长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18通过微RNA-497-5p/细胞周期蛋白E1轴调节弥漫性大B细胞淋巴瘤的增殖、凋亡和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测2018年5月至2021年5月收集的恩施土家族苗族自治州中心医院DLBCL病人淋巴组织、良性淋巴结增生病人的淋巴组织、人正常B细胞永生化细胞HMy2.CIR、DLBCL细胞系SU-DHL-1、OCI-LY8、U2932中HCG18、miR-497-5p表达及CCNE1蛋白表达,将OCI-LY8细胞分为Ct组(正常培养的OCI-LY8细胞)、pcDNA组(细胞转染过表达物阴性对照)、pcDNA-HCG18组(细胞转染HCG18过表达物)、si-NC组(细胞转染小干扰RNA阴性对照)、si-HCG18组(细胞转染HCG18小干扰RNA)、si-HCG18+inhibitorNC组(细胞转染HCG18小干扰RNA和抑制物阴性对照)、si-HCG18+miR-497-5p inhibitor组(细胞转染HCG18小干扰RNA和miR-497-5p抑制物),CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测CCNE1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,双萤光素酶验证HCG18与miR-497-5p、miR-497-5p与CCNE1的关系。结果 在DLBCL淋巴组织和细胞中,HCG18、CCNE1蛋白高表达,miR-497-5p低表达,且在OCI-LY8细胞中HCG18、CCNE1蛋白表达上调最高,miR-497-5p表达下调最多(P<0.05),因此,以OCI-LY8细胞进行后续研究,与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18(0.26±0.03比1.01±0.01)、CCNE1蛋白(0.45±0.03比1.44±0.19)表达降低,miR-497-5p(1.95±0.14比1.03±0.02)表达升高(P<0.05),与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18(1.96±0.23比1.02±0.01)、CCNE1蛋白(2.33±0.21比1.42±0.18)表达升高,miR-497-5p(0.28±0.02比1.02±0.02)表达降低(P<0.05),与siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组比较,miR-497-5p表达降低(1.21±0.09比1.95±0.14、1.94±0.13),CCNE1蛋白(0.87±0.08比0.45±0.03、0.44±0.04)表达上调(P<0.05),沉默HCG18可抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭行为及PCNA、MMP-9蛋白表达,诱导细胞凋亡及Bax蛋白表达,而上调HCG18则呈相反趋势,下调miR-497-5p逆转了沉默HCG18对OCI-LY8细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,HCG18靶向调控miR-497-5p/CCNE1。结论 沉默HCG18可能通过调控miR-497-5p/CCNE1抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡。

非小细胞肺癌组织中ki-67表达水平与EGFR突变及临床相关性研究

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中细胞增殖相关抗原(ki-67)表达水平与血管内皮生长因子受体(EGFR)突变及临床相关性。方法收集NSCLC患者56例为研究对象,按ki-67是否阳性表达予以分组,经手术切除或穿刺活检采集组织标本,使用免疫组化法及超级突变扩增阻滞系统(Super-ARMS)分别测定ki-67表达及EGFR突变情况,经Spearman分析ki-67表达水平与EGFR突变及临床相关性。结果除性别、年龄、组织学类型、淋巴结转移及远处转移外,ki-67阳性组中/低分化、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期占比高于ki-67阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);ki-67阳性组野生型占比高于ki-67阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性结果显示:ki-67表达水平与EGFR突变呈负相关(r=-0.382,P=0.004),与分化程度、TNM分期呈正相关(r=0.356,P=0.007;r=0.306,P=0.022)。结论ki-67表达、EGFR突变均可参与NSCLC发生、进展过程,且ki-67表达与EGFR突变存在相关性,提示两者可协同发挥作用,故结合临床特征、ki-67表达与EGFR突变可为临床诊疗提供关键指导。

细胞核增殖相关抗原Ki67在子宫内膜病变中的表达

目的:研究Ki67抗原在子宫内膜病变中表达的规律及其在子宫内膜癌的发生和预后评估的临床价值。方法:用免疫组化(SP)法检测子宫内膜增殖症及非典型增生各30例,子宫内膜癌90例;对照组30例,其中包括增生期及分泌期子宫内膜各15例,观察Ki67抗原在不同内膜病变及正常内膜中的阳性表达率。结果:Ki67抗原在分泌期内膜中几乎没有表达,在增生期内膜中有弱表达;在增殖症及非典型增生中有表达,但与对照组比较,无统计学意义(P>0.05),且两者之间比较,亦无统计学意义(P>0.05);在子宫内膜癌组织中表达明显增高,显著高于良性病变组和对照组(P<0.01)。而且Ki67抗原的阳性率随着临床分期及细胞分化级别的升高及淋巴转移的存在而增加。结论:Ki67抗原与子宫内膜癌发生密切相关,抗原过度表达提示子宫内膜癌患者预后不良。

细胞核增殖相关抗原ki67和bcl-2、bax与恶性卵巢上皮性肿瘤临床病理及预后的关系

目的 :研究细胞核增殖相关抗原ki6 7和凋亡抑制基因bcl 2、促凋亡基因bax与恶性卵巢上皮性肿瘤临床病理及预后的关系。方法 :采用免疫组化SP法检测 85例卵巢上皮性肿瘤中ki6 7、bcl 2、bax表达情况。结果 :①ki6 7指数在恶性卵巢上皮性肿瘤中显著高于良性及交界性肿瘤 ;与恶性卵巢上皮性肿瘤组织学分级呈正相关 ,与预后呈负相关。②bax表达水平在卵巢恶性肿瘤组中高于良性组 ,与恶性卵巢上皮性肿瘤组织学分级呈负相关 ,与预后呈正相关 ;bcl 2表达水平在恶性组中高于良性组及交界组 ;高分化组中bcl 2∶bax≤ 1的患者所占比例高于中、低分化组 ,bcl 2∶bax≤ 1患者预后较好。③恶性卵巢上皮性肿瘤中ki6 7指数与bax表达负相关 ,与bcl 2表达及bcl 2∶bax比值正相关 ;低增殖高凋亡易感组预后好于高增殖低凋亡易感组。④临床分期和bax表达水平是影响恶性卵巢上皮性肿瘤患者预后的主要因素。结论 :ki6 7可作为评价卵巢肿瘤生物学行为及预后的指标 ,bcl 2、bax相互作用 ,对恶性卵巢上皮性肿瘤的发生、发展及预后中起一定作用 ,高增殖低凋亡易感性促使肿瘤恶性发展 。

增殖细胞核抗原及Ki-67在口腔白斑和鳞癌中的表达及其相关性

目的 :比较研究增殖细胞核抗原 (PCNA)和Ki 67在口腔癌前病变中的表达。方法 :选取人正常口腔粘膜 (NOM ) (8例 )、口腔白斑 (LK) (3 1例 )及口腔鳞状细胞癌 (OSCC) (2 2例 )标本 ,同时用LSAB法染色PCNA和Ki 67表达 ,分析增殖活性。用SPSS 9.0统计软件分析各组间各指标的差异、PCNA指数和Ki 67指数的相关性。结果 :在NOM上皮及单纯增生上皮内 ,PCNA阳性细胞散在分布于上皮基底层细胞 ,统计学分析二者无差异。在异常增生上皮各组中 ,随着增生程度的病理分级的增加 ,PCNA阳性细胞数增加 ,分布从基底层向表层增加。且不同增生程度各组间统计学上有显著性差异。在高分化鳞癌中 ,主要分布在癌巢周围及肿瘤浸润前沿区域。Ki 67与PCNA分布特征类似 ,但其指数普遍低于PCNA指数。Pearson相关系数r =0 .79,二者呈线性正相关。结论 :PCNA及Ki 67与口腔粘膜增殖异常有关 ,其增殖指数与增生程度平行 ,且二者本身呈线性相关。

PTEN蛋白和核增殖相关抗原Ki-67在星形细胞瘤中的表达

目的 检测PTEN蛋白和Ki-67(MIB-1)在星形细胞瘤中的表达及相互关系。方法 应用免疫组化结合计算机图像分析方法检测62例星形细胞瘤中PTEN蛋白和Ki-67表达情况。结果 低分化(Ⅲ一Ⅳ级)星形细胞瘤中PTEN蛋白表达显著低于高分化(Ⅰ-Ⅱ级)星形细胞瘤(P<0.001);Ki-67蛋白在不同病理分级的星形细胞瘤中表达差异显著(P<0.01),且星形细胞瘤增殖指数(PI)与PTEN蛋白表达呈负相关(r=-0.778,P<0.001)。结论 PTEN蛋白表达可能在星形细胞瘤细胞增殖中发挥重要作用。

糖尿病足不同证型血管细胞核增殖相关抗原(Ki67)表达差异

目的:探讨糖尿病足中医辨证分型与血管细胞核增殖相关抗原的表达差异。方法:对32例截肢的糖尿病足患者按中医辨证分为气血两虚瘀阻证、脉络瘀热证、脉络热毒证和气阴两虚瘀阻证,分别对截肢肢体的胫后动脉应用免疫组化法进行细胞核增殖相关抗原的表达观察、分析。结果:Ki67的阳性表达与糖尿病足动脉硬化闭塞程度呈负相关,与血管炎症病变程度呈正相关。结论:炎症在糖尿病大血管病变过程中起了重要作用。

糖尿病足不同证型血管细胞核增殖相关抗原(Ki67)表达差异研究

目的:探讨糖尿病足中医辨证分型与血管细胞核增殖相关抗原的表达差异。方法:对32例截肢的糖尿病足患者按中医辨证分为气血两虚瘀阻证、脉络瘀热证、脉络热毒证和气阴两虚瘀阻证,分别对其截肢肢体的胫后动脉应用免疫组化法对细胞核增殖相关抗原(Ki67)的表达进行观察、分析。结果:Ki67的阳性表达与糖尿病足动脉硬化闭塞程度呈负相关,与血管炎症病变程度呈正相关。结论:炎症在糖尿症的大血管病变的过程中起到了重要的作用。

胰头癌患者尿激酶型纤溶酶原激活剂与增殖细胞核抗原Ki-67的相关性及其对预后的影响

目的探讨胰头癌患者尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)与增殖细胞核抗原Ki-67的相关性及其对预后的影响。方法以2000年1月至2007年12月于新疆军区总医院(38例)及郑州大学附属洛阳中心医院(34例)接受胰头癌根治术的72例患者为研究对象。采用免疫组化法检测病理标本中uPA、Ki-67蛋白表达情况,分析二者相关性,采用生存分析研究其对患者预后的影响。结果 uPA与Ki-67的表达呈正相关(r=0.263,P=0.026)。uPA和Ki-67蛋白均与肿瘤组织分化程度、临床分期及淋巴结转移有关,Ki-67与肿瘤直径有关(均P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示,uPA(-)/Ki-67(-)组患者术后生存期长于其他组,差异有统计学意义(P<0.05)。单因素生存分析显示,uPA和Ki-67过表达、肿瘤组织分化程度、淋巴结是否转移、临床分期与患者预后密切相关(均P<0.05)。将以上指标纳入多因素Cox回归模型,结果显示肿瘤组织分化程度、临床分期、uPA及Ki-67过表达是胰头癌患者预后的独立影响因素。结论 uPA与Ki-67在胰头癌进展过程中是一对协同因素,二者的阳性表达是患者预后的独立危险因素。

宫颈病变中增殖细胞核抗原、Ki-67抗原表达与HPV感染的相关性

目的探讨宫颈病变中增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki-67的表达及其与HPV感染的相关性。方法回顾性分析90例病变宫颈标本,比较不同宫颈病变组织中的PCNA、Ki-67免疫组化结果,并分析其与HPV结果的关系。结果 PCNA、Ki-67在CIN、浸润性鳞癌中的表达率均高于慢性宫颈炎中(P<0.05),而PCNA、Ki-67在CIN与浸润性鳞癌中的表达率无显著差异(P>0.05);PCNA与Ki-67表达强度呈正相关(r=0.719,P<0.05);PCNA、Ki-67表达强度与HPV感染呈正相关关系(r=0.599、0.521,P<0.05)。结论 Ki-67和PCNA的表达强度均与宫颈疾病严重程度呈正相关。

早期乳腺浸润性导管癌组织中雌激素受体、孕激素受体、细胞核增殖相关抗原Ki-67的表达情况及临床意义

目的探讨早期乳腺浸润性导管癌组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、细胞核增殖相关抗原Ki-67的表达情况及临床意义。方法选择102例早期乳腺浸润性导管癌患者,检测乳腺浸润性导管癌组织中ER、PR、Ki-67的表达情况,分析其与乳腺癌患者临床特征及预后的关系,采用Spearman相关分析法分析ER、PR、Ki-67表达情况的相关性。结果102例患者中,ER、PR和Ki-67的阳性表达率分别为59.80%、56.86%和68.63%。不同年龄、肿瘤直径、临床分期的早期乳腺浸润性导管癌患者中ER、PR的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。不同年龄的早期乳腺浸润性导管癌患者中Ki-67的阳性表达率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);肿瘤直径≥2 cm、TNM分期为Ⅱ期的早期乳腺浸润性导管癌患者中Ki-67的阳性表达率分别高于肿瘤直径﹤2 cm、TNM分期为Ⅰ期的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。ER与PR表达呈正相关(r=0.425,P﹤0.05),ER与Ki-67表达呈负相关(r=-0.217,P﹤0.05),PR与Ki-67表达呈负相关(r=-0.264,P﹤0.05)。Ki-67阴性患者的5年生存情况优于Ki-67阳性患者,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论 ER、PR及Ki-67在乳腺浸润性导管癌的发生及发展过程中具有重要意义,能够作为预测乳腺癌生物学行为和预后的重要指标。

增殖相关抗原Ki-67与非霍奇金淋巴瘤组织学恶性程度及预后关系的研究

目的 通过增殖相关抗原Ki 6 7的检测 ,观察其与非霍奇金淋巴瘤 (NHL)恶性程度和预后的关系。方法 用免疫组织化学染色的方法 ,对 34例NHL活检石蜡组织进行Ki 6 7检测 ,观察Ki 6 7指数 (Ki 6 7LI)与NHL恶性程度、化疗疗效和生存期的关系。结果 NHL低度恶性 (LG)、中度恶性 (MG)和高度恶性 (HG)三组之间Ki 6 7LI均有显著性差异 (P <0 0 0 1) ,恶性程度低的 ,Ki 6 7LI低 ;恶性程度高的 ,Ki 6 7LI高。首次化疗缓解与未缓解组之间Ki 6 7LI无显著性差异 (P >0 1)。Ki 6 7LI≤ 2 0 %组的生存期较Ki 6 7LI >2 0 %组为长 (P <0 0 5 )。结论 增殖相关抗原Ki 6 7的检测 ,能反映NHL肿瘤细胞的增殖活性 ,与NHL的恶性程度和预后密切相关 ,是判断NHL预后的有效指标。

子宫内膜细胞增生相关核抗原ki67和CA_(125)在子宫腺肌病组织中的表达

目的 :①通过观察子宫内膜细胞增生相关核抗原ki6 7的表达探讨子宫内膜增殖能力对子宫腺肌病发病的影响。②研究子宫腺肌病患者血清CA12 5升高的来源和意义。方法 :手术切除子宫标本共 5 9例 ,其中子宫腺肌病 (简称 :腺肌病 ) 2 7例 ,子宫肌瘤 (简称 :肌瘤 ) 32例。应用免疫组化方法检测CA12 5、ki6 7在子宫腺肌病和子宫肌瘤患者子宫内膜、腺肌病病灶中的表达。免疫化学发光法测定血清CA12 5水平。结果 :两组在位内膜腺体ki6 7表达强度增生期较分泌期显著增强 ,P <0 .0 5 ,腺肌病组异位内膜ki6 7表达无周期性变化 ,腺肌病组异位内膜腺体ki6 7的表达在分泌期强于其自身在位内膜 ,P <0 .0 5 ,腺肌病组子宫内膜与肌瘤组子宫内膜ki6 7表达无统计学差异。腺肌病组血清CA12 5水平显著高于肌瘤组 ,P <0 .0 0 1,两组血清CA12 5水平增生期与分泌期差异均无显著性。腺肌病组与肌瘤组内膜间及腺肌病组在位内膜与异位内膜腺上皮间CA12 5表达差异无显著性 ,并且均无周期性变化。结论 :①腺肌病异位内膜ki6 7表达增多 ,增生能力较在位内膜增强 ,说明子宫内膜侵入子宫肌层后 ,增殖能力明显增强在疾病的发展中可能有一定作用。②血清CA12 5水平腺肌病组明显高于肌瘤组。

肝细胞癌和肝硬化组织中增殖细胞核抗原及Ki-67抗原的表达及意义

为探讨肝细胞癌 (HCC)和肝硬化组织中增殖细胞核抗原 (PCNA)及 Ki- 67抗原的表达及意义 ,采用免疫组织化学技术检测 PCNA和 Ki- 67抗原在 HCC和肝硬化组织中的标记指数 (L I)。结果显示 , 、 、 级 HCC的 PCNA L I分别为 (2 6.9± 17.4) %、 (3 3 .1± 2 2 .7) %、 (73 .8± 16.3 ) % ,各级之间差异均有显著性(P均 <0 .0 5 ) ;Ki- 67L I分别为 (2 5 .8± 15 .6) %、 (5 8.2± 18.6) %、 (75 .3± 2 0 .2 ) % ,各级之间差异均有显著性 (P均 <0 .0 5 ) ;但各级 HCC中的 PCNA L I和 Ki- 67L I差异均无显著性 (P均 >0 .0 5 )。肝硬化组织中 PCNAL I为 (8.8± 5 .2 ) % ,Ki- 67L I为 (7.9± 4.4) % ,两者之间差异无显著性 (P>0 .0 5 )。提示 HCC及肝硬化组织中 PCNA和 Ki- 67抗原的阳性率基本一致 ,HCC的分化程度与 PCNA或 Ki- 67密切相关 ;原位检测 HCC组织中PCNA或 Ki- 67抗原的表达 ,有助于判断

周围型肺腺癌的CT、病理表现与增殖细胞核抗原(PCNA)表达的相关性研究

目的 研究周围型肺腺癌的CT征象、病理表现与增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的相关性。资料与方法 搜集 5 2例经手术病理证实的周围型肺腺癌 ,术前均行CT扫描 ,对手术切除的肿瘤标本进行SABC法免疫组织化学染色 ,检测其PCNA的表达。分析周围型肺腺癌的某些CT征象与PCNA过度表达之间的关系。结果 肿瘤的分化程度、有无肺门和 /或纵隔淋巴结转移、某些CT征象与PCNA的过度表达有关。结论 PCNA的表达程度可作为反映肺腺癌增殖状态、恶性程度及淋巴结转移潜能的有效指标。

沉默癌胚抗原相关细胞黏附分子1基因抑制SHG44人胶质瘤细胞增殖并促进其凋亡

目的采用RNA干扰技术(RNAi)沉默癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)基因的表达,观察沉默效果及沉默CEACAM1表达后对SHG44人胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法设计并化学合成针对CEACAM1的3对小干扰RNA(siRNA),脂质体法瞬时转染SHG44细胞。流式细胞术(FCM)检测转染效率,采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测siRNA转染前后SHG44细胞中CEACAM1 mRNA的表达,Western blot法检测CEACAM1蛋白的表达。CCK-8法检测SHG44细胞细胞增殖活性,annexin V-FITC/PI染色结合FCM检测SHG44细胞凋亡,Western blot法检测cleaved caspase-3和裂解型多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(cleaved PARP)的变化。结果 CEACAM1 siRNA转染效率达85%。与空白对照组和阴性对照组比较,qRT-PCR及Western blot结果显示,3组特异性siRNA转染48 h后,在mRNA和蛋白水平上CEACAM1的表达均降低,以CEACAM1-siRNA3效果最明显。siRNA组SHG44细胞的增殖能力较正常对照组明显下降,凋亡细胞比例增加。沉默CEACAM1表达可以上调cleaved caspase-3和cleaved PARP的表达。结论沉默CEACAM1基因表达可有效抑制SHG44胶质瘤细胞的增殖,促进细胞凋亡。

脑胶质瘤组织中胸腺嘧啶核苷激酶1的表达和意义及其与细胞增殖抗原Ki67表达的关系

目的研究脑胶质瘤组织中胸腺嘧啶核苷激酶1(TK1)的表达和意义,以及其与细胞增殖抗原Ki67表达的关系。方法 202例脑胶质瘤患者,经病理检查进行脑胶质瘤病理分级及组织类型分型。采用免疫组化染色法检测脑胶质瘤组织中TK1和Ki67的表达。比较不同级别及类型患者脑胶质瘤组织中TK1表达的阳性率;分析TK1与Ki67表达的关系。结果本组患者脑胶质瘤按WHO分级:Ⅰ级12例,Ⅱ级85例,Ⅲ级60例,Ⅳ级45例;组织类型分型:少突胶质细胞瘤28例,星形胶质细胞瘤174例。本组患者TK1阳性119例(58.9%);其中良性组(WHOⅠ级)患者无TK1阳性,低度恶性组(WHOⅡ级)阳性31例(36.5%),高度恶性组(WHOⅢ、Ⅳ级)阳性88例(83.8%);三组间TK1阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05～0.001)。星形胶质细胞瘤及复发患者的TK1阳性率分别显著高于少突胶质细胞瘤和初发的患者(均P<0.05)。TK1与Ki67的表达水平呈正相关(r=0.711,P<0.01)。结论恶性程度高、星形胶质细胞瘤及复发的脑胶质瘤患者瘤组织中TK1的表达增高;提示TK1表达可作为脑胶质瘤病理分级、分型及复发的重要参考指标。TK1与Ki67正相关,提示TK1亦可反映脑胶质瘤细胞的增殖情况。

Survivin、细胞周期素依赖激酶4、细胞增殖相关抗原在急性白血病患儿中表达的意义

目的探讨Survivin、细胞周期素依赖激酶4(Cyclin-dependent kinase 4,CDK4)、细胞增殖相关抗原(Ki-67)在儿童急性白血病(AL)中的表达及其相关性,同时观察其与AL临床分型和预后的关系。方法应用免疫组织化学链霉素亲和素-生物素-过氧化酶复合物(SABC)方法检测37例AL患儿骨髓细胞Survivin、CDK4、Ki-67表达,对照组10例为非恶性血液病且骨髓正常的儿童。结果37例AL患儿中,Survivin表达阳性率为45.9%,CDK4表达阳性率为56.8%,Ki-67表达阳性率为40.5%,均显著高于正常骨髓组织(P均<0.05);Survivin与CDK4表达呈强相关(P=0.007),Survivin与Ki-67表达呈强相关(P=0.008)。结论Survivin、CDK4、Ki-67在AL患儿中均过度表达,共同参与AL患儿白血病细胞凋亡和增殖的调控过程。联合检测Survivin、CDK4、Ki-67有助于AL的诊断、预后及疗效判断。

肿瘤相关抗原编码基因CHP2对细胞增殖的抑制作用

目的:研究肿瘤相关抗原编码基因CHP2对细胞增殖作用的影响.方法:采用PCR方法获得目的基因,克隆至真核表达载体pcDNA3,对产生的重组子进行酶切鉴定及DNA序列测定;测序正确的重组子用脂质体转染的方法转入293细胞系,药物G418筛选稳定转染细胞株,分别在基因水平以及蛋白水平进行鉴定;用3H-TdR掺入的方法检测CHP2对细胞增殖的影响.结果:经琼脂糖凝胶电泳及测序鉴定,所插入的片断方向及序列完全正确;Western blotting结果显示,获得的稳定转染细胞株能够高效的表达CHP2蛋白.细胞增殖实验结果显示CHP2稳定转染细胞株的3H-TdR掺入值明显低于对照组.结论:CHP2在细胞中的有效表达能够显著显著抑制细胞的增殖,CHP2可能是参与细胞生长调控的一个重要的调节因子.