伤寒沙门菌细胞壁缺陷突变株16SrRNA基因的检测与分析

目的探讨伤寒沙门菌细胞壁缺陷突变株的菌种相关性或亲缘性。方法分离提取伤寒沙门菌细胞壁缺陷突变株及其亲代细菌型的染色体DNA,采用16SrRNA基因引物进行PCR扩增,对扩增的16SrDNA产物进行琼脂糖凝胶电泳和碱基序列测定。结果经PCR扩增后伤寒沙门菌细胞壁缺陷突变株及其亲代细菌型均获得了大小约230 bp的特异性片段,其产物经琼脂糖凝胶电泳可见在230 bp处出现与其亲代细菌型一致的DNA条带,碱基序列测定显示具有同其亲代细菌型一致的核苷酸序列。结论伤寒沙门菌的细胞壁缺陷突变株虽然丧失了常规细菌学可检测的绝大多数表型特征,但检测16SrRNA基因能快速、灵敏地对其进行菌种相关性或亲缘性的分析与鉴定,并且也有利于对各种不能自发返祖的细菌稳定L型进行菌种相关性或亲缘性的分析与鉴定。

伤寒沙门菌细胞壁缺陷突变株的生物学特性

目的探讨细胞壁缺陷对细菌生物学特性的影响。方法诱导获得伤寒沙门菌细胞壁缺陷突变株,采用电镜和玻片凝集试验,与亲代细菌型进行比较研究。结果伤寒沙门菌细胞壁缺陷突变株在营养琼脂平板上形成珊瑚红色的圆形、凸起、湿润、边缘整齐而不透明的菌落,低倍镜下菌落为圆球形细胞堆积的颗粒样,不被发酵糖类和沙门菌H或O抗血清凝集。结论细胞壁缺陷可导致细菌丧失部分代谢特性。

El Tor 型霍乱弧菌及其细胞壁缺陷型分子遗传学背景的研究

El Tor 型霍乱弧菌(以下简称 El Tor 弧菌)可以在人工培养条件下长期存活。当微环境改变时可形成细胞壁有不同程度缺陷的菌株如抗噬菌体突变株或 L 型菌株。我们以 DNA 酶切图谱和 El Tor 弧菌溶血素、神经氨酸酶基因探针杂交图谱为参数对 El Tor 弧菌的野生型及其细胞壁缺陷型变异株在遗传背景上进行了比较分析研究。结果提示细胞壁缺陷型菌株与其野生型在DNA 水平上高度同源。此外,文中还介绍了一种从 L 型菌株中制备 DNA 的方法。

沙门菌CWDMs乳酸脱氢酶同功酶的观察

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的 CWDMs及其亲代细菌型和伤寒杆菌粗糙型的乳酸脱氢酶 ( L DH)同功酶 ,以了解沙门菌 CWDMs生物氧化的特点和机制 ,探讨 CWDMs变异的性质。结果表明 ,伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的细菌型及伤寒杆菌粗糙型在聚丙烯酰胺凝胶电泳后显示出相同的 4种具有不同泳动速率的 L DH同功酶 ,但 CWDMs仅显示 2种 L DH。CWDMs的 2种 L DH同功酶与其亲代细菌型及伤寒杆菌粗糙型的 2种快泳动的 L DH相同 ,但缺乏慢泳动的 2种 L DH同功酶。提示 CWDMs不能酵解糖类以及只能在有氧环境中利用丙酮酸生长繁殖的特性可能与其丧失了 2种慢泳动的 L

伤寒沙门菌CWDMs染色体的限制性内切酶谱分析

目的了解伤寒沙门菌CWDMs染色体的特点,探讨限制性内切酶谱在伤寒沙门菌CWDMs检测的应用价值。方法对伤寒沙门菌CWDMs染色体的特异性PCR扩增产物进行限制性内切酶谱分析。结果限制性内切酶谱分析显示伤寒沙门菌CWDMs具有与其亲代细菌型相同的酶谱。结论可用限制性内切酶谱分析对伤寒沙门菌CWDMs进行检测。