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内皮祖细胞培养条件的正交设计研究 被引量:6
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作者 张怀勤 季亢挺 +4 位作者 杨德业 黄晓燕 林捷 黄伟剑 徐力辛 《温州医学院学报》 CAS 2005年第4期261-264,共4页
目的:研究内皮祖细胞(EPCs)培养的适宜条件。方法:以L827正交表安排影响FPCs扩增贴壁的几个主要因素,光镜下观察集落形成,流式细胞术分析CD34、VE-Cadherin双阳性细胞,以此为指标分析各因素对EPCs培养的影响。结果:血管内皮生长因子(VE... 目的:研究内皮祖细胞(EPCs)培养的适宜条件。方法:以L827正交表安排影响FPCs扩增贴壁的几个主要因素,光镜下观察集落形成,流式细胞术分析CD34、VE-Cadherin双阳性细胞,以此为指标分析各因素对EPCs培养的影响。结果:血管内皮生长因子(VEGF)及接种密度对集落形成影响显著, 内皮细胞生长添加剂(ECGS)及纤维连接蛋白皿底包被无影响。4个因素对EPCs得率均有影响,且VEGF 及接种密度之间尚有交互作用。结论:EPCs培养的适宜条件为:皿底包被纤维连接蛋白,5×106/cm2接种密度,VEGF 10 ng/ml及ECGS 150μg/m1。 展开更多
关键词 内皮细胞细胞培养正交设计
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普伐他汀对内皮祖细胞培养中扩增及黏附能力的影响 被引量:1
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作者 季亢挺 张怀勤 +4 位作者 杨德业 黄小燕 黄伟剑 林捷 徐力辛 《温州医学院学报》 CAS 2005年第4期265-267,共3页
目的:观察普伐他汀对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)培养中扩增及黏附能力的影响。方法:采用密度梯度离心法分离人脐血单个核细胞,接种到包被有人纤维连接蛋白的培养皿,分为对照组(未加细胞因子)、V组(加VEGF10 ng/m1)... 目的:观察普伐他汀对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)培养中扩增及黏附能力的影响。方法:采用密度梯度离心法分离人脐血单个核细胞,接种到包被有人纤维连接蛋白的培养皿,分为对照组(未加细胞因子)、V组(加VEGF10 ng/m1)、P0.1组(加普伐他汀0.1 μmol/L)、P0.01组(加普伐他汀0.01μmol/L),培养6d后,采用流式细胞术PE-CD34及FITC-VE-Cadherin双标法测定各组扩增细胞数, 采用黏附能力测定试验测定黏附能力。结果:V组、P0.1组、P0.01组的扩增EPCs数显著高于对照组(P< 0.01),且P0.1组、P0.01组均显著高于V组(P<0.001)。P0.1组、P0.01组的黏附EPCs数显著高于对照组(P<0.001)。结论:普伐他汀可显著提高培养EPCs的扩增能力及黏附能力。 展开更多
关键词 他汀类药内皮细胞细胞培养
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人脐静脉内皮细胞的原代培养及鉴定 被引量:5
3
作者 张嘉锋 郑见宝 《陕西医学杂志》 CAS 2011年第3期264-266,共3页
目的:探讨新生儿脐静脉内皮细胞的培养及鉴定方法,建立血管内皮细胞培养模型,为体外研究血管内皮细胞提供实验手段。方法:采用0.1%Ⅱ型胶原酶分离脐静脉内皮细胞,于M199培养基(含15%胎牛血清,促内皮生长因子1%,青霉素100u/ml,链霉素100m... 目的:探讨新生儿脐静脉内皮细胞的培养及鉴定方法,建立血管内皮细胞培养模型,为体外研究血管内皮细胞提供实验手段。方法:采用0.1%Ⅱ型胶原酶分离脐静脉内皮细胞,于M199培养基(含15%胎牛血清,促内皮生长因子1%,青霉素100u/ml,链霉素100mg/ml)内培养,待细胞80%融合后,以0.25%胰蛋白酶和0.02%EDTA消化传代,并以倒置光显微镜观察内皮细胞生长情况,以免疫荧光方法对内皮细胞进行鉴定。结果:原代培养细胞在接种2h后开始贴壁生长,倒置光显微镜下观察细胞呈鹅卵石状排列,免疫荧光显示细胞胞浆内Ⅷ因子相关抗原阳性。结论:用胶原酶灌注消化脐静脉是获得内皮细胞的一种较可靠的方法。 展开更多
关键词 细胞培养内皮 血管脐静脉婴儿 新生
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视网膜血管内皮细胞的体外培养 被引量:4
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作者 钱勇 高健生 张励 《中国中医眼科杂志》 1999年第3期186-187,共2页
综述了视网膜微血管内皮细胞的体外培养过程和影响因素,对明确某些视网膜病的发病原因、预防和治疗具有重要意义。
关键词 视网膜血管内皮 内皮细胞培养 视网膜病
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蒲黄单体对内皮细胞的保护作用——形态学研究 被引量:5
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作者 黄桂秋 徐德敏 +3 位作者 张彩英 徐也鲁 赵基 王振义 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1991年第3期185-188,共4页
体外培养血管内皮细胞。模拟体内纤维蛋白予以损伤,并给予中药蒲黄单体以观察其对内皮细胞的保护作用,实验借助扫描电镜观察内皮细胞形态变化。结果表明:(1)内皮细胞与纤维蛋白接触48小时后,细胞明显皱缩,多数细胞脱落或解体;(2)同时加... 体外培养血管内皮细胞。模拟体内纤维蛋白予以损伤,并给予中药蒲黄单体以观察其对内皮细胞的保护作用,实验借助扫描电镜观察内皮细胞形态变化。结果表明:(1)内皮细胞与纤维蛋白接触48小时后,细胞明显皱缩,多数细胞脱落或解体;(2)同时加入蒲黄单体组,细胞损伤明显减轻,脱落减少,多数细胞排列规则,形态正常,尤以单体Y_4的保护作用更显著;(3)血管平滑肌细胞在同样纤维蛋白作用条件下,其形态无明显改变。 展开更多
关键词 内皮细胞培养 蒲黄单体 保护作用
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雌激素处理的hBMSC对高糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用 被引量:1
6
作者 张晓东 孙石磊 +5 位作者 王冠 李霄凌 姚立杰 徐浩 张鹏 沈雷 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期289-294,共6页
目的:探讨雌激素处理人骨髓间充质干细胞(hBMSC)对高糖诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用及机制。方法:采用30 mmol/L葡萄糖刺激hBMSC细胞建立高糖模型并分组:以无刺激者为高糖对照组(HG组)、以20μmol/L雌激素处理者为... 目的:探讨雌激素处理人骨髓间充质干细胞(hBMSC)对高糖诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用及机制。方法:采用30 mmol/L葡萄糖刺激hBMSC细胞建立高糖模型并分组:以无刺激者为高糖对照组(HG组)、以20μmol/L雌激素处理者为高糖雌激素组(HG+E2组)、以5μmo/L蛋白激酶B(PKB/Akt)抑制剂Triciribine预处理45 min后,再以20μmol/L雌激素处理者为高糖Akt抑制剂组(HG+E2+Triciribine组)和正常条件培养的hBMSC为正常对照组(NG组)。分别于处理12 h后,采用CCK8法检测各组hBMSC的细胞活力,硝酸还原酶法和ELISA法检测各组培养基上清中NO、VEGF和IL-8的含量(n=6),48 h后采用Western blot检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达水平(n=3)。此外,提取各组hBMSC的培养基上清作为条件培养基(CM)培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)并分组为:HG-CM组(HG组条件培养基处理)、HG+E2-CM组(HG+E2组条件培养液处理)、HG+E2+Triciribine-CM组(HG+E2+Triciribine组条件培养基处理)和HG-H组(高糖对照组,30 mmol/L葡萄糖终浓度处理),分别于12 h后,采用CCK8法检测各组HUVEC的细胞活力(n=6),24 h后采用流式细胞术检测各组HUVEC细胞的凋亡率(n=3);48 h后采用划痕实验观察各组HUVEC细胞的迁移率(n=3)。结果:与NG组相比,HG组中hBMSC细胞活力和细胞内eNOS蛋白磷酸化水平降低(P<0.05),细胞培养液上清中NO、VEGF和IL-8含量减少(P<0.05);与HG组相比,HG+E2组中hBMSC的细胞活力和细胞中eNOS蛋白磷酸化水平显著增加(P<0.05),细胞培养基上清中NO、VEGF和IL-8含量增加(P<0.05),而当hBMSC细胞中Akt蛋白活性被抑制后,HG+E2+Triciribine组中上述结果指标呈反向变化(P<0.05)。此外,与HG-CM组相比,HG+E2-CM组中HUVECs的细胞活力和迁移能力显著增加(P<0.05),细胞凋亡比例降低(P<0.05),而与HG+E2-CM组相比,HG+E2+Triciribine-CM组中HUVECs的细胞活力和迁移能力降低(P<0.05),细胞凋亡比例增加(P<0.05)。结论:雌激素可能通过激活hBMSC细胞Akt/eNOS信号通路,促进NO、VEGF和IL-8的分泌,进而增加HUVECs的细胞活力和迁移能力,并抑制细胞凋亡的发生,对高糖诱导的HUVECs细胞损伤发挥保护作用。 展开更多
关键词 雌激素 人骨髓间充质干细胞 细胞损伤 高糖条件 人脐静脉血管内皮细胞 细胞培养
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复方丹参滴丸对人血管内皮细胞功能的保护作用
7
作者 王东霞 王孝铭 +1 位作者 许晶兰 盛鸿颖 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1656-1656,共1页
目的:观察复方丹参滴丸对细菌内毒素(LPS)所致人血管内皮细胞损伤的影响,以探讨其对心脑血管疾病治疗的机制. 方法:人脐静脉内皮细胞培养,建立脂多糖损伤模型(以10 mg/L的LPS培养液作为损伤浓度培养细胞12 h),按分组分别把不同浓度的丹... 目的:观察复方丹参滴丸对细菌内毒素(LPS)所致人血管内皮细胞损伤的影响,以探讨其对心脑血管疾病治疗的机制. 方法:人脐静脉内皮细胞培养,建立脂多糖损伤模型(以10 mg/L的LPS培养液作为损伤浓度培养细胞12 h),按分组分别把不同浓度的丹参滴丸(1g/L、0.5g/L、0.25g/L、0.1g/L)于损伤前、损伤后加入,分别进行细胞活力、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、内皮素(ET-1)、细胞内钙的测定及形态学指标观察. 展开更多
关键词 复方丹参滴丸 血管内皮细胞功能 血管内皮细胞损伤 保护作用 内皮细胞培养 不同浓度 一氧化氮 细菌内毒素 疾病治疗
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纳米颗粒入侵血管内皮细胞动力学过程的体外模型研究
8
作者 薛春东 郑平 +3 位作者 胡思毓 曲恒超 那景童 覃开蓉 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第S01期246-246,共1页
目的纳米颗粒入侵血管内皮是其人体输运的必然过程,也是产生有益或有害生物学效应的关键环节。现有研究已表明,血管内皮细胞会在血液循环过程中摄取纳米颗粒,但纳米颗粒在细胞及亚细胞层面的输运规律尚不清楚,且受血液流动影响。构建模... 目的纳米颗粒入侵血管内皮是其人体输运的必然过程,也是产生有益或有害生物学效应的关键环节。现有研究已表明,血管内皮细胞会在血液循环过程中摄取纳米颗粒,但纳米颗粒在细胞及亚细胞层面的输运规律尚不清楚,且受血液流动影响。构建模拟在体血液流动环境的体外内皮细胞培养模型,研究纳米颗粒胞外输运-胞摄取-内扩散的入侵动力学过程。方法首先,设计和构建可精准模拟真实血液流动环境且适于检测纳米颗粒运动的微流控内皮细胞培养模型。 展开更多
关键词 纳米颗粒 体外模型 血管内皮细胞 血液流动 动力学过程 内皮细胞培养 血液循环 微流控
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洛伐他汀对溶血性磷脂酰胆碱引起的离体血管内皮损伤的保护作用 被引量:1
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作者 唐蜜蜜 吴树金 +1 位作者 马凤霞 刘立英 《中南药学》 CAS 2009年第2期94-99,共6页
目的探讨洛伐他汀(Lov)对溶血性磷脂酰胆碱(LPC)所致血管内皮损伤的保护作用及机制。方法利用家兔离体胸主动脉环和培养的人内皮细胞模型,分别观察洛伐他汀对LPC致离体血管环内皮依赖性舒张反应的损伤及对内皮细胞合成NO的损伤的保护作... 目的探讨洛伐他汀(Lov)对溶血性磷脂酰胆碱(LPC)所致血管内皮损伤的保护作用及机制。方法利用家兔离体胸主动脉环和培养的人内皮细胞模型,分别观察洛伐他汀对LPC致离体血管环内皮依赖性舒张反应的损伤及对内皮细胞合成NO的损伤的保护作用。血管环分别与LPC(4 mg.L-1)和洛伐他汀(0.025、0.05、0.1μmol.L-1)单独孵育和共孵各15 min,分别检测乙酰胆碱(ACh)诱导的内皮依赖性舒张(EDR)反应及硝普钠诱导的非内皮依赖性舒张(EDR)反应及血管组织中的脂质过氧化物产物丙二醛(MDA)的含量。在培养的人内皮细胞和培养基中分别加入LPC和洛伐他汀,分别检测LPC和洛伐他汀对内皮细胞中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(eNOS)的影响。结果LPC(4 mg.L-1)与血管环孵育15 min,引起了血管EDR的显著降低,最大舒张比值较对照组明显减小(P<0.01),洛伐他汀剂量依赖性地减轻了LPC对血管EDR的损伤作用,其最大舒张比值较LPC损伤组明显增加,(P<0.01)。LPC和洛伐他汀对硝普钠诱导的非内皮依赖性舒张反应无明显影响。LPC引起了血管组织中MDA浓度明显升高,与对照组相比有显著性差异(P<0.01);不同浓度的洛伐他汀与血管环预孵后再与LPC孵育,剂量依赖性地减少了LPC所增加的MDA浓度,与LPC损伤组比较有显著差异(P<0.01)。LPC与培养的内皮细胞孵育,导致了内皮细胞NO含量和eNOS活性的降低,不同浓度的洛伐他汀与内皮细胞预孵后再与LPC孵育,剂量依赖性地提高eNOS活性和NO的含量。结论LPC能直接抑制血管的EDR反应,洛伐他汀能剂量依赖性地拮抗LPC对EDR反应的抑制作用。其机制可能与LPC触发脂质过氧化反应,从而抑制血管内皮细胞NO的合成和增加NO的消耗有关,洛伐他汀通过抗氧化而保护血管内皮细胞的功能。 展开更多
关键词 洛伐他汀 溶血磷脂酰胆碱 内皮依赖性舒张 丙二醛 内皮细胞培养 一氧化氮 一氧化氮合酶
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内皮素的角膜上皮再生促进作用
10
作者 李平 《国外医学情报》 1995年第9期17-17,共1页
内皮素(Endothelin)是由柳泽等人在猪动脉内皮细胞培养上清液中发现的具有较强血管收缩作用的肽。根据其后的研究已明确内皮素包括内皮素-1、内皮素-2、内皮素-3三种亚型。最近发现此种肽不仅具有血管收缩作用,还有多种生理作用。本文... 内皮素(Endothelin)是由柳泽等人在猪动脉内皮细胞培养上清液中发现的具有较强血管收缩作用的肽。根据其后的研究已明确内皮素包括内皮素-1、内皮素-2、内皮素-3三种亚型。最近发现此种肽不仅具有血管收缩作用,还有多种生理作用。本文将就内皮素的促角膜上皮细胞增殖作用及在泪液中的生理学意义加以论述。 展开更多
关键词 内皮 兔角膜上皮细胞 血管收缩作用 生理作用 增殖作用 泪液 上清液 内皮细胞培养 角膜上皮缺损 研究人员
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吸烟改变人卵母细胞成熟期血管生成物质的分泌(德)
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作者 Motejlek K. Palluch F. +2 位作者 Neulen J. Grü mmer R. 马超 《世界核心医学期刊文摘(妇产科学分册)》 2006年第6期40-40,共1页
Objective: An adequate vascularization in the ovary is important for optimal oocyte maturation. By secreting vascular endothelial growth factor (VEGF) granulosa cells promote blood vessel growth. In addition, they par... Objective: An adequate vascularization in the ovary is important for optimal oocyte maturation. By secreting vascular endothelial growth factor (VEGF) granulosa cells promote blood vessel growth. In addition, they paracrinely reduce the production of VEGF antagonist sVEGFR- 1 (soluble VEGF receptor 1) in endothelial cells. In the present study we examined the influence of smoking on the sVEGFR- 1 concentration in human follicular fluid and on the paracrine activity of granulosa cells. Material and Methods: Follicular fluid samples were obtained during oocyte retrieval from 50 smoking and 50 non- smoking women undergoing in- vitro fertilization treatment. Follicular fluids were used either directly for sVEGFR- 1 quantification or added to endothelial cell cultures to determine the soluble receptor concentration in culture supernatant after four days’ incubation. Results: In this study we were able to show that smokers have a distinctly higher concentration of soluble VEGF receptor 1 in follicular fluid than non- smokers (499.6± 77.7 pg/ml versus 159.2± 29.8 pg/ml). Also, follicular fluid of smoking women shows a significantly less inhibiting effect on endothelial sVEGFR- 1 production than of non- smoking women (1174.1 ± 93.8 pg/ml compared to 794.2 ± 70.1 pg/ml). Conclusion: A higher concentration of sVEGFR- 1 indicates decreased angiogenic activity in follicles of smokers which may result in reduced blood circulation during follicular growth and thus impaired oocyte maturation by malnutrition. 展开更多
关键词 分泌血管内皮生长因子 人卵母细胞 非吸烟女性 血管生成 成熟期 可溶性受体 内皮细胞培养 人卵泡液 物质 卵泡细胞
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改良乳腺癌干细胞向血管内皮细胞方向转化的研究
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作者 毛琦淇 周少丞 +2 位作者 季晓春 滕伟峰 张佳男 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期1385-1385,共1页
尽管多年来在乳腺癌的诊断和治疗中取得突破性进展,但仍有部分患者出现复发和转移,导致乳腺癌传统治疗的失败。本研究通过改良内皮细胞培养基诱导培养,获得具有内皮细胞功能的CD133^(+)乳腺癌干细胞亚群,为研究体外抗血管生成作用机制... 尽管多年来在乳腺癌的诊断和治疗中取得突破性进展,但仍有部分患者出现复发和转移,导致乳腺癌传统治疗的失败。本研究通过改良内皮细胞培养基诱导培养,获得具有内皮细胞功能的CD133^(+)乳腺癌干细胞亚群,为研究体外抗血管生成作用机制的模型建立奠定基础。 展开更多
关键词 乳腺癌干细胞 内皮细胞功能 血管内皮细胞 内皮细胞培养 抗血管生成作用 CD133 复发和转移 诱导培养
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Preparation of BCEC-Astrocyte Co-culturing Membrane Plate Insert 被引量:1
13
作者 赵康峰 王琪 +2 位作者 蒲小平 杨秀伟 朱玉真 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 2004年第4期276-281,共6页
To prepare a hand-made micropore membrane culture plate insert forco-culture. Methods The plate insert was made using plastic centrifuge tube and micropore membrane.After seeding brain capillary endothelial cells (BCE... To prepare a hand-made micropore membrane culture plate insert forco-culture. Methods The plate insert was made using plastic centrifuge tube and micropore membrane.After seeding brain capillary endothelial cells (BCECs) on it (under the effect ofastrocyte-conditioned medium), the plate insert was assessed by analysis of trans-endothelialelectrical resistance (TEER). Results The plate insert has a stability of at least 15 d underculture condition. TEER increased significantly under co-culture condition from (66.1 +- 13.3)Ωcm^2 to (182.2 +- 6.7) Ωcm^2. Conclusion This micropore membrane culture plate insert can beeasily made, on which BCEC culture can be successfully performed. Moreover, it is adjustable andrecyclable. It follows that the plate insert is a useful tool for co-culture and the relatedresearch fields. 展开更多
关键词 blood-brain barrier culture plate insert brain capillary endothelial cell ASTROCYTE trans-endothelial electronic resistance
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脑血管病患者血浆同型半胱氨酸浓度的变化及意义 被引量:5
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作者 何晓芳 《浙江检验医学》 2008年第4期43-44,共2页
关键词 脑血管病 北京九强公司 内皮细胞培养 血症 血栓性疾病 校准品 营养因素 美国雅培 肾功能不全 分析
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新知
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《康复》 2020年第12期7-7,共1页
日本培养出具有超强增殖能力的肝脏祖细胞近期,日本研究人员发明了利用人体血管内皮细胞培养肝脏祖细胞的新技术。肝脏祖细胞能分化为肝细胞和胆管上皮细胞,该新技术或可用于重症肝病患者的移植治疗。来自九州大学、京都大学等机构的研... 日本培养出具有超强增殖能力的肝脏祖细胞近期,日本研究人员发明了利用人体血管内皮细胞培养肝脏祖细胞的新技术。肝脏祖细胞能分化为肝细胞和胆管上皮细胞,该新技术或可用于重症肝病患者的移植治疗。来自九州大学、京都大学等机构的研究人员利用细胞直接重编程技术. 展开更多
关键词 京都大学 九州大学 肝脏祖细胞 内皮细胞培养 胆管上皮细胞 人体血管 增殖能力 细胞
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