血来源的淋巴因子激活的杀伤细胞用于卵巢癌的过继免疫治疗的可行性。方法用脐血来源的淋巴因子激活的杀伤细胞对人卵巢癌裸鼠移植瘤进行治疗,并与外周血来源淋巴因子激活的杀伤细胞相对照。结果脐血来源的淋巴因子激活的杀伤细胞有明显的抑瘤作用,治疗23 d裸鼠瘤体体积为6.0 mm3,治疗后瘤体质量为(0.674±0.45)g,无明显移植物抗宿主病的发生。结论脐血可作为过继免疫治疗中效应细胞来源用于卵巢癌的治疗。

党参多糖对人胚、小鼠脾细胞增殖及体外淋巴因子激活的杀伤细胞活性的诱导作用

本研究观察了党参多糖对人胚胎及小鼠脾淋巴细胞增殖及体外淋巴因子激活的杀伤细胞(简称 LAK 细胞)活性诱导的作用,其在体外可促进有丝分裂素诱导的人胎脾及鼠脾淋巴细胞增殖,作用分别以500μg/ml 及250μg/ml 浓度为最强,也可与白细胞介素2(简称 IL-2)协同诱导人胎脾及鼠脾 LAK 活性,作用以1000μg/ml 为佳。结果提示,党参多糖对两种不同来源的脾细胞由丝裂原诱导的体外淋巴细胞转化及 IL-2诱导的 LAK活性均有促进作用。

小鼠LAK细胞MHC表达水平对其体外杀伤肿瘤活性的影响

目的探讨LAK细胞表面MHC的表达水平与体外肿瘤细胞杀伤活性的关系。方法使用siRNA沉默小鼠LAK细胞MHC-Ⅰ(H-2Kd)分子的表达,同时设空转染组和无关序列组,流式细胞仪检测不同组别靶蛋白的表达,LDH释放试验检测H-2Kd表达降低的LAK细胞对K562和H22肿瘤细胞株的杀伤活性。结果流式细胞检测证实siRNA能够抑制靶蛋白的表达,H-2Kd表达降低组对K562和H22肿瘤细胞的杀伤活性与对照组相比明显降低,空转染组和无关序列组与对照组无显著性差异。结论小鼠脾LAK细胞表面H-2Kd的表达水平与其体外杀伤活性相关。

慢性髓性白血病负载抗原的树突状细胞与CIK细胞共培养后体外增殖和特异性杀伤效率的研究

目的 观察负载抗原的树突状细胞与自体CIK细胞共培养后培养物的表型、增殖活性变化，及DC对CIK细胞毒活性的影响。方法 提取CML缓解期的BMMNC，常规诱导出DC及CIK细胞，用自体白血病细胞反复冻融抗原冲击DC，并和CIK细胞共培养，动态观察CIK细胞增殖活性和表型变化：并用MTT法检测其对自体白血病细胞、K562细胞、HL60细胞的杀伤效率。结果 DC与CIK细胞共培养，通过彼此的相互作用诱导出比CIK细胞增殖活性和杀伤活性更强的细胞群体。经抗原负载的DC活化的CIK，对自体白血病细胞、K562细胞的杀伤活性高于单纯CIK细胞，差异显著(P<0.05)。二者对HL60细胞的杀伤活性无显著差异。结论 DC与CIK共培养细胞是一种增殖活性和细胞毒活性高于CIK细胞的免疫活性细胞，经肿瘤抗原冲击的DC能明显提高CIK对肿瘤细胞的特异性杀伤活性。具有更广阔的应用前景。

乳腺癌树突状细胞瘤苗对自体CIK细胞生物活性的影响

目的探讨乳腺癌树突状细胞瘤苗(DCs)对自体CIK细胞生物活性的影响。方法取诱导7d的活化DCs瘤苗和诱导7d的自体CIK细胞混合培养(DC-CIK细胞),同期自体CIK细胞为对照组。检测2、8、14d的DC-CIK细胞CD3与CD56表型、培养上清液IL-12的水平及测定混合培养8d时对乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒效应。结果混合培养14d的DC-CIK细胞增殖率显著高于CIK细胞(P<0.01),但CD3和CD56表型无显著变化(P>0.05)。DC-CIK细胞对MCF-7乳腺癌细胞的特异性溶解率和细胞毒活性均高于CIK细胞(P<0.01);CIK细胞强烈刺激DCs分泌IL-12,混合培养2d时,DCs的IL-12p40分泌水平达到高峰。结论乳腺癌DCs瘤苗与自体CIK细胞混合培养后(DC-CIK细胞),进一步促进了DCs的成熟并增强了CIK细胞的细胞毒活性。

DC-CIK对卵巢癌细胞杀伤作用及临床治疗安全性评价

目的树突状细胞(dendritic cells,DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)经体外共培养后,探讨其增殖能力和对卵巢癌细胞的杀伤能力,并对其治疗卵巢肿瘤的安全性进行评价。方法提取健康志愿者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),通过不同细胞因子组合,分别诱导培养DC和CIK细胞,并共培养,用苔盼蓝染色计算活细胞扩增倍数,流式细胞术检测细胞表型,乳酸脱氢酶法(LDH)检测细胞毒性,酶联免疫剂吸附法(ELISA)检测细胞分泌因子水平。在卵巢癌患者签署知情同意书后,提取卵巢癌患者PBMC,诱导DC、CIK,并共培养,将质检合格的DC、CIK细胞通过腹腔注射的方式回输入患者体内,根据美国国立癌症研究所发布的《常见不良反应标准》,对不良反应进行判定,评价DC-CIK细胞治疗的近期安全性。结果 DC和CIK细胞共培养后,CIK增殖速度明显快于CIK单独培养,DC和CIK成熟分型明显增加,对肿瘤的杀伤能力比CIK单独培养时更强,且随着效靶细胞比的增加,杀伤肿瘤能力逐渐增强;DC-CIK回输早期,患者并未出现明显副反应。结论 DC-CIK共培养后,细胞增殖能力、成熟分型及协同抗瘤作用均增强;此外,DC-CIK相对安全可行。

抗原致敏DC联合LAK细胞对肺腺癌细胞杀伤作用的研究

目的:观察抗原致敏树突状细胞(DC)联合淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞对肺腺癌细胞的杀伤作用。方法:采用密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞(PBMC),常规诱导出DC、LAK细胞。倒置显微镜观察细胞的形态和增殖情况;应用流式细胞仪(FCM)测定细胞表型上变化鉴定这两种细胞。流式细胞仪检测DC经抗原冲击和未经抗原冲击后其表型变化;利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测法把DC-LAK细胞和DC-LAK-A549细胞作为效应细胞,肺腺癌A549细胞作为靶细胞,进行杀伤试验。结果:①体外诱导单个核细胞培养出DC和LAK细胞。②共培养后DC-LAK细胞的免疫表型表达增加。抗原致敏DC联合LAK细胞(DC-A549-LAK)组的免疫表型表达与对照组相比更有显著性意义。③共培养细胞在增殖倍率上有显著意义。④MTT显示共培养后的LAK细胞杀伤肿瘤细胞活性增强,抗原致敏后DC-A549-LAK抗肿瘤效应增强更显著。结论:从外周血单个核细胞中诱导出具有典型形态和免疫表型的DC和LAK细胞。DC和LAK细胞共培养细胞,增殖活性、免疫表型、杀伤活性方面高于单纯培养的LAK细胞。抗原致敏后DC-A549-LAK抗肿瘤效应增强更显著。

CIK细胞体外培养的免疫表型

目的探讨体外培养过程中细胞因子激活的杀伤细胞(CIK)免疫表型的动态变化。方法通过向外周血单个粒细胞(PBMC)中加入白细胞介素2(IL-2)、γIL-1α、γ干扰素(γ-IFN)与抗CD3McAb,诱导出CIK细胞。经流式细胞分析法对CIK细胞进行动态表型分析。结果动态表型分析显示,在第14~21天时CD3+CD16+56+细胞为(31·6±5·5)%^(35·8±9·7)%,呈高表达的平台期。结论CIK细胞在体外培养14~21d,CIK细胞CD3+CD16+56+双阳性细胞呈高表达,此时临床应用可取得较好疗效。

DC-CIK细胞联合手术治疗原发性肝癌的临床研究

目的:评价树突状细胞(Dendritic cells,DC)-细胞因子激活的杀伤细胞(Cytokine induced killer,CIK)即DC-CIK细胞联合手术治疗原发性肝癌的临床疗效。方法:将67例原发性肝癌患者随机分为治疗组和对照组,治疗组34例,行肝癌切除术,术后给予DC-CIK细胞治疗。对照组33例,行肝癌切除术。治疗结束后比较2组的免疫功能、生活质量、生存率、肿瘤复发率及不良反应。结果:治疗组DC-CIK细胞治疗后CD3+、CD4+、CD16+CD56+和CD4+/CD8+比值明显上升,CD8+效应细胞比例下降,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,治疗组治疗后CD3+、CD4+、CD16+CD56+和CD4+/CD8+比值显著上升,CD8+效应细胞比例显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组有61.8%的患者生活质量得到改善,明显高于对照组的36.4%(P<0.05)。治疗组的1年生存率为91.2%,对照组为81.8%,治疗组的1年复发率为8.8%,对照组为15.2%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。自体DC-CIK细胞治疗常见的副反应为发热、寒颤,对症处理后均可缓解。结论:DC-CIK细胞联合手术治疗原发性肝癌安全有效,对提高肝癌患者的免疫功能,改善患者生活质量,提高治疗效果具有重要作用。

DC-CIK细胞疗法联合干扰素治疗慢性乙肝临床研究

目的观察DC-CIK细胞疗法联合干扰素对慢性乙型肝炎的治疗效果。方法 134例CHB患者随机分成治疗组(DC-CIK细胞疗法联合干扰素)50例和对照组(干扰素)84例,观察2组患者肝功能、HBV-DNA、HBeAg的变化,同时观察治疗组3个月和6个月时患者肝功能、HBV-DNA、HBeAg的变化。结果治疗组HBV-DNA转阴率与对照组差异无统计学意义(P>0.05),治疗组HBeAg阴转率(56%)、抗-HBe阳转率(40%)以及ALT复常率(88%)均明显高于对照组(分别为38.1%、19.1%、57.1%),治疗组治疗6个月时,其HBV-DNA转阴率(48%)、HBeAg转阴率(56%)、抗-HBe阳转率(40%)以及ALT复常率(88%)均明显高于治疗3个月时(分别为24%、32%、18%、70%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DC-CIK细胞疗法联合干扰素治疗慢性乙肝较单用干扰素疗效更佳。

肝癌的CIK细胞免疫治疗研究进展

肝癌在全球肿瘤相关疾病中的死因占第二位,常规方法对其治疗效果并不理想,因此急需寻找新的有效方法来治疗。细胞因子激活的杀伤细胞是一种新型的免疫效应细胞,对肿瘤细胞的杀伤具有T淋巴细胞的高效性和NK细胞的非MHC限制性的特点,是目前对肝癌过继免疫治疗的有效方法之一。本文从细胞因子激活的杀伤细胞的扩增培养方法及研究进展、不同细胞因子及作用途径对其活性的影响、在杀伤肿瘤细胞中的作用机理及在肝癌治疗的实验研究与临床应用等方面进行了综述。

CIK细胞治疗慢性乙型肝炎的临床疗效观察

目的探讨CIK细胞对慢性乙型肝炎的治疗作用。方法分离患者自体外周血单个核细胞,用细胞因子诱导激活,并大量扩增,制备成细胞因子活化的杀伤细胞,应用该细胞治疗慢性乙型肝炎CIK组12例和对照干扰素组21例,所有病例均按标准诊断为慢性乙型肝炎。结果 CIK细胞可促进慢性乙型肝炎患者HBeAg阴转和HBV-DNA复常,疗效高于干扰素治疗组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CIK细胞对治疗慢性乙肝有临床前景。

CIK及DC-CIK细胞在非小细胞肺癌治疗中的研究进展

细胞因子激活的杀伤(CIK)细胞及树突细胞诱导的细胞因子激活的杀伤(DC-CIK)细胞均是新型的异质性免疫效应细胞群,其主要的效应细胞同时表达CD3和CD56两种膜蛋白分子,兼有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性和自然杀伤细胞的非主要组织相容性复合体限制性杀瘤优点。其与传统治疗方法相结合,可以使患者获得更好的临床受益率、更高的生存率和更长的生存期,显著提高患者的生活质量;应用DC-CIK比单独CIK具有更大的优势,可以提高靶向性和增强杀伤能力。CIK及DC-CIK的免疫细胞治疗为非小细胞肺癌的治疗提供了新的途径。

DC/CIK治疗非小细胞肺癌的临床研究现状

恶性肿瘤的发生率越来越高,其中以肺癌为首,肺癌中以非小细胞肺癌为主。但是临床上往往肺癌被诊断时已处于晚期,所以为了提高患者生存质量、机体免疫力及缓解率,分析DC、CIK、DC-CIK目前临床研究现状。

DC-CIK细胞治疗中晚期恶性肿瘤531例分析

目的:探讨手术及放、化疗后DC-CIK细胞治疗中晚期恶性肿瘤的临床疗效。方法:回顾性研究531例中晚期恶性肿瘤于手术及放、化疗后静脉输注DC-CIK细胞治疗的疗效及不良反应。结果:经DC-CIK细胞治疗后,OR 47.8%,CBR93.3%,Karnofsky评分增加≥20分者89.8%,T淋巴细胞rDNA转录活性分析(Ag-NORs)IS均值由5.16%增至5.68%,Ⅲ-Ⅳ期3年生存率61.2%,且对外周血象及心、肝、肾功能均无不良影响。结论:DC-CIK细胞安全、有效,能明显增强免疫功能,改善生存质量,提高3年生存率。