子宫内膜细胞增生相关核抗原ki67和CA_(125)在子宫腺肌病组织中的表达

目的 :①通过观察子宫内膜细胞增生相关核抗原ki6 7的表达探讨子宫内膜增殖能力对子宫腺肌病发病的影响。②研究子宫腺肌病患者血清CA12 5升高的来源和意义。方法 :手术切除子宫标本共 5 9例 ,其中子宫腺肌病 (简称 :腺肌病 ) 2 7例 ,子宫肌瘤 (简称 :肌瘤 ) 32例。应用免疫组化方法检测CA12 5、ki6 7在子宫腺肌病和子宫肌瘤患者子宫内膜、腺肌病病灶中的表达。免疫化学发光法测定血清CA12 5水平。结果 :两组在位内膜腺体ki6 7表达强度增生期较分泌期显著增强 ,P <0 .0 5 ,腺肌病组异位内膜ki6 7表达无周期性变化 ,腺肌病组异位内膜腺体ki6 7的表达在分泌期强于其自身在位内膜 ,P <0 .0 5 ,腺肌病组子宫内膜与肌瘤组子宫内膜ki6 7表达无统计学差异。腺肌病组血清CA12 5水平显著高于肌瘤组 ,P <0 .0 0 1,两组血清CA12 5水平增生期与分泌期差异均无显著性。腺肌病组与肌瘤组内膜间及腺肌病组在位内膜与异位内膜腺上皮间CA12 5表达差异无显著性 ,并且均无周期性变化。结论 :①腺肌病异位内膜ki6 7表达增多 ,增生能力较在位内膜增强 ,说明子宫内膜侵入子宫肌层后 ,增殖能力明显增强在疾病的发展中可能有一定作用。②血清CA12 5水平腺肌病组明显高于肌瘤组。

结直肠癌微血管密度与增生细胞核抗原的关系

目的:探讨微血管密度计数(MVD)与增生细胞核抗原(PCNA指数)在结直肠癌中的变化,以及与结直肠癌临床病理间的关系.方法:应用免疫组化方法分析结直肠癌52例、结直肠腺瘤10例、正常肠黏膜组织8例中的MVD、PCNA表达.结果:结直肠癌MVD(20.7±10.2)明显高于结直肠腺瘤(8.5±2.3)和正常肠黏膜组织(3.5±0.8)(P<0.01),结直肠腺瘤亦明显高于正常肠黏膜组织(P<0.05);MVD与结直肠癌淋巴结转移、浆膜浸润、远处转移有关,DukeD,C期明显高于A,B期(P<0.01),而与其肿瘤大小、病理类型无关(P>0.05).结直肠癌PCNA指数(61.5±23.8)明显高于结直肠腺瘤(18.6±9.0)、正常肠组织(12.3±8.5)(P<0.01),而结直肠腺瘤与正常肠组织相比,PCNA指数无显著性差异(P>0.05);PCNA指数与结直肠癌淋巴结侵犯、浆膜浸润、远处转移有关(P<0.05,P<0.01),与肿瘤大小无关(P>0.05),低分化组PCNA指数明显高于中分化组、高分化组(P<0.05),随Duke分期进展,DukeD期最高(83.6±13.6),DukeD,C期明显高于DukeB,A期(P<0.01,P<0.05).相关分析表明,MCD与PCNA指数呈正相关(γ=0.572,P<0.05).结论:MVD、PCNA与结直肠癌生物学行为密切相关,PCNA与结直肠肿瘤血管生成有关.

苦参素对实验性肝癌增生细胞核抗原和白细胞的影响

目的探讨苦参素对实验动物性肝癌增生细胞核抗原(PCNA)和白细胞的影响,为肝癌化疗中白细胞降低寻找有效的防治方法。方法将48只肝癌大鼠模型随机分成两组,实验组给以苦参素灌胃。对实验组和对照组进行白细胞、PCNA检测。结果实验组白细胞计数高于对照组;PCNA在对照组中阳性表达20例,在实验组中阳性表达7例。结论苦参素能抑制肝癌细胞的增殖,能有效预防白细胞的降低。

乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒与增生细胞核抗原的关系

增生细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen，PCNA)位于真核细胞中，为一环形发夹样蛋白结构，与复制因子和细胞周期蛋白p21(Cipl/Wafl)相互作用，是DNA延长的“分子开关”．他不仅对于DNA的复制，而且对于细胞的许多功能都是必需的，因此对于PCNA调节DNA复制及阐明蛋白相互作用的确切机制的理解是非常重要的．

增生细胞核抗原核酶对兔视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用

目的探讨增生细胞核抗原(proliferative cell nuclear antigen,PCNA)核酶(ri-bozyme,Rz)对PCNA表达及细胞增生的影响,为进一步基因治疗增生性玻璃体视网膜病变提供实验基础。方法设计构建针对PCNA的锤头状核酶(PCNα-Rz),通过阳离子脂质体Lipofectamine2000介导转染体外培养的视网膜色素上皮细胞(经此处理的为Rz载体组),观察其在细胞中的分布,应用3H-TDR掺入实验及四甲基偶氮唑盐比色实验检测细胞增生及活性,应用免疫组织化学技术检测细胞内PCNA表达水平,并设立裸Rz组、空载体组和对照组进行对照研究。结果在脂质体介导下PCNα-Rz可成功转染培养的视网膜色素上皮细胞,较裸PCNα-Rz转染效率明显增高;Rz载体组细胞增生活性显著低于裸Rz组、空载体组及对照组,细胞生长抑制率显著提高(81.2%);Rz载体组细胞PCNA表达水平(9.2±1.3)%显著低于裸Rz组(27.5±4.3)%、空载体组(37.4±5.2)%和对照组(43.6±5.8)%,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。结论PCNα-Rz能显著抑制培养的兔视网膜色素上皮细胞中PCNA的表达,降低细胞的增生活性,此项技术有望应用于人眼并可能成为防治增生性玻璃体视网膜病变的有效手段。

miRNA对垂体瘤细胞株中增生细胞核抗原、垂体瘤转化基因、血管内皮细胞生长因子表达的影响

目的探讨微小RNA(miRNA)对垂体瘤细胞株中增生细胞核抗原(ki-67)、垂体瘤转化基因(PTTG)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达影响。方法将培养好的人垂体瘤细胞放入A、B两培养瓶中培养,其中A培养瓶培养基中加入标记的miRNA基因2μl,而B培养瓶只是加入等量的培养基,采用RT-PCR及Western印迹法检测培养24 h后人垂体瘤细胞中ki-67、PTTG、VEGF基因及蛋白表达水平。结果 1A培养瓶加标记的miRNA基因后培养24 h,人垂体瘤细胞ki-67、PTTG和VEGF mRNA表达水平明显低于B培养瓶(P<0.05);2A培养瓶加入miRNA基因后培养24 h,人垂体瘤细胞ki-67、PTTG和VEGF蛋白表达水平明显低于B培养瓶(P<0.05)。结论垂体瘤细胞中ki-67、PTTG、VEGF处于高水平表达,而miRNA能够明显降低ki-67、PTTG、VEGF的表达,抑制细胞的生长,对临床具有指导意义。

增生细胞核抗原与大肠癌分化、分期及预后的关系

本文对９０例大肠癌、１０１例大肠癌断端及１５例正常大肠粘膜组织用单克隆抗体ＰＣ１０经ＳＡＢＣ免疫组化法进行ＰＣＮＡ指数测定。结果显示：ＰＣＮＡ指数在正常大肠粘膜组织为零，在大肠癌组织为１００％表达，均值为５１．４％，在大肠癌断端为８０．２％表达，均值为１９．４％；大肠癌ＰＣＮＡ指数的高低似与病程进展有关，大肠癌ＤＵＫＥ分期Ａ期和Ｂ期者ＰＣＮＡ指数显著低于ＤＵＫＥＣ期或Ｄ期者；大肠癌ＰＣＮＡ指数大小似与肿瘤的预后有关，术后３年未复发者ＰＣＮＡ指数均值在癌组织为３８．８％，在切除断端为３．５％，显著低于术后复发、转移或因癌死亡者在癌区６７％和断端３９．８％的ＰＣＮＡ指数均值。本结果提示ＰＣＮＡ指数均值与大肠癌分化程度无明显平行关系。

增生细胞核抗原对非小细胞肺癌诊断及预后意义的研究

应用抗增生细胞核抗原（ＰＣＮＡ）单克隆抗体ＰＣ１０）对肺癌（ｎ＝８６）和肺炎性假瘤（ｎ＝１０），采用ＳＰ法进行免疫组化染色，计数４００个细胞中的阳性细胞，计算每例的细胞增殖指数（ＰＩ）。阳性细胞数＞５％为阳性。肺癌的阳性率为８３．７２％，而炎性假瘤全部为阴性。细支气管肺泡癌、腺泡状腺癌和大细胞肺癌的ＰＣＮＡ的ＰＩ指数分别为０．２１５、０．３６和０．６６７．Ｎ＿０与Ｎ＿２、Ｍ＿０与Ｍ＿１比较，Ｎ＿２和Ｍ＿１的ＰＩ指数明显高于Ｎ＿０和Ｍ＿０。４６例患者中，术后存活５年以上者的ＰＩ指数明显小于３年以内者Ｐ＜０．０１。认为ＰＣＮＡ是一个有效的肺癌预后的生物标记物。

实验性视网膜脱离的病理改变及细胞增生

目的:探讨实验性视网膜脱离的病理变化和细胞增生。方法:成年白化病兔32眼在间接检眼镜直视下,先抽取玻璃体液0.5mL软化眼球,用50nm玻璃微管在下方6:00赤道部部位刺入视网膜造成裂孔并注射生理盐水0.5mL于视网膜下间隙。术后0.5,1,3,6,24h;3,7d和14d摘除眼球作组织学观察并以免疫组织化学的方法检测视网膜下细胞增生。结果:32只兔眼术后均发生视网膜脱离,视网膜脱离范围3:00～9:00(髓腺下方视网膜均脱离)。自发性复位的时间在3～14d,组织学切片显示,3d可见视网膜色素上皮细胞积聚团,7dRPE细胞增生肥大呈巨噬细胞样改变,14dRPE多层化改变,并见巨噬细胞样RPE来源于单层的RPE,游离RPE层后,吸附于脱离的光感受器细胞外节;3d增生细胞核抗原即表达阳性,增生细胞表达角蛋白阳性。结论:在此模型中,RPE细胞表现出细胞增生,巨噬细胞样细胞也来源于RPE。

pRb的磷酸化状态在肾小球系膜细胞增生和凋亡中的作用

目的:探讨视网膜母细胞瘤敏感基因蛋白(Rb蛋白)的磷酸化状态对大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增生和凋亡的影响。方法:将大鼠GMCs分为脂多糖(LPS)组、对照组、维生素(VitE)组、激素组与激素+VitE组共5组分瓶培养,后3组加LPS诱导。实验末,收集培养细胞,涂片,应用免疫组化法检测GMCs的增生细胞核抗原(PCNA)、去磷酸化Rb蛋白(Rb)、磷酸化Rb蛋白(pRb)阳性表达率,TUNEL法检测GMCs凋亡指数(AI)。结果:VitE组、激素组、VitE+激素组培养细胞PCNA阳性率均低于LPS组,VitE+激素组培养细胞PCNA阳性率明显低于激素组。VitE组、激素组、VitE+激素组培养细胞凋亡指数均高于LPS组,VitE+激素组培养细胞凋亡指数明显高于激素组。VitE组、激素组、VitE+激素组培养细胞Rb阳性率均低于LPS组,VitE+激素组培养细胞Rb阳性率明显低于激素组。VitE组、激素组、VitE+激素组培养细胞pRb阳性率均低于LPS组,VitE+激素组培养细胞pRb阳性率均低于激素组。PCNA细胞阳性率与pRb阳性细胞率、Rb阳性细胞率均成正相关;AI与pRb阳性细胞率、Rb阳性细胞率均成负相关。结论:去磷酸化和磷酸化Rb蛋白表达水平增加均促进了肾脏系膜细胞的异常增生,抑制异常增生的系膜细胞凋亡,促进肾脏病的慢性进展。

姜黄素抑制翼状胬肉成纤维细胞增生的研究

目的观察姜黄素对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞(HPF)增生和凋亡的影响,寻找辅助治疗和预防翼状胬肉复发的新方法。方法用0～160μmol/L姜黄素作用体外培养的HPF,24～96h后观察不同浓度姜黄素对HPF的影响。MTT法及免疫组织化学染色增生细胞核抗原(PCNA)检测细胞生长活性,流式细胞仪测定细胞周期时相变化。结果在20～160μmol/L浓度作用24～72h范围内,姜黄素可剂量和时间依赖性的抑制HPF增生(P<0.05)。20,40,80,160μmol/L姜黄素作用24h后,流式细胞仪检测结果发现,姜黄素作用组均出现典型的亚二倍体凋亡峰,G0/G1期细胞百分比上升(P<0.05),S期细胞百分比下降(P<0.05),说明细胞阻滞于G0/G1期。当姜黄素的浓度在20～160μmol/L范围内能浓度依赖性地抑制细胞表达PCNA(P<0.05)。结论姜黄素可显著抑制翼状胬肉成纤维细胞增生,使细胞周期停滞于G0/G1期,并诱导其凋亡,作用呈时间和剂量依赖性。

L-EGCG对Lp(a)诱导大鼠系膜细胞增生及ICAM-1表达的影响

目的探讨儿茶素的主要成分L-表没食子基儿茶素没食子酸酯(L-EGCG)对脂蛋白(a)[Lp(a)]诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增生影响及可能机制。方法选定最佳剂量与最佳时间将GMCs分为对照组、Lp(a)组[Lp(a)(5.0μg/ml)]、L-EGCG组[Lp(a)(5.0μg/ml)+L-EGCG(200mg/L)处理]共三组分瓶培养。观察L-EGCG对GMCs增生率(MTT)、增生细胞核抗原(PCNA)阳性表达率及培养液上清的细胞间粘附因子-1(ICAM-1)浓度的影响,并与对照组相比较。结果在对照组、Lp(a)组及L-EGCG组,随着处理时间的延长,GMCs的MTT、PCNA、上清ICAM-1浓度呈增加趋势,经F检验,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组比较,应用Lp(a)5.0g/ml处理后,在不同的处理时间,Lp(a)组MTT计数、PCNA阳性率、ICAM-1均明显增高,经两两之间的q检验,差异有统计学意义(P<0.01)。与Lp(a)组比较,应用L-EGCG处理Lp(a)诱导的大鼠GMCs,在不同的处理时间,L-EGCG组MTT计数、PCNA阳性率、ICAM-1均明显降低,经两两之间的q检验,差异有统计学意义(P<0.01)。在Lp(a)组、L-EGCG组,培养上清ICAM-1浓度与PCNA阳性率及与反映系膜细胞增生指标的MTT呈正相关。结论Lp(a)能明显促进肾脏GMCs的增生,L-EGCG可明显抑制Lp(a)诱导的大鼠GMCs增生,此可能与影响ICAM-1表达有关。

As_2O_3碘油栓塞对兔VX2肝癌移植瘤凋亡、增生及血管形成的影响

目的观察肝动脉As2O3碘油栓塞对兔肝移植瘤凋亡及增生细胞核抗原表达及微血管密度(MVD)的影响。方法32只家兔肝内肿瘤种植后2周,随机分4组,经肝动脉插管分别给予不同处理,实验设生理盐水灌注组(A组)、单纯碘油栓塞组(B组)、阿霉素碘油栓塞组(C组)及As2O3碘油栓塞组(D组)。治疗后1周,免疫组化方法测定肿瘤区的MVD值及增生细胞核抗原的表达,原位末端标记法检测肿瘤的凋亡指数。结果治疗后1周,单纯碘油栓塞及阿霉素碘油栓塞组,残余肿瘤区的MVD略有升高,与生理盐水对照组相比,统计学无显著性意义;As2O3碘油栓塞组残余瘤区MVD减低,与其他组相比差异具有显著性意义。各组凋亡指数和增殖指数分别为1.53±0.42、2.66±0.54、2.91±0.32、3.44±0.65和60.8±15.5、42.4±11.2、40.6±8.8、28.5±5.7,两者存在负相关。结论As2O3碘油栓塞可以通过诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增生发挥抗肿瘤效应,As2O3碘油栓塞可以抑制残余肿瘤的血管新生。

氨酪酸及谷氨酸脱羧酶在大鼠空肠上皮增生带中的表达

目的 :探讨氨酪酸 (GABA)与空肠上皮细胞分化增生之间的关系。 方法 :用免疫荧光及激光共聚焦显微技术 ,对GABA及谷氨酸脱羧酶 (GAD ,包括两种异构体GAD6 5及GAD6 7)在大鼠空肠上皮中的表达进行研究。另以麦胚凝聚素组织化学染色与GAD6 5免疫荧光结合进行双重染色 ,显示GAD6 5表达细胞的分布特征。同时 ,用增生细胞核抗原 (PCNA)免疫组化方法显示上皮细胞的增生带。 结果 :GABA及GAD6 5阳性细胞主要分布在空肠绒毛的顶端 ,空肠上皮细胞GAD6 7阴性。双重染色显示 ,杯状细胞不表达GAD6 5。PCNA免疫染色阳性细胞主要在隐窝的中下部。表明GABA及GAD6 5主要分布在空肠上皮的成熟带及功能带。 结论 :GABA系统可能与上皮细胞的成熟及分化有关。

生长激素对梗阻性黄疸肝细胞免疫功能影响的实验研究(英文)

目的探讨梗阻性黄疸围手术期肝脏增殖细胞核抗原及细胞间粘附因子1表达,以及应用生长激素对肝脏增殖细胞核抗原及细胞间粘附因子1表达的影响。方法采用梗阻性黄疸动物模型,胆总管双重结扎法建立胆道梗阻。将45只大鼠随机均分为假手术组(SO)、梗黄组(OJ)及生长激素组(rhGH)。OJ组、rhGH组行胆道结扎、切断,而SO组不结扎胆道,等待两周模型建立。rhGH组每天皮下注射Saizen0.75u/kg,SO组及OJ组相同计量NS对照,共两周。检测肝脏形态学改变,同时检测血胆红素、内毒素及PCNA及ICAM-1的肝内表达。结果梗阻性黄疸组血清内毒素含量为(0.77±0.03)u。血清总胆红素、直接胆红素、白蛋白水平和合丙较氨酶分别为(186.64±49.59)μmol/L,(144.64±41.09)μmol/L,(18.77±2.01)g/L,(180.42±30.88)u/L。而在生长激素组以上数据分别为(150.51±24.28)μmol/L,(104.98±16.10)μmol/L,(23.43±2.76)g/L,and(125.69±29.61)u/L。免疫组织化学法检测肝脏ICAM-1和PCNA的表达显示生长激素组较梗阻性黄疸组差异显著,具有统计学意义。结论内毒素会导致梗阻性黄疸围手术期肝细胞损伤及肝功能异常,而生长激素可有效缓解这一损伤。

α-双炔失碳酯诱导人早幼粒白血病HL-60细胞分化

目的：研究α－ 双炔失碳酯（α－ ａｎｏｒｄｒｉｎ ，ＡＮＯ） 对人早幼粒细胞白血病ＨＬ－ ６０ 细胞的分化诱导作用。方法：细胞生长用台盼蓝排染法；细胞分化根据细胞形态，酸性磷酸酶活性来决定；细胞周期变化用流式细胞光度术；细胞特异性抗原的表达用免疫细胞化学方法。结果：ＨＬ－ ６０ 细胞经ＡＮＯ（２ ～８μｍ ｏｌ／Ｌ） 处理９６ 小时后，细胞生长受到明显抑制，抑制率达９０ ％ 。同时，细胞核缩小，核浆比例增大，酸性磷酸酶活性呈剂量依赖性地升高，提示细胞向粒－巨细胞系分化。流式细胞仪检测发现ＡＮＯ 处理使Ｇ１ 期细胞比例增加。细胞免疫化学分析则表明ＡＮＯ 处理使ＰＣＮＡ 表达下降，雌激素受体表达升高，而对ｃ － ｍｙｃ 表达没有影响。结论：以上结果说明ＡＮＯ 能够诱导ＨＬ－ ６０ 细胞分化，这一作用可能与其通过雌激素受体，阻滞细胞周期进展，抑制ＰＣＮＡ 表达有关。

PCNA及Ki67在脑星形细胞瘤中的表达

为探讨增生细胞核抗原 (PCNA)及Ki67在脑星形胶质细胞瘤表达的临床意义 ,应用SP免疫组织化学染色法检测 3 8例不同级别的星形细胞瘤标本PCNA及Ki67的表达。发现PCNA标记指数 (LI)除在星形细胞瘤Ⅲ级和Ⅳ级组间无显著性差异外 ,其他各级别组间均存在显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,随肿瘤恶性程度的增加而增高 ;Ki67的表达总体差异具有显著性 (P <0 .0 5 ) ,但在Ⅰ与Ⅱ级别组间、Ⅲ与Ⅳ级别组间均无显著性差异 ;PCNALI与肿瘤体积成正比 (r =0 .97,P <0 .0 5 )。提示蛋白水平半定量检测脑星形细胞瘤PCNA的表达情况 ,结合病理学分级 ,可以客观地反映肿瘤的增生潜能、生长方式和组织学性质等生物学特性。

NF-κB抑制剂PDTC对人黑素瘤A375细胞增殖的影响

目的研究核转录因子-κB(NF-κB)特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲盐酸(PDTC)对人黑素瘤A375细胞的生长抑制作用。方法不同浓度的PDTC作用于A375细胞不同时间后,MTT法测定其对A375细胞增殖的抑制率,免疫细胞化学方法检测PDTC作用下A375细胞增生细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果经PDTC处理的实验组,肿瘤细胞增殖活性明显受到抑制(P<0.05,P<0.01),呈时间和剂量依赖性;与对照组相比,PDTC作用后A375细胞PCNA表达降低(P<0.01),且呈明显的剂量依赖关系。结论 PDTC具有显著抑制人黑素瘤A375细胞生长及PCNA表达的作用,是一种有潜力的抑制黑素瘤增殖的药物。

卵巢粒层细胞瘤中PCNA表达及血管发生的意义

用免疫组化ＡＢＣ方法检测了３５例卵巢粒层细胞瘤瘤细胞增生细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达和瘤组织中血管形成的情况。结果表明：ＰＣＮＡ的阳性率在２８例存活５年以上与７例存活少于５年的两组病例中存在非常显著的差别（Ｐ＜０．０１），其阳性表达并与肿瘤的临床分期密切相关（Ｐ＜０．０１）。而肿瘤组织中微血管数在该两组病例中无显著差别，与肿瘤的临床分期亦无关系。作者认为，在卵巢粒层细胞瘤中检测ＰＣＮＡ的表达有助于了解它们的生物学行为并有辅助预测预后的价值。