NS398抑制肾癌细胞增殖作用的研究

目的:探讨NS398对肾癌细胞增殖作用的影响及作用机制。方法:采用人肾癌786-0细胞系进行细胞培养,将NS398分别以25、50、100、150和200μmol/L的剂量加入细胞中,应用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞凋亡。应用RT-PCR和Western blot方法检测COX-2mRNA及其蛋白的表达。结果:NS398对肾癌786-0细胞具有较强的抑制作用,且这种抑制作用随浓度和时间的增加而增大,呈浓度依赖关系;NS398作用肾癌786-0细胞24h后,在细胞周期G0/G1期前出现明显的亚二倍体凋亡峰,随着浓度升高凋亡峰亦越来越增高,P<0.05;RT-PCR和Western blot结果表明,不同浓度NS398作用下的肾癌786-0细胞中,COX-2mRNA及其蛋白的表达明显减弱,且呈剂量梯度下降,P<0.05。结论:COX-2选择性抑制剂NS398通过生长抑制、诱导调亡来抑制肾癌细胞的增殖。NS398作为治疗和预防肾癌的有效药物值得进一步深入研究。

复方藤梨汤含药血清对人脑胶质瘤U251细胞增殖、凋亡及上皮间质转化的影响

目的探究复方藤梨汤含药血清对人脑胶质瘤U251细胞增殖、凋亡及上皮间质转化的影响。方法将24只雄性SD大鼠分为对照组和低、中、高剂量组[复方藤梨汤6、12、24g/(kg·d)],每组6只,制备含药血清处理人脑胶质瘤U251细胞。采用CCK-8法检测细胞活力,集落形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞周期分布与细胞凋亡,定量聚合酶链反应检测原癌基因C-myc、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)基因表达,Western blot法检测细胞凋亡蛋白[B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8]以及β-连环蛋白(β-catenin)、上皮性黏附蛋白(E-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)表达。结果选取体积分数10%的含药血清为最终剂量。与对照组比较,低、中、高剂量组细胞活力、克隆形成数、C-myc mRNA、CyclinD1 mRNA、Vimentin表达水平降低,处于S期细胞比例、Bax/Bcl-2比值、Caspase-3表达水平升高(P<0.05);低、高剂量组G1期细胞比例降低(P<0.05);中、高剂量组G2期细胞比例、β-catenin表达水平降低,Caspase-8和E-cadherin表达水平升高(P<0.05);高剂量组细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论复方藤梨汤含药血清可促使人脑胶质瘤U251细胞阻滞于S期,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,通过调节β-catenin、E-cadherin和Vimentin表达抑制上皮间质转化。

中药扶正祛瘤对乳腺癌干细胞MDA-MB-231增殖、凋亡的影响及其机制的研究

目的探究中药扶正祛瘤对乳腺癌干细胞MDA-MB-231抑制增殖、凋亡的影响。方法体外富集培养乳腺癌干细胞MDA-MB-231,饲养小鼠并灌输中药获得含药血清;实验分为对照组、等药量组、1倍药量组、2倍药量组,MTT法检测每组乳腺癌干细胞MDA-MB-231细胞抑制率;在最适药物浓度条件下连续培养MDA-MB-23细胞5 d,MTT法测定每天细胞的抑制率,绘制乳腺癌干细胞MDA-MB-231抑制增长曲线;在最佳药物浓度及培养时间下培养细胞,用流式细胞仪检测乳腺癌干细胞MDA-MB-231的凋亡情况;q RT-PCR法检测中药扶正祛瘤处理后细胞MDA-MB-231中mi R-34a及其靶基因SIRT1的基因表达。结果含药血清对乳腺癌干细胞MDA-MB-231有不同程度的抑制,抑制率:2倍药量组>1倍药量组>等量药量组>对照组;采用2倍药量的小鼠血清连续培养细胞,1～4 d内随处理时间增长细胞抑制率增加,第5天有下降趋势;含药血清处理后的细胞内mi R-34a基因表达量高于对照组,SIRT1基因表达量低于对照组;2倍药量的中药扶正祛瘤血清作用乳腺癌干细胞MDA-MB-231 4 d后与对照组相比出现大量的凋亡。结论中药扶正祛瘤能够效抑制乳腺癌干细胞MDA-MB-231的增殖,可能通过调控mi R-34a靶基因SIRT1的表达而抑制癌细胞的增殖凋亡。

DuP-697对K562细胞增殖抑制作用观察及机制研究

目的观察选择性COX-2抑制剂DuP-697对K562细胞的增殖抑制效应，并探讨其作用机制。方法分别以不同浓度的DuP-697体外处理K562细胞，用MTT比色法检测药物影响下的细胞活力；用流式细胞仪分析细胞周期及DNA含量。结果DuP-697能够以剂量依赖性方式有效地抑制K562细胞增殖，药物的IC50值为31．7μmol／L；流式细胞仪检测证实K562细胞被阻滞于G1期。结论DuP-697能够抑制K562细胞增殖，并呈药物剂量依赖性；其分子机制可能与细胞周期中G1／S期的转阻滞有关。

加味扶正抑瘤汤含药血清对结肠癌HT-29细胞的抑制效应及其机制研究

【目的】观察加味扶正抑瘤汤含药血清对结肠癌HT-29细胞株增殖及细胞凋亡抑制基因Bcl-2、促凋亡基因p53表达的影响。【方法】选取结肠癌HT-29细胞株,随机分不同浓度含药血清组及空白血清组,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、实时无标记动态细胞分析(RTCA)法、逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞增殖以及Bcl-2、p53 mRNA表达情况。【结果】加味扶正抑瘤汤含药血清对结肠癌HT-29细胞株增殖具有抑制作用(P<0.05),且呈浓度与时间的依赖关系;体积分数12%、15%含药血清作用48 h可显著降低HT-29细胞株Bcl-2 mRNA表达,升高p53 mRNA表达,与空白血清组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】加味扶正抑瘤汤对结肠癌HT-29细胞增殖具有明显的抑制作用,其机制可能与下调Bcl-2和上调p53的表达相关。

国内外新药研究开发新动向

罗氏制药公司研制可预防老年痴呆症疫苗；发现抑制癌细胞增殖方法；美研制出高效宫颈癌疫苗；和记黄埔研制出老年痴呆症新中药；新药“异甘草酸镁”即将问世；