绿原酸联合连翘苷调控细胞因子风暴的网络药理分析及基于TLR4/TRAF6/PI3KC3通路的协同抗炎作用

目的基于网络药理学和体外实验探究绿原酸联合连翘苷调控细胞因子风暴的机制。方法利用Swiss Target Prediction、PharmMapper、SEA和TCMSP数据库预测绿原酸和连翘苷的靶点,在GeneCards、OMIM、DRUGBANK和DisGeNET数据库获取细胞因子风暴的靶点,筛选交集靶点绘制Venn图,以STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质相互作用网络,采用DAVID数据库进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。以脂多糖(LPS)诱导RAW264.7巨噬细胞构建细胞因子风暴模型;采用细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测巨噬细胞存活率;采用Griess法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)含量;以酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧化酶-2(COX-2)的水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TNF受体相关因子(TRAF4)、TNF受体相关因子6(TRAF6)、磷酸肌醇-3-激酶3(PIK3C3)蛋白表达。结果网络药理分析获得绿原酸联合连翘苷治疗细胞因子风暴的8个核心网络靶点[丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、白蛋白(ALB)、低氧诱导因子1α(HIF1A)、IL-6、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、酪氨酸激酶(SRC)、Toll样受体4(TLR4)];富集关键通路包括PI3K/AKT信号通路等。体外实验结果显示,与对照组比较,模型组中NO、TNF-α、IL-6的释放量和iNOS、COX-2蛋白表达量均显著升高(P<0.001)。与模型组比较,给药后NO、TNF-α、IL-6、iNOS、COX-2的水平均显著降低(P<0.001)。与单药给药组比较,绿原酸和连翘苷(1∶1)联合用药组炎症指标下降更明显(P<0.001)。与模型组比较,给药组TLR4、TRAF6、PI3K3C的蛋白表达和PI3K3C的磷酸化水平显著下降。结论绿原酸联合连翘苷能协同抑制促炎细胞因子的表达,调控细胞因子风暴,可能通过TLR4/TRAF6/PI3K3C信号通路实现。

化湿败毒方干预COVID-19细胞因子风暴的网络药理学研究

目的 通过网络药理学从免疫微环境、细胞因子角度探讨化湿败毒方治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的机制。方法 利用数据库筛选化湿败毒方作用靶点、COVID-19病理靶点;对交集靶点基因进行富集分析;采用基因集富集分析(GSEA)分析基因涉及的具体信号通路。结果 得到47个化湿败毒方治疗COVID-19的潜在靶点;基因本体(GO)富集分析涉及通路为对脂多糖的反应、膜筏、细胞因子活性等。京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集涉及通路为白细胞介素-17(IL-17)信号通路、辅助性T细胞17(Th17)分化等信号通路。结论 化湿败毒方可以通过调节细胞因子活性、IL-17等通路达到调节免疫浸润微环境的作用,从而抑制细胞因子风暴,达到治疗COVID-19的作用。

急性重症感染后炎症细胞因子风暴下心肌状态及超声心动图心脏检测的价值

目的探讨急性重症感染后炎症细胞因子风暴下的心肌状态及超声心动图心脏检测的价值。方法选取2020年1月—2023年2月在海南西部中心医院就诊的急性重症感染患者110例,其中,合并细胞因子风暴患者45例(观察组),无细胞因子风暴患者65例(对照组)。比较两组患者的临床资料、心肌损伤标志物、心电图、超声心动图参数等差异。结果观察组患者年龄高于对照组(P<0.05);观察组乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、肌钙蛋白T、肌钙蛋白I和N-末端B型脑钠肽原高于对照组(P<0.05);观察组白细胞计数和中性粒细胞计数高于对照组(P<0.05),而血小板计数和红细胞计数低于对照组(P<0.05);观察组心房颤动、室性期前收缩、房性期前收缩和异常Q波占比高于对照组(P<0.05);观察组左心室舒张末期内径、左心室收缩末期内径、左心室舒张末期容积、左心室收缩末期容积、E峰、三尖瓣反流压差和肺动脉收缩压高于对照组(P<0.05),而左室射血分数和A峰低于对照组(P<0.05)。结论急性重症感染后炎症细胞因子风暴下患者心肌损伤明显,超声心动图可直观检测心脏情况。

炎症风暴下免疫障碍性脓毒症脑病患者转归的研究及细胞因子联合检测的临床意义

目的探讨细胞因子联合检测在脓毒症免疫状态识别及脓毒症脑病的风险预示、早期诊断、临床治疗、预后判断的临床运用价值。方法将符合纳入标准的20例脓毒症患者和20例脓毒症脑病患者设为观察A组和观察B组,另选取20例非脓毒症感染性疾病患者设为对照组。观察组患者均接受基于SSC脓毒症指南的标准化治疗方案,根据细胞因子检测结果采取相应的抗炎和(或)免疫调节治疗。比较三组患者感染指标、细胞因子指标、序贯器官衰竭评分(SOFA)、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分等临床指标的差别。结果观察A组的IL-6、PCT、CRP水平高于对照组和观察B组(P<0.05),观察B组的IL-10水平高于对照组和观察A组(P<0.05)。与观察A组比较,观察B组入院SOFA评分、APACHEⅡ评分增高,GCS评分减低(P<0.05)。根据检测结果采取相应的抗炎和(或)免疫调节治疗,结果提示观察B组出院APACHEⅡ评分、SOFA评分较入院时下降,GCS评分较入院时增高(P<0.05)。观察A组和观察B组在出院SOFA评分、APACHEⅡ评分、GCS评分及住院天数间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论细胞因子联合检测对识别脓毒症脑病患者炎症风暴后的免疫状态有重要意义,能够早期协助诊断并指导临床治疗和改善预后。

Hepatology|寨卡病毒RNA对急性肝炎和细胞因子风暴的干预作用

急性肝炎、移植物抗宿主病(GVHD)和脓毒症极易引发炎症反应的过度激活和促炎细胞因子的高水平表达,从而导致细胞因子风暴综合征(CRS)的发生。限制促炎细胞因子的过度释放,尤其是有效控制CRS,对于维持免疫内稳态和保护机体至关重要。近年来,已有研究表明蛋白翻译过程参与调控疾病相关基因的表达及疾病的发展进程,通过靶向蛋白翻译过程可有效控制CRS的发生。中国医学科学院系统医学研究院/苏州系统医学研究所马烽研究员团队,联合苏州大学戴建锋教授以及军事医学科学院秦成峰研究员等的一项研究打破了病毒编码基因以蛋白形式发挥功能的传统观念,发现黄病毒家族中寨卡病毒来源的非结构蛋白NS2A能够以RNA的形式抑制蛋白翻译,并进一步在小鼠体内验证了其对急性肝炎和GVHD的控制作用,为CRS的治疗提供了新思路。

细胞因子风暴在流行性感冒病毒感染中的作用及防治研究

流行性感冒病毒(流感病毒)感染具有较高的致病率和死亡率,其感染的严重程度和病毒引起的以过度炎症反应为特征的细胞因子风暴密切相关。本文综述了细胞因子风暴在流感病毒感染中的病理表现、作用机制及其研究进展,并对细胞因子风暴相关的流感病毒感染的防治进行了探讨。

麻杏石甘汤治疗新冠肺炎细胞因子风暴的网络药理学分析

目的:用网络药理学方法探讨麻杏石甘汤成分、靶点、通路和生物学功能,阐明其治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)细胞因子风暴的作用机制。方法:通过TCMSP、TCMID数据库以及文献报道,搜索麻杏石甘汤每味中药的成分和靶点,用Cytoscape软件构建和成分-靶点网络。用STRING搜素靶点的相关蛋白,并构建PPI网络。利用MECODE和ClusterOne聚类找出二者共同的关键靶点。利用Metascape和ClueGO对关键靶点进行通路和生物学功能富集分析。结果:麻杏石甘汤中麻黄有效成分6个、苦杏仁8个、石膏3个、生甘草92个。聚类分析得到67个关键靶点,其中IL-6和TNF是重要的核心靶点。麻杏石甘汤主要参与的分子通路和生物学功能与病毒感染和细胞因子免疫调节相关的是:人T细胞白血病病毒1型(TLV-1)感染;单纯疱疹病毒感染;TNF-R1信号通路和相关信号复合物;整合素1途径;白细胞介素信号;TH17细胞分化;炎性反应的调节;PI3K-Akt信号通路;白细胞介素-2介导的信号通路;免疫应答中细胞因子分泌的负调控;内皮屏障建立的调控;T细胞稳态增殖的调控。结论:麻杏石甘汤通过多成分、多靶点对机体的病毒感染和免疫炎性反应起到多方面的调控,包括促进TH细胞分化和T细胞稳态抑制病毒复制,负调控白细胞介素、TNF、整合素等免疫炎性反应递质消除细胞因子风暴。麻杏石甘汤针对COVID-19的病毒复制和细胞因子风暴具有显著的调节作用。

基于“细胞因子风暴”探讨中医药治疗重型、危重型新型冠状病毒肺炎

"细胞因子风暴"发病机制复杂,易引起多器官功能衰竭,导致疾病迅速加重、恶化,死亡率高。在此次新型冠状病毒感染肺炎(COVID-19)疫情中,患者病情急剧恶化乃至死亡,与其体内爆发"细胞因子风暴"密切相关。《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第七版)》(以下简称《诊疗方案》)制定了重型、危重型COVID-19的中医药方案,中医药以其多成分、多靶点、多途径的整体治疗优势而受到了关注。基于"细胞因子风暴",结合《诊疗方案》中对重型、危重型辨证分型及推荐处方,探讨中医药治疗重型、危重型COVID-19的可能作用及其机制。

EB病毒相关淋巴细胞增殖病与细胞因子风暴

EB病毒(EBV)相关淋巴细胞增殖病包括T、NK、T/NK和B细胞型等良性至恶性的多种疾病,临床表现复杂,其发生发展过程与细胞因子风暴有密切联系。研究发现,不同类型之间所表达的细胞因子谱不同,这有利于对疾病病程的进一步理解,可能对早期诊断和治疗提供帮助。本文就不同类型的EBV相关淋巴细胞增殖病的细胞因子分泌及其在疾病病程中的作用作一综述,讨论的问题包括EBV相关淋巴细胞增殖病分类,T/NK-LPD和细胞因子,B-LPD和细胞因子,HLH和细胞因子等。

新型冠状病毒肺炎的细胞因子风暴及其药物治疗

细胞因子风暴被认为是重型和危重型新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者死亡的重要原因,表现为过激的炎症反应:免疫细胞过度激活和细胞因子过度释放,造成肺毛细血管内皮细胞和肺泡上皮细胞弥漫性损伤,引发呼吸衰竭,在循环系统推动下细胞因子到达多个器官造成多器官衰竭。白细胞介素6拮抗剂、糖皮质激素和恢复者血清等是目前的免疫治疗药物。本综述旨在综述COVID-19疾病过程中细胞因子风暴发生的可能机制及抑制细胞因子风暴的潜在治疗药物。

NLRP3炎性小体水平检测在非霍奇金淋巴瘤患者免疫治疗相关细胞因子风暴及化疗相关间质性肺炎中的预测价值分析

目的分析NOD样受体家族3(NLRP3)炎性小体水平检测在非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者免疫治疗相关细胞因子风暴(CRS)及化疗相关间质性肺炎(IP)中的预测价值。方法回顾性分析2019年3月—2021年4月在北京协和医院血液内科接受嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫治疗联合化疗的NHL患者125例临床资料,按照CAR-T免疫治疗期间是否出现CRS分为CRS组(n=99)、非CRS组(n=26),比较2组一般资料、基线外周血NLRP3炎性小体各基因mRNA表达、炎性细胞因子、血常规、血生化指标水平,经双变量Preason相关性分析NLRP3炎性小体表达与炎性细胞因子水平的相关性;根据化疗期间是否出现IP分为IP组(n=28)、非IP组(n=97),比较2组一般资料、基线外周血NLRP3炎性小体各基因mRNA表达及血常规、血生化指标水平;多因素Logistic回归分析影响NHL患者CRS、IP发生的危险因素;ROC曲线分析NLRP3炎性小体表达预测NHL患者CRS、IP发生的价值。结果CRS组外周血NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)的mRNA表达水平均高于非CRS组(t/P=9.546/<0.001、3.456/0.001、4.386/<0.001);CRS组外周血C反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、IL-10、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、乳酸脱氢酶(LDH)水平均高于非CRS组(P<0.01);双变量Preason相关性显示,CRS患者外周血NLRP3、ASC、Caspase-1的mRNA表达均与CRP、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α、LDH水平呈正相关(P<0.01)。IP组外周血NLRP3、ASC、Caspase-1的mRNA表达水平均高于非IP组(t=27.931、4.890、6.319,P均<0.001);IP组血常规、血生化相关指标水平与非IP组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。多因素Logistic回归分析显示,NLRP3、ASC、Caspase-1的mRNA表达升高均是影响NHL患者CRS、IP发生的危险因素(P<0.05);绘制ROC结果显示,NLRP3、ASC、Caspase-1及三者联合预测NHL患者CRS发生的AUC分别为0.890、0.715、0.800、0.916,预测IP发生的AUC分别为0.901、0.868、0.880、0.935。结论NHL初诊时NLRP3炎性体信号通路的异常活化与炎性细胞因子水平相关,且NLRP3炎性小体表达水平是影响CRS及IP发生的危险因素,可有效预测CRS及IP发生。

浅谈新型冠状病毒肺炎“细胞因子风暴”的防治

根据本课题组研究成果,提出防治新型冠状病毒肺炎患者发生"细胞因子风暴"的策略.静脉输注大剂量维生素C(100~300mg·kg^-1·d^-1)和肠道灌注生大黄可阻抑休克时肠上皮-树突样细胞转分化而降低细胞因子的表达;经结肠液体复苏可显著降低多器官内细胞因子表达.抗凝和维生素C保护内皮细胞而降低细胞因子的表达.间断短时血液滤过(ISVVH)可在转录水平和翻译后水平降低促炎细胞因子而上调白细胞介素-10(IL-10)水平.大剂量蛋白酶抑制剂(乌司他丁>100×10^4U/d)可抑制肺间质内弹力蛋白酶活性,防止细胞因子过度释放.总之,蛋白酶抑制剂、大剂量维生素C、抗凝、保护肠道微生态稳态和肠黏膜上皮以及经结肠途经补液可预防细胞因子风暴,而ISVVH则是治疗细胞因子风暴的良好方法.

中医学与"COVID-19"细胞因子风暴的关系及其中医药治疗

2020年2月11日,新型冠状病毒肺炎(COVID)-19由世界卫生组织正式命名。COVID-19病毒的传播速度比急性呼吸系统综合征冠状病毒(SARS-CoV)和中东呼吸综合征冠状病毒(MERSCoV)快,能人与人之间传播[1~3]。COVID-19与蝙蝠衍生的bat-SL-CoVZC45和bat-SL-CoVZXC21两种严重急性呼吸系统综合征冠状病毒密切相关。

病原体感染引发细胞因子风暴的相关研究进展

细胞因子风暴(cytokine storm)是指机体感染微生物后引起体液中多种细胞因子如 TNF-α、IL-1、IL-6、IL-12、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、MCP-1和 IL-8等迅速大量产生的现象。细胞因子风暴是引起急性呼吸窘迫综合症和多器官衰竭的重要原因。其浓度与疾病的严重程度和预后相关。

细胞因子风暴概述

细胞因子风暴是一种不受控制的全身性炎症反应,由多种因素引发,可导致机体稳态失衡,甚至使患者死亡。大多数情况下细胞因子风暴由感染、全身性疾病等因素触发,也可能因过敏反应而造成,但较为罕见。本文综述了细胞因子风暴的临床表现及对机体的损伤机制,重点介绍了严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)感染所引起的细胞因子风暴效应。

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞CX3CR1趋化因子受体mRNA的表达

目的:探讨趋化因子受体CX3CR1在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)中的表达,及其与疾病活动的相关性。方法:收集93例确诊的SLE患者和30例正常人的PBMC,提取RNA。应用RT-PCR方法检测CX3CR1mRNA表达水平,并与疾病活动度评分(SLEDAI)作直线相关性分析。结果:①CX3CR1 mRNA在PBMC中的表达水平,活动期(3.735±0.557)与非活动期(0.530±0.045),两者差异有统计学意义(t=2.606,P=0.01);非活动期与对照组(0.146±0.02)间的差异有统计学意义(t=5.831,P=0.000);患者组(2.819±1.347)与对照组间的差异有统计学意义(t=3.921,P=0.000)。②SLE患者组CX3CR1 mRNA水平与疾病活动度评分(SLEDAI)呈正相关(r=0.445,t=4.523,P<0.001)。③不具有血管炎、肌炎、肾损及血小板减少的患者与具有上述相应临床特征的患者比较,CX3CR mRNA表达水平更高,差异具有统计学意义。结论:CX3CR1mRNA表达水平在活动期SLE比非活动期增高,与疾病的活动性(SLEDAI)呈正相关。CX3CR1可能反映疾病的活动性、参与特异器官受累的发生。

新冠肺炎细胞因子风暴下激素剂量调整患者1例

2019年12月开始,在世界多个国家和地区发现了多例不明原因肺炎病例,我国武汉的疫情持续进展,最早病例报告于2019年12月1日[1-2]。2020年1月12日,世界卫生组织正式将造成武汉肺炎疫情的新型冠状病毒命名为2019-nCoV[3]。2020年2月11日,世界卫生组织将新型冠状病毒感染的肺炎命名为COVID-19。与此同时,国际病毒分类委员会将新型冠状病毒命名为SARS-CoV-2。

冠状病毒肺炎细胞因子风暴及免疫调控治疗

细胞因子风暴是一种失控的过度免疫应答,是冠状病毒肺炎的重要发病机制。病毒劫持机体的免疫系统,导致免疫调节的负反馈丧失、多种细胞因子异常升高,损害了肺泡弥散功能并造成多器官功能障碍。靶向冠状病毒细胞因子风暴的特异性治疗研究,如粒细胞集落刺激因子、托珠单抗、卡莫他特、血液净化治疗等已取得系列成果,其可能是缓解新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情的有效手段。但COVID-19具有独特的病理特征,上述治疗的研究成果仍需进一步临床试验来验证。本文就冠状病毒肺炎细胞因子风暴及免疫调控治疗进展进行综述。

基于网络药理学的血必净注射液干预细胞因子风暴辅助治疗重症新型冠状病毒肺炎的潜在机制研究

2019年12月底于我国湖北省武汉市爆发新型冠状病毒肺炎(COVID-19),截止2020年4月30日,我国共确诊病例8万余,全球已确诊病例300余万,其传染性强,传播迅速广泛,引起了国内外高度关注。重症患者可因“细胞因子风暴”在中低热甚至无明显发热病程中快速进展为急性呼吸窘迫综合征、多器官衰竭等严重并发症。目前在《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案》中要求加强中西医结合,中西医结合治疗也收到了积极效果。本文运用网络药理学方法探讨血必净注射液辅助治疗重症COVID-19与干预细胞因子风暴密切相关的作用路径和潜在的机制靶点,有望对现有的诊疗方案中药临床应用做有益补充,发挥抗击疫情的重要作用。

新冠肺炎并发细胞因子风暴的临床前药效评价方法研究进展

新型冠状病毒-2(SARS-CoV-2)感染的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者存在严重的肺部炎症和细胞因子风暴,因此,细胞因子风暴的治疗是抢救COVID-19危重病人的重要环节。作为重要的致死因素,细胞因子风暴的临床前研究必不可少,相关的体内外实验也是今后开发COVID-19新药的必经之路。该文综合国内外相关研究结果,提供了细胞因子风暴的体内外实验方法,包括动物模型的建立、细胞评价方法、药效学评价指标等,旨在对细胞因子风暴的临床前研究方法予以参考指导。