细胞因子释放综合征的体外试验探索性研究

目的建立细胞因子释放综合征(CRS)的体外评价方法,对试验体系细胞密度、阳性药种类及浓度进行探索。方法分别用CD3抗体(OKT3)(0.1~5μg)、OKT3(0.1~1μg)+CD28抗体(anti-CD28)(1、2μg·mL^(-1))、佛波酯(PMA)(10~100 ng·mL^(-1))、PMA(10~100 ng·mL^(-1))+离子霉素(ION)(1、5μg·mL^(-1))刺激外周血单个核细胞(PBMC)48 h,用CCK-8法检测细胞增殖情况来筛选PBMC的最佳密度及药物的最佳浓度。实验分为7组:对照组、OKT30.1μg+anti-CD281μg·mL^(-1)组、OKT30.5μg+anti-CD281μg·mL^(-1)组、OKT31μg+anti-CD281μg·mL^(-1)组、PMA 10 ng·mL^(-1)+ION 1μg·mL^(-1)组、PMA 25 ng·mL^(-1)+ION 1μg·mL^(-1)组、PMA 50 ng·mL^(-1)+ION 1μg·mL^(-1)组,分别与PBMC细胞暴露48 h,收集细胞上清,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测药物作用下PBMC释放细胞因子白介素-6(IL-6)、干扰素γ(IFN-γ)情况。结果与对照组相比,OKT3和PMA均引起中密度、高密度PBMC显著增殖,各剂量OKT3和PMA均引起细胞增殖。与阳性药单独使用相比,药物联合使用产生更强的细胞活化效应。与对照组相比,在OKT3(0.1~1μg)+anti-CD28(1μg·mL^(-1))作用下,PBMC释放IL-6、IFN-γ显著增加;在PMA(10~50 ng·mL^(-1))+ION(1μg·mL^(-1))作用下,PBMC分泌IFN-γ与对照组相比显著增加,在PMA(25~50 ng·mL^(-1))+ION(1μg·mL^(-1))作用下,PBMC分泌IL-6与对照组相比显著增加。结论确定了PBMC体外CRS风险评价方法的细胞密度、阳性药物种类及浓度、药物联合使用浓度。

基于“壮火”理论辨治嵌合抗原受体T细胞治疗相关细胞因子释放综合征的经验

细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)是嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)治疗引起的最常见的不良反应,往往以发热为突出表现。基于《黄帝内经》“壮火”理论,以发热为切入点,认为CAR-T治疗相关CRS的主要病机在于阳气亢极而阴相对不足,从而表现出燔灼炎热、食气伤阴的致病特点。中医辨治以调整阴阳、分期论治为治疗原则,解毒透邪兼以扶正固本,旨在恢复机体稳态以重新达到动态平衡,从而治疗CAR-T疗法引起的免疫毒性反应。

重组鼠IFN-γ腺病毒诱发细胞因子释放综合征小鼠模型的建立和观察

目的:通过向C57Bl/6J小鼠腹腔注射IFN-γ腺病毒(Ad-mIFN-γ)建立细胞因子释放综合征(CRS)的动物模型。方法:构建Ad-mIFN-γ及对照Ad-lacZ腺病毒载体,分别以MOI=100体外转染小鼠腹腔巨噬细胞,流式细胞术检测其对细胞mIFN-γ分泌的影响。将40只雌性C57Bl/6J小鼠按随机数字表法分为对照组、载体对照组、病毒低、中、高剂量组(每组8只),分别向各组小鼠腹腔注射PBS(200μL)、Ad-lacZ(2×10^(7)PFU/只)、Ad-mIFN-γ(5×10^(6)PFU/只)、Ad-mIFN-γ(1.5×10^(7)PFU/只)和Ad-mIFN-γ(2×10^(7)PFU/只)。每日观测小鼠的体质量及生存情况;第3天时采用流式细胞术检测小鼠外周血和脾内单核细胞(CD11b^(+))、巨噬细胞(CD11b^(+)/CD86^(+))比例,免疫荧光染色法检测脾内CD11b^(+)的单核细胞比例;第9天时采用流式细胞术检测小鼠血清中细胞因子的分泌水平;第14天,采用颈椎脱臼法处死小鼠,H-E染色法观察小鼠肝、脾、肺和肾的病理和组织学变化。结果:Ad-mIFN-γ体外感染小鼠腹腔巨噬细胞,在第3天检测到巨噬细胞分泌mIFN-γ达到峰值(118.34±2.90)pg/mL,并在一周内持续高分泌mIFN-γ,Ad-lacZ对照组IFN-γ分泌水平较低后,第3天时为(0.17±0.08)pg/mL。小鼠腹腔注射Ad-mIFN-γ后,在14 d内病毒低、中剂量组无小鼠死亡,病毒高剂量组小鼠体质量持续减轻(P<0.001);第3天,病毒高剂量组小鼠外周血和脾组织内单核细胞、巨噬细胞比例较对照组和中剂量组均显著增加(P<0.05或P<0.01);第9天,病毒低、中、高剂量组小鼠血清中mIFN-γ、IL-6、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、IL-1、TNF-α等细胞因子的水平均显著升高(P<0.001);10 d内病毒高剂量组小鼠死亡率达100%。组织病理检测可见病毒高剂量组小鼠的肝、脾、肺、肾组织有明显损伤。结论:Ad-mIFN-γ体外感染小鼠原代腹腔巨噬细胞后,可以快速分泌mIFN-γ;腹腔注射高剂量(2×10^(7)PFU/只)Ad-mIFN-γ导致小鼠出现CRS典型表现,可作为CAR-T细胞治疗诱发CRS的动物模型。

IL-12-CAR-T细胞诱发细胞因子释放综合征小鼠模型的建立及观察

目的:通过构建表达IL-12的小鼠CAR-T细胞,探讨经尾静脉将其输注于小鼠体内建立细胞因子释放综合征(CRS模型的方法。方法:构建基于靶向鼠源CD19的CAR分子,包装逆转录病毒载体并感染小鼠T细胞构建mCD19-CAR-T、mCD19/IL-12-CAR-T细胞。通过构建小鼠体内胰腺癌Panc02-CD19细胞移植瘤模型,检测mCD19/IL-12-CAR-T细胞的抗肿瘤活性,ELISA法检测两种CAR-T细胞IL-12和IFN-γ分泌水平;经小鼠尾静脉输注mCD19/IL-12-CAR-T细胞构建CAR-T细胞CRS小鼠模型,流式细胞术检测小鼠血清中IL-6、MCP-1、IL-1、IL-10、TNF-α、IFN-γ等细胞因子的含量,H-E染色法观察荷瘤小鼠肝、脾、肺和肾的病理组织学变化。结果:经过培养扩增的mCD19/IL-12-CAR-T细胞能有效分泌IL-12,CAR阳性率达(56.9±5.4)%;与非靶细胞Panc02或靶细胞Panc02-CD19共培养时,均能高分泌IFN-γ。成功构建小鼠胰腺癌Panc02-CD19细胞移植瘤模型,经小鼠尾静脉注射1×10^(6)个mCD19/IL-12-CAR-T细胞能显著抑制移植瘤的生长,但未能诱发严重CRS;输注2×10^(6)个mCD19/IL-12-CAR-T细胞后,小鼠出现体质量减轻、血清炎性因子水平升高、组织损伤,最终导致死亡等一系列典型CRS表现。结论:成功构建IL-12-CAR-T细胞诱发的小鼠CRS模型,其稳定性好、重复性高,具有广泛的应用前景。

嵌合抗原受体T细胞免疫治疗所致细胞因子释放综合征相关细胞因子的研究进展

嵌合抗原受体T细胞免疫治疗(CAR-T)可导致细胞因子释放综合征(CRS),且多种细胞因子在CRS发生发展中起着重要作用。其中IFN-γ、IL-6是CRS发生的重要驱动因子,IFN-γ、sVCAM-1和Ang-2/Ang-1升高对CRS的发生有预测价值,IFN-γ、IL-6、CRP、GM-CSF、MCP-1等与CRS严重程度相关。阻断IFN-γ、GM-CSF可能可减少CRS的发生。文章明确CAR-T所致CRS相关细胞因子在CRS发生、发展中的角色定位,以期为诊断评估、动态监测、及时处理CRS提供依据。

1例西妥昔单抗注射液致严重细胞因子释放综合征分析

单克隆抗体类药物已经成为抗肿瘤治疗药物的重要组成部分,然而使用过程中常常出现输液反应,严重者甚至会造成生命威胁[1,2]。单克隆抗体在使用过程引起的严重输液反应可能包括以下几种作用机制[3,4]:过敏反应,如Ⅰ型过敏反应(IgE介导);类过敏样反应,如细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS);以及几种免疫介质介导的混合反应。

血浆置换治疗细胞因子释放综合征2例

目的观察血浆置换(therapeutic plasma exchange,TPE)治疗肿瘤患者放化疗及免疫治疗后发生细胞因子释放综合征的疗效。方法2023年5—6月,对本院收治的2例放化疗及免疫治疗所致的细胞因子释放综合征患者采用TPE进行治疗,并观察疗效。结果2例患者由于炎性渗出导致皮肤反应、破溃,治疗后基本愈合,局部无渗出,无发热。结论TPE治疗由放化疗及免疫治疗所致的细胞因子释放综合征效果良好。

托珠单抗治疗CAR-T细胞治疗难治复发多发性骨髓瘤后细胞因子释放综合征的效果分析

探讨分析针对CAR-T细胞治疗难治复发多发性骨髓瘤后细胞因子释放综合征患者治疗时,将托珠单抗应用于患者治疗中的效果,分析临床可应用价值。方法 本次研究将实验时间段设置在2019年6月,至2020年3月,在该时段将我院中收入的CAR-T细胞治疗难治复发多发性骨髓瘤后细胞因子释放综合征患者24名进行研究。研究人员针对所有患者进行托珠单抗治疗,在治疗完成后针对患者疗效和毒副反应进行评价,分析患者各项细胞因子变化状况,分析最终结果。结果 本次研究治疗完成后,24名患者中,16名患者治疗后效果显著,6名患者治疗有效,仅有2名患者在治疗后病情未见改善或病情出现明显加重的情况,需更换治疗方案同时,相较于治疗前,所有患者的各项细胞因子指标存在明显改善,治疗前后对比分析差异显著存在(P<0.05)。结论 在针对CAR-T细胞治疗难治复发多发性骨髓瘤后细胞因子释放综合征患者进行治疗时,研究人员将托珠单抗应用于患者的临床治疗中,能够在一定程度上使患者的临床疗效得到提升。同时这一治疗方式能够对患者的细胞因子起到一定的控制作用,改善患者病情状况。

托珠单抗治疗CAR-T细胞治疗难治复发多发性骨髓瘤后细胞因子释放综合征的疗效

目的:观察托珠单抗治疗嵌合抗原受体修饰的T(CAR-T)细胞治疗难治复发多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)后细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)的疗效。方法:以2016年2月至2017年2月西安交通大学第二附属医院血液内科住院的24例CAR-T细胞治疗难治复发MM患者为研究对象,对发生2级以上的CRS患者给予4~8 mg/(kg·d)的托珠单抗治疗,观察其疗效及毒副作用、细胞因子、超敏C反应蛋白(Hs CRP)等的变化。结果:24例患者中有21例患者发生了CRS,依据CRS分级标准:1、2级各7例,3级5例,4级2例。CRS患者均表现持续高热,细胞因子及Hs CRP明显升高,其中IL-6升高最为显著。14例2级以上CRS患者经托珠单抗治疗后,临床症状明显缓解、体温迅速下降,细胞因子、Hs CRP含量逐渐恢复正常,无明显毒副作用发生。结论:托珠单抗在CRS治疗中疗效明显、无明显毒副作用,保证了难治复发MM患者CAR-T治疗的安全性。

急性B淋巴细胞白血病靶向治疗致细胞因子释放综合征的护理

目的总结急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)靶向治疗致细胞因子释放综合征(CRS)的护理经验,为临床护理提供参考。方法对B-ALL行嵌合型抗原受体T细胞(CAR-T)治疗发生CRS的52例患者,严密监护,重点加强发热、循环功能障碍、肝肾毒性反应、肺渗血、神经系统症状及凝血功能异常等的护理干预。结果4例死亡,48例好转出院。20例随访9~35个月,一般情况良好;28例随访1~12个月后回当地治疗后失访。结论B-ALL行CAR-T治疗致CRS,症状严重,严格专科护理评估和病情管理,及时有效的干预是支持患者度过危险期的重要保障。

CAR-T细胞治疗儿童复发性B系急性淋巴细胞白血病所致细胞因子释放综合征临床分析

目的探讨CAR-T细胞疗法治疗儿童复发性B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)时出现的细胞因子释放综合征(CRS)的临床特征。方法回顾分析2019年1月至2020年6月收治的14例CAR-T细胞治疗的复发性B-ALL患儿的临床资料。结果14例复发性B-ALL输注CAR-T细胞后,9例发生严重CRS,11例患儿出现血流动力学不稳,5例需要机械通气,10例有神经系统症状,7例出现肝损害。14例患儿均使用托珠单抗治疗,7例静脉使用糖皮质激素,5例行血液净化治疗。3例患儿死亡,11例在2周内好转。结论CRS是CAR-T细胞输注后的常见毒性反应,可出现多器官功能障碍,CRS的严重程度与细胞因子IL-6、IFN-γ水平呈正相关。托珠单抗和激素是最主要的治疗方法,血液净化也是CRS的一种特殊治疗方法。

慢性心力衰竭与急性冠状动脉综合征患者细胞因子释放部位的对比分析

目的 :研究慢性心力衰竭和急性冠状动脉综合征患者肿瘤坏死因子 α (TNF α)、白细胞介素 6(IL 6)释放部位的区别。 方法 :选取接受心导管检查及治疗的 60例患者 ,按疾病类型分为三组 ,急性冠状动脉综合征 17例 (急性冠状动脉综合征组 ) ,慢性心力衰竭 15例 (慢性心力衰竭组 ) ,另 2 8例为对照组。分别自股动脉、股静脉、冠状动脉左主干和冠状静脉窦 4处取血 ,比较各部位TNF α、IL 6水平的差异。 结果 :①慢性心力衰竭组和急性冠状动脉综合征组各部位TNF α、IL 6水平均高于对照组 (P <0 0 1) ;②急性冠状动脉综合征组冠状静脉窦TNF α、IL 6水平高于左主干 ,而慢性心力衰竭组和对照组无此现象。 结论 :慢性心力衰竭炎性因子主要来源于心外低灌注组织 ;急性冠状动脉综合征患者中心内组织炎性细胞因子水平明显升高。

肿瘤免疫治疗所致细胞因子释放综合征的研究进展

近年来,肿瘤免疫疗法取得了显著的临床疗效,但部分患者会产生免疫介导毒性,其中最常见的是细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)。CRS是一种由快速免疫激活引起的抗原非特异性毒性反应,特征为循环细胞因子水平增高、急性全身炎症症状,以及继发性器官功能障碍。因此,建立统一的CRS诊断标准、阐明CRS发生和发展的具体免疫学机制、根据患者自身情况开展个体化精准免疫治疗已经成为肿瘤免疫治疗亟待解决的重要问题。本文就肿瘤免疫疗法中CRS的定义、潜在的免疫学机制、诊断与鉴别诊断、临床表现以及临床治疗决策等方面进行综述,为开展肿瘤免疫精准治疗提供有益借鉴。

细胞因子释放综合征的发病机制及诊断分级与处理方案

嵌合抗原受体T细胞治疗(CAR-T)作为近年来肿瘤治疗的新方法,在血液肿瘤中取得了令人惊喜的结果。细胞因子释放综合征(CRS)是免疫治疗,尤其是CAR-T治疗的一种最常见不良反应,临床症状多样、发生率高,严重者可造成多器官功能衰竭甚至危及患者生命。CRS的发病机制目前仍不清楚,其发生及严重程度与细胞因子如白细胞介素-6等升高、血管内皮激活相关。及早诊断及治疗CRS具有重要的临床意义。托珠单抗及糖皮质激素是目前控制CRS的主要药物,合适时机应用是控制CRS的关键。

免疫检查点抑制剂致细胞因子释放综合征1例

目的探讨免疫检查点抑制剂(ICI)导致的细胞因子释放综合征(CRS)的诊断和治疗。方法回顾性分析1例北京协和医院呼吸与危重症医学科收治的肺癌患者在接受ICI帕博利珠单抗后出现CRS的诊治资料。结果患者在接受帕博利珠单抗后出现发热、低血压、炎性指标明显升高、肝功能异常,结合临床无明确的病原学证据、抗感染无效后,考虑CRS,予糖皮质激素及白介素6受体单克隆抗体托珠单抗后,患者病情好转。结论ICIs抑制剂可导致CRS,病情重、发展快、预后差,临床中需要引起重视。糖皮质激素联合细胞因子抑制剂有可能成为一种有效的治疗措施。

嵌合抗原受体T细胞治疗相关的细胞因子释放综合征及其治疗

通过基因工程技术改造获得的表达嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)的T细胞有望成为血液系统恶性疾病治疗的新有效手段。嵌合抗原受体T细胞(CAR T cell,CAR-T)治疗B细胞恶性血液疾病可诱导产生快速和长期的临床反应,但也可能导致发生独特的急性毒性反应,甚至因此危及生命。细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)是CAR-T治疗的最常见毒性反应,严重程度从轻微反应直至危及生命的多器官功能障碍,严重的CRS可演变、发展成暴发性的噬血细胞性淋巴组织细胞增生症。CAR-T治疗的另一常见毒性反应是与CRS同时或在CRS之后发生的神经毒性,即CAR-T相关的脑病综合征。为了尽量降低CRS的发生率和死亡率,密切监测和迅速处理CRS相关的症状非常重要。本文概要介绍CRS的症状、分级和治疗。

嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液肿瘤并发重度细胞因子释放综合征患者的护理

目的总结嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液肿瘤并发重度细胞因子释放综合征患者的护理。方法对15例恶性血液肿瘤行嵌合抗原受体T细胞治疗并发重度细胞因子释放综合征的患者,实施积极的病情观察以早期识别、预防感染、症状管理、降低细胞因子治疗的护理、心理护理等措施。结果14例患者经治疗护理后细胞因子释放综合征得到有效控制,1例因多器官功能衰竭死亡。结论嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液肿瘤并发重度细胞因子释放综合征患者治疗难度大,并发症多,密切的病情观察和及时护理干预是保证患者治疗顺利进行的关键。

血浆置换联合抗肿瘤坏死因子抗体治疗CAR-T细胞相关细胞因子释放综合征1例

目的通过对1例CAR-T输注后CRS的诊治过程进行回顾及分析,探究血浆置换对于管理此类毒性的作用。方法描述本例患CAR-T输注相关CRS的淋巴瘤患者的诊治经过,结合PubMed,Elsevier,Wiley,CNKI等数据库检索相关指南和临床实验或病例报告进行病例分析。结果患者诊断为滤泡细胞淋巴瘤,经多线、多疗程治疗后,评估疾病进展(progressive disease,PD),给予抗CD19/20 CAR-T细胞治疗。患者于输注细胞当天夜间出现高热、寒战,继发呼吸困难和低血压,并有C反应蛋白(C reactive protein,CRP)、白细胞介素-6(Interleukin,IL-6)等炎症因子急剧升高,提示患者发生细胞因子释放综合征(Cytokines release syndrome,CRS)。给予患者对症退热、广谱抗感染、肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)抗体及前后3次血浆置换治疗。CRS相关的临床表现逐渐缓解,出院后3个月原发病评估疗效为持续完全缓解(complete response,CR)。结论CAR-T细胞输注相关的CRS是细胞免疫治疗较为严重的毒性反应,可能导致患者多器官衰竭甚至致命。血浆置换可能成为一些严重的CRS患者的治疗选择之一。

CAR-T免疫疗法所致细胞因子释放和神经毒性综合征的诊疗研究进展

嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞(CAR-T)免疫治疗尤其在复发/难治性恶性血液病的临床应用中显示出卓越的疗效,被认为是最有前景的肿瘤治疗方法之一,但是CAR-T免疫治疗中可引发独特的毒性作用,其中细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)和免疫效应细胞相关神经毒性综合征(immune effector cell-associated neurotoxicity syndrome,ICANS)在临床应用中最为常见,并具有潜在的致死性,使得CRA-T疗法的广泛应用受到一定的限制,因此如何最大程度地利用CAR-T免疫治疗的同时努力减少或预防CRS和ICANS的发生是目前临床研究的重点,深入了解CRS和ICANS的发生机制能为新的预防措施提供思路。早期识别相关危险因素及鉴定生物预测标志物,熟悉其分级与治疗措施,有利于规范CAR-T免疫疗法的临床应用和患者安全管理。本文就CRS和ICANS的危险因素、发生机制、临床表现、分级与治疗和预防措施等方面进行综述,旨在为CAR-T疗法常见毒性作用的规范管理提供帮助。

西妥昔单抗致细胞因子释放综合征的案例分析与药事干预

目的:提高对输液反应中细胞因子释放综合征的重视程度,加强对细胞因子释放综合征的鉴别诊断,规范处方审核和预处理,以减少不良反应的发生。方法:通过一例罕见的西妥昔单抗致细胞因子释放综合征的案例,回顾性查阅病史并运用PDCA(Plan-Do-Check-Action,PDCA)循环方法进行专项点评,分析查找原因,提出优化措施。结果:白介素-6(IL-6)是细胞因子释放综合征主要的炎症介质,短时间内高于正常水平250倍或多个细胞因子(IL-8、IL-10等)同时高于正常水平75倍,并结合临床主要症状(如低血压、高热、血氧饱和度下降等)可作为判断细胞因子释放综合征发生的依据。通过建立统一处方审核标准、规范用药流程和加强患者用药宣教,可减少或避免细胞因子释放综合征的发生。结论:通过对案例的专项分析并与药事管理方法相结合,可为临床合理用药及相关不良反应的防治提供经验参考。