应用自制细胞培养罐小规模制备抗衣原体单抗的研究

目的 建立简便、经济的小规模制备单抗的罐培养方法。方法 使用自制细胞培养罐培养抗衣原体杂交瘤细胞株 ,定时细胞计数 ,测定培养上清液中葡萄糖、乳酸及抗体含量 ,微量免疫荧光法测定单抗效价。结果 5d内细胞密度从 5× 10 8/L增至 1× 10 10 /L ,活细胞数为 1.4 5× 10 9/L ,纯化抗体为 0 .4 4g/L ,总量达 11mg ,3株杂交瘤细胞均获得效价为 1∶2 0 4 8的培养上清。结论 自制细胞培养罐可以纯批式小规模制备单抗 ,污染少 。

应用CelliGen细胞罐高密度培养抗人B血型杂交瘤细胞条件的研究

应用CelliGen细胞培养罐,培养抗人B血型杂交瘤细胞,获得了细胞密度超过10~7/ml,产物IgM 2g/L以上,特异性血凝效价达到2^(13)～2^(15)。培养条件50～80r/min、pH7.2、溶解氧(DO)30％～50％,高密度时维持DO2％～10％是必要的,4种气体混合流量为0.2LPM,高密度时要增加氧气供应,细胞密度达到1.6×10~6/ml时开始灌注,随细胞密度增加,灌注量亦增加,每天补充新培养液由800ml逐渐增加到3000ml。13B1杂交瘤细胞生长代谢与葡萄糖、乳酸有关,与氨代谢无关。